几种生长调节物质及有机附加物对菠萝愈伤组织分化影响的细胞学研究

用菠萝6－74冠芽诱导愈伤组织，在愈伤组织分化过程中进行细胞学研究，观察到菠萝伤组织中薄壁细胞随机分化形成胚性细胞，胚性细胞分裂形成两种分生组织即生细胞团和分生组织结节，它们可以进一步形成器官原基，分化为芽、根、苄氨基嘌呤（BA）对务组织芽的分化起决定性作用，它刺激分生细胞团产生单向极性生长形成芽原基。萘乙酸（NAA）则对根的分化起决定作用，玉米素（ZT）在有BA和NAA的存在下加速了细胞型分裂和分生组织向芽原基的分化，水解乳蛋白（LH）促进芽的分化，但却抑制维管组织结节向根的转化；。酵母提取液（YE）则对两种分生组织的进一步分化都有抑制作用。     

体外诱导人牙龈成纤维细胞多向分化潜能的实验研究

目的 探索人牙龈成纤维细胞（hGFs）是否具有多向分化潜能, 为组织工程学提供新的细胞来源。方法 经志愿者知情同意后收集健康牙龈组织, 组织块法培养 hGFs。取第 3 代 hGFs 进行成骨、 成软骨和成脂诱导, 未分化诱导的细胞为对照组。分别用碱性磷酸酶 （ALP） 染色和茜素红染色、 阿利新蓝染色、 油红 O 染色检测细胞成骨、 成软骨和成脂能力。实时定量聚合酶链反应 （PCR） 检测细胞中成骨分化标志基因 ALP、 runt 相关转录因子 2 （Runx2）、成软骨分化标志基因聚集蛋白聚糖（AGR）和成脂分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARγ2）的表达。结果 成骨诱导组培养至 7 d 时 ALP 染色可见大量的蓝紫色沉淀, 28 d 时细胞周围有大量红染的钙结节沉积,而对照组无钙结节, 培养至 14 d 细胞中 ALP 和 Runx2 表达明显高于对照组（P < 0.01）。14 d 时成软骨诱导组阿利新蓝阳性, 成脂诱导组可见红色的脂肪滴, 而对照组 2 种染色为阴性, AGR、 PPARγ2 表达均明显高于对照组（P <0.01）。结论 hGFs 具有成骨、 成软骨和成脂分化的多向分化潜能。     

肝脏相关巨噬细胞起源及发育分化研究进展

巨噬细胞存在于所有组织且功能具有多样性。巨噬细胞是肝脏中重要组成部分,对维持组织稳定性及对肝损伤做出快速反应具有不可或缺的作用。研究表明组织中成熟的巨噬细胞起源于胚胎。巨噬细胞包含不同亚群。库普弗细胞为原本就定居在肝脏中具自我维持功能的细胞,区别于单核细胞源性巨噬细胞。不同环境信号进一步决定了肝脏巨噬细胞的分化方向和功能。本文重点讨论肝脏巨噬细胞的起源、分类和分化,并简要介绍其功能。     

干细胞在牙齿再生中的应用前景

在生命过程中，有些组织如血液、皮肤、小肠等组织的细胞需要不断地更新。哺乳动物大多数的成体细胞和组织在正常环境下的自我更新能力较低，而千细胞则是一类未分化的、具有无限或永生的自我更新能力的细胞，它能够产生至少一种类型的、高度分化的子代细胞。近年来，随着细胞工程和组织工程的进一步发展，干细胞在细胞治疗、组织器官修复、发育生物学以及牙齿组织工程领域有着极为广阔的应用前景。     

浅谈甲状腺未分化癌的病理诊断

甲状腺未分化癌是恶性程度最高的肿瘤之一,发病率低,但死亡率却极高,多见于老年女性,表现为迅速增大的颈部肿块,有明显周围组织受累症状,易发生早期转移.甲状腺未分化癌的组织学特点取决于梭形细胞、鳞状或上皮样细胞、巨细胞三种成分的构成,细胞多形性明显,核分裂像多见,表现为肉瘤样、表皮样甚至鳞样形态改变,或其他罕见形态变异型.肿瘤细胞通常表达角蛋白和PAX-8,而甲状腺球蛋白(Tg)及转录因子(TTF-1)阴性.分子遗传学改变主要包括信号转导通路上关键节点的突变、染色体异常以及表观遗传学改变.未分化癌的组织学起源尚未完全明确,普遍认为可能是分化好的甲状腺癌去分化的终末阶段.     

ID因子与肺癌关系的研究进展

肿瘤的发生、发展是由于机体正常细胞在不同的始动与促进因素长期作用下产生增生与异常分化而造成的，肿瘤细胞的分化程度与其恶性程度相关并直接影响其预后。分化抑制因子（inhibitors of differentiation，Id）是对细胞的分化、增殖、凋亡具有重要的作用的一类蛋白质，近来研究表明，Id因子在肿瘤的发生、发展中起着重要作用，并与组织类型、恶性程度和患者的预后有关。     

成年大鼠脑膜原代组织干细胞特性细胞的分离及神经诱导分化研究

目的 分离并检测成年大鼠脑膜组织中具有干细胞特性的细胞亚群,探讨其诱导成神经细胞的能力.方法 自成年大鼠活体分离、剪取脑膜经胰酶消化制成细胞悬液,接种于培养皿,用无血清的特殊培养基培养,动态观察脑膜细胞克隆球的形成及分化过程,并用巢蛋白（Nestin）、表面抗原CD133抗体进行免疫荧光染色,对阳性细胞进行表观遗传学鉴定.分离的脑膜细胞经曲古抑菌素A（TSA）诱导培养基分别诱导分化后检测脑膜细胞向神经细胞分化成熟程度,用免疫印迹法（westen blotting）检测诱导分化后脑膜细胞内成熟神经细胞相关标志性蛋白--高分子量神经丝蛋白（NF-200）、神经元蛋白（BM88）的表达情况.结果 成年大鼠脑膜组织体外培养时不同类型细胞的贴壁时间有差异,具有干细胞特性细胞呈球形,黏着在首先贴壁的扁平基底细胞上分裂形成克隆球,克隆球细胞Nestin、CD133免疫荧光染色阳性.诱导分化后NF-200、BM88有明显表达,表明经诱导分化后脑膜细胞可分化为神经细胞.结论 活体分离成年大鼠脑膜组织部分细胞体外培养具有干细胞特性,并可向神经细胞方向分化.     

微环境改变调制干细胞分化的研究进展

干细胞是一类能够自我复制的未分化细胞,具有向多种细胞类型分化的功能.近年来有关干细胞分化的研究备受关注并取得了显著成果.细胞生长微环境中的生物化学和生物物理学因素的改变对干细胞分化方向有显著影响,本文简要综述微环境改变调控干细胞分化的相关进展.     

中药黄芩苷影响人牙周膜细胞增殖的时间效应

牙周膜细胞(periodontal ligament cell,PDLC),是一种具有多向分化功能的群体细胞,具有趋化、黏附、增生、生物合成和分化为成骨细胞、成牙骨质细胞和形成矿化组织等多项生物学功能[1]。牙周膜细胞在牙周组织的再生和修复中起重要作用,但有关黄芩苷对牙周膜细胞增殖影响的研究,     

间充质干细胞研究进展及其临床应用前景

间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）通常是指从骨髓或其他组织中分离到的在体外具有多向分化潜能的一类细胞。自Friedenstein等首次报道骨髓中有少量细胞在培养过程中能贴壁分化形成类似骨、软骨的集落后,人们对这些细胞产生了浓厚兴趣。随后从鼠、兔、犬、人等多种动物的骨髓中均分离到了这种贴壁细胞。它们具有多向分化潜能,在体外不同诱导条件下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞及神经细胞。     

诱导间充质干细胞向心肌细胞分化方法及分化机制进展

干细胞在体外特定条件下,可特异的向某种组织类型细胞进行分化,其中包括向心肌细胞分化。目前,胚胎干细胞(em-bryonic stem cells,ESCs)虽然具有这方面的功能,且其分化效率较一般成体细胞高,但是由于伦理问题限制了其在临床的应用。而间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)不仅取材方便,且没有伦理争议,是最具希望的再生医学种子细胞,引起了人们的极大关注。目前对于体外诱导不同来源的间充质干细胞向心肌细胞分化方法的实验研究很多,主要包括化学试剂诱导和模拟体内微环境诱导两大类。该文就MSCs向心肌分化的体外诱导方法和分化机制的研究进展作一综述。     

人畸胎瘤细胞株PA-1胚胎干细胞生物学特性的鉴定

目的鉴定人畸胎瘤细胞株PA-1的胚胎干细胞生物学特性。方法用碱性磷酸酶染色法鉴定体外培养PA-1细胞的分化水平,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测PA-1细胞多能性基因Nanog、Oct4和Sox2的表达情况。通过悬滴培养法使PA-1细胞形成拟胚体,用RT-PCR法检测拟胚体分化的三胚层特异性基因的表达。通过SCID小鼠体内成瘤实验,用HE染色和免疫组化鉴定PA-1细胞体内接种后三胚层组织的分化。结果体外贴壁培养PA-1细胞碱性磷酸酶染色呈深紫色,PA-1细胞能表达多能性基因Nanog,Oct4和Sox2。悬滴培养PA-1细胞可形成拟胚体(EB),且能够表达三胚层特异性基因(内胚层:Sox17,AFP;中胚层:C-actin,Brachyury;外胚层:Sox1,Pax6)。PA-1细胞接种至SCID小鼠皮下可以形成畸胎瘤,HE染色可见神经外胚层组织,免疫组化可见三胚层细胞表面标志抗原:GFAP(外胚层)、Vimentin(中胚层)及Desmin(内胚层)均呈阳性表达。结论 PA-1细胞在贴壁培养过程中能够保持未分化/低分化状态,并表达多能性基因; PA-1细胞在体内及体外分化实验中均能分化出三胚层的细胞或组织;证明PA-1细胞具有一定的胚胎干细胞生物学特性。     

胎盘间充质干细胞向神经细胞诱导的实验研究

目的间充质干细胞(MSCs)具有自我更新和多向分化能力的特点，尽管其主要来源骨髓间充质干细胞(BMSCs)已被认为是治疗多种疾病的良好细胞来源。但在严重感染或随着年龄的增长骨髓细胞数及增殖、分化能力均明显下降等情况下，就无法顺利获得足量可用于治疗的BMSC，有必要寻找MSC的新来源。方法消化胎盘组织、贴壁培养获得基质细胞；用流式细胞仪检测其细胞表面标志；比较叔丁对甲氧酚(butylated hydroxyanisole，BHA)、复方丹参注射液、β-巯基乙醇(BME)等对培养的基质细胞向神经细胞分化的作用；采用免疫细胞化学的方法对分化的细胞进行鉴定。结果胎盘组织中分离出的基质细胞与骨髓间充质干细胞有相似形态和细胞表面标志，并可诱导表达神经元和星型胶质细胞标志神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolasen，NSE)、神经微丝(neurofilament，NF)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrilament acidic protein，GFAP)。结论胎盘组织中存在能分化为神经元样细胞的间充质干细胞。胎盘间充质干细胞可能是一种可为临床治疗提供丰富新来源的间充质干细胞。     

人绒毛膜来源的间充质干细胞成骨成脂分化潜能

目的:探讨人绒毛膜来源的间充质干细胞(hCDMSC)体外生长特性和成骨成脂分化潜能,证实人绒毛膜来源的间充质干细胞作为组织工程种子细胞的可行性.方法:取胎盘组织基蜕膜面用胶原酶和胰蛋白酶法分离培养,通过传代扩增观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖曲线,体外向成骨、成脂诱导分化,茜素红和油红O染色鉴定细胞分化能力,RT-P...     

创伤继发假性上皮瘤样增生病变中上皮细胞去分化机制的探讨

目的 为探讨创面愈合相关的假性上皮瘤样增生(PEH)病变组织中上皮细胞去分化的发生机制。方法 将11例来自临床创(烧)伤后继发PEH病变及其边缘正常皮肤6例(PEHN)标本，采用组织病理学和电子显微镜技术观察PEH上皮组织形态改变，并结合免疫组化抗原标记技术，观察抗人广谱细胞角蛋白(p-CK)、CKl9、Bcl-2和增殖细胞核抗原(PCNA)在PEH组织中定位和分布特征。结果 与PEH-N组相比，PEH呈现鳞状上皮化生，问质密布微血管结构和炎症免疫细胞，可见表皮结构崩溃和细胞脱落；超微结构显示上皮基底细胞变形和细胞间隙增宽，可见肿瘤样细胞和单核细胞样细胞等异常分化细胞从原细胞浆膜“壳”结构孵出。在相同部位免疫组化显示，对Bcl-2和PCNA的免疫反应活性增强而缺失p-CK和CK19标记的“基底细胞”从p-CK阳性的角蛋白框架内脱出，而在增生性上皮组织中央部位细胞则呈现CK19和Bcl-2强阳性的交织。结论 在PEH组织中丧失分化和表皮结构形成能力的表皮基底细胞呈脱壳样与原细胞浆膜结构分离，是基底细胞去分化的典型形态特征。在上皮-间质交界处形成的特有微环境可能在其中扮演孵化器样作用。     

体外诱导人胚胎干细胞向神经细胞分化的研究进展

研究表明胚胎干细胞（embryonic stemcells,ES细胞）在体外可以发育分化出神经组织细胞,这对于了解神经发育的机制和研究神经组织退化性或脑组织损伤性疾病的治疗具有重要的意义。本文就胚胎干细胞分化为神经组织细胞的常用方法和机制做一综述。     

BMSCs体外培养与向神经元样细胞诱导分化的研究进展

骨髓间充质干细胞(bone marrnw mesenchymal stem cells,BMSCs)是来源于骨髓组织中的非造血细胞,具有来源容易获取、不受伦理限制,广泛的增殖分化能力,易于分离、培养、扩增、纯化,免疫原性弱,免疫耐受性强,体外基因转染率高,并能稳定高效的表达外源基因等优点.因此,BMSC成为一种比较理想的种子细胞,BMSC由于能向神经细胞这种几乎不可再生细胞的分化能力,更是成为研究的热点.近年来BMSCs的体外诱导向神经元样细胞分化的方法和可能的机制取得了很多新的进展和成果,本文就BMSCs体外培养诱导向神经元样细胞分化的进展作一综述.     

干细胞样SP细胞研究进展

摘要： 干细胞样 SP 细胞是近年来在很多正常组织和恶性肿瘤组织及细胞系中发现的一种具有不同程度分化潜能和自我更新能力的细胞群体。虽然 SP 细胞在总体细胞中所占比例很低, 但这部分具有干细胞特性的细胞在干细胞以及肿瘤干细胞研究方面起着越来越重要的作用。本文综述了 SP 细胞的发现、 生物学特性、 与肿瘤干细胞之间的关系以及 SP 细胞的未来临床应用等。最后对 SP 细胞的发展进行了展望。     

癌的分化诱导及分化诱导剂的研究进展

癌的发生与正常细胞的分化受阻有关,成熟过程的改变可导致出现具持续增殖能力的不成熟细胞产生.许多体外建系的人和小鼠白血病细胞在生理的或非生理物质作用下,能被诱导分化成正常或近似正常的细胞,并伴有细胞增殖能力的降低.因此,分化诱导方法有可能单独或联合化疗防治或治疗肿瘤.     

人多能干细胞向上皮细胞分化研究进展

多能干细胞因其能够自我更新、自我复制，并具有分化为三胚层来源细胞的潜力而受到生物学家和临床医生的瞩目。上皮细胞是哺乳动物多数器官的组成部分，也是90%的癌症细胞来源，由于体外扩增困难，对其研究深度不如间质细胞。将多能干细胞诱导分化为上皮细胞可以满足人类疾病建模和研究的需求，并有希望治愈临床相关疾病。来自同一胚层的上皮在发育过程中经历相同的发育阶段，参考已有的上皮分化方案，进一步了解不同胚层来源细胞发育历程，为同类型细胞的诱导提供参考。目前人多能干细胞分化为不同胚层来源的人上皮细胞的方法已建立。文章对至今为止的分化方法、鉴定指标及结果进行总结，以供相关人员参考。