牛体外受精胚胎一步脱防冻剂冷冻方法的研究

为了研究适合于牛体外受精胚胎的一步除防冻剂的冷冻方法，特进行两个试验。试验１分别用１．５Ｍ甘油＋０．２５Ｍ蔗糖、１．５Ｍ乙二醇和１．５Ｍ丙二醇作防冻剂冷冻体外受精后第７天，已发育至囊胚阶段的牛胚胎。使胚胎降温至－７℃后，植冰，然后以０．３℃／分的速率降温至－３０℃，立即将胚胎投入液氮中冷冻保存。在３７℃水中解冻胚胎后，使其直接在含１５％胎犊血清（ＦＣＳ）的磷酸缓冲液（ＰＢＳ）中脱去防冻剂。经体外培养７２ｈ后，３组胚胎的孵化率分别为７７．２７％（１０２／１３２）、７３．２４％（１０４／１４２）、４７．９０％（５７／１１９），第１、２组的孵化率极显著高于第３组（Ｐ＜０．０１），说明用１．５Ｍ丙二醇溶液冷冻的胚胎，在解冻后不宜直接在ＰＢＳ中脱防冻剂。试验２比较用不同浓度（１．０Ｍ０１．５Ｍ，２．０Ｍ）的乙二醇和不同投液氮温度（－２５℃，－３０℃，－３５℃）冷冻胚胎的效果。结果表明乙二醇浓度和投液氮温度对胚胎孵化率均无显著影响（Ｐ＞０．０５），各组胚胎的孵化率变动于７４．４４％－８５．４８％之间。     

牛体外受精胚冷冻保存的研究

对牛卵泡卵母细胞体外受精（ＩＶＦ）１６８ｈ的致密桑椹胚、囊胚用常规快速冷冻法、预冷和不预冷的超快速冷冻法进行了冷冻保存试验。结果表明：ＩＶＦ囊胚采用含１０％甘油的常规快速冷冻法、含２．１ｍｏｌ／Ｌ甘油和０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖预冷５ｍｉｎ的一步冷冻法及含２５％甘油和２５％乙二醇预冷５ｍｉｎ的玻璃化冷冻法等３种方法进行冷冻保存，解冻后的继续发育率（６８．０％，５９．０％，６５．７％）均无显著差异（Ｐ＞０．０５），可用快速、简便、预冷的一步冷冻法或玻璃化冷冻法替代常规快速冷冻法；ＩＶＦ致密桑椹胚可用一步冷冻法（２．１ｍｏｌ／Ｌ甘油＋０．２５ｍｏｌ／Ｌ蔗糖）和玻璃化冷冻法（２５％甘油＋２５％乙二醇或２５％甘油＋２５％１，２－丙二醇）进行预冷的超快速冷冻保存；冻前预冷（５ｍｉｎ）能显著提高ＩＶＦ囊胚的冻后形态正常率和继续发育率（Ｐ＜０．０５）；ＩＶＦ囊胚冷冻—解冻后的继续发育率高于ＩＶＦ致密桑椹胚。     

小鼠胚胎快速冷冻的研究

本文研究了小鼠胚胎快速冷冻方法,以ＰＢＳ＋２．０Ｍ甘油＋０．５Ｍ蔗糖为冷冻液,以ＰＢＳ＋０．５Ｍ蔗糖为称释液。结果桑椹胚冷冻解冻后的存活率为６９．３％,早期囊胚冷冻解冻后的存活率为６０．４％,二者之间无显著差异。     

奶牛胚胎分割与半胚裸露冷冻保存试验

本试验研究了①Ａ、Ｂ、Ｃ三个质量等级胚胎的分割效果；②五种不同冷冻方法冷冻裸露半胚的存活情况；③冻前培养３．０、１．５～２．０、１．０小时的裸露半胚存活率。结果①Ａ、Ｂ、Ｃ级胚胎的分割成功率分别为９５．８％（９２／９６）、７且．４％（７０／９８）、３０％（６／２０），三者间差异极显著（Ｐ＜０．０１）；②半胚冷冻前以２０％ＦＣＳ－ＰＢＳ液培养３．０小时后，以五种不同冷冻方法冷冻，均未获得存活半胚；③半胚冷冻前培养３．０、１．５～２．０、１．０小时后，以添加１０％而聚糖的１０％甘油＋０．１Ｍ蔗糖／ＰＢＳ液冷冻，分别获得了０％（０／４５）、６８．８％（１１／１６）、７５．０％（９／１２）的存活率。结果表明，胚胎质量是影响胚胎分割成功率的关键因素，半胚冷冻前的培养时间是影响裸露半胚存活的重要因素。     

安格斯牛冻胚洲际间引种试验成功

我们从澳大利亚引入安格斯（Ａｎｇｕｓ）牛７日龄冻胚１６枚。这１６枚冷冻胚胎在液氮中保存８９４天后，用３６℃水浴解冻（２５秒钟），全部回收，在室温２７℃条件下，用１０％蔗糖一步脱除抗冻剂（甘油）１０分钟后，移入２００％犊牛血清ＰＢＳ１０分钟，再移入同样浓度的犊牛血清ＰＢＳ中１０分钟。按常规形态鉴定方法，对胚胎评级，１０枚为可用胚胎，解冻后胚胎可用率为６２．５％（１０／１６。将１０枚可用胚胎用非手术法，移入发情周期与胚胎发育期同步的５头受体牛，结果２头妊娠，移位妊娠率为４０％（２／５）。妊娠足月后，２头受体牛各产公犊１头。在我国首次获得成功。     

影响玻璃化冷冻兔胚胎效果的一些因素

试验对影响玻璃化冷冻兔胚胎效果的一些因素进行探讨，以找出理想的玻璃化冷冻方法。在测试的５种玻璃化溶液中，含３５％乙二醇（ＥＧ）和１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖的溶液（ＶＳ１）对胚胎的毒性最小。用ＶＳ１冷冻桑椹胚和囊胚的理想程序是：在室温下使胚胎分别在２０％ＥＧ和３５％ＥＧ中平衡２、３分钟后，移入ＶＳ１中，０．５分钟内（囊胚也可在２分钟后）投入液氮中冷冻。桑椹胚的存活率为９１．７％（３３／３６），囊胚的存活率为９７．１％（３３／３４）～９７．３％（３６／３７）。８～１６细胞胚胎的理想冷冻程序为：在室温下使胚胎在２０％ＥＧ、３５％ＥＧ中平衡２、３分钟，移入４℃的３７％ＥＧ＋１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖溶液中平衡２分或１０分钟后冷冻，胚胎存活率分别为１００％（３７／３７）、８６．１％（３１／３６）。     

绵羊冷冻胚胎移植试验

绵羊冷冻胚胎有枚浆冻前Ａ级胚胎解冻后,胚胎等级有所下降,可用胚率为７７．９％,Ａ、Ｂ级胚移植妊娠率分别为３３．３％（１８／５４）和１６．７％（１／６）,差异不显著（Ｐ〉０．０５）;桑椹胚、早期囊胚、中期囊胚、扩张囊胚移植妊娠率分别为２０．８％（５／２５）、４２．９％（６／１４）、３５．７％（５／１４）５ ３７．５％（３／８）,囊胚期胚胎移植妊娠率较高,但差异不显著（Ｐ〉０．０５）     

体外受精后不同时间收集的牛胚胎的冷冻效果

比较了体外受精后不同时间收集的牛囊胚期胚胎冷冻后的存活率。试验一收集受精后第６，７，８和９天出现的胚胎，分３步加入０．７５ｍｏｌ／Ｌ甘油和０．５ｍｏｌ／Ｌ丙二醇，将胚胎装入０．２５ｍＬ细管后，放入已降温至５℃的冷冻机内，立即以２℃／ｍｉｎ的速率降温至－７℃，停留５ｍｉｎ后植冰。植冰后５ｍｉｎ，以０．３℃／ｍｉｎ的速率降温至－２５℃，取出胚胎，并立即投入液氮中保存。解冻时，先让细管在空气中暴露１０ｓ     

扩张囊胚玻璃化超低温冷冻保存及移植技术的研究

本试验探讨了对鼠扩张囊胚玻璃化冷冻保存后，提高发育率的最佳条件。玻璃化溶液是用ＰＢＳ液稀释成的３０％聚蔗糖＋０．５Ｍ蔗糖混合法，再将乙二醇（ＥＧ）调制成２０、３０及４０％（ｖ／ｖ）的溶液，即ＥＦＳ２０、３０及４０。玻璃化冷冻保存是１０、２０及２５℃温度下，将扩张囊胚直接移入ＥＰＳ溶液后投入液氮中一步法令冻保存，其中２５℃下保存后的发育率最高（８７％）。继之将扩张囊胚用１０％ＥＧ溶液经５分钟处理后，再移入ＥＦＳ４０中二步法冷冻保存，发育率高达９４％。利用二步法冷冻保存的扩张囊胚移植后，妊娠受体的产仔率为６６％（１６８／２５５），同时照组产仔率６１％（８０／１３２）相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。     

混合保护液和冻前处理方法对小鼠胚胎一步冷冻效果的影响

选用Ａ￣Ｅ５种混合保护液：Ａ．二甲亚砜（ＤＭＳＯ）＋乙醇（ＥＧ），Ｂ．甘油（ＧＬ）＋丙二醇（ＰＧ），Ｃ．ＧＬ＋ＥＧ，Ｄ．ＧＬ＋ＤＭＳＯ，Ｅ．ＰＧ＋ＥＦ，以２种冻前处理方法，对小鼠桑椹胚和囊胚进行一步冷冻，冷冻混合保护液中各种保护剂浓度均为２５％。法的冻前平衡液为ＶＳ２的对倍稀释液；法的冻前平衡液中，前一种保护剂浓度为１０％，后一种保护剂浓度为２０％。胚胎于室温（２０℃）下在ＶＳ１中平衡５ｍｉｎ或Ｖ     

AA~ 种鸡产蛋率、受精率、孵化率的相关分析

对AA 肉用种鸡产蛋周(1～35周)的产蛋率、受精率、孵化率进行跟踪观测并对3个指标进行相关性分析。结果表明:产蛋率与受精率相关系数为0.864(P<0.01);产蛋率与孵化率相关系数为0.900(P<0.01);受精率与孵化率相关系数为0.992(P<0.01),产蛋率与受精率,产蛋率与孵化率,受精率与孵化率三者都呈较强正相关。其中受精率与孵化率相关性最强,产蛋率与孵化率相关性次之,产蛋率与受精率相关性较弱。     

不同细胞密度冻存对奶牛乳腺上皮细胞的影响

试验采用了内蒙古呼和浩特健康荷斯坦奶牛乳腺组织经5代纯化后,将奶牛乳腺上皮细胞分别设为1组（1×104个细胞/mL）、2组（1×105个细胞/mL）、3组（1×106个细胞/mL）、4组（1×107个细胞/mL）4个密度梯度进行冻存,复苏后检测细胞死亡率、贴壁率、凋亡率并进行形态学观察。结果显示,4组复苏后死亡率极显著低于其他3组（P〈0.01）,贴壁率显著高于其他3组（P〈0.05）;3组细胞凋亡率显著低于其他3组（P〈0.05）;3、4组细胞到第3天基本铺满瓶底,生长状态良好。     

温湿度对黑水虻繁殖率及幼虫转化鸡粪效率的研究

为了探讨山东地区冬季黑水虻成虫繁殖的最佳温湿度环境以及幼虫对新鲜鸡粪的转化效率,对不同饲养温度和湿度下黑水虻虫蛹羽化率、平均产卵量和虫卵孵化率等指标进行测定,分析幼虫增重、料虫比、干物质转化率以及采食速度等指标的变化规律。结果表明:黑水虻虫蛹在本试验条件下均能正常羽化(P>0.05);27℃、30℃温度条件下与24℃相比均极显著提高了成虫的平均产卵量(P<0.01),人工加湿与自然湿度相比也有显著提高(P<0.05);33℃虫卵孵化率最低,27℃和30℃孵化效果好;人工加湿显著提高了27℃、30℃和33℃虫卵孵化率(P<0.05);温度和相对湿度对平均产卵量和虫卵孵化率均具有明显的交互作用(P<0.05)。研究结果显示,黑水虻幼虫的增重为72.16 mg,料虫比8.79,干物质转化率为33.28%,采食速度在接虫后第5天最快,达到8.98 mg/h。     

刈割对多年生黑麦草叶组织转化的影响

组织转化是分析草丛的组织生长、枯死和净生产的理论，对于合理利用草地具有重要的指导意义。本研究应用组织转化的理论和方法，通过周割试验对多年生黑麦草叶片组织的转化进行较为深入的研究。研究结果表明，12个州割处理中，多年生黑麦草的叶片净生产率以14天×7．5cm和14天×5．0cm最高，分别为53．13千克／公顷／天和51．72千克／公顷／天，而42天×10．0cm最低。     

不同细胞密度冻存对奶牛乳腺上皮细胞的影响

试验采用了内蒙古呼和浩特健康荷斯坦奶牛乳腺组织经5代纯化后,将奶牛乳腺上皮细胞分别设为1组(1×104个细胞/mL)、2组(1×105个细胞/mL)、3组(1×106个细胞/mL)、4组(1×107个细胞/mL)4个密度梯度进行冻存,复苏后检测细胞死亡率、贴壁率、凋亡率并进行形态学观察。结果显示,4组复苏后死亡率极显著低于其他3组(P<0.01),贴壁率显著高于其他3组(P<0.05);3组细胞凋亡率显著低于其他3组(P<0.05);3、4组细胞到第3天基本铺满瓶底,生长状态良好。     

绵山羊双羔素提高美利奴羊繁殖率的研究

为了提高美利奴羊的繁殖率,增加美利奴羊产区养殖者的经济效益,运用绵山羊双羔素(睾酮-3-羧甲基肟·牛血清白蛋白)对新疆维吾尔自治区巩乃斯种羊场、新疆生产兵团76团兴牧公司、齐齐哈尔种畜场和甘肃省绵羊繁育技术推广站的美利奴羊进行免疫试验。结果显示:4个试验点试验组发情率和受胎率与对照组相比,差异均不显著(P>0. 05);与相应对照组相比,巩乃斯种羊场和76团兴牧公司产羔率和双羔率极显著升高(P<0. 01),齐齐哈尔种畜场和甘肃省绵羊繁育技术推广站显著提高(P<0. 05);单羔和双羔初生重与对照组相比,齐齐哈尔种畜场试验组显著降低(P<0. 05),其他羊场无显著差异(P>0. 05);对76团兴牧公司2～6岁母羊双羔率进行统计,发现2岁母羊产双羔率最低,5岁母羊产双羔率最高;齐齐哈尔种畜场试验组双羔的断奶重与对照组相比,降低2. 10 kg。结果提示:通过对不同地方美利奴羊应用绵山羊双羔素可以提高美利奴羊的繁殖率,提高养殖者的经济效益。     

The importance of the ecological view of agriculture

Abstract

Marked populations of Themeda triandra and Sporobolus fimbriatus tillers were sequentially harvested at fortnightly intervals both under irrigation and under unamended moisture conditions. Sampling covered a period from tiller initiation through to senescence after flowering.

Tiller masses and green leaf areas were used to derive absolute growth rates, relative growth rates, net assimilation rates and leaf area ratios respectively. Growth rates of Themeda triandra were higher, or were maintained at high levels for longer than those of Sporobolus fimbriatus. Moisture stress resulted in considerably depressed growth rates. Photosynthetic efficiency of spring emerging tillers was potentially greatest in midsummer, but this seasonal influence was masked by moisture stress on non‐irrigated treatments.     

饮水添加沼液对肉鸡生产性能的影响

沼气池的建设是农村新能源综合开发利用推广项目之一,极大地提高了农民生活质量。沼液、沼渣的再开发利用是进一步推进该项目所面临的问题。饮水中添加50%的沼液饲喂4周龄AA肉仔鸡进行35d生长试验,效果明显。平均每只鸡增重0.0666±0.0166Kg,比对照组提高7.5%,总耗料量降低2.7%,料重比降低0.34,均差异显著(P<0.05)说明饲料转化率明显提高。成活率试验组比对照组提高2个百分点。屠宰率提高0.85个百分点,差异不显著(P>0.05),但胸肌率比对照组提高4个百分点,差异显著(P<0.05)。     

应用B超技术提高规模奶牛场繁殖性能的研究

本研究针对上海光明荷斯坦牧业有限公司三个千头规模牧场进行B超技术实际生产应用,对三个牧场不同年度有无使用B超技术的牧场分别进行配种后30d早孕诊断,提前检出空怀牛及时处理并再次参加配种使之怀孕,减少空怀饲养成本。通过B超技术应用并收集配种率、受胎率和繁殖率等数据资料进行检验分析和对比,在生产实践中取得了良好的效果。B超应用于三个牧场可促进成母牛实际配种率的提高,一、二、三场分别提高了21个百分点（P〈0.01）、21个百分点（P〈0.01）、19个百分点（P〈0.05）;促进成母牛月平均情期受胎率的提高,一、二、三场分别提高了3个百分点（P〉0.05）、6个百分点（P〈0.05）、3个百分点（P〉0.05）;促进成母牛年总繁殖率的提高,一、二、三场分别提高了5.1个百分点、7.6个百分点、7.1个百分点。B超应用于青年牛的早孕诊断与繁殖管理,效果不明显（P〉0.05）。在分析研究中,在南方夏季高温减少配种的条件下,应用B超使6～11月平均配种率提高了3.1个百分点,并由配种后30d使用B超早孕诊断与60d复检对比差异可知,60d直检空胎率相比较降低了25.65个百分点,30～60d之间的胚胎损失率为4.92%,这也反映该公司牧场牛群质量和饲养管理等整体状况良好。     

不同时期断奶对牦母牛繁殖性能的影响

对178头牦母牛分别在8月26日(Ⅰ组)和10月6日(Ⅱ)进行犊牛断奶。Ⅰ组发情率为99%,繁殖率89%;Ⅱ组发情率28%,繁殖率33%。Ⅰ组比Ⅱ组的发情率和产犊率分别提高了66%和64%。群体受胎率提高了9.34%。对断奶后的母牛和犊牛进行人工补饲,母牛的膘情和犊牛的生长发育都良好。