艾塞那肽通过下调p22phox、NOX4和TGF-β1减轻1型糖尿病大鼠主动脉的氧化应激损伤

目的观察胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂艾塞那肽对1型糖尿病大鼠主动脉NADPH氧化酶亚单位表达及其氧化应激损伤作用的影响。方法 30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=7)和造模组(n=23)。采用链脲佐菌素(STZ)制备1型糖尿病大鼠模型。将造模成功的19只1型糖尿病大鼠随机分为糖尿病对照组(n=10)和艾塞那肽治疗组(n=9)。艾塞那肽治疗组给予艾塞那肽5μg/kg皮下注射,2次/天;正常对照组和糖尿病对照组给予等量的生理盐水皮下注射。药物干预8周后,处死动物。用实时荧光定量聚合酶链反应法(RTPCR)检测主动脉p22phox和NOX4 mRNA的表达,用免疫组织化学法检测主动脉的转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。标本切片用HE染色后,行组织形态学检查。结果与正常对照组比较,糖尿病对照组大鼠主动脉p22phox和NOX4 mRNA表达显著升高,TGF-β1蛋白表达显著升高(P<0.05)。与糖尿病对照组比较,艾塞那肽治疗组大鼠主动脉p22phox和NOX4 mRNA表达降低(P<0.05),主动脉TGF-β1蛋白表达降低(P<0.05)。与正常对照组比较,糖尿病对照组大鼠主动脉内膜和中膜明显增厚,内膜不光滑,内皮细胞突起,形态不规则,平滑肌细胞排列紊乱;与糖尿病对照组比较,艾塞那肽治疗组大鼠主动脉内膜仅局限性增厚不光滑,内皮细胞与平滑肌细胞排列较整齐,中膜轻度增厚。结论艾塞那肽通过下调1型糖尿病大鼠主动脉p22phox、NOX4和TGF-β1的表达,减轻氧化应激对主动脉的损伤,对糖尿病大鼠血管产生保护作用。     

胰高血糖素样肽1受体激动剂对糖尿病大鼠心肌组织转化生长因子-β1／Smad信号通路的影响

目的观察胰高血糖素样肽1（GLP-1）受体激动剂对糖尿病大鼠心肌组织转化生长因子-β1／Smad（TGF-β1／Smad）信号通路及间质纤维化的影响并探讨其机制。方法36只170-200g雄性Wistar大鼠,采用随机数字表法分为正常对照组（N组,10只）和造模组（26只）,后者尾静脉注射无菌柠檬酸缓冲液稀释链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病模型,N组注射等量柠檬酸缓冲液。将成模的22只大鼠用随机数字表法分为糖尿病组（DM组,11只）和艾塞那肽干预组（EX组,11只）。EX组以1．0nmol·kg-1·d-1剂量皮下注射艾塞那肽,N组和DM组以等量生理盐水皮下注射。实验结束时,DM组和EX组大鼠各存活10只。HE和Masson染色观察心肌病理变化,Westernblotting或实时定量聚合酶链反应（Real-TimePCR）检测TGF-β1／Smad信号通路的相关因子以及过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）的表达。采用单因素方差分析和直线相关分析进行统计学分析。结果与正常对照组相比糖尿病组大鼠心肌细胞间可见散在分布、排列紊乱的胶原纤维,心脏体重比增加,经艾塞那肽干预后心肌间质胶原纤维沉积较糖尿病组减轻,心脏体重比下降（F=44．456,P〈0．05）;Smad2、Smad3、转化生长因子。β1（TGF-β1）、胶原蛋白Ⅰ（ColⅠ）的表达在糖尿病组较正常对照组增加,艾塞那肽干预后表达下降（F=20．005、57．902、14．206、144．807,均P〈0．05）;Smad7以及PPARα的表达在糖尿病组较对照组下降,艾塞那肽干预后表达增加（F=22．318、39．142,均P〈0．05）。结论艾塞那肽抑制心肌TGF-β1／Smad信号通路、改善心肌纤维化可能与PPARα有关。     

N-乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠肾脏NADPH氧化酶表达的影响

目的探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对糖尿病大鼠肾脏尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶表达的影响。方法大鼠随机分为正常对照（NC）组、正常对照NAC治疗组（CT组）、糖尿病组（DM组）和糖尿病NAC治疗组（DT组）。8周后测定血糖、胰岛素、肌酐、游离15-F2t-异前列烷和总抗氧化物水平、24小时尿蛋白排泄量（UPro/24h）、肾系膜基质增宽指数、肾皮质p22phox、p67phox、铜-锌-超氧化物歧化酶（Cu-Zn-SOD）和结缔组织生长因子（CTGF）蛋白表达。结果糖尿病大鼠UPro/24h、血浆游离15-F2t-异前列烷水平、系膜基质增宽指数、肾脏p22phox、p67phox和CTGF蛋白表达显著增高，血浆总抗氧化物浓度和肾脏Cu-Zn-SOD蛋白表达显著降低。NAC治疗能显著逆转糖尿病大鼠上述各项指标的变化。结论NAC显著降低糖尿病大鼠肾脏氧化应激水平，减轻氧化应激对肾组织的损伤，产生肾脏保护作用。     

胰高血糖素样肽-1及其类似物对HepG2细胞G6Pase合成的影响

目的 观察胰高血糖素样肽-1 （GLP-1）及其类似物对人肝癌细胞系HepG2细胞糖异生关键酶葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）合成的影响.方法 将对数生长期HepG2细胞随机分6组,胰岛素（胰岛素）组加入10 nmol/L胰岛素,GLP-1组加入10 nmol/L GLP-1,艾塞那肽组加入10 nmol/L艾塞那肽,GLP-1＋胰岛素组分别加入10 nmol/LGLP-1、10 nmol/L胰岛素,艾塞那肽＋胰岛素组分别加入10 nmol/L艾塞那肽＋10 nmol/L胰岛素,对照组加入同等剂量细胞培养液,每组10个样本.采用Western blot法检测各组G6Pase水平.结果 胰岛素组、GLP-1组、艾塞那肽组、GLP-1＋胰岛素组、艾塞那肽＋胰岛素组、对照组G6Pase表达量分别为0.070±0.015、0.068±0.013、0.067±0.008、0.031 ±0.003、0.030±0.002、0.191 ±0.056,与对照组比较,其余5组G6Pase表达量减少（P均＜0.05）;与胰岛素组、GLP-1组、艾塞那肽组比较,GLP-1＋胰岛素组、艾塞那肽＋胰岛素组G6Pase表达量减少（P均＜0.05）.结论 GLP-1及其类似物艾塞那肽能抑制HepG2细胞G6Pas的合成.     

利拉鲁肽激活糖尿病大鼠肾脏内皮源性一氧化氮合酶活性降低尿白蛋白排泄的研究

目的 探讨利拉鲁肽对糖尿病大鼠24 hUAlb排泄的影响及机制. 方法 将30只大鼠分为正常对照（NC）组、糖尿病（DM）组和利拉鲁肽（DM＋L）组.检测各组给药前后血肌酐（Scr）、BUN和24 hUAlb.HE、PAS染色观察肾脏形态学改变;Western blot检测肾脏GLP-1受体（GLP-1R）、内皮源性一氧化氮合酶（eNOS）、p-eNOS表达;ELISA检测eNOS活性. 结果 与NC组相比,DM组Scr、BUN、24 hUAlb升高,肾脏eNOS表达比较差异无统计学意义,GLP-1R、p-eNOS表达及eNOS活性降低（P＜0.01）.与DM组相比,DM＋L组Scr、BUN、24 hUAlb降低,肾脏GLP-1R、p-eNOS表达及eNOS活性升高（P＜0.05或P＜0.01）. 结论 利拉鲁肽可上调糖尿病大鼠肾脏GLP-1R表达,提高肾小球血管内皮细胞eNOS活性,减少糖尿病大鼠UAlb排泄.     

番茄红素对高脂球囊损伤兔脂质过氧化和NADPH氧化酶的影响

目的:研究番茄红素对高脂球囊损伤术后家兔脂质过氧化损伤和颈动脉斑块处NADPH氧化酶的影响.方法:将32只健康成年雄性新西兰大耳白兔,随机分为模型组(Model, n=8)、假手术组(Sham, n=8)、番茄红素组(LY,10 mg·kg-1·d-1,n=8)和阿托伐他汀组(AT,5 mg·kg-1·d-1,n=8).除Sham组给予普通饲料外,其余各组均给予高脂饲料并行颈总动脉内膜剥脱术建立动脉粥样硬化模型.8周后,检测血清血脂水平,脂质过氧化水平,损伤处血管内膜中膜厚度比值(IT/MT),免疫组化染色和RT-PCR法检测颈动脉斑块处Nox4和p22phox的表达.结果:与Model组比较,Sham组、LY组和AT组血清血脂、脂质过氧化水平、颈动脉IT/MT比值、颈动脉斑块Nox4和p22phox蛋白和mRNA表达均显著减低(P＜0.05);与AT组相比,LY组血脂水平、颈动脉IT/MT比值差异无统计学意义,而脂质过氧化水平和颈动脉Nox4和p22phox蛋白和mRNA表达减低差异有统计学意义(P＜0.05).结论:番茄红素可减轻由高脂球囊损伤术引起的家兔脂质过氧化损伤及动脉粥样硬化,其机制可能与下调NADPH氧化酶表达有关.     

利拉鲁肽对糖尿病大鼠肾组织局部肾素-血管紧张素系统活性及转化生长因子β1表达的影响

目的：探讨利拉鲁肽是否能够抑制糖尿病大鼠肾组织局部肾素-血管紧张素系统（RAS）,进而下调转化生长因子（TGF）-β1表达。方法给予4周龄雄性Wistar大鼠高糖高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素鼠尾静脉注射建立糖尿病大鼠模型20只,采用随机数字表法分为糖尿病组和利拉鲁肽组,每组10只,同时设对照组10只。利拉鲁肽组予以利拉鲁肽（400μg· kg-1· d-1）皮下注射,对照组和糖尿病组大鼠给予等量生理盐水皮下注射。12周后,应用实时定量聚合酶链反应（PCR）、Western blotting法检测比较各组大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）和TGF-β1表达的变化,酶联免疫吸附实验检测各组肾组织血管紧张素（ Ang）Ⅱ的表达,Masson染色观察各组大鼠肾组织胶原沉积情况。采用单因素方差分析比较组间差异,两两比较采用LSD检验。结果 Masson染色显示,糖尿病组大鼠肾组织胶原纤维沉积对照组明显增多,利拉鲁肽组大鼠肾组织胶原纤维沉积较糖尿病组少。糖尿病组大鼠肾组织AngⅡ表达显著高于对照组（t＝3.444,P＜0.05）,利拉鲁肽组大鼠肾组织AngⅡ表达则较糖尿病组显著降低（ t＝2.614,P＜0.05）。糖尿病组大鼠肾组织AT1R、TGF-β1 mRNA和蛋白表达显著高于对照组（t＝4.084、3.714、9.381、6.408,均P＜0.05）。利拉鲁肽组大鼠肾组织AT1R、TGF-β1mRNA和蛋白表达显著低于糖尿病组（ t＝3.487、2.907、5.033、2.295,均P＜0.05）。结论利拉鲁肽可抑制糖尿病大鼠肾组织TGF-β1的表达发挥肾保护作用,可能与其抑制肾组织局部RAS活性有关。     

利拉鲁肽诱导骨髓间充质干细胞定向分化及移植治疗1型糖尿病大鼠的研究

目的 体外研究利拉鲁肽诱导骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）分化为胰岛素分泌细胞（IPCs）,并在体内进一步观察IPCs移植对1型糖尿病（T1DM）大鼠的治疗作用.方法 （1）体外采用密度梯度离心联合差壁培养法分离、纯化大鼠BM-MSCs,进一步分为未诱导组、高糖＋尼克酰胺诱导组、胰高血糖素样肽1（GLP-1）诱导组和利拉鲁肽诱导组;（2）倒置显微镜下观察各组细胞形态变化,双硫腙染色鉴定诱导后细胞,荧光定量PCR检测巢蛋白（Nestin）、胰十二指肠同源盒1（PDX-1）、葡萄糖转运蛋白2（Glut-2）、葡萄糖激酶（GK）、胰岛素和胰高血糖素等基因,细胞免疫荧光检测胰岛素和胰高血糖素等蛋白;（3）将180 ～ 220 g的30只雄性SD大鼠以60 mg/kg剂量腹腔注射链脲佐菌素制备T1DM模型,造模成功后按随机数字表法分为对照组（T1DM组,n=8）、未诱导的BM-MSCs移植组（BM-MSCs组,n=9）和经利拉鲁肽诱导的BM-MSCs移植组（LIRA＋ BM-MSCs组,n=9）,给予相应干预8周,待血糖基本稳定后,选取4只正常、同龄、雄性SD大鼠作为对照,行腹腔注射的葡萄糖耐量试验（IPGTT）进一步观察移植后细胞对高糖刺激的反应性.结果 （1）利拉鲁肽诱导后BM-MSCs形态逐渐变圆,呈明显的聚集性生长状态,双硫腙染色为阳性;与高糖＋尼克酰胺诱导组比较,利拉鲁肽诱导组细胞Nestin mRNA表达下调（0.003 8±0.000 4比0.007 5±0.003 0,P＜0.05）,胰岛素（0.000 20±0.000 03比0.000 08±0.000 02）和胰高血糖素（0.001 1±0.0004比0.000 7±0.000 1）等mRNA表达上调（F=7.26、10.06、4.92,均P＜0.05）,PDX-1、Glut-2、GK mRNA表达亦上调;利拉鲁肽诱导组和GLP-1诱导组细胞胰岛素或胰高血糖素蛋白表达均呈阳性.（2）体内实验示,与T1DM组比较,LIRA＋ BM-MSCs组和BM-MSCs组大鼠8周末血糖均明显降低[分别为（28.0±1.2）、（8.9±1.1）、（14.5±0.9）mmol/L,F=719.61,均P＜0.05];IPGTT提示移植IPCs后的大鼠血糖在30 min时升至峰值,150 min时降至空腹水平,血糖变化曲线与正常组类似.结论 体外利拉鲁肽可以在一定程度上促进BM-MSCs分化成为IPCs,且移植后的IPCs能够在体内进一步发挥降糖作用.     

迷走神经复合体注射GLP-1对糖尿病大鼠下丘脑GLP-1受体表达及胃排空的影响

目的探讨中枢迷走神经复合体注射GLP-1(胰高血糖素样肽-1)对糖尿病大鼠胃排空的影响和中枢作用机制。方法36只雄性清洁级Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组和糖尿病GLP-1(GLP-1)干预组。DM组和GLP-1组腹腔注射链脲佐菌素(STZ),三组大鼠中枢迷走神经复合体(DVC区)埋置套管,注射STZ 4周后,GLP-1组经套管注射的GLP-1,NC组和DM组大鼠DVC区注射等体积生理盐水。用酚红灌胃法检测胃排空;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测大鼠下丘脑GLP-1RmRNA的表达。结果注射STZ 4周后,DM组大鼠胃排空率较NC组明显升高(P<0.05),下丘脑GLP-1受体mRNA表达较对照组无明显变化。GLP-1组大鼠胃排空率较DM组显著降低(P<0.05),但高于正常对照组(P<0.05),下丘脑GLP-1RmRNA的表达明显高于NC组及DM组(P<0.05),胃排空率与下丘脑GLP-1受体mRNA表达量成负相关。结论迷走神经复合体注射GLP-1可抑制DM大鼠早期胃排空加速,中枢作用机制可能与促进下丘脑GLP-1受体的表达有关。     

血管紧张素转化酶抑制剂和抗氧化剂对湿热应激性大鼠心肌AngⅡ和p22phox表达的影响

目的:观察血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)卡托普利(Captopril,CTP)和抗氧化剂（维生素C,VitC）对湿热应激(HHS)大鼠心肌组织中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ)、活性氧簇（ROS）和p22phox表达的影响。方法: 将32只成年雄性SD大鼠随机分为:对照组、HHS组、CTP组(HHS+CTP)及VitC组(HHS+VitC),每组8只。喂养4周后,颈动脉插管测定大鼠血压,计算大鼠左心室质量指数。用放射免疫法测定心肌组织中AngⅡ的浓度。用比色法测定心肌组织中ROS的水平。应用RT-PCR检测p22phox mRNA的表达。用免疫组化染色法检测大鼠心肌中p22phox的分布特征。结果: 平均动脉压、AngⅡ和ROS和p22phox的水平,HHS组与对照组比较,VitC组和CTP组与HHS组比较,均有非常显著性差异（P<0.01）;两个药物组之间比较无统计学意义。结论: HHS可增加大鼠心肌组织中AngⅡ表达,同时上调p22phox mRNA和其蛋白的表达,介导心肌细胞内ROS生成增加。用抗氧化剂和ACEI阻滞后,AngⅡ表达减少,p22phox mRNA和其蛋白的表达降低,心肌细胞内ROS生成减少,其机制可能与HHS导致AngⅡ诱导ROS产生有关。以上提示,HHS可引起心脏损害,抗氧化剂和ACEI对HHS性心脏损害具有拮抗作用。     

胰高血糖素样肽-1对糖尿病大鼠胃排空的非受体通路的影响

目的探讨室旁核(Paraventricular nucleus,PVN)内胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like pepetide-1,GLP-1)是否存在非受体通路参与糖尿病大鼠胃排空的中枢调节。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、GLP-1(7-36)干预组(GLP组)、Exendin(9-39)联合GLP-1干预组(E-G组)及Exendin(9-39)干预组(Exendin组)。制备糖尿病大鼠模型,PVN埋置套管并给予GLP-1(7-36)或Exendin(9-39)等药物,2周后甲基纤维素-酚红溶液测胃排空;实时荧光定量分析法检测PVN区GLP-1受体(GLP-1R)mRNA表达情况。结果注射STZ 2周后,GLP组及E-G组胃排空率较DM组、Exendin组均明显降低(P均0.05),但高于NC组(P0.05);GLP组及E-G组的下丘脑GLP-1R mRNA表达较DM组、NC组、Exendin组均明显增高(P均0.05)。GLP组胃排空率和空腹血糖较E-G组降低(P0.05);下丘脑GLP-1R mRNA表达GLP组与E-G组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论室旁核注射GLP-1可减缓糖尿病大鼠早期的胃排空,推测GLP-1影响胃排空的中枢作用机制除促进GLP-1受体表达增加外,非受体作用通路亦发挥重要作用。     

手把区域多肽及氯沙坦抑制左旋谷氨酸钠大鼠腹部脂肪组织还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位的表达

目的 探讨手把区域多肽（HRP）及氯沙坦对左旋谷氨酸钠（MSG）大鼠胰岛素敏感性的影响及探讨其对腹腔脂肪组织局部肾素血管紧张素系统（RAS）和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶亚单位基因表达的影响.方法 将8周龄体重在250～300 g的MSG大鼠共24只采用完全随机法分为MSG对照组（MSG组,n=6）、HRP干预组（MSG-HRP组,n=6,1.0 mg·d-1·kg-1）、氯沙坦干预组（MSG-L组,n=6,450 mg/L于饮用水中）、HRP及氯沙坦联合干预组（MSG-HRP-L组,n=6）,干预4周,正常SD大鼠为对照组（Con组,n=6）.12周龄时予以行胰岛素耐量试验评估大鼠胰岛素敏感性,计算胰岛素注射后30 min与0 rain时血糖比值.测定单位质量腹腔脂肪组织（前）肾素、（前）肾素受体[（P）RR]和选择性血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R） mRNA的表达及血管紧张素-Ⅱ（Ang-Ⅱ）蛋白水平,测定NADPH氧化酶亚单位P47phox和P22phoxmRNA的表达情况.采用方差分析及LSD两两比较法进行统计学分析.结果 外源性胰岛素注射后计算30 min血糖与基础血糖的比值,MSG组最高（92％±12％）,与Con组（66％±8％）、MSG-HRP组（76％±5％）、MSG-L组（78％±5％）、MSG-HRP-L组（75％±10％）比较均有统计学差异（F=6.875,P＜0.05）.本研究未能检测到腹腔脂肪组织中（前）肾素mRNA的表达.MSG-HRP组、MSG-L组、MSG-HRP-L组（P） RR mRNA表达量分别是MSG组大鼠的1.92、3.19和1.90倍（F=9.805,P＜0.05）.MSG-HRP组、MSG-L组、MSG-HRP-L组AT1 R mRNA分别是MSG大鼠组表达量的72％、45％和53％（F=14.508,P＜0.05）.与MSG组比较,MSG-HRP组脂肪局部Ang-Ⅱ水平下调[分别为（36±8）比（56±4） ng/g蛋白,P＜0.05],但是MSG-L组和MSG-HRP-L组水平均明显升高[分别为（79±14）比（70±16）比（56±4） ng/g蛋白,F=14.864,均P＜0.05].MSG-HRP组、MSG-L组、MSG-HRP-L组腹腔脂肪组织中P47phox mRNA分别是MSG大鼠组表达量的65％、51％和43％（F=7.082,均P＜0.05）.p22pho mRNA分别是MSG大鼠组表达量的57％、40％和41％（F=9.810,均P＜0.05）.结论 HRP和氯沙坦均可改善MSG大鼠胰岛素敏感性,其机制可能是其减少脂肪组织局部Ang-Ⅱ的数量或抑制脂肪组织中局部Ang-Ⅱ的效应,抑制氧化应激,从而改善脂肪胰岛素抵抗.     

L-精氨酸对糖尿病大鼠心肌损伤的影响

目的研究L-精氨酸(L-Arg)对糖尿病(DM)大鼠心肌的保护作用。方法 28只大鼠腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)制备DM模型,随机均分为DM组、L-Arg〔300 mg/(kg.d)〕治疗组。另设立正常对照(NC)组(n=12)。用药12周末处死大鼠,用透射电镜观察3组大鼠心肌细胞的形态学改变,采用RT-PCR检测心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮素-1(ET-1)mRNA的表达水平,并测定心肌组织内eNOSi、NOS、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性以及一氧化氮(NO)、ET-1的含量。结果电镜下可见DM组大鼠心肌细胞肌原纤维含量明显减少,肌浆网扩张,线粒体肿胀变性。DM组大鼠eNOS mRNA表达、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性及NO含量明显低于NC组,而ET-1 mRNA表达及ET-1含量明显高于NC组。L-Arg组大鼠心肌病变明显减轻,eNOS mRNA表达、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性及NO含量明显高于DM组,ET-1mRNA表达及ET-1含量明显低于DM组。结论 L-Arg对DM大鼠心肌具有保护作用,其机制可能与L-Arg增加心肌组织NO含量、降低ET-1含量,改善心肌血供有关。     

缬沙坦抗氧化作用对血管损伤小鼠血管重构的影响

目的：探讨缬沙坦对血管损伤小鼠血管重构的影响和机制。方法雄性C57BL/6小鼠160只,采用聚乙烯套管包裹于股动脉外的方法造模。随机分为4组：正常组（n=40）、假手术组（n=40）、手术组（n=40）和缬沙坦组（n=40,术后予缬沙坦治疗）。造模14天后处死小鼠,取套管处股动脉观察血管形态学变化,并检测血管内膜和中膜面积,同时采用逆转录酶-聚合酶链式反应（PT-PCR）法检测烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐氧化酶[NAD（P）H氧化酶]主要亚单位p22phox、p47phox及rac-1 mRNA水平,采用光泽精化学发光法测定股动脉超氧阴离子（O2-）含量。结果各组中膜均无增厚表现,仅手术组和缬沙坦组可见内膜增厚。与正常组和假手术组相比,手术组[（370.00±2.50）μm2]与缬沙坦组[（160.11±2.41）μm2]内膜面积增大,但两组比较无显著性差异（P＞0.05）;与正常组和假手术组相比,手术组和缬沙坦组p22phox、p47phox及rac-1 mRNA水平均有升高;与手术组相比,缬沙坦组p22phox[（0.530±0.038） vs.（0.885±0.030）]、p47phox[（0.525±0.035） vs.（0.745±0.032）]、rac-1[（0.435±0.037） vs.（0.910±0.015）]mRNA降低,差异有统计学意义（P＞0.05）;缬沙坦组与手术组股动脉O2-表达均明显增高,且p22pho（r=0.994）、p47phox（r=0.985）及rac-1（r=0.990）的表达量与O2-含量间均呈正相关。结论短期应用缬沙坦可抑制损伤后血管内膜增厚、逆转血管重构,其机制可能与缬沙坦抗氧化应激作用有关。     

骨细胞GLP-1受体表达对2型糖尿病大鼠骨微结构的影响

目的观察2型糖尿病大鼠股骨颈骨细胞表达胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)阳性细胞百分数的变化,探讨骨组织GLP-1R变化对骨微结构的影响。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为实验组(30只)和对照组(30只),实验组采用高糖高脂饲料喂养至12周时加小剂量链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型,对照组采用普通饲料喂养。分别于造模成功时和成模后第12周,处死10只大鼠作为糖尿病0周组(DM0w组,n=10)和糖尿病12周组(DM12w组,n=10),对照组分别于同期各处死10只大鼠作为正常对照(NGT0w组,n=10;NGT12w组,n=10)。经腹主动脉采血测定空腹血糖(FBG)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)。取近端股骨颈,制备脱钙和不脱钙骨切片,备免疫组化检测GLP-1R阳性的骨细胞,采用Simple软件分析骨小梁形态计量学指标:骨小梁占骨髓腔体积百分比(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)。采用单因素方差分析比较各组大鼠股骨颈表达GLP-1R阳性的骨细胞百分数,BV/TV、Tb.Th、Tb.N的变化,采用Pearson行相关分析。结果与同期对照组相比,DM0w组、DM12w组大鼠FBG、TC、TG升高(均P0.05);与同期对照组相比,DM0w组、DM12w组大鼠股骨颈表达GLP-1R阳性骨细胞百分数和BV/TV、Tb.Th均减少(均P0.05);与DM0组相比,DM12组大鼠股骨颈表达GLP-1R阳性的骨细胞百分数、BV/TV、Tb.Th、Tb.N均减少(均P0.05);Pearson相关分析显示大鼠股骨颈GLP-1R阳性骨细胞百分数与股骨颈BV/TV、Tb.Th、Tb.N均呈正相关,相关系数分别为r=0.803,P0.05;r=0.545,P0.05;r=0.771,P0.05。结论糖尿病大鼠股骨颈骨细胞GLP-1R的表达减少,同时BV/TV、Tb.N减少,Tb.Th变薄,骨细胞GLP-1R的表达可能是影响2型糖尿病骨微结构的因素之一。     

艾塞那肽对糖尿病大鼠脂肪细胞脂代谢的影响

目的观察比较艾塞那肽和甘精胰岛素治疗对糖尿病大鼠脂肪细胞脂代谢的影响。方法7～8周龄雄性sD大鼠,体重180～200g,按随机数字表法分为2组（对照组8只,高脂组30只）：对照组仅予普通饮食,高脂组予高脂喂养5周,联合小剂量链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病SD大鼠模型,3d后将成模大鼠随机分为3组进行不同干预：对照组和糖尿病组给予生理盐水,另外2组分别予艾塞那肽或甘精胰岛素干预4周。通过Westernblotting和实时定量聚合酶链式反应检测大鼠附睾周围脂肪组织中脂肪细胞脂质合成酶如磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶-1（ACC-1）蛋白及基因表达,以及脂质水解相关酶如脂肪组织甘油三酯脂酶（ATGL）、色素上皮衍生因子（PEDF）基因表达。多组定量资料间比较采用方差分析,两两比较采用最小差异显著性分析。结果与对照组比较,糖尿病大鼠脂肪细胞脂质合成酶PEPCK和FAS基因及蛋白表达降低,ACC-1基因水平降低,脂质水解相关蛋白ATGL和PEDF基因表达升高（均P〈0．05）。艾塞那肽及甘精胰岛素治疗后,PEPCK、FAS基因及蛋白水平升高,ACC-1基因表达增加,ATGL、PEDF基因表达降低（均P〈0．05）。与甘精胰岛素组比较,艾塞那肽组PEPCK、FAS基因[艾塞那肽与甘精胰岛素：PEPCKmRNA（1．68±0．45）VS（1．15±0．24）;FASmRNA（7．12±0．13）vs（1．18±0．16）]及蛋白[PEPCK（1．11±0．08）vs（0．87±0．08）;FAS（1．95±0．10）VS（0．99±0．08）]水平明显升高（t=2．525、69．374、5．312、18．670,均P〈0．05）。结论艾塞那肽可促进脂肪组织甘油三酯合成、减少脂质分解,其作用强于甘精胰岛素。     

艾塞那肽对糖尿病大鼠肝脏组织胰岛素抵抗的影响

目的 研究胰高糖素样肽1受体激动剂艾塞那肽对高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肝脏组织胰岛素抵抗的影响及其机制.方法 健康雄性6周龄SD大鼠采用随机数字法分为正常对照组（C组,n=6）、正常对照＋艾塞那肽处理组（C＋E组,n=6）、糖尿病组（D组,n=5）以及糖尿病＋艾塞那肽处理组（D＋E组,n=5）,由高脂饮食加小剂量STZ诱导成2型糖尿病后,D＋E组以及C＋E组大鼠予艾塞那肽,5μg腹部皮下注射,每天1次干预;8周后,分别测定空腹葡萄糖出现率、肝糖输出率、甘油出现率、甘油糖异生相关参数;测定外源性胰岛素持续输注状态下的肝糖输出和葡萄糖输注率.同时行透射电子显微镜观察大鼠肝脏组织超微结构改变.多组间数据比较采用单因素方差分析.结果 D＋E组大鼠空腹血糖、血浆甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）水平均显著低于D组,但显著高于C组及C＋E组,差异均有统计学意义（F=82.827、81.648、27.613、26.300、105.234,均P＜0.05）,ISI则显著高于D组大鼠,但仍显著低于C组及C＋E组（F=17.566,P＜0.05）.空腹状态下,D＋E组大鼠的葡萄糖出现率、甘油出现率、肝糖输出率、甘油糖异生相关参数（甘油转化为葡萄糖的百分率、来源于甘油的葡萄糖百分比、甘油糖异生速率）均显著低于D组大鼠,但仍显著高于C组及C＋E组（F=68.424、41.543、68.424、40.223、17.491、86.465,均P＜0.05）.胰岛素钳夹稳态时,D＋E组大鼠内源性肝糖输出较D组大鼠显著抑制,但仍显著高于C组及C＋E组（F=85.403,P＜0.05）;其外源性葡萄糖输注率则显著高于D组大鼠,仍显著低于C组及C＋E组（F=49.954,P＜0.05）.超微结构研究显示D＋E组大鼠的肝细胞超微结构损伤显著减轻.结论 胰高糖素样肽1受体激动剂艾塞那肽显著改善糖尿病大鼠肝脏组织超微结构损伤,进而改?     

1，25-二羟维生素D3对糖尿病大鼠肺脏的保护作用及机制

目的观察1,25-二羟维生素D3[1,25-（OH）：D,]对糖尿病大鼠炎性水平及肺组织Toll样受体4（TLR4）表达的影响,探讨其肺保护作用及机制。方法将90只SD大鼠随机分为对照组（C组）10只及模型组80只,模型组经尾静脉注射STZ制备糖尿病模型,C组注射等体积柠檬酸缓冲液;将模型组造模成功的75只大鼠随机分为糖尿病组（D组）,1,25-（OH）：D,大、中、小剂量干预组（H、M、L组）及精蛋白锌胰岛素干预组（Y组）各15只,其中H、M、L组分别予0．3、0．15、0．025μg/（kg·d）的1,25-（OH）：D3灌胃,Y组予胰岛素颈后皮下注射,c组和D组予蒸馏水2mL灌胃,均为1次/d、连续16周,16周后所有动物均采用股动脉放血处死,立即取肺脏组织置于10％甲醛及液氮中保存。测定各组血糖及血清CRP水平;采用HE、Masson染色法观察肺组织形态学变化,免疫组织化学法检测TLR4、NF-KBp65的蛋白表达;采用PCR法定量检测TLR4、MyD88、NF-KBp65的mRNA表达。结果①D组血糖及血清CRP水平均显著高于C组（P〈0．01）,各干预组均不同程度低于D组,尤以H组为著（P〈0．01）。②D组肺泡壁重度增厚、肺间质明显增生、大量炎症细胞浸润,H、Y、M及L组肺泡壁轻到中度增厚、炎细胞浸润明显;与c组比较,余5组TLR4、NF-KBp65蛋白表达有所升高,其中H、Y组显著低于D组。③D组,TLR4、MyD88和NF-KBp65的mRNA表达显著高于C组（P〈0．01）,各干预组表达水均低于D组。肺组织TLR4mRNA表达与MyD88mRNA（r=0．610）、NF-KBp65mRNA表达（r=0．744）均呈正相关,P均〈0．001;MyD88mRNA与NF-KBp65mRNA表达亦呈正相关（r=0．609）,P〈0．001。结论1,25-（OH）：D,可能通过TLR4介导的炎症途径对STZ诱导的糖尿病大鼠肺脏病变发挥保护作用。