胶体金免疫层析试纸条与ELISA检测猪瘟抗体的比对试验

胶体金免疫层析试纸条检测猪瘟抗体阳性检出率94.69%,ELISA法检测猪瘟抗体合格率95.58%,两者符合率为99.07%;胶体金免疫层析试纸条强阳性率为86.73%,ELISA检测猪瘟抗体阻断率≥60%为89.38%,检测线显色强度与抗体水平呈正相关。     

胶体金免疫层析试纸条与ELISA检测猪蓝耳病抗体的比对试验

胶体金免疫层析试纸条检测猪蓝耳病抗体的结果中强阳性、中阳性、弱阳性、阴性分别为48.67%、18.58%、31.86%、0.88%,检测猪蓝耳病抗体合格率99.12%;ELISA检测猪蓝耳病抗体合格率95.58%,符合率为96.43%。胶体金免疫层析试纸条能够评价猪蓝耳病疫苗临床免疫状况,可进行猪蓝耳病抗体的定性检测。     

犬C-反应蛋白荧光定量免疫层析检测方法的建立与应用

试验开展了犬C-反应蛋白(C-CRP)荧光微球免疫层析定量方法的研究,旨在研制一种操作简易、灵敏度高,用于快速定量检测C-CRP荧光免疫层析试纸条。采用双抗体夹心法和荧光免疫层析技术,以羧基荧光微球标记的抗C-CRP单克隆抗体及羊抗鸡IgY为标记抗体,抗C-CRP单克隆抗体和鸡IgY分别作为检测线和质控线制备荧光免疫层析试纸条。结果显示,所制备C-CRP检测试纸条的检测范围为0.5～250mg/L,检测限为0.5mg/L,批内和批间变异系数(CV)分别为0.68%～6.94%和0.89%～8.79%,平均回收率为98.15%～101.19%,试剂与9种干扰物质无交叉反应。加速破坏稳定性试验表明试纸条可以常温放置24个月。临床样本测试发现,其与I-CHROMA试剂盒检测结果相关性良好(R2=0.995)。综上所述,该荧光免疫层析试纸条灵敏度、特异度较高,且操作简单、快速,可用于宠物犬临床检测。     

犬C-反应蛋白荧光定量免疫层析检测方法的建立与应用

试验开展了犬C-反应蛋白(C-CRP)荧光微球免疫层析定量方法的研究,旨在研制一种操作简易、灵敏度高,用于快速定量检测C-CRP荧光免疫层析试纸条。采用双抗体夹心法和荧光免疫层析技术,以羧基荧光微球标记的抗C-CRP单克隆抗体及羊抗鸡IgY为标记抗体,抗C-CRP单克隆抗体和鸡IgY分别作为检测线和质控线制备荧光免疫层析试纸条。结果显示,所制备C-CRP检测试纸条的检测范围为0.5～250mg/L,检测限为0.5mg/L,批内和批间变异系数(CV)分别为0.68%～6.94%和0.89%～8.79%,平均回收率为98.15%～101.19%,试剂与9种干扰物质无交叉反应。加速破坏稳定性试验表明试纸条可以常温放置24个月。临床样本测试发现,其与I-CHROMA试剂盒检测结果相关性良好(R2=0.995)。综上所述,该荧光免疫层析试纸条灵敏度、特异度较高,且操作简单、快速,可用于宠物犬临床检测。     

不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡检测牛羊布鲁氏菌病的效果分析

为比较不同品牌胶体金免疫层析试纸条/卡（简称试纸条/卡）检测牛羊布鲁氏菌病的效果,利用抗体布鲁氏菌阴阳性血清,对6种品牌试纸条/卡的准确性及灵敏度进行观察比较;同时按不同试纸条/卡操作方法对经虎红平板凝集试验（RBPT）初筛和竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）复核的临床牛羊血清样品进行检测比较。结果显示：不同试纸条/卡对布鲁氏菌企业标准阴阳性血清检出率均为100%,其中2种试纸条/卡敏感性高,对不同稀释倍数阳性血清均可检出;试纸条/卡对临床阴性血清均100%检出,但对临床阳性血清样品的检测结果差异较大,其中对羊阳性血清样品的检出率为5.88%～70.59%,对牛阳性血清样品为50.0%～100.0%。结果表明,不同品牌试纸条/卡在布病检测时存在一定差异。建议使用试纸条/卡进行布鲁氏菌病初筛后,应结合国家相关布病诊断技术进行复检,以确保检测结果的准确性。     

犬心丝虫内共生体-沃尔巴克氏体DNA检测

通过检测犬血液中心丝虫共生体-沃尔巴克氏体DNA,了解海南海口犬心丝虫的自然感染及沃尔巴克氏体的基因分型情况。随机以海南流浪狗中心和海口市宠物医院的60只家犬作为指示动物,使用真空采血管抽取家犬全血,应用PCR扩增犬血中犬心丝虫沃尔巴克氏体丝状热敏感蛋白基因(fts Z基因)片段以检测心丝虫感染犬外周血液中的沃尔巴克氏体DNA,然后对阳性片段进行测序,并将所测序列与Gen Bank中注册的基因序列进行比较分析。结果显示,共检测60只家犬血液,其中发现3只犬为心丝虫沃尔巴克氏体阳性,阳性率5.0%。系统发育树对比结果显示,海口犬源犬恶丝虫沃尔巴克氏体与来自中国成都犬恶丝虫沃尔巴克氏体的fts Z基因序列的同源性最高。同时,显示不同宿主和不同地区的犬恶丝虫沃尔巴克氏体形成一个支系。     

猪瘟病毒胶体金免疫层析检测方法的建立及应用

为建立一种猪瘟病毒的快速检测方法，采用柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金，选择15nm胶体金标记兔抗猪瘟病毒抗体，对胶体金标记抗体采用低温超速离心法进行纯化，组装免疫层析试纸条。用试纸条对猪瘟可疑病料进行检测，同时用直接荧光抗体试验和RT—PCR做平行试验。结果显示，用试纸条检测猪瘟病毒，10min左右即可显示结果，试纸条、直接猪瘟荧光抗体试验和RT—PCR的阳性检出率依次为36．36％（4／11）、45．45％（5／11）和72．72％（8／11）。表明，用胶体金免疫层析试纸条检测猪瘟病毒操作简便，需时短，可以用于猪瘟的流行病学调查。     

狂犬病病毒抗体纳米荧光检测试纸条的临床应用

为评价狂犬病病毒抗体纳米荧光试纸条的性能,使用该试纸条,对A、B、C 3组不同免疫阶段犬血清进行抗体检测,并对122份临床犬血清,同时使用试纸条、SYNBIOTICS试剂盒、北京世纪元亨ELISA试剂盒进行抗体检测。结果显示:未免疫狂犬病疫苗的A组,抗体水平极低;免疫1个月后的B组,抗体水平迅速升高;免疫2个月后的C组,抗体水平出现回落。试纸条与SYNBIOTICS试剂盒的阳性符合率为92%,阴性符合率为91.67%,总符合率为90.17%;与北京世纪元亨试剂盒的阳性符合率为96.16%,阴性符合率为97.15%,总符合率为96.73%。结果表明,试纸条可以真实反映不同免疫阶段的狂犬病病毒抗体变化,与国内外商品试剂盒符合率高,可应用于狂犬病疫苗免疫后的临床效果评估,指导临床建立合理的免疫策略。     

内蒙古部分地区犬猫弓形虫病流行情况调查

为了调查内蒙古呼和浩特地区犬猫弓形虫病的流行情况,采用酶联免疫吸附试验和胶体金免疫层析法对呼和浩特地区共254只犬猫进行弓形虫抗体检测,采用胶体金免疫层析法对阳性感染犬猫进行抗原检测.结果显示,利用酶联免疫吸附试验检测犬的弓形虫阳性率为12.6%,猫为10.3%;利用胶体金免疫层析方法检测犬的弓形虫阳性率为11.4%,猫为9.2%;利用胶体金免疫层析方法对阳性犬猫进行抗原检测,检出率分别为23.8%和33.3%.调查表明,不同来源犬猫的弓形虫感染率差异显著,因此,加强对散养及流浪犬猫的管理是非常必要的.同时建议加强血清学监测,以便及时有效地采取预防措施.     

胶体金免疫层析法检测谷物中的黄曲霉毒素B1

采用胶体金免疫层析法检测谷物中的黄曲霉毒素B1,谷物样品经提取后,用胶体金免疫层析试纸条法对其进行黄曲霉毒素B1的测定,并与高效液相色谱法进行比较。结果表明:胶体金免疫层析试纸条法与高效液相色谱法的相符率可达90%以上,胶体金免疫层析试纸条法操作简单、快速、方便,可以应用于谷物中的黄曲霉毒素B1的现场快速检测。     

布鲁氏菌抗体时间分辨荧光检测方法的建立

用布鲁氏菌的Bp26蛋白包被免疫层析试纸条的检测线,以稀土荧光纳米颗粒标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)作为信号报告基团,建立了检测布鲁氏菌抗体的时间分辨荧光检测方法。用制备的稀土荧光试纸条检测715份牛血清,与虎红平板凝集试验结果的符合率为92%,且与牛巴贝斯虫阳性血清、牛结核菌阳性血清、牛副结核杆菌阳性血清、口蹄疫阳性血清均无交叉反应,检测灵敏性好于胶体金试纸条。     

湖北省武汉市某门诊犬细小病毒病病例统计分析

[目的]了解武汉市犬细小病毒病(CPD)的流行情况和特点。[方法]以华中农业大学动物医院门诊为依托,应用胶体金试纸条和PCR检测技术,对2015年9月至2016年9月的犬门诊病例进行调查分析。[结果]共检测门诊犬病例2 728例,检出CPD阳性121例,阳性检出率为4.4%。从时间分布看,该期间大部分月份的阳性检出率在3%~5%之间,2015年10月的最高,2016年6—9月的最低。从群间分布看,阿拉斯加、边牧、哈士奇、比熊、萨摩耶、博美、巴哥等犬种的CPD阳性数量均占该品种就诊犬总数量的10%以上,而拉布拉多、雪纳瑞、德牧、贵宾、金毛犬则在5%以上;雄性犬的CPD阳性检出率明显高于雌性;在阳性病例中,2~4月龄幼犬的占比最高,在40%~60%之间;未免疫或未按规定免疫犬的CPD阳性数量与总阳性数量的占比高达86.7%,而按规定免疫犬仅为13.3%。[结论]CPD的发生与犬的品种、年龄、性别、免疫状况和气候等因素存在一定的关系,尤其是其年龄和免疫状况。本研究有助于了解该病的流行特点,并可为该病的防治提供参考。     

检测犬抗狂犬病毒抗体的胶体金免疫层析法的建立及应用

为建立一种简便快速的胶体金免疫层析方法(GICA)以用于检测犬抗狂犬病毒抗体,本研究运用间接反应一步法原理,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒用以标记抗犬IgG抗体形成金-抗犬IgG抗体复合物,制成金标结合垫,加上包被有狂犬病毒糖蛋白的硝酸纤维膜,即制成胶体金免疫层析试纸条.样品中狂犬病?　 毒抗体与金标记抗体结合后沿硝酸纤维素膜移动,与膜上的糖蛋白特异结合形成肉眼可见的红色线条.试验结果显示,GICA试纸条与抗狂犬病毒抗体有特异性反应,与犬瘟热病毒、犬细小病毒等的抗体无交叉反应;GICA与标准ELISA法比较的总符合率为99.4%.结果表明,GICA试纸条检测抗狂犬病毒抗体特异性强、成本低,操作简便,不需任何仪器,特别适用于野外以及现场使用.     

胶体金免疫层析试纸条在禽病检测方面的应用与展望

胶体金免疫层析试纸条作为检测工具,具有特异性强、使用方便、结果易于判断等优点,被广泛应用于基层和现场检测。目前,已研发出多种应用于禽病抗原和抗体检测的胶体金免疫层析试纸条。本文从胶体金免疫层析试纸条的技术原理、研究进展及发展方向等方面进行简要综述。     

鸡毒支原体胶体金免疫层析试纸条的研制和初步应用

为研制一种用于快速检测鸡毒支原体(MG)的胶体金免疫层析试纸条,采用直径20nm的胶体金颗粒标记纯化的MG多克隆抗体,硝酸纤维素膜检测线和质检线分别喷加纯化的MG多克隆抗体和兔抗鸡IgG抗体,制作胶体金试纸条。试纸条检测MG阳性显示两条红色反应条带;阴性为一条红色反应带。本试纸条可检测到1∶1 280倍稀释的MG抗原,即颜色变化单位为8×104 CCU/mL,具有高度的灵敏性。用试纸条检测衣原体、滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡大肠埃希菌和鸡白痢沙门菌等均呈阴性,表明该试纸条具有较好的特异性。对试纸条检测呈MG阳性的38只病鸡进行MG培养验证,所得结果一致;同时对MG培养检测的另外95份病鸡样品进行试纸条测试比对,符合率为96.84%,证明该试纸条具有很高的准确性。该胶体金免疫层析试纸条检测MG操作简单,灵敏度、准确度、特异性等均符合要求,可以用于养殖场批量MG的检测。     

胶体金免疫层析试纸条在生物毒素检测领域的研究进展

胶体金免疫层析试纸条是一种常用的检测方法,广泛应用于疾病诊断、生物毒素检测等领域。该技术基于胶体金标记的特异性抗原（抗体）与待检样品中的目标分子相互作用,在试纸条上形成可见的测试线或信号变化。其流程包括样品预处理、标记抗体制备、试纸条组装步骤。胶体金免疫层析试纸条可以用于快速检测食品中的毒素残留、环境中的有害物质以及临床诊断中的相关指标。该技术具有无创、快速、灵敏和准确的特点,在临床应急检测和大规模筛查中能快速获得结果。文章总结了胶体金免疫层析试纸条技术及其在生物毒素检测中的研究进展,并分析了当前胶体金免疫层析试纸条技术的优缺点,展望了该技术在生物毒素检测领域的未来发展方向。     

犬恶丝虫抗体dot-ELISA检测方法的建立

为快速诊断犬恶丝虫病，建立了犬恶丝虫抗体dot—ELISA检测方法，并与阻断试验、交叉反应试验、重复性试验、琼脂扩散试验和平行对照试验进行了比较。结果显示，制备的犬恶丝虫虫体粗制抗原与犬钩虫、犬弓首蛔虫和犬蠕形螨感染犬的阳性血清无交叉反应，检出犬恶丝虫阳性血清的最高抗体效价为1：1024，重复性好；建立的犬恶丝虫病dot—ELISA诊断方法的灵敏度比琼脂扩散试验和美国IDEXX实验室制备的犬恶丝虫病诊断试剂盒分别高2048倍和48倍。     

乳制品抗生素快检试纸条的研究进展

随着国民对乳制品需求量的增加,乳制品行业成为发展最快的食品产业之一,但随之产生的抗生素残留问题也成为关注的焦点。快检试纸条作为一种简便、快速、低成本的检测手段,在抗生素检测方面发挥关键作用。主要介绍了用于检测乳与乳制品中残留抗生素的快检试纸条,包括胶体金免疫层析试纸条、酶联免疫试纸条、荧光免疫层析试纸条、核酸适配体试纸条和生物膜干涉试纸条。重点介绍了基于新型荧光纳米材料、核酸适配体、生物膜干涉等技术的新型试纸条的研究进展。     

牛指状丝虫检测犬丝虫抗体的PPA—ELISA方法

<正> 国内外用蟠尾丝虫、指状丝虫和犬恶丝虫等检测人丝虫病抗体以及棉鼠丝虫检测犬恶丝虫病的报道,说明丝虫有共同抗原部分,斯里兰卡的Dissanyoke已用牛指状丝虫分离到可     

猪伪狂犬病病毒野毒抗体胶体金免疫层析试纸条的初步应用

为建立一种简单、快速、敏感、特异的猪伪狂犬病病毒野毒抗体血清学检测方法,本研究利用胶体金标记SPA蛋白作为金标垫,以重组g E蛋白和猪Ig G分别作为检测线和质控线,组装检测猪伪狂犬病病毒g E抗体的胶体金免疫层析试纸条。该试纸条肉眼于15 min内即可判定结果,检测PCV-2、PRRSV、PEDV、CSFV、PPV、PRV疫苗毒的阳性血清均为阴性,检测PRV野毒阳性血清的灵敏度达1∶1 280,与IDEXX g E-ELISA抗体检测试剂盒的符合率为95.31%,室温条件下可稳定保存6个月以上。本研究研制的PRV野毒抗体胶体金免疫层析试纸条操作简单、检测快速、敏感性高、特异性强,可用于PRV野毒感染的快速诊断,特别适合于现场检测。