灯盏细辛通过VDAC1/ROS/NLRP3通路减轻H2O2诱导的心肌细胞损伤

目的 探讨灯盏细辛(EB)对过氧化氢(H₂O₂)诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法 建立体外H₂O₂诱导的心肌细胞氧化应激损伤模型。将体外培养的HL-1小鼠心肌细胞分为空白组(常规培养)、对照组(4 mg·L^-1 EB 1 h)、模型组(800μmol·L^-1 H₂O₂ 1 h)、实验组(4 mg·L^-1 EB+800μmol·L^-1 H₂O₂ 1 h)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力；用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞损伤情况；用流式细胞术检测活性氧(ROS)含量；用蛋白质印迹法检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)和电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)蛋白表达水平；用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)含量；用钙黄绿素乙酰甲酯(Ca...     

人参蛋白协同H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤

目的:探讨人参蛋白(GP)协同H₂O₂诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)氧化应激损伤的作用,并筛选二者的最佳联合浓度。方法:首先采用不同浓度H₂O₂诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤,然后采用不同浓度GP联合200 μmol·L^-1H₂O₂诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤;采用倒置荧光显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活,Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡。结果:SH-SY5Y细胞经GP-H₂O₂作用后,细胞数量减少,轴突缩短或消失,胞体变圆、缩小,大小不等;细胞存活率降低;Heochst 33342染色呈现高蓝光;GP 60 mg·L^-1+H₂O₂ 200 μmol·L^-1为联合诱导氧化应激损伤的最佳浓度。结论:GP有协同H₂O₂诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤的作用,抑制细胞增殖、促进细胞凋亡是其可能的作用机制。     

太白楤木总皂苷对H2O2诱导LO2细胞损伤的修复作用及机制研究

目的 观察太白楤木总皂苷(TSAT)对H₂O₂诱导的LO₂细胞损伤的修复作用，并探讨其作用机制。方法 将培养的LO₂细胞分为对照组、H₂O₂模型组和TSAT不同浓度处理组，通过MTT法进行TSAT浓度筛选，检测TSAT对LO₂细胞增殖的影响，倒置显微镜下观察LO₂细胞形态变化，检测TSAT对LO₂细胞丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)水平的影响，Hoechst染色观察LO₂细胞核改变，流式细胞术检测凋亡率，Western blot法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax、caspase 9和caspase 3的表达。结果 当TSAT浓度小于20μg·mL^-1时对细胞具有保护作用，选用10、15、20μg·mL^-1 TSAT进行后续实验。...     

下调miR-106a-5p对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤及JAK1/STAT3通路的影响

目的 探讨下调miR-106a-5p对过氧化氢(H₂O₂)诱导的心肌细胞损伤及Janus激酶1(JAK1)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)通路的影响。方法 不同浓度梯度H₂O₂(0、50、100、200、400μmol/L)处理大鼠心肌细胞H9c2。H9c2细胞分为对照组、H₂O₂组(100μmol/L H₂O₂)、miR-106a-5p NC组(100μmol/L H₂O₂+转染miR-106a-5p NC)和miR-106a-5p siRNA组(100μmol/L H₂O₂+转染miR-106a-5p siRNA)。实时荧光定量PCR(qPCR)法检测miR-106a-5p表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及...     

3D打印技术构建不同比例PLA/TiO2复合支架及其性能评估

目的 利用3D打印技术构建不同比例的聚乳酸/二氧化钛(PLA/TiO₂)纳米复合支架,探究其相关性能。方法 在PLA中分别添加1%、1.5%、2.5%、5%和10%的TiO₂纳米颗粒。通过3D打印技术构建PLA/TiO₂纳米复合支架,对其形貌、力学性能、孔隙率、热性能和生物性能进行表征。结果 与纯PLA支架相比,PLA/TiO₂-1.5%、PLA/TiO₂-2.5%支架具有更高的孔隙率和更好的力学性能。所有支架均为层层交互叠加的网状结构,孔径约200μm,孔隙均匀规则。体外细胞增殖实验发现,所有支架均可促进小鼠胚胎成骨细胞增殖,PLA/TiO₂-1.5%组支架的细胞增殖效果优于其他组支架(P<0.05)。结论 相比于其他支架,PLA/TiO₂-1.5%支架具有适宜的力学性能,高孔隙率,更好地促进细胞增殖能力,可为骨缺损修复材料研究奠定基础。     

麝香及其代用品人工麝香对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞损伤保护作用比较研究

目的：研究麝香（TR）及其代用品人工麝香（RG）对H₂O₂诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤保护作用及机制。方法：将对数期生长的HUVECs细胞随机分为5组：空白对照、H₂O₂、H₂O₂+NAC、H₂O₂+TR和H₂O₂+RG。HUVECs细胞在H₂O₂作用2 h后,采用MTS法检测细胞增殖光密度值并计算存活率,利用试剂盒测定细胞外液LDH漏出量、细胞内MDA含量、SOD和GSH-Px活力。对HUVECs细胞进行伊红染色,然后用光学显微镜观察细胞形态变化。结果：与H₂O₂组相比较,麝香（50 μg·mL^-1）增加了细胞存活率（P<0.05）;使LDH漏出量和MDA含量显著降低（P<0.05,P<0.001）;使SOD和GSH-Px活力显著提高（P<0.01,P<0.05）;抑制了H₂O₂对HUVECs细胞形态的改变,减少了细胞内ROS水平。人工麝香（50 μg·mL^-1）对HUVECs细胞也有保护作用,但不具有统计学意义。结论：麝香对H₂O₂诱导的人脐静脉内皮细胞损伤具有保护作用,作用机制可能与有效改善细胞内抗氧化酶的活性,减轻氧化应激损伤有关。此外,麝香对人脐静脉内皮细胞的保护作用略强于人工麝香。     

蟛蜞菊内酯通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对人脐静脉内皮细胞氧化损伤的影响

目的 研究蟛蜞菊内酯(WEL)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)炎症损伤的保护作用及其分子机制。方法 建立过氧化氢(H₂O₂)诱导HUVECs氧化应激损伤模型,给予200μmol·L^-1H₂O₂处理24 h。实验分组：正常对照组、二甲亚砜(DMSO)组、H₂O₂组、WEL组(20μmol·L^-1)。通过噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平,荧光显微镜观察各分组细胞p62蛋白表达情况。Western blotting测定细胞中mTOR、p-mTOR、PI3K、p-PI3K、SOD1等蛋白表达水平。结果 与H₂O₂组比较,WEL组HUVECs细胞存活率升高(P<0.01),细胞内ROS减少,SOD1表达增强,自噬体膜上p62蛋白聚集增多;与H₂O₂损伤组相比,WEL能明显增加损伤后H...     

萘磺酸钠修饰的石墨烯基Fe3O4复合材料的制备与载药性能评价

目的:制备采用1-萘磺酸钠修饰的石墨烯基Fe₃O₄复合材料,并对其性能进行评价.方法:用1-萘磺酸钠进行修饰制备石墨烯基Fe₃O₄复合材料Fe₃O₄/GO-NA,同时进行磁性测定,然后包封盐酸多柔比星(DOX),得到Fe₃O₄/GO-NA/DOX,用高效液相色谱法测定DOX的含量,对其高效装载、缓释性、稳定性和细胞毒性进行分析.结果:Fe₃O₄/GO-NA具有超顺磁性,饱和磁化强度为16.5 emu·g^-1,Fe₃O₄/GO-NA/DOX对DOX的载药率为(68.59±1.02)%(n=3),缓释性及稳定性良好,并且基本无生物毒性.结论:Fe₃O₄/GO-NA/DOX制备工艺可行,性能良好,具有广阔的应用前景.     

四氧化三钴/氧化铈异质结构模拟酶的抗细胞氧化损伤研究

目的 探究具有丰富氧空位的四氧化三钴/氧化铈异质结构(Co₃O₄/CeO₂ HSs)模拟酶的活性及其降低氧化应激对细胞的损伤。方法 在模拟生理条件下(37℃、pH 7.4),分别将Co₃O₄/CeO₂ HSs和CeO₂纳米片(CeO₂ NFs)与过氧化氢(H₂O₂)溶液反应,观察其对H₂O₂的清除能力;在同等条件下,使用溶解氧仪和TMB检测H₂O₂的分解产物;研究Co₃O₄/CeO₂ HSs对鼠源成纤维L929细胞的毒性,以及在氧化应激条件下对L929细胞的保护作用。结果 在模拟生理条件下,Co₃O₄/CeO₂ HSs能够将H₂O<...     

LncRNA CYTOR对大鼠背脊髓神经元细胞损伤及炎性因子的影响

目的 探讨LncRNA CYTOR对大鼠背脊髓神经元细胞损伤及炎性因子的影响及其可能作用机制。方法 采用过氧化氢(H₂O₂)诱导大鼠背脊髓神经元细胞建立细胞损伤模型，随机分为：con组、H₂O₂组、H₂O₂+pcDNA组、H₂O₂+pcDNA-LncRNA CYTOR组、H₂O₂+pcDNA-LncRNA CYTOR+miR-NC组、H₂O₂+pcDNA-LncRNA CYTOR+miR-136-5p组。qRT-PCR检测LncRNA CYTOR、miR-136-5p的表达量；MTT法与流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡；ELISA法检测IL-6、IL-21的水平；双荧光素酶报告实验检测LncRNA CYTOR与miR-136-5p的靶向关系；Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果 与con组比较，H     

磷酸肌酸钠联合纳洛酮治疗急性酒精中毒的效果及对H2O2、β-内啡肽的影响

目的 探讨磷酸肌酸钠联合纳洛酮治疗急性酒精中毒的效果及对过氧化氢(H₂O₂)、β-内啡肽的影响。方法 205例急性酒精中毒患者,采用随机数字表法分为试验组(103例)和对照组(102例)。对照组采用纳洛酮治疗,试验组在对照组基础上加用磷酸肌酸钠治疗。比较两组临床疗效、不良反应发生情况及治疗前后H₂O₂、β-内啡肽、肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平。结果 试验组治疗总有效率94.17%高于对照组的83.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组H₂O₂、β-内啡肽水平均低于本组治疗前,且试验组H₂O₂(30.41±6.02)mmol/gprot、β-内啡肽(210.14±13.25)ng/L低于对照组的(44.12±7.06)mmol/gprot、(250.35±15.69)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后...     

固体酸(TiO2/Fe3+)催化对硝基苯甲酸乙酯合成的研究

目的以TiO₂/Fe³⁺催化合成对硝基苯甲酸乙酯。方法用TiO₂/Fe³⁺催化合成对硝基苯甲酸乙酯,产品通过MS检测,并用正交试验确定了其最佳反应条件。结果最佳反应条件为:酸醇摩尔比为1∶6,反应温度为90℃,反应时间为2h,收率达88%。结论该法能顺利实现对硝基苯甲酸和乙醇的酯化。     

1,25（OH）2D3对人肾小球系膜细胞增殖及PCNA表达的影响

目的探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25（OH）₂D₃]对人肾小球系膜细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）表达及细胞增殖的影响。方法体外培养人肾小球系膜细胞,取传代培养至3⁸代细胞随机分为4组:正常对照组（加含5%胎牛血清DMEM培养基）,增殖对照组（EGF组,加10μg/L的EGF）,一般干预组[VD组,加10^-8mol/L 1,25（OH）₂D₃],增殖干预组[EGF+VD组,加10μg/L EGF及10^-8mol/L1,25（OH）₂D₃],均作用48 h。流式细胞术检测各组细胞周期;Western blot检测各组PCNA表达的情况。结果 （1）细胞周期。与正常对照组相比,EGF组G₁期细胞明显减少,S、G2/M期细胞增多,增殖指数（PI）较高;VD组G₁期细胞明显增多,S、G₂/M期细胞减少,PI较低;与EGF组相比,VD组和EGF+VD组G₁期细胞增多,S、G₂/M期细胞减少,PI较低,差异均有统计学意义。（2）系膜细胞中PCNA蛋白的表达。与正常对照组相比,EGF组PCNA的表达较高,VD组PCNA的表达较低;与EGF组相比,VD组和EGF+VD组PCNA的表达较低。结论 1,25（OH）₂D₃通过阻滞细胞周期、抑制PCNA的表达,从而抑制人肾小球系膜细胞的增殖。     

复合指数A-aDO2、a/A比值与PaO2/FiO2预测晚期早产儿呼吸窘迫伴呼吸衰竭的价值研究

目的 探讨复合指数肺泡动脉氧分压差(A-aDO₂)、动脉肺泡氧分压(a/A)比值与氧合指数(PaO₂/Fi O₂)预测晚期早产儿呼吸窘迫伴呼吸衰竭的价值研究。方法 按照简单随机数字表法选取呼吸窘迫症晚期早产儿，40例不需要机械通气为对照组，40例需要机械通气为观察组。分析呼吸衰竭参数对晚期早产儿呼吸窘迫需要机械通气的预测、复合指数A-aDO₂、a/A比值与PaO₂/Fi O₂差异比较、预测参数的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、阳性率、阴性率、约登指数并制作出ROC曲线。结果 两组患儿最大A-aDO₂、最低a/A比值、最低PaO₂/Fi O₂的AUC曲线差异无统计学意义(P>0.05)。这3个AUC曲线均比PaCO₂的AUC曲线高，A-aDO₂曲线超过最大Fi O₂曲线(P<0.05)。A-aDO_2...     

美洲大蠊提取物对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨美洲大蠊提取物(PAS840)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞氧化损伤模型的保护作用及机制。方法:采用H₂O₂刺激PC12细胞建立神经细胞氧化损伤模型,实验分为正常组(Con)、模型组(Mod)、PAS840低中高剂量组(20,50,125 μg·mL^-1的PAS840培养基溶液进行处理),采用倒置显微镜观察细胞形态并采用CCK-8法检测各组细胞存活率,生化试剂盒检测各组超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的水平;DCFH-DA荧光探针检测各组活性氧簇(ROS)的水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;JC-1法染色检测各组细胞线粒体膜电位(MMP);RT-qPCR检测各组Nrf2/HO-1通路因子(Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1)、凋亡因子(Bcl-2、Bax和Caspase-3)、炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)、乙酰胆碱酯酶(AchE)和过氧化氢酶(CAT) mRNA的表达水平;Western blot法检测各组Nrf2、HO-1、Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达水平。结果:PAS840可显著提高氧化损伤细胞的存活率、MMP及SOD、GSH-Px和GSH的水平,降低LDH、MDA和ROS的水平;显著降低Keap1、TNF-α、IL-1β、IL-6和AchE mRNA表达的同时,显著增加CAT和NQO1 mRNA的表达,显著降低Nrf2、Bax和Caspase-3的mRNA及其蛋白表达,显著增加HO-1和Bcl-2的mRNA及其蛋白表达。结论:PAS840可以抑制H₂O₂诱导的PC12细胞凋亡,减轻炎症,其机制可能与降低ROS、调控Nrf2/HO-1通路因子减轻细胞的氧化损伤程度有关。     

黄芪多糖缓释纤维对成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响

目的:研究黄芪多糖(AP)缓释纤维对成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响。方法:将AP分别与左旋聚乳酸(PLLA)结合制备成AP质量浓度分别为0、25、50、100μg/ml的静电纺丝缓释纤维,即PLLA、PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3,以异硫氰酸荧光素为指示剂于荧光显微镜下观察MC3T3-E1细胞在上述4种缓释纤维上的黏附情况;采用紫外分光光度法在490 nm波长处测定PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3中AP的含量,考察其21 d内的体外释放情况;采用MTT法检测4种缓释纤维作用24、48、72 h时MC3T3-E1细胞的增殖情况;采用酶标仪法检测4种缓释纤维对MC3T3-E1细胞作用3、5、7 d时的碱性磷酸酶(ALP)活性表达情况。结果:镜下观察PLLA纤维连续,较多空隙,表面光滑;PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3纤维呈纵横交错的三维、多空网络结构,且3种AP载药量下纤维形态未见明显改变。PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3能持续释放AP 21 d,且最初的24 h内释药呈突释状态。与PLLA比较,PLLA/AP2、PLLA/AP3能促进MC3T3-E1细胞的增殖,PLLA/AP1仅作用48 h时能促进MC3T3-E1细胞的增殖,差异具有统计学意义(P<0.05);PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3均能增强MC3T3-E1细胞中ALP活性表达,差异具有统计学意义(P<0.05),且与AP浓度呈正相关。结论:AP缓释纤维具有一定的缓释作用,且对MC3T3-E1细胞的增殖、分化具有剂量依赖性的促进作用。     

白藜芦醇对LPS诱导的MC3T3-E1成骨细胞的骨保护作用

目的 探讨白藜芦醇对脂多糖(LPS)诱导的MC3T3-E1成骨细胞的骨保护作用.方法 采用CCK-8法检测白藜芦醇不同浓度下MC3T3-E1成骨细胞的细胞增殖活性,对硝基苯磷酸盐法检测白藜芦醇不同浓度下MC3T3-E1成骨细胞ALP活性.将MC3T3-E1成骨细胞分为空白组(基础培养基)、对照组(LPS 2 μg/mL)和实验组(LPS 2μg/mL+白藜芦醇20 μmol/L).采用qRT-PCR检测三组成骨相关基因Runx2、ALP、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)mRNA表达,Western blot法检测三组细胞沉默调节蛋白1(SIRT1)蛋白表达.结果 白藜芦醇20 μmol/L是MC3T3-E1成骨细胞最适成骨浓度(P＜0.05).与空白组比较,实验组成骨相关基因Runx2、ALP、OCN和OPN mRNA表达水平和SIRT1蛋白表达水平均降低(P＜0.05);与对照组相比,实验组成骨相关基因Runx2、ALP、OCN和OPN mRNA表达水平和SIRT1蛋白表达水平升高(P＜0.05).结论 白藜芦醇能够通过提高Runx2、ALP、OCN、OPN和SIRT1相关成骨因子的表达对LPS诱导的MC3T3-E1成骨细胞发挥骨保护作用.     

勒哲多糖粗提物体外抑制H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤的作用及机制研究

目的:基于体外活性氧(reactive oxygen species, ROS)清除体系和H₂O₂诱导HepG2细胞氧化损伤模型探讨勒哲多糖粗提物(LZC)的体外抗氧化作用和机制。方法:测定LZC对羟基自由基、超氧阴离子、DPPH自由基、亚硝酸根离子的清除作用;试剂盒检测H₂O₂诱导HepG2细胞氧化损伤模型中细胞中丙二醛(malondialdehyde, MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)水平,2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(2’,7’-dichlorofluorescein diacetate, DCFH2-DA)荧光探针检测细胞内ROS水平和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,Western blot检测核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)、肿瘤蛋白53(p53)、Bcl...     

萘磺酸钠修饰的石墨烯基Fe3O4-华法林复合材料的研制

目的：合成新型的萘磺酸钠修饰的石墨烯基Fe₃O₄-华法林复合材料（Fe₃O₄/GO-NA/W）,对其进行质量评价并分析其抗凝血性,以期用于心脏支架抗凝血。方法：采用离心法对Fe₃O₄/GO-NA/W的包封率进行测定;计算生成物的回收率、精密度并评价其稳定性;将Fe₃O₄/GO-NA/W复合材料固定于多巴胺涂覆的316 L不锈钢表面,研究其表面抗凝血性能,用扫描电镜观察样品表面血小板的黏附情况。结果：所制得复合材料的包封率（n=5）为（80.1±1.09）%,平均回收率（n=3）为（100.4±0.44）%,华法林检测浓度线性范围为20~100 μg·mL^-1（r=0.999 8）,DA-GNW表面水接触角为（50.8±1.1）°,固定了Fe₃O₄/GO-NA/W复合材料的不锈钢表面具有良好的抗凝效果。结论：Fe₃O₄/GO-NA/W复合材料制备工艺可行,质量控制方法简便可靠,抗凝血性能良好。氧化石墨烯复合材料在心血管材料表面的应用为其生物功能化提供了一种可行的方法。     

罗格列酮对体外培养小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1生长与分化的影响研究

目的:研究罗格列酮对体外培养小鼠前成骨细胞系MC3T3-E1生长与分化的影响。方法:以小鼠MC3T3-E1作为药物筛选的细胞模型,分别加入1、2、5、10μmo·lL-1罗格列酮干预,MTT法测定细胞活性并计算生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫组化法分析细胞中促凋亡因子Bax和抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达;测定细胞中分化指标碱性磷酸酶(ALP)的活性。设立只加入培养基处理的空白对照组。结果:与空白对照组比较,罗格列酮各浓度组生长抑制率、细胞凋亡率升高(P均<0.05),Bax表达增强、Bcl-2表达减弱、ALP活性下降(P均<0.05),且呈浓度依赖性。结论:罗格列酮可抑制MC3T3-E1细胞生长及分化,并诱导其凋亡;而Bax/Bcl-2可能参与凋亡的发生,并可能起关键调控作用。