膀胱移行细胞癌组织中Caspase-3和Bcl—2蛋白的表达及其意义

目的：探讨Caspase3和Bcl2蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及其与病理分级和临床分期的关系。方法：采用免疫组化SABC法并结合图像分析方法检测32例膀胱移行细胞癌和10例膀胱正常组织中Caspase3和Bcl-2蛋白的表达。结果：Caspase-3和Bcl-2两种蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达与正常膀胱组织之间都有显著性差异（P〈0．05）。Caspase-3与病理分级和临床分期均无显著性差异（P〉0．05）,Bcl-2与病理分级和临床分期均无显著性差异（P〉0．05）,Caspase-3和Bcl-2两者之间呈负相关（FS=-0．358,P〈0．05）。结论：在膀胱癌组织中Caspase3的表达降低和Bcl-2的表达升高可能与膀胱癌的发生发展有关。     

E2F-1、E2F-3在膀胱癌组织的表达及临床意义

目的：探讨膀胱癌转录因子E2F-1、E2F-3的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学方法检测39例膀胱癌与12例正常膀胱粘膜中E2F-1、E2F-3的表达，以统计学方法分析其表达与肿瘤分级、分期、复发之间的关系。结果：E2F-1在膀胱癌组织与正常膀胱粘膜中的阳性表达率分别为82．1％（32／39）和41．7％（5／12），差异有统计学意义（P〈0．05）。癌组织E2F-1的表达在不同的临床病理特征之间差异无显著性；E2F-3在膀胱癌组织与正常膀胱粘膜中的阳性表达率分别为53．8％（21／39）和91．7％（11／12），差异有显著性（P〈0．05）。癌组织中E2F-3的表达在不同的分级、分期之间差异有显著性（P〈0．05）。结论：E2F的异常表达参与膀胱癌的发病过程，并可在一定程度上反映肿瘤的恶性程度。     

CXCL5在膀胱癌组织中的表达及其临床意义

目的研究CXCL5在膀胱正常组织和膀胱癌组织中的表达及与临床病理及预后的关系。方法应用免疫组化方法检测136例膀胱癌和30例膀胱正常组织石蜡标本中CXCL5表达情况,并进行相关临床病理及5年生存率分析。结果在正常膀胱组织和膀胱癌组织中CXCL5表达有显著性差异(P0.05);CXCL5的阳性表达与膀胱癌病理分级、临床分期、淋巴结转移之间有显著性差异(P0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示CXCL5的表达与预后呈负相关。用Log-Rank统计方法判断其中有显著性差异(P0.05),且CXCL5强阳性组、弱阳性表达组和阴性组三者之间的5年生存率的差异有统计学意义(P0.05)。结论CXCL5在膀胱癌中表达增高,与膀胱癌的病理分级、临床分期及淋巴结转移呈正相关,其高表达是膀胱癌的独立预后危险因子之一。     

小窝蛋白-1、基质金属蛋白酶-2在膀胱癌的表达及其关系

目的探讨小窝蛋白-1（CAV-1）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在膀胱癌表达及其两者关系。方法应用免疫组化SP法检测77例膀胱癌和15例正常膀胱组织CAV-1、MMP-2的表达。培果CAV-1、MMP-2在膀胱移行细胞癌（TCCB）、膀胱腺癌表达明显高于正常膀胱黏膜，有显著性差异（P〈0．01），CAV-1在G1、G2、G3膀胱移行细胞癌阳性率分别15％、40％、68％，临床分期浸润型表达明显高于表浅型，有显著性差异（P〈0．01）；MMP-2在G1、G2、G3阳性率分别20％、40％、72％，临床分期浸润型表达明显高于表浅型，有显著性差异（P〈0．01）。CAV-1和MMP-2在膀胱癌表达有明显正相关（P〈0．01），在正常膀胱黏膜无相关性（P〉0．05）。培论CAV-1，MMP-2与膀胱癌病理分级、临床分期有关，提示CAV-1可能促进MMP-2分泌。     

生长分化因子-9在人膀胱癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨生长分化因子-9（growth differentiation factor-9,GDF-9）在人膀胱癌组织中的表达及其与膀胱癌病理分级和临床分期的关系。方法：运用免疫组化技术检测GDF-9在50例不同分期分级的膀胱癌组织和15例正常膀胱组织之间的蛋白表达情况。结果：①正常人膀胱组织中GDF-9呈高表达,且GDF-9蛋白主要定位于膀胱移行上皮细胞的胞浆中。而膀胱癌组织中GDF-9呈低表达或不表达。②GDF-9阳性表达率在膀胱癌病理分级间分别：I级47．6％（10／21）,II级26．7％（4／15）,III级7．1％（1／14）,差异具有统计学意义（P〈0．05）。GDF9阳性表达率在膀胱癌临床分期间分别：Ta～T1期40．6％（13／32）,T2～T3期11．1％（2／18）,差异具有统计学意义（P％0．05）。结论：GDF-9在膀胱癌组织中低表达或不表达,且与膀胱癌病理分级和临床分期呈负相关。GDF-9可能是一个潜在的人膀胱肿瘤抑癌基因。     

维甲酸受体β在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨维甲酸受体β（retinoic acid receptor-beta,RAR-β）在膀胱移行细胞癌中表达的意义。方法应用免疫组织化学方法检测80例膀胱移行细胞癌组织标本中RAR-β的表达。病理分级：Ⅰ级26例,Ⅱ级22例,Ⅲ级32例;临床分期：T120例,T220例,T322例,T418例;其中复发性膀胱癌46例。以10例正常膀胱组织作为对照。结果10例正常膀胱粘膜组织中RAR-β均为强阳性表达。80例膀胱移行细胞癌中RAR-β阳性表达28例（35.0%）。RAR-β表达在病理分级Ⅰ级以及临床分期T1、T2期膀胱癌中表达较高;在复发性与非复发性膀胱移行细胞中的表达分别为17.4%和58.9%,差异显著（P〈0.05）。结论RAR-β在膀胱移行细胞癌组织中存在表达缺失,其表达缺失程度与肿瘤病理分级、临床分期及复发相关,有作为膀胱移行细胞癌预后指标的可能。     

NY-ESO-1基因在膀胱癌中的表达及临床意义的研究

目的 探讨NY-ESO-1的表达与膀胱癌分期分级的关系以及临床意义.方法 回顾性研究2001～2002年膀胱癌组织32例,其中男性24例,女性8例.正常膀胱粘膜对照取自耻骨上经膀胱前列腺切除术的良性前列腺增生的患者.阳性对照为正常睾丸组织.常规行RT-PCR方法检测膀胱癌组织及对照组等NY-ESO-1基因的表达,分析其表达与膀胱癌分期分级的关系以及临床意义.结果 NY-ESO-1 mRNA在32例膀胱癌组织中12例表达(37.5%),在正常膀胱粘膜上没有表达.肿瘤组织中PCR反应的产物与正常睾丸的表达产物一致.NY-ESO-1 mRNA的表达和膀胱癌的病理分级相关,有统计学差异(P＜0.05).NY-ESO-1 mRNA的表达率随着肿瘤病理分级的增高而升高:G1期是0/3(0%);G2期是4/16(25%);G3期是8/13(61.54%).浸润性膀胱癌中NY-ESO-1 mRNA的表达与表浅性肿瘤的表达无显著性差异.结论 NY-ESO-1 mRNA在正常膀胱组织上没有表达,仅在正常睾丸组织和病理膀胱癌组织上有表达.NY-ESO-1 mRNA的表达率随着膀胱癌病理分级的增高而升高.     

p73基因在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义

目的研究p73基因在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测60例膀胱尿路上皮癌中p73基因的表达,统计分析其与肿瘤临床病理特征的关系。结果膀胱癌组织中p73阳性表达率为38.3%（23/60）,明显低于癌旁组织（78.3%,47/60,P〈0.01）及正常膀胱组织（86.7%,13/15,P〈0.01）。p73蛋白的表达与膀胱尿路上皮癌组织分化程度有关（P〈0.05）,且与临床分期、浸润及转移也密切相关（P〈0.05）。结论p73基因在膀胱尿路上皮癌的发生和发展中起抑制作用,p73蛋白的表达可能是预判膀胱癌预后的重要指标之一。     

骨桥蛋白和MMP-10在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义

目的检测膀胱尿路上皮癌中骨桥蛋白（OPN）和金属基质蛋白酶10（MMP-10）的表达,探索二者与膀胱癌的病理分级和临床分期及临床预后的关系,比较二者之间的相关性。方法应用免疫组化方法检测60例膀胱移行细胞癌和20例正常膀胱壁标本中的OPN和MMP-10的表达,并分析二者表达与肿瘤分期、分级、复发、淋巴结转移之间的关系。结果20例正常膀胱组织中,17例（85.0%）OPN表达为阴性,3例（15.0%）为弱阳性,而MMP-10未见表达;OPN在膀胱癌组织中的阳性率为73.3％（44/60）,MMP-10在膀胱癌组织中的阳性表达率为63.3％（38/60）,OPN和MMP-10在膀胱尿路上皮癌组织和正常膀胱组织表达中有明显差异（P＜0.05）。膀胱尿路上皮癌组织中,OPN及MMP-10的表达与组织病理学分级、临床分期、复发及转移呈正相关,膀胱尿路上皮癌组织中,二者之间的表达亦呈正相关关系。结论OPN及MMP-10表达强度同肿瘤分级、分期、复发、转移有关,可能作为临床评估膀胱尿路上皮癌进展及肿瘤预后的指标及在膀胱癌的进展中起协同作用。     

醛酮还原酶1C2和组织蛋白酶D在膀胱移行细胞癌中的超表达及意义

目的：探讨醛酮还原酶1C2（AKR1C2）和组织蛋白酶D（cathepsinD）在膀胱移行细胞癌中的表达及其与膀胱癌病理分级、临床分期的关系。方法：应用免疫组织化学的方法检测AKR1C2和cathepsinD在40例膀胱癌组织和5例正常膀胱组织中的表达,并对比两者表达相关性。结果：40例膀胱癌中AKR1C2阳性表达率为80％,cathepsinD阳性表达率为90%,cathepsinD蛋白表达与膀胱癌病理分级、临床分期呈正相关（r=0．308）．AKR1C2蛋白表达在不同膀胱癌病理分级中差异有统计学意义（P〈0．05）。AKR1C2蛋白在不同临床分期之间表达差异无统计学意义。结论：结论：AKR1C2和cathepsinD表达特征可以作为膀胱移行细胞癌的诊断和判断预后的参考指标。     

Fhit基因和Survivin基因在膀胱移行细胞癌中的表达和意义

目的探讨Fhit基因和Survivin基因在膀胱移行细胞癌（TCC）中的表达和意义。方法用免疫组织化学sP法检测49例膀胱TCC组织和10例正常膀胱组织中Fhit蛋白和Survivin蛋白的表达。结果10例正常膀胱组织中Fhit蛋白表达均为阳性，Survivin蛋白表达均为阴性；Fhit蛋白在膀胱TCC中阳性表达率为46．9％（23／49），随恶性程度和临床分期增高而阳性表达减少，差异有统计学意义（P〈0．05）；Survivin蛋白在膀胱TCC中阳性表达率为57．1％（28／49），随恶性程度和临床分期增高而阳性表达增高，差异有统计学意义（P〈0．05）；膀胱TCC中Fhit蛋白和Survivin蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论Fhit基因和Survivin基因可能是膀胱TCC发生的晚期分子事件，Fhit蛋白和Survivin蛋白异常表达可作为膀胱TCC的肿瘤标志物。Fhit蛋白可能通过肿瘤凋亡抑制途径发挥作用。     

Netrin-1: A new promising diagnostic marker for muscle invasion in bladder cancer

BackgroundBladder cancer is the most common urological malignancy with a high tendency for progression and recurrence. So far, no reliable diagnostic marker is present with 100% sensitivity and specificity. Netrins are related to laminin proteins, and were first discovered to be involved in neural development. After that, they were found in other organs of the body and several studies stated that they have implicated in cancer progression.PurposeThis study aimed at investigating the netrin-1 gene expression in bladder cancer tissues, in addition to the possibility of using urinary netrin-1 as a marker for muscle invasion diagnosis in bladder cancer cases.MethodsNetrin-1 gene expression in bladder cancer tissue was detected in this study by real-time polymerase chain reaction. Moreover, netrin-1 protein was measured in tissue and urinary deposit samples by western blotting.ResultsThe results of this study revealed that netrin-1 is expressed in bladder cancer and control tissues, with a strong positive correlation between netrin-1 in tissues and urinary netrin-1 (rs = 0.762, P < 0.0005). Receiver operating characteristic curve analysis confirmed the muscle-invasion diagnostic value of urinary netrin-1 with bladder cancer cases, providing an area under the curve equals to 0.758 (95% confidence interval, 0.630–0.886, P < 0.0005), with 96% sensitivity and 67% specificity. Bladder cancer patients had been included to examine risk factors for local recurrence, distant metastasis, and death. Cox regression models showed that netrin-1 gene expression, tumor size, and age are positive predictor markers for local tumor recurrence. Age is a predictor for distant metastasis, and tumor stage is a predictor for death.ConclusionUrinary netrin-1 can be used as a promising biomarker for diagnosis of muscle invasion, which may help in the follow up of non-invasive tumors. In addition, tissue netrin-1 expression may serve as a predictor of local tumor recurrence.     

肝细胞生长因子及其受体在膀胱癌中的表达及意义

目的探讨肝细胞生长因子及其受体c-Met在人膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化方法检测8例正常膀胱黏膜标本及45例膀胱移行细胞癌标本中HGF及c-Met的表达;并以分级、分期、复发、转移等临床特征分组,比较各组的阳性表达率。结果8例正常膀胱黏膜中HGF均为阴性表达,c-Met仅1例为弱阳性表达。而45例膀胱移行细胞癌标本中,两者阳性表达率分别为64.4%和62.2%,共表达率42.2%。肿瘤组织与正常膀胱黏膜比较,HGF及c-Met的表达差异均有统计学意义。肿瘤初发和复发组HGF阳性表达率差异有统计学意义(P<0.01);Tis~T1组及T2~T4组c-Met的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.01)。结论HGF及其受体c-Met在膀胱移行细胞癌中呈过度表达,该信号传导通路主要以自分泌方式激活,在膀胱移行细胞癌的发生、发展及术后复发中可能起重要作用。     

微小RNA let-7基因表达在膀胱癌生物学行为中的作用

目的 探讨膀胱癌组织中微小RNA(miRNA)表达在膀胱癌发生发展中的作用. 方法 Trizol法抽提9例膀胱癌患者癌组织及癌旁正常膀胱组织标本总RNA,分离与富集miRNA,随机选取2组miRNA标本与miRNA表达谱芯片杂交,采用LuxScan 3.0和SAM 2.1软件对芯片结果 进行图像数据分析.在差异性表达的miRNA中筛选出感兴趣的let-7基因,采用印迹杂交技术对9组miRNA标本中let-7基因进行验证. 结果 膀胱癌组织和正常膀胱组织标本中差异性表达有显著性意义的miRNA 71个,其中表达上调33个,表达下调38个;差异性表达有极显著性意义的miRNA(上调或下调≥4倍)26个,其中显著上调12个,显著下调14个.let-7基因验证结果 与芯片表达结果 一致,癌组织let-7基因表达吸光度值为479.6±228.2,正常膀胱组织为694.6±152.9,组间差异有统计学意义(P<0.05). 结论 膀胱癌组织和正常膀胱组织中存在差异表达的miRNA,let-7基因在膀胱癌的发生中可能起着抑癌基因的作用.     

膀胱癌和肾癌组织中RASSF1A基因的甲基化改变

目的研究RASSF1A基因启动子的甲基化状态及在膀胱癌和肾癌发生中的作用。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测45例手术切除的膀胱癌组织和相应癌旁正常组织标本、9例电切膀胱癌组织、3例非肿瘤患者正常膀胱组织、12例肾癌组织和相应癌旁正常组织标本中RASSF1A基因的甲基化情况。结果膀胱癌组织中RASSF1A基因异常甲基化55.6%(30/54),其中手术切除组57.8%(26/45),电切癌组织异常甲基化4例,癌旁正常组织基因异常甲基化1例;肾癌组织中基因异常甲基化66.7%(8/12),相应癌旁正常组织中未发现基因甲基化。3例正常膀胱组织标本中未发现基因异常甲基化。膀胱癌组织中RASSF1A基因甲基化率有随组织分期升高的趋势,但与临床病理参数间无明显相关性。结论膀胱癌和肾癌组织中RASSF1A基因启动子高度甲基化,表明该基因甲基化可能与2种肿瘤的发生相关。     

miR-34a在膀胱癌中下调MTA2表达的研究

目的 研究微小核糖核酸34a（microRNA-34a,miR-34a）在膀胱癌中的表达及临床意义,确定转移相关基因2（metastasis-associated gene2,MTA2）是否为miR-34a调控的下游靶基因,探讨膀胱癌中miR-34a与MTA2的相互作用机制。方法 选取48对膀胱癌根治术后癌组织及癌旁组织,标本来源于2011年5月至2012年5月我科收治的膀胱癌患者。Real-time PCR检测miR-34a和MTA2在组织中RNA的表达情况;荧光素酶实验鉴定MTA2是否为miR-34a下游靶基因;膀胱癌细胞株T24及UMUC3中转入miR-34a后,琼脂糖凝胶电泳、免疫印迹实验检测MTA2的RNA及蛋白表达。结果 Real-time PCR检测表明,膀胱癌组织中miR-34a呈低表达,并且与肿瘤分期有关（P〈0.01）;MTA2在癌组织中表达明显上调。MiRanda、Mirwalk、Targetscan软件预测miR-34a与MTA2的mRNA有结合位点,荧光素酶实验结果表明MTA2可能是miR-34a的潜在靶基因。转染miR-34a后,分别检测MTA2的蛋白和mRNA表达情况,发现MTA2蛋白受到抑制,mRNA表达不受影响。结论 miR-34a在膀胱癌中可能通过作用于其潜在靶基因MTA2而发挥抑癌基因作用。     

Livin和HIF-1α在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在膀胱尿路上皮癌组织中的表达及其与膀胱尿路上皮癌复发的关系。方法:应用免疫组化SABC法检测45例膀胱尿路上皮癌及15例正常膀胱黏膜组织石蜡切片中Livin和HIF-1α的表达情况,并结合临床资料进行分析。结果:45例膀胱尿路上皮癌组织中分别有23(51.1%)例Livin阳性和39(86.7%)例HIF-1α阳性。在正常组织中有1(6.7%)例Livin阳性,3(20.0%)例HIF-1α阳性。二者在膀胱尿路上皮癌组织中的表达均明显高于相应正常膀胱组织(P<0.01)。Livin蛋白和肿瘤复发成正相关,病理分级之间存在差异;但Livin和HIF-1α的表达均与膀胱尿路上皮癌的临床分期和患者年龄无关(P>0.05);此外,HIF-1α在病理分级上也无显著差异;Livin与HIF-1α之间也不存在相关性。结论:检测Livin和HIF-1α蛋白有助于评估肿瘤的生物学行为,并有利于膀胱尿路上皮癌患者的临床治疗决策。     

抑癌基因PTEN与Beclin1在膀胱癌中的表达及临床意义

【摘要】〓目的〓探讨抑癌基因PTEN与Beclin1在膀胱癌组织中的表达及临床意义。方法〓收集65例膀胱癌患者癌组织及癌旁组织,15例正常膀胱组织,采用免疫组织化学方法检测组织PTEN与Beclin1表达,Spearman相关分析癌组织中两者的相关性。结果〓PTEN在癌组织,癌旁组织及正常组织中的高表达率分别为53.8%,81.5%和93.3%。Beclin1在癌组织,癌旁组织及正常组织中的高表达率分别为58.5%,84.6%和86.7%。PTEN与Beclin1在癌组织的高表达率显著高于癌旁组织及正常组织(P均>0.05)。癌组织中Beclin1和PTEN表达与患者组织学分级及临床分期相关,而与患者性别及年龄无关。癌组织Beclin1和PTEN高表达率随着患者组织学分级和临床分期增高均呈趋势下降(P均<0.05)。癌组织中Beclin1表达与PTEN表达呈正相关(P<0.001)。结论〓Beclin1和PTEN可能与膀胱癌的发生发展有关。     

膀胱癌组织及血清中内皮抑素表达的意义

目的　探讨原发性膀胱癌患者血清内皮抑素水平和组织表达与肿瘤分级、分期的关系。　方法　采用免疫组织化学方法检测 4 5例膀胱癌组织及 12例正常膀胱组织中内皮抑素表达情况。ELISA法检测 5 8例膀胱癌患者术前血清内皮抑素水平 ,4 3例健康者血清作对照。　结果　浅表性膀胱癌组内皮抑素表达率 6 1.5 % ,浸润性癌组为 90 .6 % ,正常膀胱组织为 33.3%。膀胱癌患者血清内皮抑素 4 6 .3ng/ml,显著高于对照组的 2 9.8ng/ml(P <0 .0 1)。局部浸润性膀胱癌患者血清内皮抑素 4 8.6ng/ml,显著高于浅表性癌组的 31.1ng/ml(P <0 .0 1) ;远处转移组血清内皮抑素 6 9.8ng/ml,显著高于局部浸润组 (P <0 .0 1) ;浅表性癌组与对照组血清内皮抑素水平差异无显著性意义。G3级肿瘤患者血清内皮抑素水平显著高于G1和G2 级 (P <0 .0 1)。　结论　膀胱癌患者血清内皮抑素水平和组织表达显著增高 ,并与肿瘤分级、分期相关 ,检测内皮抑素表达及血清水平有助于判断膀胱癌的恶性程度。