肺癌p53蛋白表达和基因突变与临床病理的相关研究

目的 检测肺癌中ｐ５３蛋白表达和基因突变状况及其与临床病理和预后的相关性。方法：应用免疫组织化学（ＬＳＡＢ法）和聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）二种方法。结果 检测肺鳞癌４６例，共９５例。免疫组化ｐ５３蛋白总阳性率为５０．５％（４８／９５例），肺鳞癌阳性率为５６．５％（２６／４６例）、肺腺癌为４４．７％（２２／４９例）。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测ｐ５３基因突变率为４１．１％（３９／９     

肝癌组织中N—ras基因突变和p53蛋白表达

目的：研究Ｎ－ｒａｓ和ｐ５３基因与肝癌发生，发展的关系。方法：应用多聚酶链反应－单链构象多态性分析法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）和免疫组化法，检测２９例肝癌中的Ｎ－ｒａｓ基因突变和ｐ５３蛋白的表达。结果，１３例肝癌ｐ５３蛋白阳性（４４．８％），表明广西地区肝癌中曾普遍存在ｐ５３基因的突变，肝癌及癌旁组织中Ｎ－ｒａｓ基因在第２～３７密码子间的突变率分别为７９．３１％和８０．７７％，２２例有２个以上突变位点（     

bcl—2,p53蛋白及PCNA表达与横纹肌肉瘤临床病…

目的：研究横纹肌肉瘤（ＲＭＳ）中ｂｃｌ－２、ｐ５３、ＰＣＮＡ表达与其临床病理的相关性。方法：对５０例横纹肌肉瘤进行免疫组化ＡＢＣ法标记。结果：ｂｃｌ－２、ｐ５３基因蛋白和ＰＣＮＡ，发现ｂｃｌ－２、ｐ５３、ＰＣＮＡ阳性表达率分别为２８％、７２％、７０％，其阳性表达与年龄、性别及不同组织类型的ＲＭＳ无关。但民分化程度有关，Ｐ５３、ＰＣＮ在低分化ＲＭＳ阳性率分别为８５％、９５％，显著高于 化ＲＭＳ４２．     

bcl-2、p53蛋白及PCNA表达与横纹肌肉瘤临床病理相关性研究

目的：研究横纹肌肉瘤（ＲＭＳ）中ｂｃｌ－２、ｐ５３、ＰＣＮＡ表达与其临床病理的相关性。方法：对５０例（随访４１例）横纹肌肉瘤进行免疫组化ＡＢＣ法标记。结果：ｂｃｌ－２、ｐ５３基因蛋白和ＰＣＮＡ，发现ｂｃｌ－２、ｐ５３、ＰＣＮＡ阳性表达率分别为２８％、７２％、７０％，其阳性表达与年龄、性别及不同组织类型的ＲＭＳ无关（Ｐ＞０．０５）。但与分化程度有关，ｐ５３、ＰＣＮＡ在低分化ＲＭＳ阳性率分别为８５％、９５％，显著高于高分化ＲＭＳ４２．８％和１４．３％（Ｐ＜０．０５），随访存活１年以内的ｐ５３、ＰＣＮＡ阳性率均为８６．７％，亦明显高于存活超过３年以上的阳性率３３．３％和４１．７％（Ｐ＜０．０５）。而ｂｃｌ－２在低分化ＲＭＳ阳性２０％显著低于高分化７１．４％（Ｐ＜０．０５），随访存活１年以内的阳性率１３．４％明显低于存活超过３年以上的４１．４％（Ｐ＜０．０５）。ｐ５３与ｂｃｌ－２阳性表达呈明显负相关，ｐ５３阳性率越高，而ｂｃｌ－２阳性率越低。结论：ＰＣＮＡ、ｐ５３、ｂｃｌ－２蛋白表达能比较准确地反映ＲＭＳ的生物学特性，ｐ５３、ｂｃｌ－２可作为肿瘤预后显著相关的有效指标。     

大肠腺癌p53基因cDNA突变与突变型p53基因蛋白表达的相互关系和意义

目的：探讨大肠腺癌突变型ｐ５３基因蛋白表达与ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变间的相互关系和意义。方法：对１００例新鲜大肠腺癌组织采用ＰＡｂ２４０单克隆抗体免疫组织化学染色（ＬＳＡＢ法）检测突变型ｐ５３基因蛋白表达、ＲＴ－ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变，并比较它们间相互关系。结果：１００例大肠腺癌中，７６例ＰＡｂ２４０单抗阳性（７６％），５１例ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变阳性（５１％）；ＰＡｂ２４０单抗反应与ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变比较，两者皆阳性４９％，两者中一者阳性２９％，两者皆阴性２２％（Ｐ＜０．０００１）。结论：ｐ５３基因ｃＤＮＡ突变与其基因蛋白产物结构改变高度吻合，大肠腺癌ｐ５３基因ｍＲＮＡ（ｃＤＮＡ）突变是参与和影响突变型ｐ５３基因蛋白结构改变和生物学行为的主要因素     

肺癌p53基因突变与临床病理关系的研究

目的；探讨肺癌Ｐ５３基因突变与临床之关系：方法：采用ＰＣＲ－限制性惩段长度多态性分析法（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）检测４７ 肺癌Ｐ５３基因２４９位密码为突变；结果：非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＳ）Ｐ５３基因２４９位密码子突变率２４．２４％，小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）突变率为０（０／１４）。Ｐ５３基因２４９位密码了点突变与肺癌分期、组织分化、吸烟无关，与ＮＳＣＬＣ淋巴结转移有关；结论：Ｐ５３基因２４９位密码子突变是Ｎ     

肺小细胞癌p53基因分析mdm—2基因蛋白表达的关系

目的：探讨肺小细胞癌（ＳＣＬＣ）的ｐ５３基因改变的ｍｄｍ－２基因的蛋白表达的关系。方法：应用免疫组化ＬＳＡＢ法和聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析的方法,对１４例ＳＣＬＣ的石蜡切片组织进行研究。结果：免疫组化染色ｐ５３蛋白阳９例,阳性率为６４．３％（９／１４）;ｍｄｍ－２蛋白阳性４例,阳性率为２８．６％（４／１４）。ｐ５３基因海５、６、７、８外显子,突变率分别为２１．４（３／１４     

大肠腺瘤与腺癌P21,P53,P185蛋白表达及ras,p53基因突变的检测

应用免疫组化及ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测３０例大肠腺瘤、７４例大肠腺癌及癌旁粘膜Ｐ２１、Ｐ５３、Ｐ１８５蛋白表达及ｒａｓ、ｐ５３基因突变。结果表明，大肠腺瘤Ｐ２１、Ｐ５３蛋白阳性率（５３．３％，２７．６％）高于癌旁粘膜（Ｐ＜０．０１），二者过度表达与腺瘤恶性倾向有关。大肠腺癌Ｐ２１、Ｐ５３及Ｐ１８５蛋白阳性率（７２．９％，３７．８％，４７．２％）皆高于腺瘤Ｉ级不典型增生（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５及Ｐ＜０．０５）。９例腺瘤，４０例腺癌存在两种以上蛋白表达，共同表达与腺瘤恶性倾向及腺癌预后有关。大肠腺瘤及腺癌ｒａｓ基因突变率分别为２６．７％及４１．９％，ｒａｓ基因突变与腺瘤恶性倾向有关。大肠腺瘤及腺癌ｐ５３基因２４８位点突变率分别为３．３％及１４．９％。６例腺癌存在两种基因突变，两种基因协同突变与大肠癌预后有关。提示ｒａｓ、ｐ５３及ｃ－ｅｒｂＢ－２基因改变均参与了大肠癌的发生、发展过程。     

30例结直肠癌p53基因突变的初步研究

为了解结直肠癌ｐ５３基因突变的情况，应用聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术对３０例人结直肠癌中ｐ５３基因第５、６、７、８外显子进行检测，发现１６例（５３．３３％）存在ｐ５３基因突变，其中第７外显于７例，第５外显子４例，第６外显子３例，第８外显子２例。结果表明：（１）结直肠癌中普遍存在ｐ５３基因突变；（２）ｐ５３基因突变与结直肠癌的发生和发展有关；（３）ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术是一种敏感、可靠且简便、快速和经济的方法，尤其适用于临床实验室进行大规模的样本筛选。     

p^53基因与Rb基因在卵巢癌组织中突变的初步分析

为了解卵巢癌组织中抗癌基因Ｐ＾５３与Ｒｂ基因的突变情况，我们把ＰＣＲ单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术及ＰＣＲ－ＤＮＡ直接测序方法应用于５７例卵巢癌组织细胞的检测，结果发现ｐ＾５３基因可能的突变率为３２％，Ｒｂ基因可能的突变率为２１％，不同分化程度肿瘤的Ｐ５３及Ｒｂ基因突变率未见明显区别，结论：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ角染技术是筛查基因突变简便，敏感，无核素污染的最佳方法，而ＰＣＲ－ＤＮＡ直接测序仪     

p53依赖的X-连锁凋亡抑制蛋白调节与卵巢癌顺铂耐药的关系

目的本研究旨在探讨X-连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法应用RT—PCR、Western Blot、流式细胞仪等检测卵巢癌顺铂敏感细胞株0V2008、A2780s和耐药株C13＊、A2780cp中XIAP表达和卵巢癌细胞的凋亡率,并将反义XIAP寡核苷酸（XIAPAs—ODN）、正义XIAP寡核苷酸（XIAPs—ODN）和随机对照链导入顺铂耐药细胞C13＊（p53野生型）和A2780cp（p53突变型）中,比较转染前、后耐药细胞Caspase-3活性和顺铂耐药性的改变。结果卵巢癌顺铂敏感细胞和耐药细胞中XIAP在mRNA水平的表达无明显差异（P〉0．05）。顺铂可以引起OV2008和A2780s中XIAP蛋白表达明显下降（P〈0．05）,而对C13＊和A2780cp的XIAP蛋白含量无明显影响（P〉0．05）。转染XIAPAs—ODN可降调p53野生型耐药细胞C13＊中XIAP的表达,并显著增加Caspase-3活性和对顺铂敏感性（P〈0．05）,而XIAP As—ODN对p53突变型耐药细胞A2780cp无此作用。结论卵巢癌细胞对顺铂产生耐药可能与XIAP蛋白相对高表达有关,反义XIAP可在一定程度上逆转卵巢癌顺铂耐药,该作用与卵巢癌细胞的p53表型有关。     

直肠癌远端移行粘膜p53、k-ras基因突变的检测及其临床意义

运用聚合酶链式反应一单链构象多态性分析(PCR-SSCP)方法,通过对直肠癌切除标本远端移行粘膜p53、k-ras基因突变的检测,界定远端移行粘膜存在的范围.直肠癌根治术标本54例,于自然张力下取肿瘤下缘1.0cm(A组)、2.0cm(B组)、3.0cm(C组)粘膜标本,对照组(D组)40名正常直肠粘膜取自痔上粘膜环切吻合术(PPH)标本,采用PCR-SSCP法分别检测各标本的p53、k-ras基因突变情况.结果显示,A、B组基因突变率无显著性差异(P=0.321),与对照组有显著性差异(P=0.012),C组基因突变率与A、B组有显著性差异(P=0.002),与对照组无显著性差异(P=0.072).按病例分析,54例p53突变者占35.2%(19/54);k-ras突变者占20.4%(11/54);44.4%(24/54)发生至少一种基因突变,6例(11.1%)出现p53和k-ras基因同时突变.突变的发生与患者年龄、性别、癌肿大小、病理类型、TMN分期等因素均无关.直肠癌远端移行粘膜p53、k-ras突变多位于2cm内,3.0cm处与正常粘膜无显著性差异,可以界定为分子遗传学上的远端最小安全切缘.     

p53对缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞演变的影响

目的：观察缺血再灌注损伤（ischemia/reperfusioninjury,IRI）后,低龄和高龄p53（＋/＋）和p53（-/-）鼠肾小管上皮细胞的演变,探讨p53基因对IRI后肾小管上皮细胞演变的影响。方法：分别建立低龄（2月龄）和高龄（12月龄）p53（＋/＋）和p53（-/-）鼠左肾IRI模型。于IRI后0d、1d、3d、7d、1月、3月、6月,用HE染色观察肾小管组织学变化,免疫组织化学法检测肾小管上皮细胞增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达,组织化学染色观察肾小管上皮细胞衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）的活性,用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin in situ nick-end labeling,TUNEL）法检测肾小管上皮细胞凋亡。结果：IRI后0d,肾小管以坏死为主,高龄鼠比低龄鼠明显（P〈0.05）,p53（-/-）鼠比p53（＋/＋）鼠明显（P〈0.05）;细胞凋亡在7d时达到高峰,且高龄鼠比低龄鼠明显（P〈0.05）,p53（＋/＋）鼠比p53（-/-）鼠明显（P〈0.05）。p53（＋/＋）低龄鼠IRI后1月出现衰老细胞,3月和6月显著增多（P〈0.05）,对侧肾未见衰老细胞;而p53（-/-）低龄鼠IRI后6月才出现明显的衰老细胞;两种基因型高龄鼠在IRI后0d双肾均见衰老细胞,但p53（＋/＋）鼠显著多于p53（-/-）鼠（P〈0.05）,1d后,IRI肾的衰老细胞明显减少（P〈0.05）,对侧肾无变化。p53（＋/＋）高龄和低龄鼠细胞增殖无统计学意义（P〉0.05）,而p53（-/-）低龄和高龄鼠在IRI后3、7d细胞增殖进行性增加,且低龄鼠显著多于高龄鼠、p53（-/-）鼠多于p53（＋/＋）鼠（P〈0.05）。对高龄鼠IRI后1d点细胞衰老和凋亡进行相关分析显示,在p53（＋/＋）鼠二者显著负相关（r=-0.82,P〈0.05）,在p53（-/-）鼠,二者无显著相关性（r=0.26,P〉0.05）。结论：①IRI可促进正常肾小管上皮细胞衰老的进程;②已经进入衰老状态的肾小管上皮细胞在遭受IRI刺激后,更易走向死亡（坏死和/或凋亡）;③p53在IRI所致肾小管上皮细胞演变过程中发挥着重要的调控作用。     

p53基因表达在辐射诱导骨髓细胞凋亡和修复中作用研究

目的 探讨p53基因表达在辐射导的骨髓细胞凋亡和修复中的改变与作用。方法 经^60Coγ射线以5．5Gy全身辐射78只LACA小鼠。于照后4wk内分批活杀，将骨髓分别进行HE染色和超薄切片，并进行P53蛋白LSAB免疫组化染色和突变型p53(mtp53)cDNA-DNA原位杂交。结果 照射后小鼠骨髓出现明显损伤及损伤后重建现象；照射后6h,造血细胞凋亡显著，并出现凋亡的典型改变；P53蛋白于造血细胞凋亡及修复时均明显增多，而mtp53DNA仅于修复期呈阳性。结论 p53基因表达与了辐射诱导的骨髓细胞凋亡和凋亡后的修复过程。     

大鼠脑慢性缺血状态再灌注对海马区神经细胞凋亡及p21和p53蛋白表达的影响

目的通过建立大鼠慢性脑缺血再灌注模型,观察再灌注时大鼠海马区神经细胞凋亡及p53和p21蛋白的表达。方法70只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10),模型组(n=30),模型再灌注组(n=30),应用TUNEL法检测细胞凋亡情况,用免疫印迹法检测大鼠海马p53和p21蛋白的表达。结果对照组未见凋亡细胞,模型组凋亡细胞数明显少于模型再灌注组(p<0.05);p53和p21蛋白在对照组无表达,模型组表达少于模型再灌注组(p<0.05),术后48h达高峰,72h后逐渐降低。结论慢性脑缺血再灌注后海马神经细胞凋亡,海马区p53和p21蛋白表达上调可能参与正常灌注压突破综合症发病机制。     

阿糖胞苷诱导肺腺癌细胞凋亡与p73激活相关

目的 体外观察阿糖胞苷(1-β-D-arabinofuranosylcytosine, Ara-C)对肺腺癌A549细胞凋亡的诱导作用,探讨p53、p73基因在此凋亡过程中的调控作用.方法 Ara-C体外作用于A549细胞,TUNEL法检测A549细胞的凋亡;透射电镜观察A549细胞凋亡的典型超微结构;免疫印迹法检测A...     

吸烟与肺癌p53基因突变的关系

肺癌p53基因突变与吸烟密切相关,烟草中含有苯并芘等上百种化学物质,随吸烟进入气道和肺部,被支气管粘膜上皮吸收入细胞内连接到DNA上引起p53基因突变.烟草中的主要致癌物质苯并芘引起p53基因5-CpG(5-胞嘧啶磷酸鸟苷)甲基化并进一步导致GC→TA置换为其主要机制.     

野生型90β对热休克蛋白90β基因表达的调控作用

为了阐明野生型p53在热休克蛋白90β(hsp90β)基因表达调控中的作用,我们利用野生型p53的表达质粒转染Jurkat细胞,发现野生型p53可以剂量依赖方式抑制hsp90β基因的启动子活性,并且证实hsp90β基因的表达在mRNA和蛋白水平均明显减少.     

细胞核和线粒体的p53凋亡途径

与 p5 3介导的细胞周期抑制相比 ,由 DNA损伤、氧化作用以及致癌物引起的 p5 3诱导的细胞凋亡机制还知之甚少 ,阐明 p5 3肿癌抑制基因诱导凋亡是当务之急 ,p5 3作为抗癌靶分子主要在于它的凋亡作用 ,揭开 p5 3诱导凋亡途径之谜 ,可以证明 p5 3具有生化多样性 ,其功能远远超出一个单纯转录因子的功能。线粒体内 p5 3蛋白诱导凋亡的证据表明 ,协同 p5 3转录活性功能 ,将使 p5 3诱导的凋亡路径变得更加复杂     

肿瘤抑制基因p53基因与肿瘤关系以及基因治疗的研究进展

在 5 0 %肿瘤中都发现 p5 3基因有缺失或突变 ,可见它与癌症的关系非常密切。现已确认的抑癌基因根据其结构与功能的不同分为两类 :一类是特异性地抑制 CDK4和 CDK 6 ,包括 p16、p15、p18和 p19;另一类是对 CDK有广谱抑制作用 ,包括p2 1、p2 7、p5 3。本文就 p5 3基因的结构、功能与肿瘤的关系以及在基因治疗中的应用作了简要的总结