地塞米松对热性惊厥患儿外周血单个核细胞细胞间黏附分子-1及淋巴细胞功能相关抗原-1的干预作用

目的 探讨地塞米松(DXM)对热性惊厥(FS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及配体淋巴细胞功能相关抗原-1( LFA-1)表达和分泌的影响.方法 FS组患儿16例分为FS对照组和DXM干预组,DXM干预组采用1.0μmol·L-1的DXM进行干预;健康对照组16例,为年龄和性别与FS组患儿相匹配的同期体检健康儿童.常规方法进行FS组和健康对照组的PBMC培养.采用流式细胞仪检测PBMC表面ICAM-1、LFA-1表达水平;采用ELISA法检测培养上清中ICAM-1、LFA-1水平.结果 FS对照组在体外培养的PBMC表面ICAM-1、LFA -1表达水平分别为(19.78±8.93)％和(43.05±15.85)％,明显高于健康对照组[(13.88±6.73)％,(30.43±16.25)％] (Pa＜0.05);DXM干预组的PBMC表面ICAM-1、LFA-1表达水平分别为(17.14±7.98)％和(33.93±19.76)％,与FS对照组比较有下调趋势,但差异无统计学意义(Pa＞0.05).FS对照组PBMC的ICAM-1、LFA-1分泌水平分别为(6.73±3.88)％和(4.84±2.95)％,明显高于健康对照组[(4.24±2.42)％,(2.76±1.36)％](Pa＜0.05);DXM干预组PBMC的ICAM-1、LFA-1分泌水平[(4.34±1.82)％,(3.06±2.81)％]明显低于FS对照组(Pa＜0.05).结论 糖皮质激素DXM干预后ICAM-1、LFA-1的表达被抑制,抑制FS患儿ICAM-1、LFA-1的高表达可作为其治疗的新靶点.     

热性惊厥患儿血浆和外周血单个核细胞表面ICAM-1/LFA-1的表达水平

目的探讨细胞间黏附因子-1(ICAM-1)及其配体淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)对热性惊厥(FS)患儿的神经免疫调节作用。方法2004-11—2006-12将武汉市儿童医院60例FS患儿分为单纯性FS(SFS)组30例和复杂性FS(CFS)组30例;对照组30例,为年龄和性别相匹配的同期体检健康儿童。采用双抗夹心ELISA法检测血浆可溶性ICAM-1/LFA-1水平,流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)表面ICAM-1/LFA-1的表达水平。结果SFS组和CFS组患儿血浆ICAM-1水平分别为(21.54±11.09)ng/mL和(24.34±6.86)ng/mL,均明显低于对照组(29.73±12.39)ng/mL儿童(P<0.05);3组血浆LFA-1水平从高到低依次为CFS组(12.30±8.04)ng/mL、SFS组(12.09±8.83)ng/mL和对照组(9.51±8.07)ng/mL,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。SFS组的PBMC表面ICAM-1表达水平为(29.96±12.31)%,明显高于CFS组(22.50±8.19)%及对照组(14.21±11.31)%儿童(P<0.05),CFS组的PBMC表面ICAM-1表达水平明显高于对照组儿童(P<0.05);而LFA-1在PBMC表面的表达水平则不同,3组比较,SFS组最高为(50.89±21.36)%,CFS组最低为(34.35±11.45)%,对照组为(41.39±16.30)%,组间比较差异有统计学意义。结论ICAM-1/LFA-1作为早期应激状态下的协同刺激信号免疫因子,参与白细胞黏附及其黏附级联反应,使大脑神经元在对热应激不适应基础上呈过度兴奋状态,诱导惊厥的发生。且CFS的神经免疫病理过程要比SFS相对复杂,抑制FS的ICAM-1/LFA-1黏附活动可能为其防治开辟新的途径。     

热性惊厥患儿外周血单个核细胞表面淋巴细胞功能相关抗原-1的表达

目的 探讨细胞间黏附分子配体淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)对热性惊厥(FS)患儿的神经免疫调节作用.方法 Fs患儿60例分为单纯性FS(SFS)组和复杂性FS(CFS)组各30例;年龄和性别与FS组相匹配的同期体检健康儿童30例为健康对照组.采用流式细胞术检测各组儿童外周血单个核细胞(PBMC)表面LFA-1蛋白表达水平.同时从60例FS检测样本中随机抽取SFS和CFS各20例.从30例健康对照组儿童中抽取19例,采用半定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测其PBMC LFA-1 mRNA表达水平.结果 SFS组PBMC表面LFA-1蛋白表达水平(50.89±21.36)明显高于CFS组(34.35±11.45)及健康对照组儿童(41.39±16.30)(Pa <0.05),CFS组与对照组相比无显著性差异,但数值有下调趋势.SFS组LFA-1 mRNA表达水平为(0.73±0.11),明显高于健康对照组(0.60±0.15)和CFS组(0.54±0.17)(Pa <0.05);CFS组LFA-1 mRNA水平与对照组比较亦有下调趋势,但无统计学意义.结论 LFA-1可能作为早期应激状态下的协同刺激信号免疫因子,参与白细胞黏附及其黏附级联反应,使大脑神经元在对热应激不适应基础上呈过度兴奋状态,诱导惊厥的发生.CFS患儿神经免疫病理损害过程要比SFS相对复杂,阻止脑内异常免疫应答的发生可能为FS的防治开辟新途径.     

喘息性疾病婴幼儿外周血单个核细胞淋巴细胞功能相关抗原-1和巨噬细胞分化抗原-1的表达

目的探讨婴幼儿喘息性疾病患儿外周血单个核细胞(PBMC)表面淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)和巨噬细胞分化抗原-1(Mac-1)的表达及相关性,探讨喘息性疾病的免疫学发病机制,鉴别儿童喘息临床表型的炎性指标。方法随机选取在本院住院的3岁以下喘息患儿29例。男17例,女12例。从同期在本院住院的呼吸道感染但不伴有喘息的患儿中随机抽取同年龄患儿26例作为非喘息组,男15例,女11例。从同期在本院儿保门诊体检的健康儿童及外科非感染性疾病患儿中随机抽取同年龄患儿25例作为对照组。男15例,女10例。3组婴幼儿均在治疗前抽取静脉血2 mL,分离PBMC,采用流式细胞术检测PBMC中LFA-1、Mac-1的表达情况。结果喘息组和非喘息组LFA-1的表达[(47.46±13.94)%和(35.88±12.64)%]明显高于对照组[(26.62±10.41)%],喘息组和非喘息组Mac-1的表达[(7.43±3.42)%和(4.53±3.04)%]明显高于对照组[(2.92±1.80)%]。其中喘息组患儿LFA-1和Mac-1的表达高于非喘息组,差异均有统计学意义(Pa<0.01);相关性分析显示LFA-1和Mac-1在喘息组呈正相关(r=0.403,P<0.05)。结论 LFA-1、Mac-1在喘息性疾病发病机制中具有重要作用,检测LFA-1、Mac-1的表达可作为鉴别婴幼儿喘息临床表型的炎性指标。     

毛细支气管炎患儿ICAM-1和RANTES检测的意义

目的：探讨毛细支气管炎（简称毛支炎）患儿细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和激活调节正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）检测的意义及相关性。方法：采用流式细胞术检测28例毛支炎患儿、23例支气管肺炎患儿及24例健康婴儿外周血淋巴细胞ICAM-1表达情况,ELISA法测定其血清RANTES水平,并进行相关性分析。结果：毛支炎组ICAM-1表达(35.0±10.3%)高于肺炎组（29.9±8.6%; P<0.05）及对照组（24.6±6.9%; P<0.01）,肺炎组ICAM-1表达高于对照组（P<0.05）。毛支炎组和肺炎组RANTES水平分别为32.1±6.0和 30.6±6.2 ng/mL,高于对照组的27.1±5.1 ng/mL（分别P<0.01,<0.05）,毛支炎组与肺炎组差异无统计学意义。ICAM-1与RANTES在毛支炎组呈正相关（r=0.675,P<0.01）。结论：ICAM-1和 RANTES参与了毛支炎的发病过程且具有协同作用。［中国当代儿科杂志,2010,12（3）：181-183］     

哮喘儿童细胞因子信号转导抑制因子mRNA表达与Th1/Th2的关系

目的：细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)对JAK-STAT途径的细胞因子如白介素、干扰素等的调节起重要作用,目前SOCS与哮喘的关系仍在研究中。本研究观察SOCS1和SOCS3 mRNA在哮喘儿童外周血单个核细胞（PBMC）中的表达水平与CD4+ T细胞IFN-γ/IL-4平衡及特异性IgE（sIgE）的关系。方法：采集44例4~14岁过敏性哮喘患儿及30例健康儿童PBMC,分别用流式细胞仪分析CD4+ T细胞IFN-γ/IL-4比值,另提取总RNA,采用SYBR Green I逆转录荧光定量PCR的方法检测每组SOCS1和SOCS3 mRNA的表达。结果：哮喘组患儿外周血IFN-γ阳性的CD4+T细胞百分比［（15.7±2.0）%］及IFN-γ/IL-4比值（3.4±1.5）均低于对照组［分别为（19.1±2.7)%、4.8±2.9］;而SOCS1 mRNA（⊿Ct值11.1±1.9）表达显著高于对照组（⊿Ct值12.6±2.8）。两组儿童SOCS1 mRNA表达均与外周血分泌IFN-γ的CD4+ T细胞百分比呈负相关（P<0.05）。SOCS1和SOCS3与sIgE均无相关性。结论：SOCS1 mRNA在哮喘组患儿外周血中高表达,并与Th2占优势的免疫失衡有关。     

2009甲型H1N1流感患儿免疫功能改变初探

目的 探讨2009甲型H1N1流感(以下简称"甲流")患儿免疫功能及可能的免疫发病机制.方法 深圳市儿童医院2009年11月1日-2010年1月10日甲流住院患儿60例,轻症35例(轻症肺炎),重症25例(重症肺炎或甲流相关性脑病,死亡3例),同年龄正常对照组20例.采用real-time PCR、流式细胞术及ELISA检测外周血单个核细胞胞浆模式识别受体(PRRs)维甲酸诱导基因I/黑色素瘤分化相关基因5(RIG/MDA5)、胞膜PRRs Toll样受体(TLRs)分子及其信号途径传导分子、细胞因子/趋化因子及负性调节因子变化;T、B及NK细胞凋亡及凋亡相关基因TRAIL和CASPASE-3表达.结果 (1)甲流患儿RIG/MDA5表达、TLR2、TLR4表达明显高于正常对照组[TLR2(9.69±3.15)×10-2vs.(3.96±0.83)×10-2,t=10.16,P＜0.05;TLR4(10.23±2.85)×10-2vs.(7.46±2.18)×10-2,t=3.76,P＜0.05],以重症甲流患儿增高为著,RIG/MDA5表达增高最为明显;TLRs途径信号传导分子MyD88、TRAM等表达明显高于轻症甲流患儿.(2)甲流患儿CD3+[(1.22±0.38)×109/Lvs.(3.59±1.10)×109/L,t=9.21,P＜0.05]、CD4+、CD8+T细胞及NK细胞绝对计数明显低于正常对照组,B细胞无明显改变.(3)轻症甲流患儿TNF-α、IL-6、IL-1β等炎症细胞因子血浓度或基因高于正常对照组,重症患儿炎症细胞因子TNF-α[(6.42±1.76)×10-2vs.(9.05±2.51)×10-2,t=4.55,P＜0.05]明显低于正常对照组.IFN-α/β表达持续高于正常对照组,尤以重症甲流患儿为著;IFN-I诱导基因IP-10[(20.52±6.09)×10-2vs(1.18±0.34)×10-2,t=18.74,P＜0.05]、RANTES或iNOS轻症患儿表达高于正常对照组,重症患儿表达则趋于减少.(4)甲流患儿CD3+[(32.90±7.66)%vs.(20.21±6.58)%,t=6.21,P＜0.05]、CD4+、CD8+T细胞、NK细胞凋亡高于正常对照组,以重症患儿更为显著.凋亡相关基因TRAIL和CASPASE-3表达明显高于正常对照组.(5)重症患儿PRRs负性凋节因子SOCS1、SOCS3、IRAK-M、TRAF4及FLN29表达明显高于轻症患儿,抗炎细胞因子IL-10及IL-10/TNFα比值随病情加重增高.结论 甲流患儿机体免疫功能紊乱,轻症患儿处于全身免疫激活状态,重症患儿同时存在免疫激活/免疫抑制反应.     

调节性T细胞及Foxp3基因在再生障碍性贫血患儿外周血中的变化及意义

目的：研究CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Treg)及Foxp3基因在再生障碍性贫血（简称再障）患儿外周血中的表达水平,探讨其在再障发病机制中的作用。方法：采用流式细胞术分别检测21例慢性再障(CAA)、9例急性再障(SAA)和15例健康儿童（对照组）外周血Treg细胞的比例变化,并用RT-PCR方法检测其外周血中Foxp3 mRNA的表达水平。结果：SAA和CAA组患儿外周血中CD4+T细胞百分比、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD127lowTreg细胞占CD4+T细胞百分比均低于对照组（P＜0.05）,且SAA组低于CAA组（P＜0.05）;相关基因FoxP3 mRNA在SAA患儿外周血中呈低表达（0.47±0.08）%,明显低于对照组(0.71±0.12)%和CAA组(0.68±0.14)%,P＜0.05。结论：再障患儿外周血Treg细胞和Foxp3 mRNA表达减低,可能在再障的发病过程中有重要作用,且SAA表达低于CAA,有望用于再障病情严重程度的评估。［中国当代儿科杂志,2010,12（4）：241-243］     

慢性肺疾病患儿外周血细胞因子的改变

目的：观察早产儿慢性肺疾病外周血白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达,探讨免疫因素在慢性肺疾病中的可能作用。方法：26例住院满28 d的早产儿分为慢性肺疾病组（14例）和非慢性肺疾病组（对照组,12例）,用液相芯片技术（Bio-plex悬浮蛋白芯片系统）检测两组患儿外周血中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的表达水平。结果：慢性肺疾病组患儿外周血的IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α与对照组差异均无统计学意义,P>0.05。结论：外周血中的IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α在慢性肺疾病的非急性期没有发生很大的改变,免疫因素可能不在慢性肺疾病的非急性期起作用。［中国当代儿科杂志,2010,12（11）：855-857］     

初发1型糖尿病儿童辅助性Th1细胞因子紊乱相关因素分析

目的：检测初发1型糖尿病患儿IL-1β、IL-12、IL-18、TNF-α等细胞因子水平,并分析其与感染、起病时间等临床指标相关性。方法：选择初发1型糖尿病患儿33例为病例组,依据外周血白细胞（WBC）水平将33例患儿分为WBC增高组和WBC正常组;另选取健康体检儿童27例为对照组。应用酶联免疫吸附法检测血清IL-1β、IL-12、IL-18、TNF-α等细胞因子水平;同时检测病例组患儿血气pH值、血糖、血乳酸、果糖胺、外周血白细胞及中性粒细胞等各临床指标水平。结果：病例组细胞因子 IL-12水平高于对照组（P＜0.001）。病例组IL-18水平与发病时间呈负相关（r=-0.413,P=0.015）;中性粒细胞与IL-1β水平呈正相关（r=0.413,P=0.023）;外周血WBC与IL-18水平亦呈正相关（r=0.352,P=0.038）。WBC增高组细胞因子IL-1β、IL-12、IL-18水平高于WBC正常组(均P＜0.05)。结论：1型糖尿病患儿存在Th1细胞分泌细胞因子紊乱,感染可进一步提高细胞因子的分泌水平,可能推动了早期糖尿病起病过程。     

生长因子β1对儿童哮喘的作用及孟鲁司特钠对其影响

目的 探讨生长因子β1在儿童哮喘中的作用及观察孟鲁司特钠对其的影响。方法 筛选2009年9月-2010年9月我院哮喘专病门诊轻度持续哮喘患儿60例及来院健康体检儿童30例,将哮喘患儿随机分成孟鲁司特钠组和安慰剂对照组;采用双抗夹心酶联免疫吸附试验( ELISA)、RT-PCR技术分别检测治疗前后患儿血浆中TGF-β1水平和外周血单个核细胞(PBMC)中TGF-β1mRNA表达;采用流式细胞技术,检测表达叉状头/翅膀状螺旋转录因子3的CD4T调节细胞(Foxp3+ CD4+ Treg)及各亚型的比例。结果 (1)血浆中TGF-β1水平：治疗前哮喘组[(11.51±1.12) ng/L]明显低于健康对照组[(47.92±1.52) ng/L](q=20.01,P＜0.01);治疗后,孟鲁司特钠组[ (20.03±1.14)ng/L]高于安慰剂组[(12.10±3.91) ng/L]（q=14.62,P＜0.05）,但均值仍低于健康对照组;(2)外周血单个核细胞中TGF-β1 mRNA表达：治疗前哮喘组(0.31 +0.07)明显低于健康对照组(0.61±0.2) (q =8.97,P＜0.05);治疗后,孟鲁司特钠组(0.46±0.13)表达高于安慰剂组(0.32±0.04)（q=8.25,P＜0.05）,但仍低于健康对照组;(3)流式细胞检测结果各组间比较差异有统计学意义(P＜0.05)：哮喘患儿与健康对照组相比,Foxp3+ CD4+ Treg细胞比例增加[(8.30±1.30)％,(6.05±1.80)％];其中CD45 RA+ Foxp3lo比例增高[(4.60±1.04)％,(3.27±1.03)％];CD45 RA - Foxp3h1比例降低[(0.75±0.13)％,(0.93±0.26)％];CD45 RA-Foxp3lo比例两组差异无统计学意义。治疗后,孟鲁司特钠组较安慰剂组,aTreg细胞占Foxp3+ CD4+ Treg比例增加[(1.16±0.24)％,(0.89±0.22)％],差异有统计学意义。结论哮喘儿童体内存在血浆及外周血单个核细胞中TGF-β1表达的降低,可能是导致哮喘发病的重要原因;孟鲁司特钠能有效改善TGF-β1的表达并通过调节Foxp3的表达来发挥治疗作用。     

过敏性紫癜性肾炎患儿共刺激分子4-1BB/4-1BBL 变化及其临床意义

目的探讨共刺激分子4-1BB/4-1BBL在过敏性紫癜性肾炎(HSPN)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其临床意义。方法选取初发过敏性紫癜无肾炎(HSP组)、初发过敏性紫癜性肾炎(HSPN组)患儿各20例(其中15例进行了肾脏病理检查),20例正常儿童为对照组,分离培养PBMC。应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测并比较三组PBMC中4-1BB m RNA和4-1BBL m RNA的变化,分析4-1BB/4-1BBL m RNA变化与肾脏病理的关系。结果HSPN、HSP患儿PBMC中4-1 BB m RNA、4-1 BBL m RNA的表达均高于对照组,差异有统计学意义(P均0.01)。HSPN患儿的病理积分与4-1BB/4-1BBL m RNA表达呈正相关关系(r=0.570、0.515,P均0.05)。PBMC中,加入植物血凝素后,HSPN组、HSP组和对照组4-1 BB/4-1 BBL m RNA的表达均高于空白对照组,差异有统计学意义(P均0.01),其中HSP、HSPN组增高幅度较对照组明显,HSPN组增高幅度较HSP组更为显著,差异有统计学意义(P均0.01);加入地塞米松后,HSPN组、HSP组4-1 BB/4-1 BBL m RNA的表达均较空白对照组减少,差异有统计学意义(P均0.01)。结论 HSPN患儿PBMC中共刺激分子4-1BB/4-1BBL m RNA的表达显著增高,植物血凝素能诱导其高表达,而地塞米松能抑制其表达,提示4-1BB/4-1BBL可能参与HSPN的发病。     

雌激素对大鼠肠缺血再灌注损伤时TNF-α、ICAM-1表达的影响

目的探讨雌激素对大鼠肠缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用以及对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、细胞间黏附因子-1（ICAM-1）表达的影响。方法青春期大鼠随机分为4组（各组n=15）,假手术组未切除卵巢,其余3组行双侧卵巢切除术后隔天皮下分别注射蓖麻油（对照组）、雌二醇（E2,E2组）、高剂量的E2（5E2组）4周。各组大鼠行肠系膜上动脉夹闭30min后行再灌注。血清标本测E2浓度,小肠黏膜行黏膜病理评分、TNF-α和I-CAM-1mRNA表达测定。结果对照组、假手术组、E2组和5E2组的血清雌二醇浓度依次增加（各组间P均〈0.01）。黏膜病理评分E2组低于其他3组（P〈0.01）。组织TNF-α、ICAM-1mRNA表达在E2组最低,对照组最高;E2组的组织TNF-α、ICAM-1mRNA表达比对照组低（P均〈0.01）。结论雌激素对大鼠肠I/R损伤有保护作用,该保护作用与抑制TNF-α、ICAM-1表达有关。     

过敏性紫癜患儿血清低糖基化IgA1、核因子κB与炎症递质的研究

目的探讨儿童过敏性紫癜(HSP)血清低糖基化Ig A1(Gd-Ig A1)、核因子-κB(NF-κB)水平变化,及其与炎症递质间的关系。方法选取2014年10月至2015年3月初发HSP患儿70例,分普通组(23例)、腹型组(21例)、肾炎组(26例);同期17例健康体检儿童为正常对照组。采用ELISA法检测血清Gd-Ig A1、NF-κB、白介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平。结果在HSP急性期,普通组、腹型组、肾炎组及对照组间血清Gd-Ig A1、NF-κB、IL-8、TNF-α、ICAM-1水平的差异有统计学意义(P均0.01);其中肾炎组的血清Gd-Ig A1、NF-κB、IL-8、TNF-α、ICAM-1水平均高于普通组,差异有统计学意义(P均0.05)。在HSP恢复期,肾炎组的血清Gd-Ig A1、NF-κB、TNF-α、IL-8水平仍高于对照组,差异均有统计学意义(P均0.05),ICAM-1水平在四组间的差异无统计学意义(P0.05)。HSP患儿急性期血清Gd-Ig A1与NF-κB呈正相关(r=0.67,P0.05)。结论 Gd-Ig A1可能通过激活细胞NF-κB,上调炎症递质IL-8、TNF-α及ICAM-1的表达,参与介导HSP的小血管炎性损伤。     

黄芪对心肌炎心肌穿孔素及外周血TNF-α的影响

目的：儿童病毒性心肌炎(VMC)发病率高,临床上缺乏有效的治疗药物。该研究旨在探讨黄芪注射液治疗小鼠柯萨奇B3(CVB-3)病毒性心肌炎的疗效及其机制。方法：24只Balb/C鼠腹腔感染柯萨奇病毒B3亲心肌细胞株后,随机等分为两组：黄芪治疗组(黄芪注射液10 g/kg,腹腔注射,每天1次,连续7d)和对照组(同法每天注射等容积注射用水)。实验第8天留取心肌和血液标本,进行心肌病理检查,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测心肌穿孔素(PFP)mRNA表达及放免法检测外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果：①黄芪治疗组心肌组织病理改变明显轻于对照组;②黄芪治疗组心肌PFP mRNA的表达明显低于对照组［(1.10±0.07) vs (1.31±0.12)］(P<0.01);③黄芪治疗组血清TNF-α含量明显低于对照组［(2.39±0.21) ng/ml vs (2.97±0.32) ng/ml］(P<0.01)。④PFP mRNA表达水平与血清TNF-α含量呈显著正相关(r=0.84,P<0.01)。结论：黄芪注射液对病毒性心肌炎有明显的治疗作用,其机制可能是通过减轻病毒性心肌炎中PFP介导的细胞毒性作用和炎症反应。     

炎症因子诱导星形胶质细胞凋亡及机制探讨

目的：探讨LPS,IL-1β,TNF-α所致星形胶质细胞(AC)凋 亡的机制及途径。方法：原代培养的新生SD大鼠前脑AC分为正常对照组、 炎症组(LPS+IL 1β+TNF α)与预处理组(L-NMMA预处理30 min后加入LPS+TNF-α+IL-1 β)。培养72h后,MTT测定AC活力;分光光度仪测定细胞培养上清中NO2-/NO3-含量;电镜、流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blot检测胞浆内细胞色素C的表达;原位杂 交检测AC Caspase-3 mRNA表达。结果：预处理组细胞活力明显高于炎症 组(0.81±0.29 vs 0.46±0.15),差异有显著性(P<0.01)。炎症 组AC活力与其分泌的一氧化氮(NO)呈负相关(r=-0.604,P<0.05)。预处理 组凋亡率［(15.2±7.9)%］低于炎症组［(29.7±10.4)%］,P<0.0 5。预处理组胞浆内细胞色素C的含量较炎症组明显减少(14 784±2 096 vs 31 049± 3 784),P<0.01。炎症组的Caspase 3 mRNA表达强于预处理组。结论：①LPS,IL-1β,TNF-α可导致细胞活力下降。其细胞活力的下降与其分泌的NO增多有关。②增多的NO可导致AC凋亡;NO导致的AC凋亡可能与细胞色素C凋亡途径有关。     

姜黄素对新生大鼠坏死性小肠结肠炎的保护作用

目的：通过研究姜黄素对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)肠组织病理改变,环氧合酶-2(COX-2)表达,肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素-10 (IL-10)生成的影响,探讨姜黄素对NEC是否有保护作用。方法：40只新生大鼠随机分为4组：正常对照组,溶剂对照组,NEC模型组,姜黄素干预组,每组10只。每日定时观察各组大鼠的一般情况,连续3 d并于第4天处死,取肠道组织检测病理改变,TNF-α、IL-10含量及COX-2的表达。结果：姜黄素能改善NEC模型大鼠一般情况及病理组织学征象;与正常对照组、溶剂对照组比较,NEC模型组,姜黄素干预组TNF-α、IL-10浓度显著增高(P<0.05);姜黄素干预组TNF-α浓度较NEC模型组显著下降(P<0.05)、IL-10浓度较NEC模型组显著升高(P<0.05);姜黄素干预组COX-2表达量显著低于NEC模型组。结论：姜黄素对NEC大鼠具有保护作用,其机制可能与姜黄素抑制COX-2的表达,减少TNF-α的含量、增加 IL-10的含量有关。［中国当代儿科杂志,2010,12（2）：132-136］     

川崎病患儿外周血单核细胞趋化蛋白1的表达及其与冠状动脉损害的关系

目的 观测川崎病(KD)患儿单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的血浆浓度及外周血单个核细胞(PBMC)中MCP-1 mRNA表达的变化,并分析其与KD及冠状动脉损害的关系.方法 采用ELISA方法及荧光定量PCR技术测定56例KD患儿急性期与缓解期血浆MCP-1浓度及PBMC中MCP-1 mRNA表达变化,并与60例非感染患儿、66例非KD发热患儿进行比较.结果 KD患儿急性期血浆MCP-1水平[(409.55±97.42)pg/ml]与PBMC中MCP-1 mRNA表达水平(1.97±0.77)明显高于非感染对照组与发热组;KD患儿缓解期血浆MCP-1水平[(301.64±71.55)pg/ml]与PBMC中MCP-1 mRNA表达水平(1.31±0.39)明显高于非感染对照组,与发热组相比差异无统计学意义;KD组中冠状动脉损害者血浆MCP-1水平和PBMC中MCP-1 mRNA表达水平在急性期与缓解期均明显高于无冠状动脉损害者.结论 MCP-1在川崎病患儿体内持续增高,可能参与了促使单个核细胞聚集于冠状动脉局部的趋化作用过程,有可能作为判断KD病情活动状态及冠状动脉损害的免疫学指标之一.     

哮喘缓解期患儿Th1/Th2相关上游转录因子及细胞因子的表达

目的从基因和蛋白质水平了解哮喘缓解期患儿T辅助淋巴细胞(Th)免疫平衡状况。方法选取24例哮喘缓解期和12例健康儿童作为对照,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR(real time PCR)法分别测定外周血细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平及外周血单个核细胞(PBMC)中特异性转录因子T-bet、GATA-3表达情况。结果病例组血浆IL-4水平(37.14±12.77)ng/L显著高于对照组(27.08±6.12)ng/L,t=2.467 P<0.05;病例组PBMC中GATA-3的表达强度(5.45±1.11)较对照组(4.70±0.86)显著增高(t=2.049 P<0.05);病例组与对照组比较IFN-γ/IL-4及T-bet/GATA-3比率均显著降低(t=-2.208,-4.212 P<0.05,P<0.01)。结论哮喘缓解期患儿体内存在基因和蛋白质水平Th1/Th2平衡的紊乱,以Th2亚群亢进为主。     

IL-27对哮喘患儿IFN-γ及IL-4的调节作用

目的：探讨白介素27（IL-27）对哮喘患儿干扰素γ（IFN-γ）及白介素4（IL-4）的调节作用。方法：收集23例哮喘患儿外周血单个核细胞（PBMC）,加入不同浓度（5 ng/mL或0.5 ng/mL）重组人白介素27（rh IL-27）进行体外培养12 h,予酶联免疫吸附法（ELISA）测定其培养上清IFN-γ及IL-4浓度。结果：5 ng/mL和0.5 ng/mL两个浓度的rh IL-27刺激PBMC进行体外培养后,IFN-γ表达分别为85.9±12.2和8.9±2.3 μg/L,较细胞刺激素组(7.2±1.3 μg/L)均有显著升高（P＜0.01或0.05）。5 ng/mL rh IL-27组IL-4表达较细胞刺激素组有明显降低（15.0±1.9 μg/L vs 77.0±15.6 μg/L,P＜0.01）。结论：IL-27参与了哮喘的发病过程,它可通过调节Th1/Th2相关细胞因子活性为哮喘治疗提供一种新的途径。［中国当代儿科杂志,2010,12（7）：521-523］