针刺对哮喘豚鼠肺内嗜酸细胞凋亡及Fas表达的影响

目的 观察针刺定喘、膏肓、肺俞、丰隆等穴对哮喘豚鼠嗜酸粒细胞(EOS)凋亡及Fas表达的影响。方法 将27只豚鼠随机分成3组，哮喘模型组、针刺组和空白组。造模同时分别针刺，2w后，心脏采血并取肺组织，HE染色，以TUNEL法观测肺内EOS凋亡，以免疫组化观测Fas抗原表达。结果 空白组、模型组少见EOS凋亡及FAS阳性表达，而针刺组见EOS凋亡，有较多的FAS抗原阳性表达的细胞。结论 针刺可诱导哮喘豚鼠的肺内EOS凋亡。     

咳喘膏穴位贴敷对哮喘豚鼠嗜酸细胞趋化因子和组胺的影响

目的观察咳喘膏对哮喘豚鼠嗜酸细胞趋化因子、组胺的影响,探讨其作用机制。方法将豚鼠随机分为对照组,模型组,地塞米松组,咳喘膏穴位贴药1、3、6h组,每组各10例。卵蛋白致敏并诱发哮喘,行穴位贴敷。检测各组嗜酸性粒细胞趋化因子、血组胺水平。结果咳喘膏穴位贴敷各组嗜酸性粒细胞趋化因子、组胺较模型明显减低。结论咳喘膏穴位贴敷可改善豚鼠哮喘气道炎性反应。     

三氧化二砷对哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的：研究三氧化二砷（As2O3)对哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡的影响及其作用机制。方法：豚鼠30只随机分为3组，即对照组、哮喘组和As2O3(2mg/kg)治疗组。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿嘧啶缺口末端标记（TdT-mediated dUTP nick end labelling,TUNEL)技术原位标记细胞凋亡；计算机图像分析技术对气道壁EOS浸润和EOS凋亡进行定量测定。结果：对照组豚鼠气道壁EOS计数（4．4±2．5）个／HP，EOS凋亡指数为（0．42±0．08）％；与对照组比较，哮喘组豚鼠气道壁EOS浸润显著增加（P＜0．01），EOS凋亡指数显著下降（P＜0．01）；As2O3治疗组，气道壁EOS浸润显著下降（P＜0．01），EOS凋亡指数显著增加（P＜0．01），EOS凋亡指数显著下降（P＜0．01）；As2O3治疗组，气道壁EOS浸润显著下降（P＜0．01），EOS凋亡指数明显增加（P＜0．01），并且气道壁EOS浸润数量与EOS凋亡指数之间呈显著性负相关（r=-0.949,P<0.01)。结论：EOS凋亡异常是支气管哮喘的一个重要的发病机制；As2O3通过促进肺内EOS凋亡，下调EOS浸润数量，从而减轻了哮喘气道炎症；小剂量As2O3治疗哮喘既有效又相对安全，具有潜在的应用价值。     

芩荑合剂吸入对哮喘豚鼠气道嗜酸粒细胞凋亡的影响

目的 :研究芩荑合剂对哮喘豚鼠气道嗜酸粒细胞 (Eos)凋亡的影响。方法 :2 4只豚鼠随机分为 3组 ,即对照组、模型组和芩荑合剂吸入组 (1 8ml kg) ,每组 8只 ,以卵蛋白吸入致敏激发制作哮喘豚鼠模型 ,密度梯度分离法分离支气管肺泡灌洗液 (BALF)中Eos ,应用流式细胞术 (FCM)检测其凋亡率。结果 :对照组豚鼠BALF中Eos计数为 0 32± 0 11× 10 9 L ,Eos凋亡率为 14 1±4 2 % ;与对照组比较 ,模型组豚鼠BALF中Eos显著增加 (P <0 0 1) ,Eos凋亡率显著下降 (P <0 0 1) ;芩荑合剂吸入组同模型组相比 ,BALF中Eos显著减少 (P <0 0 1) ,Eos凋亡率显著增加 (P <0 0 1) ,且BALF中Eos数量与Eos凋亡率呈显著性负相关 (r=- 0 895 ,P <0 0 1)。结论 :Eos凋亡异常是支气管哮喘的一个重要的发病机制 ;芩荑合剂吸入可促进气道内Eos凋亡 ,减少Eos聚集 ,从而减轻哮喘气道炎症。     

三拗汤加味对哮喘豚鼠肺内嗜酸细胞凋亡的影响

目的:观察三拗汤加味(SATJW)对哮喘豚鼠肺内EOS凋亡的影响.方法:60只豚鼠分为正常组、哮喘模型组、中药3个剂量组及博利康尼组,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿嘧啶缺口末端标记(TdT-mediated dUTPnick end labelling,TUNEL)技术原位标记细胞凋亡,计算机图像分析技术对气道壁EOS浸润和EOS凋亡进行定量检测,电镜观察BALF中凋亡细胞形态学改变.结果:哮喘模型组豚鼠支气管壁浸润显著增多.肺内凋亡细胞较少;各SATJW组EOS的浸润量较哮喘模型组有明显降低,凋亡较哮喘模型组明显.BALF中SATJW组电镜下见嗜酸性细胞染色质浓缩、边集、聚集在核膜周边.胞核发生固缩,胞膜皱缩等凋亡现象.结论:SATJW在哮喘发生过程中有诱导EOS凋亡的作用.     

二硫化二砷诱导哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的研究

目的观察二硫化二砷(As2S2)诱发哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡的作用。方法采用卵白蛋白制备哮喘豚鼠模型并激发哮喘,提取肺泡灌洗液并分离其中的嗜酸细胞。将嗜酸细胞悬浮生长于含10%小牛血清的RPMI 1640培养液中,嗜酸细胞初始浓度均为2×109L-1。A组As2S2以1.406 3 mg/L终浓度分别加入细胞培养液中培养3,6,12,24,48 h。B组将As2S2终浓度调整为0.04,0.09,0.18,0.35,0.70,1.41,2.81 mg/L,培养6h。2组均以不加As2S2为对照。Wright’s染色、透射电子显微镜观察嗜酸细胞的形态学变化。流式细胞仪检测观察嗜酸细胞凋亡率。结果嗜酸细胞与As2S2作用6 h后,Wright’s染色、透射电子显微镜均观察到嗜酸细胞出现凋亡的形态学改变。将嗜酸细胞与终浓度为1.406 3 mg/L As2S2在培养基中分别培养3,6,12,24,48 h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着As2S2作用时间的延长而先升高,于24 h达最高,凋亡率为27.19%,而后下降。各不同时间组嗜酸细胞凋亡率与对照组比较均有显著性差异。将嗜酸细胞与不同终浓度As2S2在培养基中分别培养6 h后,流式细胞检测可见嗜酸细胞凋亡率随着As2S2浓度的增加而升高,各不同浓度组嗜酸细胞凋亡率与对照组比较亦均有显著性差异。结论As2S2可促进哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸细胞凋亡,随着As2S2作用时间的延长和浓度增加这种作用更明显。     

麻芩咳喘合剂对哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞及其阳离子蛋白的影响

[目的]通过观察中药麻芩咳喘合剂对哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞(Eos)及其阳离子蛋白(ECP)的影响,初步探讨该方治疗支气管哮喘的作用机制。[方法]二级Hartley雄性豚鼠60只随机分为正常对照组、模型组、泼尼松组和麻芩咳喘合剂组,镜下观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中Eos数量变化,并采用放免法测定血清ECP浓度。[结果]麻芩咳喘合剂组BALF中Eos计数明显低于模型组和泼尼松组,而血清ECP的分布与模型组比较亦有显著性差异。[结论]中药麻芩咳喘合剂可能具有减少哮喘豚鼠体内Eos数量和抑制Eos活化的双重作用。     

中药咳喘方对哮喘豚鼠肺组织病理学影响的研究

[目的]以卵蛋白致敏的哮喘豚鼠为动物模型,观察中药咳喘方对哮喘豚鼠肺组织病理学变化的影响.[方法]正常雄性豚鼠60只,体质量(300±20)g,随机分为正常对照组、模型组、泼尼松组、咳喘方组,每组各15只.验组分别给予泼尼松、咳喘方水煎剂(黄芩、地龙、杏仁、麻黄、当归、细辛、半夏等),连续灌胃给药14 d,观察实验动物肺组织病理学变化.[结果]对照组肺及支气管结构正常,各级支气管上皮完整,肺泡间隔正常,少量炎细胞浸润.模型组支气管管腔狭窄,管壁增厚,黏膜皱襞增多,部分脱落;杯状细胞明显增加;气道壁大量嗜酸性粒细胞浸润;肺泡间隔增宽,其中可见嗜酸性粒细胞;部分肺泡腔变小.泼尼松组支气管黏膜皱襞增多,部分脱落,管壁轻度增厚,管腔轻度狭窄.咳喘方组支气管黏膜上皮轻度增厚,气道壁炎细胞浸润较轻,肺泡间隔明显变薄,肺泡腔趋于正常,其间有少量嗜酸性粒细胞浸润.[结论]中药咳喘方能显著改善哮喘豚鼠肺组织病理学变化,其作用优于泼尼松组.     

柴朴汤对哮喘豚鼠肺内嗜酸粒细胞凋亡及气道重塑的影响

目的:研究柴朴汤对哮喘豚鼠肺内嗜酸粒细胞(EOS)凋亡及气道重塑的影响。方法:将2 7只豚鼠随机分成三组,每组9只:即对照组,模型组,柴朴汤组。以HE染色观察气道重塑,以TUNEL法标记肺内EOS凋亡,以免疫组化标记Fas抗原表达。结果:模型组EOS凋亡指数(0 14±0 0 2 ) % ,Fas抗原表达(1 2 9±1 86 ) %细胞,柴朴汤组EOS凋亡指数(2 6 3±0 35 ) % ,Fas抗原阳性表达(8 11±3 6 ) %的细胞,两组有显著性差异(P <0 0 5 ) ,并且EOS凋亡指数与表达Fas阳性的细胞比例呈显著正相关;柴朴汤组气道重塑指标明显低于模型组,两组相比有显著性差异(P<0 0 5 )。结论:柴朴汤可诱导哮喘豚鼠的肺内EOS凋亡,抑制气道重塑。     

咳喘灵对实验性豚鼠哮喘模型支气管——肺泡灌洗液嗜酸细胞Fas-mRNA及bcl2-mRNA表达的影响

研究咳喘灵对实验性豚鼠哮喘模型支气管—肺泡灌洗液嗜酸细胞凋亡基因Fas-mRNA及bc l2-mRNA表达的影响。方法:按文献造模,将豚鼠随机分哮喘模型组、强的松组、中药组、空白对照组。用原位杂交法检测治疗前后各组豚鼠支气管—肺泡灌洗液嗜酸细胞Fas-mRNA、bc l2-mRNA的表达,用HPIAS-1000彩色病理图文分析系统进行分析。全部数据使用SPSS10.0统计软件进行统计学处理。结果:中药组与强的松组均较空白对照组及哮喘模型组豚鼠支气管—肺泡灌洗液嗜酸细胞Fas-mRNA表达显著增多;bc l2-mRNA表达显著减少,P<0.05;中药组较强的松组Fas-mRNA表达显著增多,P<0.05。     

针刺“足三里”对哮喘大鼠嗜酸细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:观察针刺"足三里"对脾虚哮喘和哮喘大鼠的效应差异,并探讨其作用机制。方法:60只SD大鼠按体质量随机分为5组:脾虚哮喘组、脾虚哮喘针刺组、哮喘组、哮喘针刺组、正常对照组,每组12只。前两组先建立脾虚模型,之后与哮喘组及哮喘针刺组一起均采用卵蛋白诱发哮喘动物造模方法,建立大鼠脾虚哮喘结合模型和哮喘模型,正常对照组以同等剂量的生理盐水进行处理。脾虚哮喘针刺组和哮喘针刺组均针刺"足三里"穴进行治疗,每日1次,连续治疗8d,其他组不予治疗干预。采用原位杂交法检测肺组织中Fas基因(mRNA)、Bcl-2mRNA的表达。以脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)进行肺组织细胞凋亡的检测。结果:与正常对照组比较,脾虚哮喘组和哮喘组均显示为Fas mRNA表达明显减少和Bcl-2mR-NA表达增多(均P<0.01)、嗜酸细胞(EOS)计数显著增多和EOS凋亡率下降(均P<0.01);与哮喘组比较,脾虚哮喘组的Fas mRNA表达明显减少、Bcl-2mRNA表达增多(均P<0.01)、EOS计数明显增多(P<0.01);与两对应的哮喘组比较,两针刺组的Fas mRNA表达明显增多和Bcl-2mRNA表达显著减少(均P<0.01)、EOS计数显著减少和EOS凋亡率明显升高(均P<0.01);哮喘针刺组与脾虚哮喘针刺组比较,Fas mRNA和Bcl-2mRNA的表达无明显差异(均P>0.05),哮喘针刺组的EOS计数显著下降、EOS凋亡率显著提高(均P<0.01)。结论:针刺"足三里"均可调整脾虚哮喘和哮喘状态下Fas mRNA和Bcl-2mRNA表达的失衡状态,促进EOS的凋亡,从而抑制哮喘炎性反应的进一步发展;针刺"足三里"在调整脾虚哮喘EOS相关基因表达失衡上具有一定的优势。     

加味过敏煎对支气管哮喘大鼠嗜酸性粒细胞凋亡及Fas、Bcl-2调节作用的研究

目的:观察支气管哮喘大鼠模型肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)的凋亡及其调控蛋白Fas、Bcl-2的表达,探析加味过敏煎对模型的干预作用。方法:将50只大鼠随机分为空白组、模型组、加味过敏煎组、激素组、加味过敏煎联合激素组,每组10只。用氢氧化铝/卵蛋白[Al(OH)₃/OVA]致敏,雾化吸入含OVA的0.9%氯化钠溶液激发,建立哮喘模型。各治疗组均给予相应药物连续灌胃14 d,并在灌胃治疗后雾化含OVA的0.9%氯化钠溶液激发,每次雾化20 min,连续雾化7 d。模型组与空白组均用0.9%氯化钠溶液进行灌胃与雾化。采用TUNEL免疫荧光染色法观察肺组织中EOS凋亡情况;免疫印迹法、免疫组化法检测肺组织中Fas、Bcl-2蛋白的表达情况。结果:模型组大鼠肺组织中EOS计数显著增加,EOS凋亡率明显降低,Fas蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白表达显著增高(P<0.05);治疗后,各治疗组大鼠肺组织中EOS凋亡率均有不同程度的增高,Fas蛋白表达均增高,Bcl-2蛋白表达均降低,其中以加味过敏煎联合激素组变化程度最明显(P<0.05)。结论:加味过敏煎可能通...     

平喘汤对发作期支气管哮喘患者肺功能的影响

目的观察平喘汤对发作期支气管哮喘患者肺功能的影响。方法将93例支气管哮喘患者随机分为对照组和治疗组;对照组44例给予西医常规治疗,治疗组49例在常规治疗基础上加用平喘汤口服;疗程14天。结果治疗组的临床控制率为63.27%,明显高于对照组的43.18%(P<0.01);治疗后两组患者肺功能均有明显改善(P<0.05),且治疗组肺功能改善优于对照组(P<0.05)。结论平喘汤可明显改善发作期支气管哮喘患者的肺功能。     

平喘灵对哮喘大鼠嗜酸性粒细胞计数及凋亡的影响

目的:探讨平喘灵冲剂对哮喘的治疗作用及其机制。方法:用卵蛋白雾化吸入致敏法,复制大鼠哮喘模型;将SD大鼠分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组、平喘灵大、小剂量组,共5组;取血清及肺泡灌洗液进行嗜酸性粒细胞(Eos)计数,肺组织制作切片HE染色形态学观察,并采用免疫组织化学法技术检测肺组织Fas、Bcl-2的表达。结果:模型组较空白组血液中和肺泡灌洗液(BALF)中Eos的数量均明显升高,引喘潜伏期明显缩短(P<0.05),组织形态学病变明显,气道Eos等炎症细胞Fas、Bcl-2表达异常;激素组及平喘灵大剂量治疗组较模型组血液中和BALF中Eos的数量明显降低,引喘潜伏期明显延长(P<0.05),组织形态学改善明显,并可纠正气道Eos等炎症细胞Fas、Bcl-2的异常表达(P<0.05)。结论:平喘灵可通过调节气道Eos炎症细胞Fas、Bcl-2的异常表达从而达到治疗哮喘的目的。     

咳喘口服液治疗支气管哮喘的临床研究

[目的]评价咳喘口服液治疗支气管哮喘的临床疗效和安全性。[方法]采用随机对照方法，对160例支气管哮喘患者进行了临床试验，治疗组(咳喘口服液组)103例，对照组(泼尼松组)57例。[结果]治疗组和对照组总有效率分别为86．4％、84、2％，两者无显著性差异，但在肺功能改善方面治疗组优于对照组。临床试验中未发现不良反应。[结论]咳喘口服液治疗支气管哮喘疗效确切，临床用药安全。     

咳喘灵对实验性豚鼠哮喘模型支气管-肺泡灌洗液嗜酸细胞Fas—mRNA及bcl2-mRNA表达的影响

研究咳喘灵对实验性豚鼠哮喘模型支气管-肺泡灌洗液嗜酸细胞凋亡基因Fas—mRNA及bcl2-mRNA表达的影响。方法：按文献造模，将豚鼠随机分哮喘模型组、强的松组、中药组、空白对照组。用原位杂交法检测治疗前后各组豚鼠支气管-肺泡灌洗液嗜酸细胞Fas—mRNA、bcl2-mRNA的表达，用HPIAS-1000彩色病理图文分析系统进行分析。全部数据使用SPSS10．0统计软件进行统计学处理。结果：中药组与强的松组均较空白对照组及哮喘模型组豚鼠支气管-肺泡灌洗液嗜酸细胞Fas—mRNA表达显著增多；bcl2-mRNA表达显著减少，P〈0．05；中药组较强的松组Fas—mRNA表达显著增多，P〈0．05。     

亚砷酸对人肺腺癌细胞株TNF-α、Fas、bcl-2表达的影响

目的观察亚砷酸(As2O3)对人肺腺癌细胞株(LAC)TNF-α、Fas及bcl-2表达的影响,以探讨亚砷酸诱导肺癌细胞凋亡的机制。方法以双抗体夹心ABC-ELISA法定量检测体外培养的人肺腺癌细胞株中TNF-α、Fas、bcl-2的表达情况。结果与空白对照组相比,各浓度组As2O3作用于人肺腺癌细胞株72h后,bcl-2蛋白表达无明显变化(P>0.05);但TNF-α、Fas表达增加,且各浓度组相比差别有显著意义(P<0.05)。结论不同浓度As2O3作用于人肺腺癌细胞株72h后bcl-2表达无明显变化,但TNF-α、Fas蛋白表达增加,且与浓度有相关性,表明其诱导肺癌细胞凋亡机制可能是通过上调促凋亡基因TNF-α、Fas表达来实现的。     

麻杏石甘汤对哮喘大鼠肺组织中Sec1413表达的影响

[目的]研究麻杏石甘汤及其主要成分对哮喘模型大鼠肺组织中Secl413表达的影响。【方法】70只大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、麻杏石甘汤组、麻黄组、杏仁组、甘草组,每组10只,第0、7天腹腔注射卵蛋白致敏,第14天开始雾化并给予药物,连续两周。最后一次雾化24h后测肺泡灌洗液（BALF）中炎症细胞数、病理观察气道炎症变化、实时定量聚合酶链反应（PCR）检测大鼠肺组织中Sec1413mRNA的水平。【结果】与正常组相比,模型组BALF中自细胞总数、嗜酸细胞、中性粒细胞数明显升高,肺组织中可见大量炎性细胞浸润及气道上皮细胞损伤,Sec1413mRNA表达量明显减少,有统计学意义差异;与模型组相比,麻杏石甘汤组、地塞米松组、甘草组BALF中白细胞总数、嗜酸细胞、中性粒细胞数目明显减少,肺组织中未见大量炎性细胞浸润及上皮细胞损伤,Sec1413mRNA量明显增加,差异有统计学意义,而麻黄组、杏仁组的上述各项指标与模型组相比无统计学意义差异。[结论]麻杏石甘汤及甘草能够有效减轻哮喘大鼠气道炎症的程度,其机制可能与调控Sec1413在肺组织的表达水平,增强气道保护作用有关。