全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质TGF-β1表达的影响

目的观察全反式维甲酸对糖尿病肾病肾小管-间质转化生长因子β1表达的影响。方法24只链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为治疗组（T）,模型组（D）各12只,和12只正常组（N）,T组给予全反式维甲酸20mg/（kg·d）油溶液灌胃,D组和N组分别灌等量的溶剂。4、8周每组各处死大鼠6只,测量24h尿微量清蛋白排泄率、肾重/体重、血肌酐、血糖（BX）。肾组织PAS、Masson s染色。免疫组化方法检测肾小管-间质转化生长因子β1的表达。结果全反式维甲酸可减轻肾小球系膜区基质、细胞的增生,明显缓解肾小管的损伤,肾间质的基质减少。4周尿微量清蛋白的排泄实验组低于模型组（3.08±0.48μg/min VS 3.35±0.56μg/min,P〈0.05）,8周时尿微量清蛋白的排泄率明显低于同期模型组（2.49±0.40μg/min VS 4.53±0.87μg/min,P〈0.01）;肾小管上皮细胞转化生长因子β1的表达明显低于模型组。结论全反式维甲酸可减轻糖尿病肾病肾小管-间质的损害,减少蛋白尿。可能通过抑制转化生长因子β1的表达防止肾间质的纤维化,保护肾功能。     

全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质纤维化的作用及机制

目的 探讨全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质纤维化的作用以及对肾间质转化生长因子β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 24只链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为治疗组(T)、模型组(D)各12只、正常组12只(N),T组给予全反式维甲酸(atRA)(20mg·kg-1·d-1)油溶液灌胃,D组和N组分别灌等量的植物油.4、8周每组各处死大鼠6只,测量24h尿微量清蛋白排泄率、肾重/体质量、血肌酐、血糖(BS).肾组织PAS、Masson染色.免疫组化方法检测肾小管-间质TGF-β1、α-SMA的表达.结果 atRA可减轻肾小球系膜区基质、细胞的增生,明显缓解肾小管-间质的纤维化.4周尿清蛋白的排泄率实验组低于模型组[(3.08±0.48)μg/min与(3.35±0.56)μg/min,P<0.05],8周时尿清蛋白的排泄率明显低于同期模型组[(2.49±0.40)μg/min与(4.53±0.87)μg/min,P<0.01];肾小管上皮细胞TGF-β1的表达明显低于模型组(P<0.01),肾小管-间质α-SMA的表达明显低于模型组(P<0.01).结论 atRA可减轻糖尿病大鼠肾小管-间质的纤维化,减少尿蛋白.可能通过下调肾小管-间质TGF-β1的表达、减少肾小管-间质肌成纤维细胞的数量,防止肾间质的纤维化,保护肾功能.     

全反式维甲酸对大鼠肾间质纤维化的延缓作用及其可能分子机制

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠肾间质纤维化(RIF)的延缓作用及其可能分子机制。方法将36只大鼠随机分为ATRA组、RIF模型组和假手术组,每组12只。ATRA组、RIF模型组大鼠采用左侧输尿管梗阻方法建立RIF模型,假手术组只开腹探及肾包膜。术前1 d,ATRA组给予ATRA灌胃,其余2组灌胃等量生理盐水。于造模后的第2周末和第4周末,每组随机抽取6只大鼠。留取大鼠左侧肾组织,行Masson染色并计算RIF指数,免疫组织化学法检测肾组织维甲酸受体α(RARα)、阻抑素、Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)、纤维连接蛋白(FN)的表达水平,实时荧光定量PCR检测肾脏组织RARα、阻抑素的mRNA表达水平。结果造模后的第2周末和第4周末,假手术组、ATRA组、RIF模型组RIF指数、ColⅣ和FN的蛋白表达水平依次升高,RARα和阻抑素的蛋白、mRNA表达水平依次降低(均P<0.05);在ATRA组、RIF模型组,与第2周末比较,第4周末RIF指数、ColⅣ和FN的蛋白表达水平更高,而RARα和阻抑素的蛋白、mRNA表达水平更低(均P<0.05)。在RIF模型组中,第2、4周末时...     

全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质Prohibitin表达的影响

目的探讨全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾小管-间质Prohibitin表达的影响。方法24只链脲佐茵素（STZ）诱导的糖尿病大鼠，随机分为治疗组（T），模型组（D）各12只和12只正常组（N），T组给予全反式维甲酸20mg／（kg·d）油溶液灌胃，D组和N组分别灌等量的溶剂，4、8周每组各处死大鼠6只，测量尿清蛋白排泄率、肾重／体重、血肌酐、血糖（BS）。肾组织Masson’s染色。免疫组化方法检测肾小管-间质Prohibitin的表达。结果全反式维甲酸可缓解肾小管的损伤，减少肾间质的细胞外基质，4、8周时尿清蛋白的排泄率治疗组分别显著低于模型组（P〈O．01），血肌酐治疗组与同期模型组相比也显著降低。治疗组肾小管．间质Prohibitin的表达上调，明显高于模型组。结论全反式维甲酸可能通过上调肾小管-间质Prohibitin的表达防止肾间质的纤维化，保护肾功能。     

肌成纤维细胞与肾小管间质纤维化

肾小管间质纤维化(RIF)是各种慢性肾脏疾病最后的共同途径,是国内外医学研究的热点问题之一。近年来,有关肌成纤维细胞(MyoF)在RIF形成中的作用备受关注。MyoF具有很强的合成细胞外基质能力,与RIF关系非常密切,并可能成为RIF防治的新靶标,将为研究RIF的发生机制和寻找延缓各种慢性肾脏疾病进展的有效措施提供新的思路。     

肌成纤维细胞与肾间质纤维化

肌成纤维细胞 (ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ)是一种超微结构介于成纤维细胞和平滑肌细胞之间的细胞 ,2 0世纪70年代被Ｇａｂｂｉａｎｉ等命名。其后许多学者对其来源、特征及在疾病发生中的作用等方面做了大量的研究 ,证明肌成纤维细胞在创伤愈合、纤维化形成和肿瘤生物学等方面发挥重要作用。近 10年来 ,各国学者在实验动物模型和人类慢性肾小球疾病中发现肌成纤维细胞与肾间质纤维化的形成和发展关系密切 ,其标志蛋白α 平滑肌肌动蛋白 (α ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ ,α ＳＭＡ)被认为可作为判断多种慢性进展性肾病预后的指标…     

全反式维甲酸对人牙周膜细胞向成骨分化的影响

目的检测全反式维甲酸(AT-RA)对人牙周膜细胞(hPDLCs)向成骨分化的影响。方法原代培养hPDLCs,用噻唑盐(MTT)方法检测AT-RA作用于细胞hPDLCs及对其增殖的影响,用酶动力方法检测对其碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,用茜素红染色方法检测对其形成钙盐沉积的影响。结果 AT-RA不影响hPDLCs的增殖活性,但能增强hPDLCs的ALP活性,并明显促进钙盐沉积。结论 AT-RA可以促进hPDLCs向成骨分化。     

全反式维甲酸对大鼠骨髓间质细胞的诱导分化作用

【目的】探讨全反式维甲酸对大鼠骨髓间质细胞 (BMSCs)的诱导分化作用。【方法】从大鼠骨髓中分离培养间质细胞并传至第 6代 ,诱导前 2 4h加 1μg·L-1碱性成纤维生长因子 (bFGF)入培养液中以促分裂 ,再以反式维甲酸作诱导剂 ,然后观察细胞形态的变化 ,并采用免疫组织化学法 ,对诱导后第 4天的细胞行巢蛋白 (nestin)、神经丝蛋白 (NF)、神经元特异性烯醇化酶 (NSE)表达的检测。对第 8天的细胞行脂肪细胞特异性苏丹Ⅱ染色。【结果】诱导后第 4天的部分细胞不仅在形态上表现为神经元样 ,而且呈nestin、NF及NSE阳性 ;诱导后第 8天的部分细胞呈苏丹Ⅱ染色阳性。【结论】骨髓间质细胞具有多向分化潜能 ,在反式维甲酸作用下 ,可被诱导成神经元样细胞及脂肪细胞。     

全反式维甲酸对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏TGF-β1/Smad3信号通路的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织TGF-β1/Smad3信号通路的影响.方法:雄性Wistar大鼠72只随机分成3组:假手术组、UUO组、ATRA干预组,每组均为24只.UUO组和ATRA组大鼠腹腔注射麻醉后,行左侧输尿管结扎术.在同样的条件下,假手术组只探及肾包膜.ATRA组自...     

全反式维甲酸在慢性肾衰大鼠体内的变化及其意义

目的：外源性全反式维甲酸（all-trans retinoic acid，atRA）能延缓慢性肾衰的病理进程，因此我们在本研究中检测了慢性肾衰时内源性atRA的水平是如何波动的。方法：建立5／6肾大部切除的大鼠肾衰模型，采用反相高效液相色谱仪（RP-HPLC）检测了5／6肾大部切除大鼠不同时间点的血、肾组织atRA的水平。结果：与假手术组（sham）比较，单纯肾大部切除组（NX）血肌酐水平自第10周起明显高于sham组（P〈0．05）。NX组大鼠血浆atRA在第2周有一个明显的升高，第7周降至接近正常或正常以下；NX组肾组织atRA水平自第2周时间点有明显升高，直到第10周才降至接近正常或正常以下，同sham组比较没有差异。sham组大鼠血浆和肾组织atRA的含量比较稳定。结论：正常大鼠血浆和肾组织内有atRA存在，含量比较稳定。5/6肾大部切除后，大鼠血浆和肾组织内atRA在短期内升高，以后明显下降，在中、晚期降至正常水平。     

ATO和ATRA联合化疗治疗急性早幼粒细胞白血病效果观察

目的观察亚砷酸(ATO)、全反式维甲酸(ATRA)和化疗联合治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效和副作用。方法对53例初治APL患者分别采用ATO和ATRA联合化疗诱导缓解。结果完全缓解(CR)率为71.6%,部分缓解(PR)率为13.8%。3年复发率为10.5%。结论ATO联合ATRA与化疗治疗APL患者的缓解高,副作用低和复发率低,是临床上治疗急性早幼粒细胞白血病的首选方案。     

全反式维甲酸对人卵巢癌细胞株HO8910增殖、侵袭能力的影响

目的:观察全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)对体外培养人卵巢癌细胞株HO8910增殖、侵袭能力的影响,为ATRA应用于卵巢癌的临床治疗提供实验依据.方法:选用人卵巢癌细胞株HO8910进行体外培养,以不同浓度的ATRA处理HO8910细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制情况,倒置显微镜进行形态学观察,Transwell小室体外侵袭实验检测细胞侵袭能力.结果:(1)ATRA浓度为10~(-7)～10~(-5)mol/L时,均明显抑制HO8910细胞的增殖(P<0.05),并具有时间-剂量依赖性.24、48、72 h ATRA抑制HO8910细胞增殖的IC_(50)值分别为2.331×10~(-5)、0.998×10~(-6)、0.891×10~(-7)mol/L.(2)倒置显微镜可观察到经10~(-6)mol/LATRA处理的HO8910细胞部分发生形态学的良性分化.(3)体外侵袭实验显示经10~(-6)mol/L ATRA处理的HO8910细胞,穿膜细胞数目明显减少(P<0.05).结论:ATRA能明显抑制人卵巢癌细胞株HO8910的增殖、侵袭能力,有望为ATRA应用于卵巢癌的临床治疗提供新的有效的途径.     

全反式维甲酸对卵巢上皮性癌细胞糖代谢的影响

目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对卵巢上皮性癌细胞株COC2干预后肿瘤细胞内糖代谢的变化及意义,进而从肿瘤能量代谢角度说明ATRA对卵巢上皮性癌的抑制及诱导分化作用产生的机制。方法以不同浓度及作用时间的ATRA对COC2细胞株进行干预,测定细胞质糖原、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)的含量。结果COC2经5μmol/L及10μmol/L ATRA作用后,细胞内糖原含量及SDH的含量增加,LDH含量下降,并与时间呈正比,但两浓度间差异无统计学意义;经1μmol/L ATRA作用后与对照组比较无差异。结论5μmol/L及10μmol/L ATRA作用于COC2癌细胞株后,可产生细胞内糖原及SDH含量增加、LDH含量下降的改变,减缓了肿瘤细胞内的能量代谢,从而达到诱导肿瘤分化、抑制肿瘤生长的作用。     

全反式维甲酸对5/6肾大部切除大鼠肾间质纤维化的影响及其作用机制

 目的  探讨全反式维甲酸 (all-trans retinoic acid,atRA)对5/6肾大部切除 (5/6 nephrectomy,5/6Nx) 大鼠肾小管间质纤维化的作用及其机制。方法  成年雄性SD 大鼠行5/6Nx后2周分为3组:5/6Nx组 (大豆油1 mL·kg-1·d-1,n=11)、 atRA1 组 (atRA 5 mg·kg-1·d-1,n=10)、atRA2组 (atRA 10 mg·kg-1·d-1,n=11),另设Sham组即假手术组 (大豆油1 mL·kg-1·d-1,n=7)。经灌胃给药,每日1次,连续给药12 周。测定24 h尿蛋白量和血肌酐浓度;肾脏病理切片采用VG染色,对肾小管间质纤维化进行评分;用Western blot检测肾皮质中α平滑肌肌动蛋白 (α-smooth muscle actin,α-SMA)和纤溶酶原激活物抑制剂1 (plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)的蛋白表达。结果  术后14 周,atRA显著降低5/6Nx大鼠的24 h尿蛋白量和血肌酐浓度 (P均<0.05)。atRA显著降低该模型的肾小管间质纤维化 (P<0.01)。atRA显著下调该模型的肾皮质α-SMA和PAI-1表达 (P均<0.05),肾小管间质纤维化评分与α-SMA和PAI-1表达均呈显著正相关 (r分别为0.717 6和0.809 8,P均<0.01)。结论  atRA可减少5/6Nx大鼠的尿蛋白水平,抑制肾皮质α-SMA和PAI-1的蛋白表达,从而减轻肾间质纤维化。     

糖尿病大鼠不同阶段心肌内MMP-9与TIMP-1表达及全反式维甲酸的干预作用

目的动态观察糖尿病(DM)大鼠心肌组织内基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达水平的变化及全反式维甲酸(ATRA)对两者的干预作用。方法链脲菌素(STZ)法复制SD大鼠DM模型,将造模成功的大鼠随机分为DM30d组、DM60d组、DM+ATRA处理30d组和DM+ATRA处理60d组。另取同期大鼠作为正常对照,分设对照30d组、对照60d组、对照+AT-RA30d组和对照+ATRA60d组。各组大鼠30d和60d测量心质量/体质量比值,HE染色观察心肌结构的改变,并用免疫组化技术检测心肌组织中MMP-9与TIMP-1表达水平。结果各DM组大鼠心质量、体质量均较各对照组低,而心质量/体质量比值明显升高(均P<0.05),而DM+ATRA组与DM组比较,上述指标明显改善(P<0.05);各DM组大鼠空腹血糖较对照组升高(P<0.05),而DM+ATRA组与DM组比较,差异无统计学意义;各DM组大鼠心肌组织中MMP-9与TIMP-1表达水平均较同期各对照组明显升高(P<0.05),而DM+ATRA组较DM组降低(P<0.05)。光镜下可见DM组心肌结构改变明显,而DM+ATRA组病变减轻。结论高糖状态下,大鼠心肌内MMP-9与TMIP-1表达水平失衡可能是导致大鼠心脏肥大和组织形态改变的原因,ATRA可能通过使心肌内MMP-9与TIMP-1表达恢复平衡而改善心肌重构。     

Notch1在全反式维甲酸诱导的神经干细胞分化中的作用

目的 探究Notch1在全反式维甲酸诱导的神经干细胞分化中的作用,揭示其对神经管发育的影响。 方法 免疫荧光检测神经干细胞标记物——巢蛋白(Nestin)、神经元标记物——神经丝蛋白(NF)、星型胶质细胞标记物——神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞标记物——半乳糖脑苷脂(GALC)及Notch1在上述细胞中的分布。Western blotting检测神经干细胞中Notch1、NF、GFAP、GALC分别在普通分化培养基和全反式维甲酸培养基(ATRA)中1、3、5、7 d的含量。神经干细胞分为4组:将普通分化培养基设为A组,普通分化培养基+DMSO组设为B组,普通分化培养基+DMSO+25 μmol/L γ-内分泌酶抑制剂(γSI)组设为C组,普通分化培养基+DMSO+50 μmol/L γSI设为D组,Western blotting检测各组细胞中Notch1含量。 结果 免疫荧光鉴定Nestin、NF、GFAP、GALC呈阳性,且在上述细胞胞膜上及胞质中有Notch1存在。普通分化培养基中Notch1在第5天较第1天明显增加,NF在第5天较第3天明显降低,GFAP与GALC含量在第5天较第1天明显下降。加入ATRA的普通分化培养基中,Notch1在第7天较第1天明显减少,而NF、GFAP、GALC在第7天较第1天明显增加。加入γSI后,Notch1胞内段NICD含量明显降低。 结论 Notch1信号通路抑制神经干细胞分化,ATRA通过抑制Notch1促进神经干细胞的分化。     

全反式维甲酸、三氧化二砷联合化疗治疗初治急性早幼粒细胞白血病的临床观察

目的观察以全反式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(ATO)双诱导,联合化疗治疗初治急性早幼粒细胞白血病(APL)的疗效。方法对初治APL患者35例以ATRA和ATO进行双诱导,联合DA(柔红霉素+阿糖胞苷)方案化疗,达完全缓解(CR)后,采用DA、MA(米托蒽醌+阿糖胞苷)、HA(高三尖杉酯碱+阿糖胞苷)、MDAra-c(中剂量阿糖胞苷)、ATO序贯治疗,于每疗程化疗结束后连服ATRA 15 d,总治疗时间3年。结果35例初治APL患者中,1例早期死亡,未纳入评价,其余34例中,33例(97.1%)获得CR,1例(2.9%)未缓解(死于重症肺部感染)。2例(5.9%)发生维甲酸综合征(RAS)。随访至2009年5月,复发2例。3年总生存率、无病生存率分别为94.12%、91.18%。结论双诱导联合化疗治疗初治APL疗效可靠,患者可耐受治疗。