清开灵系列品种中胆酸和猪去氧胆酸的通用检测定方法研究

目的:建立一个通用检测方法测定清开灵系列品种中胆酸和猪去氧胆酸的含量。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法。色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%乙酸溶液(40:60,V/V),流速为0.8mL·min-1,蒸发光散射检测器的漂移管温度为110℃,N2流速为2.0mL·min-1,进样量为5～25μL。结果:胆酸和猪去氧胆酸的进样量均在0.5～3.5μg(r=0.9999或0.9998)范围内与各自峰面积积分值呈良好的对数线性关系;不同剂型清开灵系列品种中胆酸的平均加样回收率在93.8%～99.5%之间,RSD在0.8%～4.6%之间(n=6);猪去氧胆酸的平均加样回收率在95.9%～105.6%之间,RSD在0.9%～4.9%之间(n=6)。结论:该方法简便、准确、分离效果好、专属性强,可作为清开灵系列品种的通用检测方法。     

RP-HPLC法同时测定猪胆粉药材中3种牛磺结合型胆酸的含量

目的:建立同时测定猪胆粉药材中牛磺猪胆酸、牛磺猪去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸含量的RP-HPLC方法。方法:采用Welchrom C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-磷酸二氢钠溶液(0.03 mol·L-1)(70∶30),用磷酸调节pH为4.4,流速为1.0 mL·min-1,检测波长200 nm,柱温25℃。结果:牛磺猪胆酸、牛磺猪去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸进样量分别在1.65～16.5μg(r=0.9998),2.03～20.3μg(r=0.9998),1.09～10.9μg(r=0.9996)范围内线性关系良好;检测限分别为26.4,7.6,38.2 ng;平均加样回收率(n=9)分别为101.2%(RSD=1.9%),99.1%(RSD=1.7%),100.6%(RSD=2.1%)。结论:该方法简便、准确,重复性好,在同一色谱条件下实现多指标成分的同时测定,为猪胆粉的全面质量评价提供参考。     

反相高效液相色谱法测定布南色林原料的含量及有关物质

目的建立测定布南色林及其有关物质含量的反相高效液相色谱法。方法色谱柱为WatersXterraRP18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-25mmol/L的磷酸二氢钠溶液(内含25mmol/L庚烷磺酸钠,用磷酸调pH至3.0,35∶30∶35),检测波长为243nm,流速为1 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL。结果布南色林检测质量浓度的线性范围为1.022～10.22μg/mL(r=0.9994),平均回收率为100.14%(RSD=0.82%)。结论所用方法简便、准确、专属性强,可用于该原料的质量控制。     

高效液相色谱法测定熊胆冻干粉针剂中牛磺熊去氧胆酸含量

目的:建立熊胆冻干粉针剂中牛磺熊去氧胆酸的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,以甲醇-0.03mol/L磷酸二氢钠溶液(65:30),用磷酸调pH值至4.4作为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm.结果:牛磺熊去氧胆酸进样量在2.5～16μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 5;平均加样回收率为99.75%,RSD为0.82%(n=5).结论:高效液相色谱法操作简便、重现性好、专属性强、准确可靠,可作为熊胆冻干粉针剂中牛磺熊去氧胆酸的定量分析方法.     

HPLC法同时测定云连药材中6种生物碱的含量

目的:建立同时测定云连药材中6种生物碱含量的方法。方法:色谱柱为Xtimate～(TM)C_(18),流动相为30 mmol/L碳酸氢铵溶液(含0.1%三乙胺和0.7%氨水)-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的检测质量浓度线性范围分别为0.85～16.96 mg/L(r=0.999 9)、1.25～24.96 mg/L(r=0.999 8)、2.05～40.96 mg/L(r=0.999 9)、3.65～72.96 mg/L(r=0.999 9)、2.88～57.60 mg/L(r=0.999 9)、13.25～264.96 mg/L(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;加样回收率分别为97.14%～102.14%(RSD=1.93%,n=6)、97.00%～102.00%(RSD=2.06%,n=6)、98.18%～101.82%(RSD=1.79%,n=6)、96.15%～101.28%(RSD=2.06%,n=6)、96.88%～101.88%(RSD=1.87%,n=6)、99.31%～103.76%(RSD=1.89%,n=6)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于云连药材中6种生物碱含量的同时测定。     

高效毛细管电泳法测定头孢克洛胶囊中头孢克洛的含量

目的:测定头孢克洛胶囊中头孢克洛的含量.方法:高效毛细管电泳法.毛细管柱(60 cm×75μm),以30 mmol/L硼砂为运行缓冲液(pH=9.2),高压进样5 s,分离电压为12 kV,温度为25℃,检测波长为254 nm,以地塞米松磷酸钠为内标.结果:头孢克洛在6～30μg/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 6),平均回收率为99.20%(n=5,RSD=2.03%).结论:高效毛细管电泳法简单、快捷、灵敏.     

不同人参提取物对胶原诱导的血小板聚集的影响

<正>为评价人参粗提取物及单体的药效活性,按比浊法进行血小板聚集测定,结果报告如下。1材料与方法1.1试剂:Tyrode buffered的配置:137mmol/L NaCl;0.3mmol/L Na2HPO4;2mmol/L KCl;12mmol/L NaHCO3;0.35%牛血清;1mmol/L CaCl2;5mmol/L Hepes。诱导剂:胶原:鼠尾胶原(Sigma,1mg/mL);麻醉剂:戊巴比妥钠(1%),30～40mg/kg。抗凝剂:枸橼酸钠(3.8%),血液和抗凝剂比例(9:1)。     

高效毛细管电泳法测定石榴皮中鞣花酸的含量

目的:建立以高效毛细管电泳法测定石榴皮提取物中鞣花酸含量的方法。方法:毛细管柱为未涂层毛细管,缓冲液为30mmol/L氨基丁三醇-30mmol/L磷酸二氢钾(20∶9),分离电压为20kV,检测波长为254nm,柱温为25℃,进样条件为25mbar、5·0s。结果:鞣花酸检测浓度在0·0398~0·3184mg/ml范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0·9993);平均加样回收率为97·42%(RSD=1·84%)。结论:本方法准确、可靠,可用于石榴皮药材的质量控制。     

离子色谱法测定尿碘浓度

目的:建立测定人尿样中碘离子浓度的离子色谱法。方法:采用离子色谱,在IonPacAS7柱上,用50mmol/L的硝酸为淋洗液测定尿液中碘离子的含量。检测方式为直流安培检测,工作电极为Ag电极,参比电极为Ag/Agcl电极。结果:碘离子浓度检测线性范围为50～1000μg/L(r=0.9998),平均回收率为95.8%～97.0%,相对标准偏差为2.6%～3.7%;测得的正常人尿碘浓度为100～300μg/L。结论:该方法稳定、准确、快速,可用于实际样品的测定。     

HPLC法测定牛磺熊去氧胆酸胶囊含量的临床分析

目的：建立测定牛磺熊去氧胆酸胶囊含量的方法。方法采用KromasilC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液(80%磷酸调pH至3.5),梯度洗脱,检测波长205 nm,柱温30℃,流速1.2 ml/min,进样量20μl。结果牛磺熊去氧胆酸在0.0953~1.9050 mg/ml范围内与浓度呈良好的线性关系(r=0.9999);加样回收率为99.93%,RSD=1.0%(n=9)。结论采用高效液相色谱法(HPLC)测定牛磺熊去氧胆酸胶囊含量,该方法简便准确、精密度和重复性良好,结果准确可靠。     

不同提取方法对人工牛黄中胆酸含量的影响

目的:研究不同提取方法对人工牛黄中胆酸含量的影响。方法:选择3个不同产地的人工牛黄,采用经水解处理和未经水解处理2种方法提取胆酸,并用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定胆酸含量。结果:经水解处理的样品中胆酸含量高于未经水解处理的同批样品。结论:水解过程将人工牛黄中的结合型胆酸转化为游离型胆酸,从而使胆酸的含量升高。因此,将总胆酸含量和游离胆酸含量共同作为人工牛黄质量控制的指标更为合理。     

胶束电动毛细管色谱法测定牡丹皮及六味地黄丸中丹皮酚的含量

目的用胶束电动毛细管色谱法分离测定中药材牡丹皮及中成药六味地黄丸中丹皮酚的含量。方法定量采用内标法 ,选取芦丁为内标。所用毛细管规格为 5 5cm(有效长度 5 0cm)× 75 μm,检测波长 2 74nm ,电压 1 5kV ,背景电解质分别为 30mmol/LSDS -30mmol/L硼砂 ,2 0mmol/LSDS -5 0mmol/L硼砂 ( pH 9 4 )。 结果线性分别为 6～ 4 2mg/L,1 8 2～ 91mg/L;相关系数分别为0 9995和 0 9997;RSD为 1 95 %和 3 6 %;加样回收率为 1 0 1 5 %～ 1 0 3 3%和 97 7%～1 0 1 9%。丹皮酚含量分别为 1 5 9%和 0 1 4 8%。结论胶束电动毛细管色谱法用于测定牡丹皮及六味地黄丸中丹皮酚的含量是可行的。     

高效毛细管电泳法测定注射用头孢拉定的含量

目的 :建立以高效毛细管电泳法测定注射用头孢拉定含量的方法。方法 :运行缓冲液为25mmol/L四硼酸钠 (pH=9 2) ,进样量为50kPa×5s ,分离电压为20kV ,温度为25℃ ,检测波长为254nm ,内标为地塞米松磷酸钠。结果 :头孢拉定检测浓度在4～20μg/ml范围内线性关系良好 (r=0.9997) ,平均回收率为99.07 % (n=5 ,RSD=2 18 % )。结论 :本方法简单、快捷、灵敏 ,可为头孢拉定质量控制提供参考。     

高效液相色谱法同时测定复方葡萄糖酸钙口服溶液中2组分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定复方葡萄糖酸钙口服溶液中乳酸钙和葡萄糖酸钙含量的方法。方法:色谱柱为C18,流动相为0.025mol/LNaH2PO4(pH=2.50),检测波长为210nm,流速为1.0ml/min,柱温为25℃,进样量为20μl。结果:乳酸、葡萄糖酸检测浓度分别在0.719～46.040(r=0.9999)、0.315～20.160(r=0.9999)mmol/L范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为99.0%(RSD=1.65%)、100.5%(RSD=1.36%)。结论:本方法快速、简便、准确,且可不经分离直接同时测定本品中乳酸钙和葡萄糖酸钙的含量,可用于复方葡萄糖酸钙口服溶液的质量控制。     

HPLC测定消炎止痒醑中盐酸异丙嗪的含量

目的:建立HPLC测定消炎止痒醑中盐酸异丙嗪的含量。方法:色谱柱为Xierra-RP18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲液(取1.56g磷酸二氢钠,加纯水1000ml溶解,用磷酸调节PH值至3.0)(50:50);流速:1.0mL/min;检测波长:251nm;进样量:5μL。柱温:30℃。结果:盐酸异丙嗪进样量在0.2002～1.2012μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9997,平均回收率为100.95%,RSD为0.54%(n=9)。结论:本测定方法简便、快速、准确、重复性好,可作为消炎止痒醑的含量测定方法。     

高效液相色谱法测定甲硫氨酸维B_1注射液的含量

目的建立5μm高效液相色谱法同时测定甲硫氨酸维B1注射液中两组分的含量。方法用KromasilC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为1mmol/L的己烷磺酸钠溶液(含0.2%三乙胺,用50%H3PO4溶液调节pH5.0)-甲醇(85∶15),流速为1.0ml/min,检测波长为228nm。结果甲硫氨酸和维生素B1分别在80~723μg/ml与8.4~75.6μg/ml的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9998与0.9999),两者的平均回收率RSD分别为(99.3±0.5)%与(99.8±0.7)%(n=9)。结论此法快速简便,有较好的精密度和准确度。     

高效液相色谱法测定左旋多巴／苄丝肼分散片血药浓度及其药代动力学研究

目的建立左旋多巴血药浓度的测定方法并对其分散片的人体药代动力学进行研究。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher100C     

A high-performance liquid chromatography with fluorescence detection method for the simultaneous quantitation of monoamine neurotransmitters and their metabolites in subregions of rat brain

In the present study, wesimultaneously quantified the levels of monoamine neurotransmitters (MANTs) and their metabolites (levodopa, norepinephrine, epinephrine, dopamine, 5-HT, 3,4-dihydroxyphenylacetic acid, homovanillic acid and 5-hydroxyindole-3-acetic acid) in different brain subregions of rats using a newly developed simple, sensitive and selective high-performance liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-FLD) method. In this new HPLC-FLD method, analytes were directly extracted and separated without deriveatization step within 20 min. The FLD wavelength was set at 280 nm and 330 nm for excitation and emission, respectively. The analytes were separated on an Agilent Eclipse Plus C₁₈ column (4.6 mm×150 mm, 5.0 μm) equipped with an Agilent XDB-C₁₈ security guard column (4.6 mm×12.5 mm, 5.0 μm), and the column temperature was maintained at 35 ºC. The mobile phase for elution was isocratic. The mobile phase consisted of citric acid buffer (50 mmol/L citric acid, 50 mmol/L sodium acetate, 0.5 mmol/L octane sulfonic acid sodium salt, 0.5 mmol/L Na₂EDTA and 5 mmol/L triethylamine, pH 3.8) and methanol (90:10, v/v) at a flow rate of 1.0 mL/min. The detection limit (DL) was 0.9–23 nM for all the MANTs and their metabolites with a sample volume of 50 μL. The method was shown to be highly reproducible in terms of peak area (intraday, 0.08%–1.85% RSD, n = 5). The simultaneous measurement of these MANTs and their metabolites improved our understanding of the neurochemistry in the central nervous system (CNS) in relation to different addictive drugs (methamphetamine, heroin and their mixture) in drug-addicted rat models.     

HPLC法测定注射用氨苄西林钠舒巴坦钠中聚合物

目的建立反相高效液相色谱梯度洗脱法,测定注射用氨苄西林钠舒巴坦钠中的二聚物。方法采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)。流动相:A相[12%醋酸溶液:0.2 mol/L磷酸二氢钾溶液:乙腈:水(0.5:50:50:900)];B相[12%醋酸溶液:0.2 mol/L磷酸二氢钾溶液:乙腈:水(0.5:50:400:550)]。梯度洗脱(A相起始比例为85%,保持8.5 min,30 min内下降至0,保持该比例15 min),流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm。结果氨苄西林在0.675～5.4 mg/mL范围内与氨苄西林二聚物峰面积呈良好的线性关系(r=1.0000)。结论该方法能较好地分离舒巴坦、氨苄西林、氨苄西林二聚物及其他杂质,方法简便,结果可靠,可用于注射用氨苄西林钠舒巴坦钠中氨苄西林二聚物的检测。