缺氧对肺动脉内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞5-羟色胺转载体基因表达的影响

缺氧对肺动脉内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞５－羟色胺转载体基因表达的影响第三军医大学新桥医院心内科（重庆６３００３７）；１第三军医大学病理生理教研室刘健王培勇１何作云目的：观察肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）在无氧（０％Ｏ２＋９...     

缺氧时肺动脉内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞相互作用对细胞内 …

目的：观察了培养的小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）于缺氧时对细胞内环核苷酸的影响。结果：ＰＡＥＣ和ＵＰＡＳＭ共培养２４ｈ，ＰＡＥＣ细胞内ｃＡＭＰ含量显著降低（Ｐ〈０．０１），而ＰＡＳＭ细胞内ｃＡＭＰ含量显著增加（Ｐ〈０．０１），二种细胞内ｃＧＭＰ含量显著增加（Ｐ〈０．０１）。缺氧对二种细胞内ｃＧＭＰ含量无显著影响，但能增加ＰＡＳＭ的ｃＧＭＰ含量（Ｐ〈０．０１），降低ＰＡ     

缺氧对肺动脉内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞分泌心钠素的影响

缺氧对肺动脉内皮细胞和肺动脉平滑肌细胞分泌心钠素的影响第三军医大学新桥医院心内科（重庆６３００３７）刘健王培勇许蜀闽１高文祥１孙秉庸本实验应用细胞培养、放免测定法观察缺氧对培养的小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）自分泌心钠素...     

缺氧时肺动脉内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞相互作用对细胞内环核苷酸的影响

目的：观察了培养的小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）于缺氧时对细胞内环核苷酸的影响。结果：ＰＡＥＣ和ＰＡＳＭ共培养２４ｈ，ＰＡＥＣ细胞内ｃＡＭＰ含量显著降低（Ｐ＜００１），而ＰＡＳＭ细胞内ｃＡＭＰ含量显著增加（Ｐ＜００１），二种细胞内ｃＧＭＰ含量均显著降低（Ｐ＜００１）。缺氧对二种细胞内ｃＡＭＰ含量无显著影响，但能增加ＰＡＳＭ的ｃＧＭＰ含量（Ｐ＜００１），降低ＰＡＥＣ的ｃＧＭＰ含量（Ｐ＜００１）。ＮＯ合酶抑制剂硝基精氨酸对二种细胞的ｃＡＭＰ含量均无显著影响，但能使常氧培养的ＰＡＥＣ和缺氧培养的ＰＡＳＭ细胞内的ｃＧＭＰ含量显著降低（Ｐ＜００１）。结论：ＰＡＥＣ和ＰＡＳＭ的相互作用可引起第二信使系统传递的变化；缺氧可抑制ＰＡＥＣ的ＮＯ合酶活性而诱导ＰＡＳＭ的ＮＯ合酶活性     

缺氧对肺微血管内皮细胞释放ET-1的影响

缺氧对肺微血管内皮细胞释放ＥＴ－１的影响第三军医大学新桥医院呼吸内科研究所（重庆６３００３７）谢崧钱桂生杨晓静目的：本文研究了肺微血管内皮细胞缺氧条件下对ＥＴ－１的影响。方法：取第三代汇合成细胞单层的大鼠肺微血管内皮细胞（ＲＰＭＥＣｓ）随机分为常氧组...     

青心酮对妊高征患者胎盘血管壁一氧化氮合成酶和血浆内皮素的影响

青心酮对妊高征患者胎盘血管壁一氧化氮合成酶和血浆内皮素的影响目的：观察青心酮（３，４二羟基苯乙酮，ＤＨＡＰ）对妊高征（ＰＩＨ）患者胎盘血管内皮细胞（ＶＥＣ）和平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）内一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活性和血浆内皮素（ＥＴ）水平的影响。方法：将...     

髓磷脂碱性蛋白促进单个核细胞对内皮细胞的粘附效应

目的：探讨ＭＢＰ对外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）与人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）粘附性的影响,以揭示中枢神经系统（ＣＮＳ）炎症时ＰＢＭＮＣ进入ＣＮＳ的可能原因。方法：用细胞粘附试验,研究ＰＢＭＮＣ与ＨＵＶＥＣ的粘附性,用细胞免疫化学法、ＦＡＣＳ分别观察ＶＣＡＭ－１和ＩＣＡＭ－１的表达。结果：ＭＢＰ活化的ＰＢＭＮＣ与ＭＢＰ刺激的ＰＢＭＮＣ培养上清作用的ＨＵＶＥＣ的粘附性较对照有显著提高。ＩＣＡＭ＿１     

低浓度H2O2对肺微血管内皮细胞的迟发效应--凋亡

目的和方法：对大鼠肺微血管内皮细胞（ＰＭＶＥＣ）培养、鉴定。观察了低浓度Ｈ２Ｏ２（０￣１００μＭ）对体外培养的ＰＭＶＥＣ的迟发性损伤效应。结果：ＭＩＴ法发现Ｈ２Ｏ２对ＰＭＶＥＣ的增殖代谢活性具有剂量依赖性抑制作用,而且当Ｈ２Ｏ２去除后,此作用仍可进一步发展。形态观察、流式细胞仪ＤＮＡ测定、３’末端标记ＤＮＡ降解片断原位检测（ＴＵＮＥＬ）均表明,细胞凋亡是Ｈ２Ｏ２对ＰＭＶＥＣ迟发性损伤效应的一种重要     

TNF-α、IL-1β 、LPS对人多核白细胞、脐静脉内皮细胞血小板内皮细胞粘附分子-1表达的影响

目的：初探炎性刺激对人多核白细胞（ＰＭＮ）和脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）的血小板内皮细胞粘附分子－１（ＰＥＣＡＭ－１）表达的影响和ＰＥＣＡＭ－１的可能作用。方法：使用流式细胞仪和免疫组化法,观察脂多糖（ＬＰＳ）、白介素（ＩＬ）－１β和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）－ａ对ＰＭＮ和ＨＵＶＥＣ ＰＥＣＡＭ－１表达的变化。结果：ＬＰＳ、１Ｌ－１β和ＴＮＦ－ａ可引起ＰＭＮ表达ＰＥＣＡＭ－１蛋白减少,而对ＨＵＶＥＣ　ＰＥＣＡＭ－１的表达无显著影响,但组化显著在ＨＵ－ＶＥＣ连接部的ＰＥＣＡＭ－１染色变淡。结论：上述炎性刺激物不仅可引起ＰＭＮ表达ＰＥＣＡＭ－１减少、激活ＰＭＮ,而且可改变内皮细胞ＰＥＣＡＭ－１的分布,因此ＰＥＣＡＭ－１在炎症中可能起重要作用。     

健胎液对人脐静脉内皮细胞分泌血管活性物质的影响

目的：探讨健胎液防治胎儿宫内生长迟缓的机理，应用血清药理学方法研究健胎液对缺氧人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）分泌血管活性物质内皮素（ＥＴ）、前列环素（ＰＧＩ_２）、一氧化氮（ＮＯ）的影响，以及该方药对缺氧ＨＵＶＥＣ形态结构上的保护作用。方法：将ＨＵＶＥＣ随机分成四组：正常组、缺氧组、血清组、健胎液组，观察细胞形态的改变；检测内皮素（ＥＴ）、前列环素（ＰＧＩ_２）和一氧化氮（ＮＯ），进行统计学处理。结果：健胎液可显著提高缺氧ＨＵＪＶＥＣ合成分泌ＰＧＩ_２、ＮＯ（Ｐ ＜ ０．０５～０．０１），同时，ＥＴ的释放显著降低（Ｐ_４ｈ＜ ０．０５）。从超微结构上观察，健胎液能明显减轻缺氧对ＨＵＶＥＣ的细胞器和细胞核的损伤，尤以保护线粒体免受缺氧损伤的作用更显著。结论；通过增强血管内皮细胞对缺氧的耐受性，调节血管性物质的分泌是健胎液防治胎儿宫内生长迟缓的机制之一。     

缺氧对肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞5-羟色胺转载体基因表达的影响

目的：探讨无氧（Ｏ％Ｏ２＋９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２）和低氧（２５～３％Ｏ２＋９２％Ｎ２＋５％ＣＯ２）对新生小牛肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）和肺动肺平滑肌细胞（ＰＡＳＭ）５－羟色胺转载体基因表达的影响。方法：应用细胞培养，核酸分子杂交技术。结果：无氧组和低氧组（１５ｈ、３ｈ、６ｈ）ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体ｍＲＮＡ表达显著高于常氧组（Ｐ＜００５），而无氧和低氧１２ｈ至４８ｈ对ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体ｍＲＮＡ表达无明显影响。无氧和低氧（３ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ）组ＰＡＳＭ５－羟色胺ｍＲＮＡ表达均显著高于常氧组（Ｐ＜００１），结论：推测缺氧早期通过促进ＰＡＥＣ５－羟色胺转载体基因表达，加强ＰＡＥＣ对５－羟色胺的摄取和降解，随缺氧时间的延长，ＰＡＥＣ的此功能受损。缺氧ＰＡＳＭ５－羟色胺转载体基因表达的持续增加，则可能参与缺氧肺动脉高压的形成。     

虎杖甙对正常人血管平滑肌细胞内钙和膜电位的调节作用

目的和方法：观察虎杖甙（ＰＤ）对人脐带动脉平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）内游离钙、细胞膜电位的变化,以探讨ＰＤ对血管平滑肌的调节机制。用Ｆｌｕｏ－３－ＡＭ、ＤｉＢＡＣ４（３）标记培养的ＶＳＭＣ,在激光共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙和膜电位变化。结果：给ＰＤ（０５ｍｍｏｌ／Ｌ）１０ｍｉｎ后,ＶＳＭＣ内游离钙浓度升高５６％±５６％。当ＰＤ加入前用维拉帕米和ＥＧＴＡ预处理后,则游离钙不再升高;ＥＧＴＡ和肝素预处理也抑制ＰＤ的升钙作用,而ＥＧＴＡ和普鲁卡因预处理则使细胞内钙显著升高。ＰＤ还可使ＶＳＭＣ膜电位去极化,加入钠通道阻断剂河豚毒素（２５μｍｏｌ／Ｌ）可完全阻断ＰＤ的去极化作用：加甲氰咪胍、维拉帕米、优降糖和利及丁预处理不能阻断ＰＤ去极化作用。结论：：ＰＤ可通过细胞外钙内流来增加细胞内游离钙浓度,并促进细胞外钠离子内流而导致细胞去极化     

虎杖甙对正常大鼠血管平滑肌细胞内游离钙浓度的影响

目的：观察虎杖甙（ＰＤ）对培养的大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）内钙离子浓度的变化机理。方法：用Ｆｌｕｏ－３－ＡＭ标记培养的ＶＳＭＣ，在粘附式细胞仪上测定细胞内游离钙的变化。结果：实验结果表明，ＰＤ（００２～２０ｍｍｏｌ／Ｌ）可使大鼠ＶＳＭＣ内游离钙浓度升高，波形变宽，其引起的钙波形态与去甲肾上腺素（ＮＥ）及氯化钾所引起的高尖钙波不同，ＰＤ使ＶＳＭＣ产生一种剂量依赖性的、持续缓慢升高的钙波。ＰＤ引起的细胞内游离钙升高可被ＥＧＴＡ（２ｍｍｏｌ／Ｌ）及维拉帕米（５０μｍｏｌ／Ｌ）明显抑制。结论：以上结果提示ＰＤ既促进ＶＳＭＣ外钙离子进入细胞内，还能诱导细胞内钙离子释放；ＰＤ可能会提高正常ＶＳＭＣ的收缩性，增加正常血管的张力。     

小檗碱对中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的影响及机制探讨

目的：探讨小檗碱对中性粒细胞及血管内皮细胞粘附作用及粘附分子的影响。方法：以人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）为模型,用蛋白染料染色法观察小檗碱对中性粒细胞（ＰＭＮ）与ＨＵＶＥＣ粘附作用的影响;用细胞ＥＬＩＳＡ法、ＡＰＡＡＰ细胞免疫化学染色法观察小檗碱对ＰＭＮ－ＨＵＶＥＣ粘附过程中粘附分子ＩＣＡＭ－１及ＣＤ１８表达的影响。结果：小檗碱（０－３２～８μｇｍＬ）作用于ＨＵＶＥＣ,可抑制ＰＭＮ与ＨＵＶＥＣ间的粘附,对ＩＬ－１、ＴＮＦ（１０００μｇｍＬ）诱导的ＰＭＮ－ＨＵＶＥＣ粘附增强亦有抑制作用;而小…     

健胎液、川芎嗪对缺氧人脐静脉内皮细胞作用的实验研究

目的研究健胎液和川芎嗪对缺氧人脐静脉内皮细胞（ ＨＵＶＥＣ）分泌血管活性物质－内皮素（ ＥＴ）、前列环素（ＰＧＩ２）、一氧化氮（ＮＯ）的影响,以及该方药对缺氧ＨＵＶＥＣ形态结构上的保护作用。方法将ＨＵＶＥＣ分成五组;正常组、缺氧组、血清组、含药血清组、川芎嗪组。观察各组细胞的形态改变,检测细胞上清液ＥＴ、ＰＧＩ２、ＮＯ。结果健胎液可显著提高缺氧ＨＵＶＥＣ合成分泌ＰＧＩ２、ＮＯ（ＰＭ０．０５～０．０１）,抑制ＥＴ的释放（Ｐ４ｈ＜０．０５）;川芎嗪显著促进ＰＧＩ２的合成分泌（Ｐ＜０．０５）。从超微结构上观察．健胎液和川芎嗪能明显减轻缺氧对ＨＵＶＥＣ的细胞器和细胞核的损伤,尤以健胎液保护线粒体免受缺氧损伤的作用更显著。结论健胎液对缺氧ＨＵＶＥＣ的保护作用优于川芎嗪,这与健胎液对内皮源性的血管活性物质的整体调节效应有关。     

TNFα对微血管内皮细胞的损伤作用及其分子机制(摘要)

血管内皮细胞是肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）作用的靶细胞之一。由ＴＮＦα引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的。ＴＮＦα（简称ＴＮＦ）引起微血管内皮细胞功能、代谢的早期损伤及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系,试图从中说明ＴＮＦ引起微血管内皮细胞早期损伤的部分分子机制。 １细胞增殖动力学在体外培养的肺微血管内皮细胞（ＰＭＶＥＣ）中发现,加入 ＴＮＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）后,细胞形态从圆形、多角形变成梭形,细胞的纵轴拉长,横轴缩小。此种变化从培养６ｈ开始,７２ｈ最显。光镜下未见明显细胞损伤表现,电镜下（透射电镜及扫描电镜）细胞器无明显改变,但见内皮细胞表面微绒毛减少。当ＴＮＦ的浓度增高到４０ｎｇ／ｍｌ以上,将其与ＰＭＶＥＣ共同孵育培养７２ｈ后,ＴＮＦ组内皮细胞总数比对照组（ＰＢＳ组）显著减少（５．２３ ±０．５０减到４．３０±０．３４,Ｐ＜０．０１）。用流式细胞仪分析细胞增殖周期发现,ＴＮＦ组处于Ｇ_１期的细胞明显增多,Ｓ期和Ｍ期的细胞明显减少（Ｐ＜０．０５）。结果提示,高浓度ＴＮＦ抑制内皮细胞增生,使细胞分裂延缓。 ２ ＰＧＩ_２和ｔ－ＰＡ前列腺素Ｐ     

红细胞生成素3‘—增强子片段对内皮细胞缺氧时环加氧酶—2？…

目的和方法：体外合成红细胞生成素（Ｅｐｏ）３‘－增强子野生型及突变型片段，借助脂质全，转入内皮细胞用半定量ＲＴ－ＰＣＲ方法测定分离细胞在常氧或缺氧条件下培养４ｈ的环加氧酶２（ＣＯＸ－２）ｍＲＮＡ。结果：（１）大鼠主主动脉内皮细胞、肺微血管内皮细胞在常氧下培养，有ＣＯＸ－２基因表达；（２）缺氧能诱导这两种细胞ＣＯＸ－２基因表达增加；（３）野生型Ｅｐｏ３’－增强子片段能阻断缺氧地内皮细胞ＣＯＸ－２基因     

香烟烟雾抽提物对肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶mRNA水平及PGI_2，TXA_2生成的影响

本实验应用放免测定及分子杂交技术观察了香烟烟雾抽提物（ＣＳＥ）对培养的猪肺动脉内皮细胞环氧合酶，血栓素合成酶基因表达和ＰＧＩ＿２，ＴＸＡ＿２生成的影响，进一步从分子水平探讨由内皮细胞产生的前列腺素在ＣＳＥ影响肺血管张力和ＨＰＶ中的作用。结果发现：在常氧或缺氧下，ＣＳＥ可促使内皮细胞环氧合酶—１ｍＲＮＡ水平升高于对照组的１．５倍，而环氧合酶—２ｍＲＮＡ则分别比对照组高２倍和１倍。同时在常氧或缺氧时，ＣＳＥ使内皮细胞条件培养基中６—ｋｅｔｏ—ｐＧＦｌａ．明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。然而，不论常氧或缺氧时，ＣＳＥ不影响血栓素合成酶基因表达和ＴＸＡ２的生成。提示在常氧和缺氧时，ＣＳＥ所致的环氧合酶ｍＲＮＡ水平升高及ＰＧＩ２增加介导了猪吸烟时肺血管张力和ＨＰＶ的降低。     

低浓度H_2O_2对肺微血管内皮细胞的迟发效应——凋亡

低浓度Ｈ２Ｏ２对肺微血管内皮细胞的迟发效应—凋亡上海医科大学病理生理学教研室（上海２０００３２）曹翔张明刘清行钱睿哲张国平金惠铭研究低浓度Ｈ２Ｏ２对大鼠肺微血管内皮细胞（ＰＭＶＥＣ）的损伤作用，及其与细胞凋亡的关系。体外培养大鼠肺微血管内皮细胞至融合...     

缺氧时体外培养的肺动脉内皮细胞增殖和活力的改变

目的：探讨无氧和／或低氧对肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）活力和增殖的影响。方法：应用２形态学观察、细胞活力测定、流式细胞技术、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、免疫组化染色等方法，结果：缺氧使ＰＡＥＣ胞浆内的线粒体和粗面内质网增多，随缺氧时间的延长，线粒体肿胀，空泡化、内质网扩张。ＭＴＴ法细胞活力测定显示无氧６ｈ末ＰＡＥＣ的细胞活力无明显变化，无氧１２ｈ至２４ｈ末ＰＡＥＣ的细胞活力明显增加，在６ｈ、１２ｈ、１８ｈ、