补肺平喘汤对支气管哮喘大鼠Th1/Th2失衡及JAK/STAT信号通路影响

目的观察补肺平喘汤对支气管哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子失衡及JAK/STAT信号通路影响。方法将50只健康大鼠随机分为正常组,模型组,中药低剂量组,中药中剂量组,中药高剂量组5组,每组10只。除正常组外,其余各组给予卵白蛋白和氢氧化铝免疫反应制备支气管哮喘大鼠模型。造模4周后,中药低、中、高剂量组分别按照生药量10.8,21.6,32.4 g/kg进行灌胃给药,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,灌胃4周后,分离大鼠血清和肺组织,Elisa法检测大鼠血清IFN-γ、IL-4水平变化,RT-PCR法检测大鼠肺组织JAK/STAT信号通路变化。结果与正常组比较,模型组大鼠血清IL-4水平显著升高(P0.01),而IFN-γ呈显著下降趋势(P0.01),IL-4/IFN-γ提示免疫调节显著向Th2水平失衡,肺组织JAK1、STAT6 mRNA水平明显升高;与模型组比较,中药中、高剂量组大鼠血清IL-4水平显著降低(P0.05,P0.01),IFN-γ水平显著升高(P0.05),免疫调节明显向Th1方向调节(P0.01),肺组织JAK1、STAT6 mRNA水平明显降低(P0.05,P0.01)。结论补肺平喘汤能有效改善支气管哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子失衡,降低JAK1、STAT6 mRNA表达,调节Th1/Th2细胞因子平衡。     

基于Th1/Th2漂移的急性化脓性扁桃体炎气分证本质研究

目的:研究急性化脓性扁桃体炎患者气分证外周血Th1/Th2漂移变化.方法:通过流式细胞检测技术,对急性化脓性扁桃体炎患者气分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测,采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值.结果:与正常对照组比较,急性化脓性扁桃体炎气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值差异无统计学意义(P＞0.05).结论:急性化脓性扁桃体炎气分证与Th1/Th2漂移存在相关性.     

针刺对慢性疲劳综合征大鼠血清Th1/Th2的影响

目的:检测针刺对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠血清辅助性T细胞(Th)1/Th 2的影响,探讨针刺治疗CFS的作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、针刺组,每组8只。采用束缚+冷水游泳的复合应激法制备CFS模型。针刺组针刺"百会""关元""足三里"(双)穴,2个疗程(7d为1个疗程,1次/d,共14次)后,测量其体质量,采用酶联免疫法检测各组大鼠血清中Th 1(γ-干扰素,IFN-γ)和Th 2(白介素-4,IL-4)水平。结果:模型组大鼠体质量下降,血清IFN-γ含量较正常对照组降低,IFN-γ/IL-4比值下降(均P0.01);针刺组大鼠体质量增加,血清IFN-γ含量较模型组升高,IFN-γ/IL-4比值上升(P0.01,P0.05)。结论:针刺可调节CFS大鼠Th 1/Th 2失衡,可能是针刺治疗CFS起效的机制之一。     

慢性胃炎不同中医证型与血清Th1/Th2漂移的关系

目的:观察慢性胃炎不同中医证型与血清中Th1/Th2水平变化的关系。方法:90例慢性胃炎患者中医诊断为脾胃湿热证(50例)及脾胃虚弱证(40例),并设立10名健康者为对照。对各组患者分别检测血清中Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素L-2(IL-2)和Th2型细胞因子IL-4、IL-10的表达。结果:Th1(IFN-γ、IL-2)、Th1/Th2(INF-γ/IL-4)比值,脾胃湿热组脾胃虚弱组对照组(P0.05),而Th2(IL-4、IL-10),对照组脾胃虚弱组脾胃湿热组(P0.05)。结论:慢性胃炎患者Th1/Th2左偏,其脾胃湿热证及脾胃虚弱证不同证型的区别与Th1/Th2漂移程度有关,脾胃湿热证左偏更明显。     

泻肺清肝饮治疗哮喘热哮证的临床研究

目的:通过观察40例哮喘热哮证患者服用泻肺清肝饮前后症状积分、血清炎症因子水平、肺功能等指标的变化,评价哮喘热哮证发病与Th1/Th2失衡、炎症反应的关系,探讨泻肺清肝饮对哮喘热哮证患者Th1/Th2失衡、炎症干预的可能机制。方法:抽取40例正常对照组、41例哮喘发作热哮证常规治疗组,40例哮喘发作热哮证泻肺清肝饮治疗。采用ELISA法观察哮喘患者血浆中IFN-γ、IL-4水平及外周血Th1、Th2细胞比例变化。结果:治疗前常规组、中西医结合组IFN-γ/IL-4比值明显低于正常组(P<0.05),治疗后常规、中西医结合组IFN-γ/IL-4比值明显均低于治疗前(P<0.05),治疗后IFN-γ/IL-4比值常规组低于中西医结合组(P<0.05)。结论:哮喘发病与Th1/Th2失衡导致的炎症反应关系密切,泻肺清肝饮能调节Th1/Th2失衡,从而抑制炎症反应、调控变态反应,减轻或抑制哮喘发作。     

急性化脓性扁桃体炎卫分证外周血Th1、Th2类细胞因子的表达及临床意义

目的:研究急性化脓性扁桃体炎患者卫分证外周血Th1/Th2漂移变化。方法:通过流式细胞检测技术,对急性化脓性扁桃体炎患者卫分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测,采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较IFN-γ/IL-4比值。结果:与正常对照组比较,急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、IFN-γ、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:急性化脓性扁桃体炎卫分证与Th1/Th2漂移存在相关性。     

补脾强力复方对EAMG大鼠Th1/Th2/Th17细胞因子的影响

目的:研究补脾强力复方对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠血清Th1/Th2/Th17细胞因子的影响,探讨其可能的作用机制。方法:选择健康SPF级雌性Lewis大鼠,分为正常组、模型组、醋酸泼尼松组及补脾强力复方高、中、低剂量组,采用免疫诱导注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段方法制备大鼠EAMG模型。ELISA法检测各组大鼠血清细胞因子IFN-γ、TGF-β、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平均明显升高,TGF-β水平明显降低,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);与模型组比较,补脾强力复方高、中、低剂量组大鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平明显降低,而TGF-β水平明显升高,差异均有统计学意义(P0.01或P0.05);醋酸泼尼松组大鼠血清TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平较模型组明显降低,差异均有统计学意义(P0.01)。结论:补脾强力复方能有效降低EAMG大鼠IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平,升高TGF-β水平,从而纠正EAMG大鼠Th1/Th2/Th17细胞因子失衡,这可能是其治疗EAMG的作用机制之一。     

气虚血瘀证大鼠模型血液流变学及Th1/Th2平衡研究

目的:通过观察气虚血瘀证大鼠模型血液流变学及Th1/Th2平衡的变化,探讨气虚血瘀证的病理机制。方法:采用限食+强迫游泳+皮下注射肾上腺素方法制备气虚血瘀证大鼠模型,观察模型大鼠体重、胸腺指数、脾指数、血液流变学变化,应用ELISA方法测定血清中IFN-γ、IL-4含量。结果:与空白对照组相比,模型组体重下降,血液流变学指标升高,胸腺、脾指数降低,血清IFN-γ含量降低,IL-4含量升高。结论:气虚血瘀证大鼠存在一定免疫功能缺陷,Th1/Th2细胞平衡向Th2细胞偏移,可能是本证的病理机制之一。     

止喘贴对哮喘大鼠血清中IFN-γ、IL-4表达的影响

目的:观察止喘贴穴位贴敷对卵蛋白致敏哮喘SD大鼠血清中Th1型细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和Tn2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)水平变化的影响。方法:雄性SD大鼠44只随机分为空白组、模型组各12只,地塞米松组和止喘贴组,每组各10只。以卵蛋白(OVA)致敏激发法制备大鼠哮喘模型,用止喘贴穴位贴敷,并与空白组、模型组和地塞米松组比较。主要测定各组大鼠血清中IFN-γ、IL-4水平。结果:模型组与空白组比较,血清中IL-4的含量明显升高,而IFN-γ的含量明显降低(P<0.01)。止喘贴组能有效降低血清中IL-4含量,同时可升高IFN-γ的含量,调节Th1/Th2的失衡,与模型组相比有显著性差异(P<0.05);与地塞米松组相比,止喘贴升高血清中IFN-γ的含量方面优于地塞米松之外,IL-4的含量无明显差异(P>0.05)。结论:细胞因子IFN-γ、IL-4含量的变化反映了Th1和Th2细胞的失衡,它们参与了哮喘发病的病理生理过程。止喘贴通过升高血清中IFN-γ,降低血清中IL-4来改善Th1和Th2细胞的失衡状态。来改善缓解哮喘病情。     

固本止咳中药对COPD模型小鼠脾、胸腺指数及Th1/Th2失衡的影响

目的:观察固本止咳中药对COPD模型小鼠脾、胸腺指数及Th1/Th2失衡的影响,探讨其治疗COPD的作用机制。方法:采用鼻腔滴入LPS加熏香烟的方法建立COPD小鼠模型,实验分为空白对照组、模型对照组、固本止咳中药组;运用HE染色对形态学进行观察,评价COPD小鼠模型;采用双抗体夹心ELISA方法检测小鼠血清中IFN-γ与IL-4分泌水平。结果:COPD小鼠模型形态学结果符合COPD临床病理形态学改变;模型对照组胸腺指数和脾脏指数显著低于空白对照组(P<0.05),与模型对照组比较,固本止咳中药组小鼠的胸腺指数和脾脏指数显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,模型对照组小鼠血清中IFN-γ升高(P<0.05),IL-4降低(P<0.05),与模型对照组比较,固本止咳中药组小鼠血清中IFN-γ明显降低,IL-4升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:固本止咳中药能纠正COPD模型小鼠Th1/Th2失衡,改善模型小鼠的免疫功能。     

黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠Th17/Treg、Th1/Th2细胞平衡的影响

目的 研究黄芩汤对溃疡性结肠炎（UC）小鼠肠道辅助性T细胞（Th）17/调节性T细胞（Treg）、Th1/Th2细胞平衡的影响。方法 60只雄性C57BL/6J小鼠,按体质量随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组（0.2 g·kg^-1）,黄芩汤低、中、高剂量组（4.55、9.1、18.2 g·kg^-1）,除正常组外均予以2.5%右旋葡聚糖硫酸钠（DSS）自由饮水5 d诱导UC,连续灌胃给药7 d后处死小鼠,取肠系膜淋巴结（MLNs）和结肠组织,流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结Th17/Treg、Th1/Th2,流式细胞微球芯片捕获技术检测结肠组织白细胞介素（IL）-2、IL-17A、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、γ干扰素（IFN-γ）、IL-4、IL-10等细胞因子含量,对结肠组织样本进行病理切片观察,并采用免疫组化法检测结肠组织中T细胞表达的T-box（T-bet）、GATA结合蛋白-3（GATA-3）、IL-17A、叉头蛋白P3（FoxP3）的表达水平,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠结肠组织中转化生长因子-β（TGF-β）的含量。结果 与正常组比较,模型组Th1、Th17细胞数量显著增高,而Th2、Treg细胞数量显著减少,Th1/Th2和Th17/Treg明显升高（P<0.05,P<0.01）,小鼠结肠组织中T-bet、GATA-3、IL-17A、FoxP3表达明显升高（P<0.05,P<0.01）,细胞因子IL-2、IL-17A、IL-6、TNF-α、IFN-γ的含量明显升高,IL-4、TGF-β、IL-10的含量明显降低（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,黄芩汤各剂量组均能逆转Th1/Th2和Th17/Treg细胞的比例失衡（P<0.01）;黄芩汤低、中、高剂量组均可明显降低小鼠结肠T-bet、GATA-3的表达（P<0.05,P<0.01）,黄芩汤高低剂量组可显著降低IL-17A的表达（P<0.01）;黄芩汤高、中剂量组可显著降低细胞因子IL-2、IL-17A、IFN-γ、IL-6、TNF-α的含量,黄芩汤高剂量组还可明显增加TGF-β、IL-10的含量（P<0.05,P<0.01）。结论 黄芩汤可减轻UC小鼠结肠炎症,改善UC小鼠结肠组织损伤,这可能是通过调节Th17/Treg、Th1/Th2细胞平衡及相关细胞因子水平,调节促炎细胞因子的释放水平来实现的。     

中药对Th1/Th2细胞因子平衡调节作用的研究进展

概述中药对Thl/Th2平衡的调节作用,主要包括中药对自身免疫疾病Th1/Th2平衡的影响、对肿瘤Th1/Th2平衡的影响、对变态反应性疾病Th1/Th2平衡的影响以及对不同中医证型Th1/Th2平衡的影响等。     

千佛菌对老龄小鼠Th_1/Th_2漂移的影响

目的:通过研究千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠外周血Th1、Th2型细胞因子(IFN-γI、L-4)水平及I FN-γ/I L-4比值的影响,探讨千佛菌对衰老机体的免疫调节作用。方法:将小鼠随机分为正常对照组、衰老模型组、千佛菌大、小剂量组。除正常组外,其余均腹腔注射D-半乳糖制备衰老模型。千佛菌大、小剂量组分别以100%和50%药液每只每日0.4 mL灌胃,其余等量生理盐水灌胃。测定血清中IFN-γI、L-4含量并计算IFN-γ/IL-4比值,测定脾脏及胸腺指数。结果:模型组小鼠血清IFN-γI、L-4水平I、FN-γ/IL-4比值、脾脏及胸腺指数均明显降低,与正常组比较P0.001;与模型组比较,千佛菌大、小剂量组IFN-γI、L-4水平、脾脏及胸腺指数均明显升高P0.001I,FNγ/IL-4比值恢复;千佛菌大、小剂量组间IFN-γI、L-4比较P0.001。结论:千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠Th1、Th2型细胞因子水平及IFN-γ/IL-4比值具有升高作用,并能够显著增加小鼠的脾脏及胸腺指数,对D-半乳糖导致衰老的Th1/Th2免疫失衡具有一定的调节作用,能使之趋向恢复正常。     

Anti-asthma effects of synthetic salidroside through regulation of Th1/Th2 balance

AIM： The aim of the study was to investigate the effect and mechanism of action of synthetic salidroside in an ovalbumin （OVA）-induced asthma model in mice. METHOD： BALB/c mice were sensitized with an intraperitoneal injection of ovalbumin （OVA） to induce a mouse model of asthma in paracmasis. The mice were treated with dexamethasone as the positive control. At the end of the study, respiratory reactivity was detected, the numbers of various kinds of white blood cells in the bronchoalveolar lavage fluid （BALF） were counted, and the levels of IL-4 and INF-γ in BALF were determined. Quantitative PCR was used to detect the mRNA contents of IL-4 and INF-γ in lung tissue. Histologic examination was performed to observe inflammatory cellular infiltration. RESULTS： Salidroside treatment virtually eliminated airway hyper-reactivity, markedly reduced the eosinophil percent, obviously reduced the levels of IL-4 and raised INF-γ in the bronchoalveolar lavage fluid （BALF） compared with the sham-treated group. Quantitative PCR on the mRNA content of IL-4 and INF-γ provided confirmation. Lung histologic observations showed that salidroside reduced inflammation and edema. These effects were equivalent to the effects of dexamethasone. CONCLUSION： Synthetic salidroside exhibits an anti-asthma effect which is related to the regulation of Th1/Th2 balance. This provides a new possibility for treatment of allergic asthma.     

围术期异体输血对肺癌患者Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡的影响

目的观察围术期异体输血后肺癌患者外周血CD4+T细胞各亚群Th1、Th2、Th17及Treg细胞相关因子的比例变化。方法将行手术治疗的64例肺癌患者随机分为2组:未辐照组34例术中输入普通悬浮红细胞,辐照组30例术中输入辐照悬浮红细胞,分别于术前及术后14 d应用流式细胞术(FCM)测定2组患者外周血Th1(IFN-γ)、Th2(IL-4)、Th17(IL-17)及Treg(Foxp3)细胞比例。结果术后14 d,2组外周血中Th1、Treg细胞比例和Th1/Th2均明显高于术前(P均<0.05),Th2细胞比例、Th17/Treg均明显低于术前(P均<0.05),且辐照组Th1细胞比例及Th1/Th2、Th17/Treg比值均显著高于未辐照组(P均<0.05),Treg细胞比例低于未辐照组(P<0.05)。结论肺癌患者围术期异体输血后Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡可能与输入异体血中的活性淋巴细胞有关。     

维药神香草对COPD小鼠Th1/Th2 和Th17/Treg 平衡的影响

目的：研究维药神香草对COPD 小鼠Th1/Th2 和Th17/Treg 平衡的影响,探讨神香草治疗COPD 的免疫作用机制。方法：复制前期熏烟法建立COPD 小鼠模型,将小鼠随机分为正常组、生理盐水组、神香草高、中、低剂量组。采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中IFN-酌、IL-4、IL-17 及IL-10 的水平。结果：与正常组比较,COPD 模型组小鼠血清IL-4、IL-17 水平明显升高（P<0.05）,IFN-γ、IL-10 的水平明显降低（P<0.05）;神香草治疗后,与模型组比较,小鼠血清IL-4、IL-17 水平明显降低,IFN-γ和IL-10 水平明显升高。相关性分析表明IFN-γ与IL-4,IL-17 与IL-10 都呈负相关。结论：神香草在纠正Th1/Th2 和Th17/Treg 失衡方面发挥了一定的作用。     

免疫性肝损伤小鼠Th1/Th2细胞的变化

目的:探讨Th1/Th2细胞在免疫性肝损伤小鼠中的作用.方法:应用尾静脉注射卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)建立免疫性肝损伤小鼠模型,分离小鼠淋巴细胞,经佛波醇乙酯(PMA)、离子霉素、莫能菌素刺激培养6小时后,收获细胞,利用细胞内细胞因子染色流式细胞术检测Th2/Th2比例;另外经刀豆蛋白A(ConA)刺激培养72h后,收集培养上清,ELISA法检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的水平,同时观察地塞米松对Th1/Th2细胞的影响.结果:在模型组,随着时间的延长,小鼠外周血PBMC中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ水平逐渐升高,Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平逐渐降低,Th1细胞的百分率逐渐升高,Th2细胞的百分率逐渐降低,Th1/Th2的比值逐渐增大,与肝组织损害程度呈现正相关.地塞米松能够抑制Th1型细胞因子的分泌,降低Th1细胞的百分率,恢复Th1/Th2的比例,对肝组织损害具有保护和改善作用(P＜0.05).结论:Th1/Th2细胞失衡是造成小鼠免疫性肝损伤的原因之一,Th1应答占主导地位.     

外感湿热证患者Th1／Th2细胞因子水平变化的研究

目的：通过观察外感湿热证患者外周血T细胞免疫水平的变化,探讨外感湿热证的部分发病机制。方法：30例均为外感发热患者,辨证属外感湿热证者。正常对照组15例,为同时期健康志愿者。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者与健康者血清白介素4（IL-4）、干扰素γ（IFN-γ）水平,运用蒿芩清胆汤治疗患者3天,复测上述指标,观察蒿芩清胆汤的干预作用。结果：经蒿芩清胆汤治疗后,外感湿热组血清IFN-γ水平显著降低（P〈0．01）,INF-γ,／IL-4比值明显降低（P〈0．01）。结论：提示Th1／Th2比值失衡可能是外感湿热证发病机制之一,调整Th1／Th2失衡是蒿芩清胆汤治疗外感湿热证的机制之一。     

止咳平喘合剂对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子影响的实验研究

目的：观察中药复方止咳平喘合剂对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子的影响,从而进一步深化探讨名老中医经验方的作用机制。方法：随机将60只SD大鼠分为空白对照组、模型组、阳性对照组、止咳平喘合剂大、中、剂小剂量组,每组均为10只,以卵白蛋白（oval albumin,OVA）复制哮喘大鼠模型,采用ELISA方法检测血清中IL-4、IFN-γ含量,取右肺组织行HE染色进行形态学观察。结果：模型组血清中IL-4明显高于空白对照组（P〈0.01）,而IFN-γ明显低于空白对照组（P〈0.01）,存在IL-4/IFN-γ失衡;与模型组相比,阳性对照组、中药大剂量与中剂量组IL-4含量降低（P〈0.05）,而IFN-γ含量均有升高（P〈0.01～0.05）;并且血清IL-4与IFN-γ呈明显负相关（r为-0.974,P〈0.01）。结论：IFN-γ/IL-4的失衡参与哮喘发病过程,止咳平喘合剂可能通过下调IL-4的水平和提高IFN-γ的含量,纠正Th1/Th2细胞因子的失衡,进而减轻气道炎症。     

Th1/Th2 cytokines’ expression and production by propolis-treated mice

Aim of the study

Propolis is a natural product extensively used in food and beverages to improve health and to prevent diseases, showing immunomodulatory properties. The goal of this work was to evaluate the effect of propolis administration over a short-term to mice on Th1 (IL-2 and IFN-γ) and Th2 (IL-4 and IL-10) cytokines’ expression and production.

Materials and methods

Propolis was administered for 3 days to mice by gavage, spleens were removed and RNA was extracted to assess cytokines’ expression by real-time PCR. Supernatants of spleen cell cultures were used for cytokines determination by ELISA.

Results

Propolis administration to mice did not affect IL-2, IL-4 and IL-10 expression and production, while IFN-γ production was inhibited in the splenocyte cultures stimulated or not by Con A.

Conclusions

Since IFN-γ is a pro-inflammatory cytokine, our data suggest that propolis administration over a short-term to mice may be associated with anti-inflammatory effects in vivo, and further assays could check propolis efficiency in inflammatory diseases.