钙拮抗剂对沙土鼠脑缺血后血栓烷B_2、脑水份含量等的影响

利用夹闭沙土鼠双侧颈总动脉30分钟形成脑缺血后再灌注120分钟的动物实验模型,分别于缺血前、缺血时或再灌注后静脉注射钙拮抗剂尼卡的平(1.0mg/kg或0.1mg/kg)。结果提示尼卡的平明显抑制脑缺血后TXA_2生成,减轻脑水肿,对脑缺血有治疗作用。     

阿司匹林对沙土鼠全脑缺血-再灌注后脑内一氧化氮合酶及一氧化氮的影响

目的观察阿司匹林对沙土鼠全脑缺血-再灌注后的脑保护作用及其与脑内一氧化氮合酶及一氧化氮水平变化的关系。方法采用夹闭双侧颈总动脉的方法,制备沙土鼠短暂性全脑缺血-再灌注模型。27只健康雄性蒙古沙土鼠随机分为假手术组、脑缺血-再灌注组和阿司匹林治疗组,观察缺血7min再灌注24h后沙土鼠脑组织的病理学改变,以及一氧化氮合酶与一氧化氮水平的变化。结果病理学检查结果显示,沙土鼠脑缺血7min再灌注24h后海马CA1区缺血性损害明显,脑组织内一氧化氮合酶及一氧化氮水平显著升高(P<0.01);与脑缺血-再灌注组相比,阿司匹林治疗组沙土鼠的病理损害较轻,一氧化氮合酶与一氧化氮水平明显下降(P<0.01)。结论阿司匹林可显著减轻脑缺血-再灌注后的脑损伤,其作用机制可能与抑制一氧化氮合酶与一氧化氮水平上升有关。     

银杏叶制剂对沙土鼠短暂性脑缺血后海马DND的影响

实验在沙土鼠短暂性脑缺血模型上应用含有PAF受体拮抗剂的FGP,以观察其对沙土鼠短暂性脑缺血后海马CA1区DND的影响。结果表明：沙土鼠双侧颈总动脉结扎10分钟再灌4天模型,与对照组相比,银杏叶制剂明显增加海马CA1区存活神经元数,分别为38．50±16．31／mm和133．13±20．99／mm（P＜0．01）,与Nimodipine组（182±67／mm）结呆相近（P＞0．05）。提示：银杏叶制剂能明显对沙土鼠短暂性脑缺血后海马CA1区DND有保护作用。     

缺血预处理对沙土鼠脑缺血再灌注后线粒体功能的影响

目的 观察缺血预处理对沙土鼠脑缺血及再灌注后脑组织线粒体功能的影响。方法 用沙土鼠双侧颈总动脉结扎制成全脑缺血模型（缺血２０分钟,再灌注３０分钟）。动物随机分为预缺血组、模型组和假手术组。预缺血组给予两次（各２分钟）缺血预处理（间隔４８小时）。用氧电极法测定呼吸功能和呼吸链的氧化酶（ＮＡＤＨ氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素Ｃ氧化酶）活性。结果 缺血模型组动物的呼吸控制率、磷氧比及氧化磷酸化效率均较假     

外源性NO与内源性NO对海马区cGMP合成的影响

正常沙土鼠海马脑片孵化时加用硝普钠及钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型.硝普钠增加cGMP的产生,cGMP主要分布在海马本部曲张的纤维及少数的细胞体中.脑缺血再灌流后增加cGMP的产生,cGMP主要分布在海马本部的细胞体及少量纤维中.认为外源性NO与内源性NO介导海马区cGMP的合成分布不同.     

一种C-Jun N-末端激酶肽抑制剂在沙土鼠全脑缺血中的保护作用

目的 为了进一步研究海马C1区域神经细胞活动中JNK的作用，我们评价了一种JNK抑制剂即D-JNKI1在沙土鼠一过性大脑缺血模型中对迟发性神经细胞死亡（DND）的作用。方法 55只沙土鼠随机分为11个组。5组沙土鼠先接受5min前脑缺血处理，再灌注3h后，通过立体定向方法。向每组沙土鼠右侧侧脑室内分别注入不同浓度的D-JNKI1（2μL PBS内加入0．00012，0．0012，0．012，0．12，1．2μmol／L D-JNKI1，每组n=5）。对照组（n=5）：沙土鼠先接受5min前脑缺血处理，再灌注3h后，通过立体定向方法方法向右侧侧脑室内仅注入PBS2μL。腹腔内注射组（n=5）沙土鼠；先接受5min前脑缺血处理，再灌注3h后，1．2μmol／L D-JNKI1溶于0．5mL PBS腹腔内注射。假手术组（n=5）；沙土鼠仅暴露双侧颈总动脉，未夹闭。预处理组（共3组，n=15）：先将0．0012μmol／L D-JNKI1，0．00012μmol／L D-JNKI1溶于2μL PBS，分别注入两组沙土鼠的右侧侧脑室内，另外一组沙土鼠的右侧侧脑室内仅仅注入PBS2μL，30min后三组均夹闭双侧颈总动脉2min，48h后再次接受双侧颈总动脉夹闭5min。所有沙土鼠从接受夹闭5min双侧颈总动脉后4d处死，作冰冻切片和Niss1染色。结果 缺血再灌注3h后用D-JNKI-1治疗，有神经保护作用，最好的神经保护效应浓度为0．0012μmol／L。D-JNKI-1预处理加强了2min预处理所诱导的缺血耐受效应。结论D-JNKI1在沙土鼠全脑缺血模型中对海马CA1区域的迟发性神经细胞死亡有潜在的神经保护作用。     

迟发性神经元损伤的实验研究——沙土鼠脑海马区光镜电镜观察

本实验采用结扎沙土鼠双侧颈总动脉5分钟,然后使血流再通的方法制作迟发性神经元损伤(DND)动物模型。光镜研究结果表明,短时间脑缺血后,沙土鼠脑海马CA_1区神经元损伤发生得极其缓慢,缺血后重灌流至第4天,大部分CA_1区锥体细胞才发生坏死。在亚细胞水平,DND以内质网的大量增生和核蛋白体解聚为其主要特征。这些为DND的典型变化。     

脑缺血再灌流后海马区细胞凋亡的研究

目的:观察脑缺血再灌流后海马区细胞凋亡。方法:钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型,应用Tunel法染色。结果:短暂性前脑缺血不同时间再灌流后海马CA_1区锥体细胞发生凋亡,CA_2、CA_3区锥体细胞层、水平层、放射层、分子层及齿状回部位未见细胞凋亡。结论:短暂性脑缺血可导致CA_1区锥体细胞凋亡。     

银杏叶制剂对沙土鼠短暂性脑缺血后海马DND的影响

实验在沙土鼠短暂性脑缺血模型上应用含有ＰＡＦ受体拮抗剂的ＦＧＰ,以观察其对沙土鼠短暂性脑缺血后海马ＣＡ１区ＤＮＤ的影响。结果表明：沙土鼠双侧颈总动脉结扎１０分钟再灌４天模型,与对照组相比,银杏叶制剂明显增加海马ＣＡ１区存活神经元素,分别为３８．５０±１６．３１／ｍｍ和１３３．１３±２０．９９／ｍｍ（Ｐ〈０．０１）,与Ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ组（１８２±６７／ｍｍ）结果相近（Ｐ〉０．０５）。提示：银杏叶     

脑缺血再灌流后海马区cGMP的分布及浓度的变化

目的:研究脑缺血再灌流后海马区cGMP的变化.方法:钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型,应用双重免疫荧光染色法染色.结果:脑缺血再灌流后,cGMP迅速短暂地增高,cGMP阳性细胞主要分布在海马本部的始层、放射层及腔隙分子层,cGMP阳性细胞多数是星形胶质细胞.结论:cGMP阳性细胞可能通过cGMP的功效对脑缺血起保护作用.cGMP阳性细胞可能对脑缺血耐受.     

脑缺再灌后海马区cGMP的分布及浓度的变化

目的研究脑缺血再灌流后海马区cGMP的变化。方法钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型，应用双重免疫荧光染色法染色。结果脑缺血再灌流后，cGMP迅速短暂地增高，cGMP阳性细胞主要分布在海马本部的始层、放射层及腔隙分子层，cGMP阳性细胞多数是星形胶质细胞。结论cGMP阳性细胞可能通过cGMP的功效对脑缺血起保护作用。cGMP阳性细胞可能对脑缺血耐受。     

短暂性前脑缺血沙土鼠脑内促红细胞生成素的表达变化

促红细胞生成素 (erythropoietin ,Epo)具有神经保护和促进血管形成双重作用[1 ] ,在局灶性持续性脑缺血小鼠脑内存在Epo的表达[2 ] 。本研究观察短暂性前脑缺血沙土鼠脑内Epo的表达情况 ,探讨脑缺血时神经系统发生的内源性保护的机制。1　资料1 1　动物模型 :雄性沙土鼠 4 2只 ,6 0～ 80g( 9～ 12周龄 )由浙江省实验动物中心提供。随机分为假手术对照组和短暂性前脑缺血再灌注组。用无损伤血管夹夹闭双侧颈总动脉 3 5min,松夹后恢复血流 1h、6h、12h、1d、3d、7d。手术过程中及术后 ,用加热垫和灯泡保持肛温在 37～ 37 5℃。假手术组除不…     

缺血性脑水肿时血钠向脑内的转运

脑缺血后最初数小时脑水肿主要表现为细胞毒性水肿,血脑屏障(BBB)保持完整。脑Na~+含量的增加仅见于不完全性脑缺血而不出现于全脑缺血时,故Na~+一定来源于血液。因此一些研究者曾提出在不完全性脑缺血时Na~+从血液移入脑组织内的比率增加是由于浓度梯度的扩散或BBB特异性Na~+转运系统刺激的结果。至今,尚缺乏直接测定缺血脑组织摄Na~+率的方法。作者在这一研究中测定了单侧脑缺血模型BBB对Na~+和蔗糖的通透性,并初步对上述理论进行了验证。作者用沙土鼠作实验,结扎左侧颈总动脉30分     

沙土鼠短暂性脑缺血后灰质区少突胶质细胞选择性易损性及亚低温的影响

目的　探讨沙土鼠短暂性脑缺血后灰质区少突胶质细胞选择性易损性及亚低温的影响。方法　阻断沙土鼠双侧颈总动脉 15分钟造成前脑缺血模型。实验动物被随机分为假手术组、缺血再灌流组、亚低温 (32 .5± 0 .5℃ )治疗组。采用细胞特异性抗原转铁蛋白 (TF)免疫组化法标记少突胶质细胞。结果　缺血后再灌注 1～ 2天 ,皮层区 TF阳性的少突胶质细胞密度显著下调 (P<0 .0 1) ,随后逐渐增加 ,于缺血后再灌注第14天达高峰。在亚低温处理的动物 ,皮层区 TF阳性少突胶质细胞密度早期下调和晚期上调均受到显著抑制(P<0 .0 1)。结论　灰质区少突胶质细胞具有选择性缺血易损性。亚低温治疗可防治缺血性少突胶质细胞损伤 ,并有可能用来防止缺血后脱髓鞘变性     

一种成年大鼠脑缺血诱发的抽搐模型

目的 为了更有效模仿临床脑缺血后发生抽搐的情况,深入研究缺血性脑损伤,在成年大鼠建立一种缺血诱发的抽搐模型.方法 分离双侧颈总动脉和双侧椎动脉,将动物体温保持在39.5～40.5℃之间,用小动脉夹依次夹闭上述四条动脉15 min,在恢复血流后动物继续维持在此温度15 min,然后移至室温.对照组大鼠仅接受手术,不做缺血处理;利用行为学观察法、组织病理学方法和脑电监护法评价两组实验动物清醒后的差异.结果 接受缺血处理的大鼠100％发生了抽搐,海马细胞广泛受损,脑电图显示大鼠发生抽搐;对照组大鼠未见异常.结论 该方法是一种简便易行的可靠的使大鼠发生脑缺血后抽搐的模型操作方法.     

神经节苷脂GM_1对正常和脑缺血时皮层脑片CCK释放的影响(摘要)

我们过去已报告 CCK 可能参于脑缺血病理生理过程。为进一步研究其机制,我们观察了脑缺血蒙古沙土鼠离体皮层脑片 CCK 基础释放和钾离子存在下释放的改变,同时观察神经节苷脂是否能翻转这些变化。双侧结扎蒙古沙土鼠颈动脉半小时后,迅速取出     

牛磺酸对沙土鼠短暂性前脑缺血作用研究

目的 观察牛磺酸对沙土鼠短暂性前脑缺血的保护作用。方法 结扎沙土鼠双侧颈动脉建立前脑缺血模型,缺血5 min后进行再灌注。在缺血1 h后经静脉给予2.5 mg/kg、5 mg/kg、15 mg/kg及50 mg/kg牛磺酸。再灌注7 d时,对沙土鼠的神经功能行为缺损进行评分,并留取全脑,观察海马CA1区锥体细胞的死亡情况。结果 2.5 mg/kg牛磺酸虽然改善前脑缺血5 min再灌注7 d时沙土鼠的行为,降低海马CA1区锥体细胞的死亡,但与缺血对照组相比,无统计学意义,5 mg/kg、15 mg/kg及50 mg/kg牛磺酸可明显改善前脑缺血沙土鼠的行为缺损（P分别为0.001、0.006和0.037）,降低海马CA1区锥体细胞的死亡（P均＜0.001）,其中,5 mg/kg、15 mg/kg和50 mg/kg牛磺酸组的锥体细胞的死亡低于2.5 mg/kg牛磺酸组（P分别为0.001、0.001和0.005）。结论 牛磺酸能以剂量依赖方式降低沙土鼠前脑缺血损伤,提示牛磺酸可能是一种有效的短暂性缺血的大脑保护剂。     

3-硝基丙酸诱导沙士鼠脑缺血耐受时海马促红细胞生成素的表达

目的:探讨促红细胞生成素(erythropoietin,Epo)在小剂量3-硝基丙酸(3-nitropropionic acid,3-NPA)预处理诱导脑缺血耐受鼠脑海马的表达变化,揭示3-NPA预处理的机制。方法:将沙土鼠腹腔注射5mg/kg3-NPA后3天,阻断沙土鼠双侧预总动脉3.5min造成前脑缺血模型,通过尼氏染色和免疫组化观察海马锥体细胞损伤和Epo的表达变化。结果:对照组海马CA_1区已失去正常结构,锥体细胞大部分丧失,存活神经元计数显著低于3-NPA预处理组。对照组脑缺血再灌注6h,海马可检测到脑源性Epo的表达,再灌注12h,脑源性Epo表达达到较高水平,以后随时间延长逐渐下调。3-NPA预处理组海马Epo的表达在脑缺血再灌注后6h和12h高于对照组,1d、3d、7d与对照组比较无显著性差异。结论:3-NPA预处理可以诱导脑缺血耐受,在3-NPA预处理后脑缺血再灌注早期Epo的表达增强,提示Epo可能是3-NPA预处理形成的机制之一。     

沙土鼠脑缺血后海马CA1区神经细胞凋亡、相关基因表达及亚低温的干预作用

目的 研究沙土鼠脑缺血后海马CA1区神经细胞凋亡、相关基因表达及亚低温的干预作用. 方法 72只沙土鼠采用随机数字表法分为假手术组(SH)、低温假手术组(HSH)、常温再灌注组(IR)和低温再灌注组(HIR).采用双侧颈总动脉阻断5 min制作脑缺血再灌注损伤模型,各组依术后处死动物时间的不同再分为1、3、7d亚组(n=6),在预定时间点行开阔法迷宫检查、TUNEL法检测海马CA1区神经细胞的凋亡、免疫组化检测肿瘤抑制基因p53、核因子-kB的表达情况.结果 常温状态下脑缺血5 min可诱导沙土鼠1、3、7d的探索活动增加(P<0.051.亚低温状态下仅缺血再灌注后1 d探索活动增加(P<0.05);TUNEL与免疫组化染色显示海马CA1区神经细胞凋亡数量及p53蛋白和NF-KB表达增加,亚低温对以上过程有明显抑制作用(P均<0.05). 结论 海马CA1区p53蛋白和NF-KB表达增加可能是沙土鼠脑缺血5 min神经元凋亡的机制之一,亚低温脑保护机制可能与其对此过程的抑制作用有关.     

实验性局灶性脑缺血再灌注后HSP70 mRNA的表达

目的：探讨脑缺血后HSP70mRNA表达变化，方法：采用沙土鼠短暂前脑缺血再灌注损伤模型。Northern blot定量检测HSP70m RNA表达，结果：沙土鼠前脑缺血6分钟再灌注后各时期HSP70 mRNA表达量增加（P＜0．05），热休克预处理能增加沙土鼠短暂前脑缺血再灌注后各时期HSP70 mRNA表达（P＜0．05），结论：沙土鼠前脑缺血6分钟再灌注后各时期HSP70 mRNA表达增加，热休克预处理增加HSP70mRNA表达。