澳洲坚果抗菌肽分离纯化及其肽段鉴定与分析

以液压压榨澳洲坚果粕为原料,采用碱性蛋白酶水解制备澳洲坚果多肽（macadamia nut peptide-0,MNP-0）,以对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌活性为跟踪指标,通过超滤、DA201-C型大孔吸附树脂、交联葡聚糖凝胶Sephadex G-25对其进行逐级分离纯化,获得抑菌活性较强的抗菌肽,并运用液相色谱串联质谱（liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）技术对其进行肽段组成与氨基酸序列分析。结果表明：超滤分离的不同分子量澳洲坚果多肽在所有多肽中所占质量分数不同,抑菌活性也有所差异。其中,澳洲坚果多肽组分MNP-4占比最高,为29.55%;抑菌活性也最强,对金黄色葡萄球菌与白色念珠菌的抑菌圈直径分别为10.01 mm与9.41 mm。大孔吸附树脂纯化多肽组分MNP-4的技术条件为75%乙醇溶液为解吸剂,静态吸附3 h,动态洗脱体积60 mL。经大孔吸附树脂与交联葡聚糖凝胶Sephadex G-25分离纯化,获得3个澳洲坚果纯化多肽（macadamia nut purified peptide,MPP）组...     

林蛙抗菌肽的制备及抑菌活性研究

目的超声波方法提取林蛙表皮多肽,对其氨基酸组成和抑菌活性进行分析。方法以p H 4.5醋酸-醋酸钠缓冲液为提取溶剂,超声波方法提取林蛙表皮多肽,超高效液相色谱(UPLC)方法分析其氨基酸组成,同时采用活菌计数和滤纸片方法测定其抑菌活性。结果超声波方法提取林蛙多肽,提取率为19.81%,多肽分子量在3000~5000 Da,该活性多肽作用2 min对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌抑菌率均可达85%以上,作用5 min抑菌率可达100%;其对4株菌抑菌圈直径均可达10 mm以上。结论采用超声波方法可以从中国林蛙皮中提取抗菌肽物质,该抗菌肽为碱性多肽,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌均具有很强的抑菌活性。     

枸杞提取液的活性成分分析及其抑菌性、抗氧化性

以酒泉枸杞为研究对象,测定其提取液中枸杞多糖、甜菜碱、总酚3种活性成分的含量及不同浓度枸杞提取液的抑菌和抗氧化活性。结果表明:枸杞提取液对鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)、大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有抑制作用,抑菌能力随着枸杞提取液浓度的提高而增强,提取液含量为2.5%时,对大肠埃希氏菌的抑制率超过50%,含量为5.0%时,对鼠伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的抑制率超过50%。通过测定POV值和还原能力得出,枸杞提取液具有抗氧化性:添加5.0%提取液,与添加0.1%BHA猪油的POV值相差不大,添加7.5%提取液,猪油POV值略低于0.1%BHA。吸光度越大,抗氧化性越强,枸杞提取液含量范围为1~10 mg/mL时,A_{700 nm}吸光度范围为0.2760~0.8949。由此可知,枸杞提取物具有较强的抑菌和抗氧化能力。     

丹参提取液体外抑菌活性研究

目的 研究丹参提取液的体外抑菌作用.方法 采用常量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),探讨其体外抑菌作用.采用杯碟法检测丹参不同提取方式、不同灭菌方式以及改变提取液pH值对金黄色葡萄球菌抑菌活性的影响.结果 丹参醇提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞杆菌、短小芽胞杆菌均有抑菌作用,其95%醇提液对上述菌的MIC分别为20,20,40,80,80 mg/mL,对白色念珠菌无抑菌作用.丹参醇提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌抑菌活性较强;不同灭菌方式及改变提取液pH值对金黄色葡萄球菌抑菌活性无差异.结论 丹参提取液具有一定抑菌作用.     

丹参提取液体外抑菌活性研究

目的 研究丹参提取液的体外抑菌作用.方法 采用常量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),探讨其体外抑菌作用.采用杯碟法检测丹参不同提取方式、不同灭菌方式以及改变提取液pH值对金黄色葡萄球菌抑菌活性的影响.结果 丹参醇提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞杆菌、短小芽胞杆菌均有抑菌作用,其95%醇提液对上述菌的MIC分别为20,20,40,80,80 mg/mL,对白色念珠菌无抑菌作用.丹参醇提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌抑菌活性较强;不同灭菌方式及改变提取液pH值对金黄色葡萄球菌抑菌活性无差异.结论 丹参提取液具有一定抑菌作用.     

喙花姜精油体外抑菌活性及其稳定性的研究

采用微波辅助水蒸气蒸馏法提取了喙花姜精油,用滤纸片法研究了其对5种常见肉制品致病菌和腐败菌的抑菌活性,平板涂布法测定了其最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),并分析了pH、温度和NaCl对精油稳定性的影响。结果表明:喙花姜精油对5种受试菌有不同的抑制作用,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌的MIC最低,为3.44mg/mL,铜绿假单胞菌的MIC最高,达到55mg/mL,而对大肠埃希氏菌的MBC为6.88mg/mL,对铜绿假单胞菌的MBC为110mg/mL,表明大肠埃希氏菌对喙花姜精油最敏感,喙花姜精油对铜绿假单胞菌的抑菌效果相对较差。喙花姜精油在酸性条件下表现出较强的抑菌活性,pH为6到8时,5种受试菌的抑菌圈都表现出先减小后增大的趋势;喙花姜精油具有良好的热稳定性,温度对其影响不显著;NaCl可增加喙花姜精油的抑菌效果。     

黄芩、黄连水提物对常见临床耐药菌株的作用研究

目的检测黄芩、黄连水提物对铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌耐甲氧西林株(MRSA)、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌4种常见临床耐药菌的抑菌活性。方法依据NCCLS相关标准,采用微量肉汤稀释法检测抑菌活性。结果黄芩和黄连水提物及有效成分对金黄色葡萄球菌及MRSA抑菌效果较为显著,对大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌效果次之,对铜绿假单胞菌效果最弱;不同比例混合物中,以黄芩、黄连比例为1:2时效果最好。结论不同比例提取物混合物对MRSA均有较好的抑菌效果,对铜绿假单胞菌的抑菌效果则相对较弱。建议临床应用于抑菌时,黄芩、黄连混合比例为1:2。     

抗铜绿假单胞菌南极微生物的筛选、鉴定及其抑菌谱研究

该研究采用稀释涂布平板法从南极团结湖沉积物中分离、纯化南极微生物,采用双层平板法和琼脂扩散法从中筛选铜绿假单胞菌的拮抗菌,通过形态观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析对筛选菌株进行菌种鉴定,并测定其抑菌谱。结果表明,共分离纯化出64株南极微生物,8株对铜绿假单胞菌具有抑制作用,其中菌株NO.TJ31的抑制效果最好,抑菌圈直径达（22.3±0.7） mm,经鉴定,其为弗氏甲基杆菌（Methylobacterium frigidaeris）,菌株NO.TJ31对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、副溶血弧菌、鼠伤寒沙门氏菌、鲍曼不动杆菌、屎肠球菌、肺炎克雷伯氏菌都具有一定的抑制作用,具有较广的抑菌谱。     

马尾松针乙醇/水提取物对食品腐败细菌的抑制活性

以马尾松针为材料,研究其75%乙醇和水提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、变形杆菌、宋内氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌8种食品腐败细菌的抑菌活性。结果表明:75%乙醇和水提取物对供试菌均有显著的抑制作用,其最低抑菌质量浓度(MIC)分别为6.25~12.5mg/mL和12.5~50mg/mL;最低杀菌质量浓度(MBC)分别为12.5~25mg/mL和12.5~50mg/mL。75%乙醇提取物的抑菌活性明显强于水提取物。其热稳定性较好,经121℃湿热处理30min,仅对铜绿假单胞杆菌和沙门氏菌的抑菌活性产生微弱影响。当介质pH≤7时,75%乙醇提取物对供试菌的抑制能力随pH升高而显著下降。当pH7时,除金黄色葡萄球菌之外,对其它供试菌无抑制作用。     

诺丽果、种子和叶提取物抑菌活性及复合植物抑菌液配方筛选

研究诺丽果、种子和叶提取物的抑菌活性。通过考察诺丽果发酵汁、种子乙醇提取物、种子水蒸馏提取物、诺丽叶提取物、金银花提取物分别对铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、变形链球菌4种致病菌的抑菌活性,筛选出了抑菌活性较强的3种提取物(诺丽果发酵汁、种子水蒸馏提取物、金银花提取物)。通过单因素实验、3因素3水平正交实验,优化了复合植物抑菌液的最佳配方。结果表明:以诺丽发酵汁87%、种子水蒸馏提取物8%、金银花提取物5%制成的抑菌液,抑菌圈直径分别为:铜绿假单胞菌15 mm,大肠埃希菌22 mm,金黄色葡萄球菌28 mm,变形链球菌17 mm。抑菌效果较好。结论:复合植物抑菌液具有抑菌的作用,为进一步开发抑菌产品提供理论依据。     

北冰洋来源广谱抗菌海洋细菌的筛选及发酵条件优化

从北冰洋海域沉积物中分离筛选广谱抗菌海洋细菌,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定,并以白色念珠菌（Candida albicans）为指示菌,抑菌圈直径为响应值,通过单因素及响应面试验对其培养条件进行优化。结果表明,分离筛选出一株具有广谱抗菌性的52号菌株,其对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、大肠杆菌（Escherichia coli）、鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）、肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）均有一定的抑制作用,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。52号菌株的最佳培养条件为培养温度36 ℃、培养时间75 h、初始pH值6.5、转速178 r/min。在此最优培养条件下,52号菌株对白色念珠菌的抑菌圈直径为30.23 mm。     

北冰洋来源白色念珠菌拮抗菌株的分离与鉴定

采用涂布平板法、对峙培养法及琼脂扩散法从北冰洋沉积物样品中分离、筛选对白色念珠菌（Canidia albicans）具有良好拮抗作用的菌株,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定,并对其抑菌谱进行研究。结果表明,从北冰洋沉积物样品中共分离纯化出314株菌株,其中,4株菌株对白色念珠菌具有明显拮抗作用,且菌株56#拮抗效果最好,抑菌圈直径为（32.14±0.72） mm。菌株56#被鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,其对大肠杆菌、副溶血性弧菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌、屎肠球菌、金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌都有一定的抑制作用,是一株广谱抗菌的海洋微生物。     

澳洲坚果饼干加工技术研究

以面粉与澳洲坚果粕粉为主要原料,添加奶粉、白砂糖、坚果油等辅料,通过面团揉制、擀压、模具成型、烘烤等工艺,加工出了营养丰富、色泽淡黄、香味浓郁、口感酥脆的澳洲坚果饼干。通过单因素与正交实验确定产品的最佳配方为澳洲坚果粉50%、油脂8%、白砂糖45%、奶粉10%、小苏打0.4%、食盐0.4%、碳酸氢铵1%、鸡蛋10%、水适量,最佳焙烤温度为上火180℃、下火为150℃。     

湄潭白茶多糖提取工艺优化及其抑菌活性研究

本文以湄潭白茶为对象,研究其多糖的提取工艺条件及体外抑菌活性。考察提取温度、提取时间、料液比3个因素对多糖得率的影响,并通过正交试验确定其最佳提取参数:提取温度90 ℃、提取时间4 h、料液比1:20 g/mL,在此条件下湄潭白茶多糖得率为1.163%±0.011%。体外抑菌活性试验结果表明:湄潭白茶多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌均具有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制活性最强,其最低抑菌浓度MIC为3.125 mg/mL。研究成果将为湄潭白茶多糖的进一步研究及新产品开发提供理论指导。     

海洋细菌GM-1-1菌株对白色念珠菌的抗菌作用机理初步研究

为了探究生防解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)GM-1-1菌株无菌发酵液对白色念珠菌(Candida albicans)的抗菌性质及其抗菌作用机理,采用牛津杯法检测其对白色念珠菌的抑菌效果,通过扫描电镜法、MTT法、分光光度法等测定发酵液对白色念珠菌孢子萌发、细胞形态、生物被膜形成、细胞通透性的影响,初步探讨其抗菌作用机理。结果表明,GM-1-1无菌发酵液对白色念珠菌具有明显的抑制作用,抑菌圈直径达39.5 mm,受抑制的白色念珠菌在不含发酵液的培养基上仍可继续生长;无菌发酵液对白色念珠菌的孢子萌发具有强烈的抑制作用;扫描电镜下发现处理后的白色念珠菌细胞表面凹陷,形态不规则,细胞壁残缺;无菌发酵液抑制了白色念珠菌生物被膜的形成,增加了细胞的通透性。本文初步揭示了GM-1-1无菌发酵液对白色念珠菌的抗菌作用机理,为该菌株的进一步研究和应用奠定基础。     

Chemical composition and inhibitory effect of essential oil and organic extracts of Cestrum nocturnum L. on food-borne pathogens

In this study, we examined the chemical compositions of essential oil and tested the efficacy of oil and organic extracts of Cestrum nocturnum L. against food-borne pathogens. The chemical compositions of the oil was analysed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Forty-seven compounds representing 93.28% of the total oil were identified. The oil [5 μL of 1:5 (v/v) dilution of oil with methanol] and organic extracts of hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol (300 μg per disc) of C. nocturnum displayed a great potential of antibacterial activity against Staphylococcus aureus (ATCC 6538 and KCTC 1916), Listeria monocytogenes (ATCC 19166 and ATCC 15313), Bacillus subtilis ATCC 6633, Pseudomonas aeruginosa KCTC 2004, Salmonella typhimurium KCTC 2515 and Escherichia coli ATCC 8739. Also the oil had strong detrimental effect on the viable count of the tested bacteria. The results obtained from this study may contribute to the development of new antimicrobial agents with potential applications in food industries as natural preservatives to control food-borne pathogens.     

不同发酵剂和工艺环节对发酵牛肉调味基料抑菌性的影响

为研究不同发酵剂和工艺条件对发酵牛肉调味基料（fermented beef flavorings,FBF）抑菌性的影响,以金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、大肠杆菌（Escherichia coli）和乙型副伤寒沙门氏菌（Salmonella paratyphi B）为目标菌,添加10% FBF于目标菌中,37 ℃培养12 h,计算其对不同目标菌的抑制率。设计3 组实验：CK组（热压浸提-酶解-美拉德反应）;2）反应Ⅰ组（热压浸提-酶解-发酵）,在发酵环节接种15 种商业复合菌或单株菌;3）反应Ⅱ组（热压浸提-酶解-发酵-美拉德反应）,在反应Ⅰ的基础上继续进行美拉德反应。结果表明：不同工艺制得的处理组FBF,其抑菌能力从强到弱依次为反应Ⅱ组＞反应Ⅰ组＞CK组;CK组对P. Aeruginoosa和S. paratyphi B无抑菌能力,对E. coli的抑制率最高（61%）,其次是S. aureus（20%）和S. typhimurium（11%）;反应Ⅰ制得的FBF除对P. Aeruginoosa无抑制能力外,对其余4 株目标菌的抑制率均提高,其中,以清酒乳杆菌为发酵剂制得的FBF对S. typhimurium的抑制率可达55%;反应Ⅱ制得的15 种FBF对5 株目标菌均有较强的抑菌性,以清酒乳杆菌为发酵剂制得的FBF对S. typhimurium的抑制率达85%,对E. coli的抑制率达53%,以WBL-45为发酵剂制得的FBF对E. coli的抑制率达100%,对S. paratyphi B的抑制率达85%。最终选定WBL-45、清酒乳杆菌为制作FBF的发酵剂,采用热压浸提-酶解-发酵-美拉德反应工艺制作FBF,得到的产品抑菌性较强。     

澳洲坚果粕营养成分测定与氨基酸组成评价

目的:研究分析澳洲坚果粕营养成分的含量与组成。方法:采用氨基酸自动分析仪、凯氏定氮法及蒽酮-硫酸法等方法对澳洲坚果粕中的氨基酸、蛋白质、碳水化合物等营养成分进行了测定。应用氨基酸比值系数法,以WHO/FAO氨基酸参考模式为评价标准,对必需氨基酸的组成进行了评价。结果:澳洲坚果粕含脂肪17.22%、蛋白质24.90%、碳水化合物24.78%、氨基酸17种,总量为17.84%。其必需氨基酸的构成比例基本符合食品法典委员会(FAO/WHO)的标准,氨基酸的比值系数分(SRC)为86.95。结论:澳洲坚果粕营养丰富,人体必需氨基酸种类齐全,配比均衡,是有利于人体氨基酸营养平衡的优质食品原料。