膀胱移行细胞癌中FHIT基因启动子甲基化及其蛋白的表达

目的：探讨膀胱移行细胞癌（BTCC）FHIT基因启动子甲基化状态及其与FHIT蛋白表达的关系。方法：采用甲基化特异性PCR（MSPCR）方法及免疫组织化学S-P法检测62例BTCC组织和10例正常膀胱组织中FHIT基因启动子甲基化状态及FHIT蛋白表达。结果：BTCC组织、正常膀胱组织FHIT基因启动子甲基化频率分别为19．4％（12／62）,0（0／10）。FHIT蛋白在正常膀胱组织、BTCC中阳性表达率分别为100．0％（10／10）和46．77％（29／62）,肿瘤不同分级中随恶性程度的增高,表达减少,Ⅰ级与Ⅲ级比较,差异有统计学意义（P〈0．05）,不同临床分期中随分期的增高,表达减少,Tis～T1与T2～T1比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。FHIT基因的启动子甲基化和蛋白阳性表达有相关（P〈0．05）。结论：FHIT基因的启动子甲基化可能是基因失活重要机制之一,FHIT基因启动子甲基化及表达在BTCC的发生、发展中起重要作用。     

大肠癌中脆性组氨酸三联体基因和Survivin基因的表达及临床意义

目的检测脆性组氨酸三联体（FHIT）基因和Survivin基因在大肠癌、正常大肠黏膜上皮组织中的表达，探讨FHIT基因和Survivin基因与大肠癌．发生发展及转移的关系，探讨其与大肠癌临床病理特征的关系。方法利用免疫组织化学法对56例大肠癌和33例正常大肠黏膜组织检测FHIT、Survivin基因的表达。结果FHIT蛋白在33例癌旁正常大肠黏膜上皮和56例发癌中的阳性表达率分别为93．9％、48．2％，原发癌中FHIT蛋白的阳性表达率明显低于癌症正常大的黏膜上皮（P〈0，01）。Survivin在56例大肠癌的表达率为48．2％，显著高于33例癌症正常大肠黏膜上皮（P〈0．01）。结论FHIT基因表达的下调与Survivin基因表达的上调可能促进了大肠癌的发生。这样临床上通过检测FHIT、Survivin的基因的表达率对患者的预后有重要的指导意义。     

FHIT和p53在结肠癌中的表达及其意义

目的探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）基因和p53基因在结肠癌中的表达及其与临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学链菌素亲生物素一过氧化酶法（SP法）法检测74例结肠癌组织中FHIT和p53的表达。结果FHIT和p53在结肠癌中表达率分别为52．7％和56．8％。FHIT蛋白的丢失在结肠癌中占47．3％，FHIT蛋白低表达癌在癌组织学分级中的分布为低分化癌10／12，高中分化癌25／62，；在Dukes分期中的分布为C、D期癌23／37，A、B期癌12／37；在有淋巴转移组中为23／37，无淋巴转移组中为12／37。30例获访病例中，FHIT蛋白低表达癌在5年随访病例组中的分布为5年生存组为6／17，5年死亡组为10／13。两者与结肠癌的分化程度、病理分期（Dukes分期）、淋巴转移情况和五年生存率均有明显相关（P〈0．05）。结论结肠癌组织中FHIT蛋白的丢失是频发事件，FHIT可能是结肠癌发生中重要的抑癌基因；FHIT和p53的表达。可作为评估结肠癌高危因素和恶性生物学行为的参考指标。     

胸腺瘤细胞中PCNA、HSP70的表达水平的研究及意义

目的 研究PCNA、HSP70在胸腺瘤细胞及正常胸腺组织中的表达水平及其临床意义。方法 用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白－过氧化物酶染色法（S—P法）检测20例恶性胸腺瘤、18例良性胸腺瘤及12例正常胸腺组织细胞中PCNA、HSP70蛋白的表达水平。结果 20例恶性胸腺瘤中PCNA、HSP70蛋白阳性表达分别为80．0％（16／20）、75．0％（15／20）；18例良性胸腺瘤中PCNA、HSP70蛋白阳性表达分别为38．9％（7／18）、27．8％（5／18）；12例正常胸腺组织细胞中分别为8．3％（1／12）、0（0／12），PCNA蛋白及HSP70蛋白的表达在良、恶性胸腺瘤和正常胸腺组织三者之间差异都有显著性（P〈0．001），且在良、恶性胸腺瘤之间相比差异也均有显著性（P〈0．05）。但良性胸腺瘤和正常胸腺组织相比，PCNA及HSP70蛋白的表达差异均无显著性（P〉0.05）。结论 通过检测HSP70与PCNA在胸腺瘤的表达水平，可以判断胸腺瘤的良、恶性，为术后进一步治疗提供了有价值的参考指标。     

抑癌基因FHIT在肝细胞癌中的研究

目的　探讨原发性肝细胞癌 (HCC)中FHIT基因的表达。方法　采用免疫组织化学技术 (SP法 )检测 4 0例HCC及其癌旁组织、32例肝外伤后正常肝组织中FHIT的表达情况。结果　 4 0例HCC中有 1 1例FHIT表达缺失 ,而相应的癌旁组织中只有 2例FHIT蛋白表达缺失 ;正常肝组织中全部呈阳性表达 ;HCC组织中FHIT蛋白缺失率显著高于相应癌旁及正常肝组织 (P <0 .0 1 ) ,并与肿瘤的病理学分级、TNM分期、门静脉癌栓及HBsAg阳性表达有密切关系 (P <0 .0 5 )。结论　FHIT蛋白的缺失与HCC的发生、发展有关     

卵巢上皮性肿瘤中p16抑癌基因的表达及意义

目的 探讨抑癌基因p16在卵巢上皮癌的发生及发展的关系。方法 应用标记抗生蛋白链菌素生物素法（LSAB）检测正常卵巢、良性卵巢瘤、交界性卵巢上皮瘤以及卵巢上皮癌的组织中抑癌基因p16的表达情况。结果 p16基因的蛋白表达在恶性卵巢肿瘤中检出率为18．4％，明显低于良性卵巢肿瘤（85％）、交界性卵巢上皮瘤（90％）、正常卵巢组织（100％），P＜0．001。结论 提示p16基因广泛存在于卵巢组织中，其突变或缺失与卵巢上皮癌发生发展及预后有关。     

抑癌基因Runt相关转录因子3在胃癌中的表达及其与临床病理学因素的关系

目的探讨胃癌组织中Runt相关转录因子3（Runx3）基因的表达情况及其与胃癌临床病理学因素的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和蛋白印迹（Western blot）法分别检测52例胃癌组织和配对的正常胃黏膜组织中Runx3 mRNA以及蛋白的表达水平，并分析Runx3表达与胃癌临床病理学因素的关系。结果59．6％（31／52）的胃癌组织出现Runx3 mRNA表达缺失，48．1％（25／52）出现Runx3蛋白表达缺失，其缺失率均明显高于对应的正常胃黏膜组织（P〈0．05）。Runx3的表达缺失与肿瘤大小、组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0．05，P〈0．01）。Runx3 mRNA表达与蛋白表达呈正相关（r=0．840，P〈0．01）。结论Runx3基因与胃癌的发生、发展密切相关，有望成为胃癌诊断和治疗的新靶点。     

人非小细胞肺癌P16基因突变研究

目的探讨ｐ１６基因缺失和突变与人非小细胞肺癌发生、发展的关系。方法应用多重ＰＣＲ、ＳＳＣＰ分析及ＤＮＡ序列分析技术，对４５例人非小细胞肺癌组织中ｐ１６基因外显子１和外显子２进行基因缺失和突变分析。结果４５例肺癌样品中共检出１９例ｐ１６基因缺失，总的缺失率为４２．２％（１９／４５）。其中纯合型缺失８例（１７．８％），半合型缺失１１例（２４．４％）；外显子１缺失７例（１５．６％），外显子２缺失１２例（２６．７％）；ｐ１６基因外显子２的突变检出率为３１．１％（１４／４５）；ＤＮＡ序列分析显示ｐ１６基因７２位密码子无义突变７例，７５位密码子错义突变７例。结论ｐ１６基因的缺失和突变可能与人非小细胞肺癌的发生、发展有关。     

胃癌中脆性组氨酸三联体基因的甲基化和表达及其意义

目的检测脆性组氨酸三联体（FHIT）基因在胃癌中的蛋白表达及其甲基化情况，探讨FHIT在胃癌中的作用。方法收集胃癌新鲜组织标本共33例，采用免疫组织化学和甲基化特异性聚合酶链反应（PCR）的方法检测FHIT基因的蛋白表达和异常甲基化。结果33例胃癌组织中，24例表达FHIT蛋白，阳性率为73％，有13例发生了甲基化。阳性率为39％。胃癌中FHIT基因的蛋白表达和异常甲基化呈负相关。结论FHIT基因的异常甲基化是引起FHIT基因失活并导致胃癌发生的重要机制。     

肝门胆管癌中p16基因突变及蛋白表达异常的研究

目的 研究p16基因突变及蛋白表达异常在肝门部胆管癌发生及浸润转移中的作用。方法 应用PCR-SSCP及免疫组织化学技术分析36例肝门部胆管癌的p16基因的突变及蛋白表达情况。结果 8例在p16基因第2外显子部分存在纯合性缺失，13例存在点突变，缺失及突变共占58．3％(21／36)。8例缺失标本呈现p16蛋白表达阴性，10例出现p16蛋白表达下降，共占50％(18／36)。结论 p16基因突变及蛋白表达异常，与肝门部胆管癌的发生、浸润转移临床分期有明显的关系，且有助于判断胆管癌的恶性程度和患者的预后。     

肾细胞癌FHIT基因蛋白编码外显子突变的研究

目的：检测肾细胞癌（ＲＣＣ）组织ＦＨＩＴ基因蛋白编码外显子异常情况,了解ＲＣＣ中ＦＨＩＴ基因异常特征,探讨ＦＨＩＴ基因与ＲＣＣ发生的关系。方法：收集ＲＣＣ及相应癌周肾组织标本２２份和１６份,提取组织ＤＮＡ。ＤＩＧ标记ＦＨＩＴ全长ｃＤＮＡ探针。ＰＣＲ扩增ＦＨＩＴ基因Ｅ５￣Ｅ９,产物行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交。结果：１５份（６８．２％）癌组织标本、６份（３７．５％）癌周肾组织标本存在ＦＨＩＴ基因     

膀胱移行细胞癌HPV-16/18感染与FHIT基因改变的相关性研究

目的:探讨膀胱移行细胞癌(TCC)肿瘤组织中HPV-16/18感染与FHIT基因改变的关系。方法:根据HPV-16/18E7DNA检测结果,将32例膀胱TCC病例分为HPV-16/18感染阳性和阴性两组。选择位于FHIT基因第5内含子内的两个微卫星多态标记(D3S1234和D3S1300),对上述两组膀胱TCC患者的肿瘤组织DNA进行杂合性缺失(LOH)分析;同时,对相应的组织病理切片进行FHIT蛋白的免疫组化染色。所得用SPSS10.0软件行统计学处理。结果:在32例膀胱TCC患者的肿瘤组织中,上述两个微卫星多态标记中至少有一个发生LOH的频率为56.25%(18/32);FHIT蛋白表达下调率达84.38%(27/32)。统计学处理未发现HPV感染与FHIT基因改变相关。结论:FHIT基因LOH和FHIT蛋白表达下调是膀胱TCC中的常见异常改变,而HPV-16/18感染可能通过FHIT基因改变以外的其他途径参与膀胱TCC的发生过程。     

FHIT在散发性结肠癌中的表达及意义

目的探讨散发性结肠癌中脆性组氨酸三联体(FHIT)基因蛋白表达状况及其与临床病理指标的可能关系。方法采用兔抗人FHIT蛋白抗体和枸橼酸微波SP免疫组织化学方法检测74例结肠癌26例正常组织、26例良性腺瘤标本中FHIT表达状况并分析其与Dukes’分期等临床病理指标以及5年生存率的关系。结果26例正常结肠组织中FHIT基因表达,1例阴性(1/26,3.8%)26例结肠腺瘤组织阴性7例(7/26,26.9%)。74例结肠癌组织中阴性35例(47.3%)。三者比较有显著性差异(P<0.05)。FHIT蛋白低表达与结肠癌患者的年龄、性别、肿瘤部位、大小、血清CEA的水平、组织学类型均无相关性(P>0.05);与分化程度、病理分期、淋巴转移、远处转移、五年生存率均有差异(P<0.05)。结论FHIT表达降低可能对结肠癌的演化和进展具有一定重要作用,并可能成为一个新的预后指标。     

β-catenin、APC表达异常在肾上腺皮质腺瘤形成中的作用

目的 观察β-连环素(β-catenin)、APe在肾上腺皮质腺瘤(ACA)发生中的作用.方法 运用免疫组织化学SP法检测36例ACA,10例周围正常肾上腺组织中β-catenin及APC蛋白表达.聚合酶链反应(PCR)-DNA双向测序法分析ACA及正常组织中β-catenin基因外显子3突变.结果 免疫组织化学染色显示正常组织β-catenin为细胞膜着色,无胞质或胞核内染色.ACA中12例存在胞质或胞核内β-catenin异常染色,异位表达率为33.3%(12/36).APC在正常组织中表现为胞质着色(10/10),阳性表达率为100.O%.36例ACA中29例为胞质内正常染色,7例APC胞质内不同程度表达缺失,阳性表达率为80.5%(29/36).PCR-DNA双向测序法检测正常组织中未见β-catenin基因外显子3突变(0/10),ACA中可见5例存在β-catenin外显子3点突变,突变率为13.8%(5/36),ACA细胞中β-catenin、APC的异常表达及β-catenin外显子3突变与正常组织比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 β-catenin外显子3突变及β-catenin、APC蛋白的异常表达在ACA形成过程中是一种频发事件.     

乳腺癌细胞p16基因的研究

目的 探讨Ｐ１６基因在乳腺癌中的突变形式和频率以及有效的检测手段。方法 采用细胞２,反复贴壁法纯化人乳腺癌细胞、经多聚酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）分析技术。对１４例纯化乳腺癌细胞标本,１４例新鲜未纯化标本和２７例石蜡包埋标本及相应的癌旁乳腺组织标本的这６基因突变进行了对比性研究。结果 纯化的癌细胞组Ｐ１６基因突变率为４２．９％,而新鲜未纯化细胞组、石蜡包埋细胞组及癌旁乳腺细胞组的Ｐ     

脆性三联组氨酸基因在胃癌中的表达及其临床意义

目的:探讨FHIT基因在胃癌中的表达及意义。方法:采用免疫组化法检测49例胃癌、21例正常胃黏膜、31例萎缩性胃炎、27例异形增生组织中FHIT基因表达,并分析与临床分期、分化程度、淋巴转移及3年生存期的关系。结果:FHIT基因在进展期胃癌中的阳性表达率为18.4%,早期胃癌中为27.3%(3/11),均低于异型增生(55.6%,15/27)、萎缩性胃炎(74.2%,24/31)及正常胃黏膜(100%,P=0.000)中的表达。FHIT基因在早期胃癌中的表达高于中、晚期胃癌(P=0.001);在高分化组中低于中、低分化组(P=0.022),无淋巴结转移者与淋巴结转移者表达无统计学差别(P=0.065)。随访的49例胃癌资料中,FHIT基因表达阴性者生存时间明显低于表达阳性者(Log rank=5.06,P=0.0245)。结论:FHIT基因的表达缺失与胃癌的发生、发展及预后有关,FHIT水平可作为判断胃癌预后的一种指标。