实时荧光定量PCR法检测镇江市流感样病例样本的结果与分析

目的建立实时荧光定量PCR快速检测流感病毒核酸的检测方法,并对2009年镇江市流感检测结果进行分析,为流感的预防控制提供科学依据。方法采集镇江市3家哨点医院的流感样病例和暴发疫点现患病例的咽拭子标本,应用实时荧光定量PCR方法进行检测。结果2229份哨点医院采集的标本中检测出流感核酸阳性标本758例,其中423份为新甲型H1N1,242份为H3N2,8份为H1N1,26份为B型;356份暴发疫情采集的标本中检测出流感核酸阳性标本165例,其中112份为新甲型H1N1,51份为H3N2,2份为B型。结论镇江市哨点医院2009年6-7月流感流行为B型流感,8-9月流行H3N2型流感,10-12月流行新甲型H1N1;暴发疫情6月份出现首例新甲型H1N1,7月和8月新甲型H1N1以局部暴发为主要特征,9-12月新甲型H1N1所占流感病毒阳性比例呈明显增加趋势,应重点加强学校以及聚集性地方新甲型H1N1流感的监测和防制工作。     

玉溪市2009年流感监测分析

目的了解玉溪市流感流行动态,揭示玉溪市流感流行及病原学的变化,为更好地做好流感预防控制工作。方法按全国流感监测方案,对暴发疫情和哨点医院采集流感样病例咽拭子标本,用Real-time RT-PCR方法检测。结果 2009年玉溪市流感网络实验室共检测流感样病例标本980份,甲型H1N1核酸阳性143份,阳性率14.59%,甲型H1阳性11份,阳性率1.33%;甲型H3阳性80份,阳性率8.16%;B型核酸阳性6份,阳性率0.61%。结论玉溪市的流感病原,季节性H1、H3、B型和甲型H1N1流感同时存在,但甲型H1N1逐步成为流行的优势毒株。     

天津地区2009年流感病原学监测分析

目的:观察2009年天津市流感流行趋势、流感样病例群体暴发和甲型H1N1重症病例病原学监测情况。方法:对2009年国家级流感样病例监测哨点医院采集的流感样病例(ILI)咽拭子标本,采用病毒分离鉴定和real-time PCR检测。对疑似甲型H1N1流感病毒感染的重症病例、集中暴发病例及散发病例的呼吸道标本进行real-time PCR检测。同时对2009年5月-7月的ILI散发病例进行RT-PCR和Real-time PCR法检测,比较两种方法检测结果。对2009年9月份国家哨点医院采集标本进行核酸检测和病毒分离两种方法进行。结果:2009年共采集国家级哨点医院流感样病例标本3264份,970份流感病毒阳性,总检出率为29.7%,其中甲型H1N1亚型占55.9%(542/970株),季节性H3占26.5%(257/970株),季节性H3占26.5%(257/970株),季节性H1占7.9%(77/970),B型占0.9%(9/970株)。10月甲型H1N1明显上升,11月达高峰(91.1%),15～岁年龄段阳性率最高(72.7%)。650份疑似甲型H1N1流感重症病例中,196例(30.2%)为阳性,25～岁年龄组阳性数最高(106例),男女比例相似。321份暴发疫情标本中,190份为流感病毒阳性(59.2%)。其中甲型H1N1占44.5%(143/190),季节性H3占12.8%(41/190),B型占1.9%(6/190),未检出季节性H1。4、5月以B型为主,9～12月以甲型H1N1为主。主要为5～25岁学生。对129例散发ILI病例同时进行RT-PCR和Real-time PCR法检测,结果完全一致,均为18例流感病毒阳性。对9月份采集的474份标本进行核酸检测和病毒分离,178份核酸检测阳性,其中107例分离出毒株。结论:2009年天津地区同时存在甲型H1N1、季节性H1、H3和B型流感病毒,甲型H1N1流感病毒为优势流行型。重症病例中30.2%是由甲型H1N1流感病毒引起。暴发疫情以甲型H1N1流感病毒为主。RT-PCR和Real-time PCR法均可用于检测流感病毒。ILI核酸检测阳性率高于病毒分离阳性率。     

2009年-2011年铁岭市流感样病例病原学监测结果分析

目的:通过流感样病例监测,及时准确对流感病毒进行核酸检测及分型鉴定,快速筛查出甲型H1N1流感病毒,为临床治疗和预防控制提供依据。方法:采集2009年-2011年哨点医院的流感样病例咽拭子标本,采用RT-PCR方法检测流感病毒核酸并进行分型鉴定,再对甲型阳性标本采用Real-time RT-PCR方法筛查出甲型H1N1流感病毒。结果:2009年9月-2011年3月共采集流感样病例标本1292份,核酸阳性标本有110例,经RT-PCR分型鉴定甲型流感病毒71例,占64.55%(H1N1亚型2例占1.82%;H3N2亚型43例占39.09%;SWH1N1亚型26例,占23.64%),乙型流感病毒39例,占35.45%。结论:铁岭市2009年9月-2011年3月流感流行期主要以甲型H3N2亚型为主,并在流感样病例监测中检测出引起世界大流行的新型毒株甲型H1N1型,因此应加大对流感样病例监测检测力度,防止疫情的扩散。     

黄山市2009～2012年流感病原学监测结果分析

目的通过流感样病例监测,了解黄山市流感病原学分布情况,为临床诊断和预防控制提供依据。方法采集哨点医院流感样病例的咽拭子标本,采用RealTime RT-PCR方法检测流感病毒核酸并鉴定亚型。结果黄山市2009年8月到2012年12月哨点医院共采集到咽拭子标本1 800份,核酸检测阳性标本共422份,阳性率为23.44%。结论黄山市2009年主要以甲型H1N1流感为主,2010年主要以B型为主,2011年主要以B型和甲型H1N1流感为主,2012年主要以B型和季H3型流感为主,流感发病主要在冬春季节。     

惠州市2009年流感监测结果分析

目的了解惠州市2009年度流感的流行特征,探索流行规律,为流感的防治提供科学依据。方法采集哨点医院和暴发疫情流感样病例咽拭子标本,用MDCK细胞进行流感病毒分离,采用实时荧光定量PCR进行流感病毒分型。结果从哨点医院采集的1 482例标本中共分离271份流感病毒,其中A型265株,B(Victoria)型6株;在22起流感样病例暴发疫情中,由新甲型H1N1引起的有16起,86.4%都集中在中小学学校。结论 2009年惠州市流感监测医院的流感样病例全年均有发生,以秋、冬季为高发季节。2009年主要流行毒株为新甲型H1N1毒株。     

2009-2010年度广元市流感监测

目的了解广元市流感流行特征与流感病毒亚型分布情况,分析其流行趋势,为流感防控提供科学依据。方法 收集2009-2010年度广元市各哨点医院流感样病例(Influenza-Like Illness)监测资料、病原学监测结果及暴发疫情信息,用统计学方法对监测结果进行分析。结果2009—2010年度全市哨点医院共报告流感样病例(ILI)8 702例,流感样病例就诊百分比(ILI%)平均为2.95%(8 702/295 490)。采集流感样病例标本327份,病原学检测阳性率为59.02%,其中新甲型H1N1占70.98%,其次季节性流感甲型H3亚型占15.54%。本年度发生流感样病例聚集性暴发疫情15起,多发生在中小学校和监管场所等处。结论新型甲型H1N1是2009-2010年度广元市流感流行的优势型别,暴发疫情多发生人群聚集的环境。     

江苏省连云港市2009～2010年流感监测分析

目的监测流感流行趋势,了解连云港市流感病毒的活动特点,为制定流感防治策略提供科学依据。方法用实时荧光定量RT-PCR方法对流感样病例标本进行核酸检测分型,并对连云港市2009～2010年的流感样病例监测资料进行描述分析。结果 2009年7月～2010年12月,从哨点医院采集的2008份疑似流感样病例标本中,检测流感病毒核酸阳性530份,阳性率为26.39%,其中新甲型H1N1型263份,H1型7份,H3型222份,B型38份。2009年8月出现新甲型H1N1疫情,9月为高峰期。2010年高峰月出现在3月和9月。结论连云港市可能存在春季和秋季两个流感流行高峰,应进一步加强对流感的监测。     

淮北市2009～2011年流感病原学监测结果分析

目的通过采集流感样病例咽拭子标本进行流感病毒核酸检测,并对检测结果进行流行病学分析,了解流感的流行规律,为制定有效的防控措施提供依据。方法2009年9月-2011年2月,由哨点医院采集流感样病例咽拭子标本,用RT—PCR方法进行流感病毒核酸检测。结果淮北市2009～2011年12月共检测流感样病例咽拭子1620份,核酸阳性标本242例,阳性率为14．94％。其中,甲型H1N1196例,主要集中在2009年8月～12月;季节性H12例,季节性H334例,B型流感病毒10例。结论2009—2011年流感监测结果显示,2009～2011年,淮北市流感疫情以甲型H1N1为主,伴有甲型H3亚型和乙型散发。流感的发病人群以5—59岁年龄段为主,是流感防控的重点人群。     

西宁市首起乡镇中学甲型HIN1流感暴发疫情分析

目的了解甲型H1N1流感暴发疫情的特点,为控制学校甲型H1N1流感暴发疫情提供科学依据。方法采取现场流行病学调查方法,对2009年9月西宁市首起甲型H1N1流感暴发乡镇中学所有病例进行问卷调查。对发病3d内患者采集咽拭子标本,使用荧光定量PCR方法检测甲型H1N1流感病毒核酸,对密切接触者进行7d的医学观察。收集学校所在社区部分流感样病例咽拭子标本,了解甲型H1N1流感病毒感染状况。结果疫情持续14d,共发生流感样病例96例,罹患率为18．46％。采集53份患者咽拭子标本中27份甲型H1N1核酸为阳性,阳性率为50．94％。302名密切接触者未发生被感染病例。275份社区流感样病例咽拭子标本甲型H1N1流感核酸阳性率为10．18％。结论西宁市首起乡镇中学甲型H1N1流感暴发疫情感染来源为社区;甲型H1N1流感疫情流行病学特征与季节性流感相似。     

Co-circulation of pandemic 2009 H1N1, classical swine H1N1 and avian-like swine H1N1 influenza viruses in pigs in China

The pandemic A/H1N1 influenza viruses emerged in both Mexico and the United States in March 2009, and were transmitted efficiently in the human population. They were transmitted occasionally from humans to other mammals including pigs, dogs and cats. In this study, we report the isolation and genetic analysis of novel viruses in pigs in China. These viruses were related phylogenetically to the pandemic 2009 H1N1 influenza viruses isolated from humans and pigs, which indicates that the pandemic virus is currently circulating in swine populations, and this hypothesis was further supported by serological surveillance of pig sera collected within the same period. Furthermore, we isolated another two H1N1 viruses belonging to the lineages of classical swine H1N1 virus and avian-like swine H1N1 virus, respectively. Multiple genetic lineages of H1N1 viruses are co-circulating in the swine population, which highlights the importance of intensive surveillance for swine influenza in China.     

工作场所空气中1,1-二氯-1-硝基乙烷的气相色谱测定法

目的 建立工作场所空气中1,1-二氯-1-硝基乙烷的气相色谱测定方法.方法 活性炭管采集工作场所空气中的1,1-二氯-1-硝基乙烷,以二硫化碳解吸后毛细管柱气相色谱法测定.结果 方法的测定范围为4.0～858.2μg/ml;回归方程Y=283X-1076,相关系数r=0.9999;最低检出浓度为0.4 mg/m3(以采集3L空气样品计);不同浓度测定的相对标准偏差(RSD)为1.8%～4.1%(批内精密度试验的RSD分别为2.9%、1.8%和2.0%;批间精密度试验的RSD分别为4.1%、3.5%和3.2%);解吸效率为88.5%～90.6%;穿透容量大于0.7 mg;采样效率100%;样品在室温下至少可保存7 d.结论 方法的各项指标均符合GBZ/T210.4-2008<职业卫生标准制订指南-工作场所空气中化学物质测定方法>要求,可用于工作场所空气中1,1-二氯-1-硝基乙烷的测定.     

苗族人群细胞色素及GSTMI基因多态性分布

目的 了解细胞色素P4501A1(CYP1A1)与谷胱甘肽硫转移酶(GST)M1基因多态性在贵州苗族人群中的分布.方法 采用聚合酶链反应(PCR)和聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术检测CYP1A1和GSTM1基因的多态性.结果 97人中CYP1A1基因型为野生型、杂合型、突变型的分别有69,18,10人,分别占71.13%,18.56%,10.31%;野生型等位基因频率为0.805,突变型等位基因频率为0.195.97人中有67人为GSTM1基因缺陷型,GSTM1缺陷型占69%.结论 贵州苗族CYP1A1m1突变型等位基因频率明显低于亚洲人.而高于欧洲人群;贵州苗族GSTM1基因缺陷率与中国汉族人相比无明显差异,但明显高于日本人、韩国人、德国人和波兰人.     

PD-1/PD-L1在肝细胞癌中免疫调节作用的研究进展

肝细胞癌是世界上最常见的致死性肿瘤之一,程序性死亡蛋白-1(PD-1)和程序性死亡配体-1(PD-L1)这对免疫共抑制分子在肝癌细胞中广泛表达。目前以抗PD-1/PD-L1为靶点的免疫治疗在多种肿瘤中取得了良好而持久的疗效。然而PD-1/PD-L1在肝细胞癌微环境中的免疫调节机制尚待完善,是否对抗PD-1/PD-L1治疗敏感及如何联合其他治疗目前尚无定论。笔者主要对PD-1/PD-L1通路在肝细胞癌中的免疫调节及抗PD-1/PD-L1在肝细胞癌治疗方面的研究进展进行综述。     

妊娠合并重症新型甲型H1N1流感患者抗H1N1抗体IgG亚类的分布

目的探讨妊娠合并重症甲型H1N1流感患者抗H1N1抗体各IgG亚类在血清中的分布特点。方法收集2009年11月14日-12月31日,确诊的女性甲型H1N1流感患者,分为妊娠病例组,非妊娠病例组,同时收集抗甲型H1N1抗体阳性的健康妊娠女性作为妊娠对照组,采用ELISA法检测各组血清特异性IgG及亚类的百分结合率。结果妊娠病例组的IgG2I、gG3I、gG4亚类的百分结合率中位数分别为53.0%、65.0%、61.6%,均低于妊娠对照组,差异有统计学意义(P<0.05);各组的特异性抗甲型H1N1 IgG均以IgG1亚类为主,为>70.0%,妊娠病例组的IgG2亚类占5.0%,低于非妊娠病例组的10.0%和妊娠对照组的8.0%,(P<0.05)。结论妊娠合并甲型H1N1流感患者中,特异性抗甲型H1N1 IgG以IgG1亚类为主,IgG2亚类的绝对及相对下降与甲型H1N1感染相关。     

中磺酸抑制人单核细胞系THP-1细胞ACAT-1表达

目的观察牛磺酸对人单核细胞系THP-1细胞酰基辅酶A、胆固醇酰基转移酶-1（ACAT-1）表达的影响，以期为牛磺酸用于临床治疗动脉粥样硬化提供实验依据。方法在有或无干扰素-γ（IFN—γ）的条件下，用不同浓度的牛磺酸与THP-1持续孵育不同的时间，RT-PCR检测ACAT—1mRNA水平，Western Blot检测其蛋白表达。结果牛磺酸显著下调THP-1的ACAT-1mRNA和蛋白表达水平（P〈0．05～0．0l，n=3），并呈时间和剂量依赖性效应。IFN-γ促进ACAT-1mRNA和蛋白表达（P〈0．05），该作用被牛磺酸部分抑制（P〈0．01）。结论牛磺酸抑制ACAT-1的基础表达和由IFN-γ诱导的表达，这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

Detection of equine herpesvirus 1 genome 1B in Argentina

To determine the genomic variation of equine herpesviruses (EHVs) isolated in Argentina between 1979 and the first half of 2004, DNA sequences from all 69 strains isolated were analysed. Sixty strains were recovered from aborted fetuses, one from leucocyte-rich plasma from a horse with respiratory signs and eight from cases of neonatal disease. The DNA was extracted from rabbit kidney epithelial (RK13) cells infected with each strain and digested with three restriction endonucleases (BamHI, Bg/II and KpnI). Two strains could be differentiated using BamHI restriction and were assigned to the EHV-1 1B prototype group. Only one of these two strains was typed EHV-1 1B with Bg/II. DNA digestion with KpnI was ineffective. The results obtained in this study demonstrate that the EHV-1 1B genome has been present in Argentina since at least 1996. The finding of two strains with this electropherotype suggests that there is genomic heterogeneity among Argentinian isolates.     

Detection of CYP1A1 gene polymorphism using designed RFLP and distributions of CYP1A1 genotypes in Japanese

Isoleucine (Ile)-valine (Val) polymorphism, which is caused by a point mutation from A to G in exon 7, is reported to be associated with an elevated risk of lung cancer among Japanese. Because CYP1A1 catalyzes bioactivation of environmental procarcinogens, such as benzo[a]pyrene, it is very important to study the clinical meaning of Ile-Val polymorphism using an epidemiological study. In an epidemiological study, easy, economical, rapid and reliable identification of the CYP1A1 genotype is necessary. The present study shows that the new method, designed restriction fragment length polymorphism (designed RFLP), can detect Ile-Val polymorphism of CYP1A1 The Ile-Val polymorphism detected using this new method was consistent with that found by the allele-specific PCR amplifications (ASA) method in six cases tested. This new method detected Ile-Va1 polymorphism of CYP1A1 using 240 healthy Japanese who lived in the northern Kyusyu region. The frequency of the genotypes was as follows: Ile/Ile, 159 (66.2%); Ile/Val, 65 (27.1%); Val/Val, 16 (6.7%). The frequency of the Ile gene was 0.798 and that of the Val gene, 0.202. There was no difference in Ile-Val polymorphism based on sex or age. Racial differences influenced the distribution of this polymorphism, but Japanese regional differences did not. Since this new method, designed RFLP, is rapid, reliable and suitable for large-scale screening of polymorphisms, it may be used routinely to detect Ile-Val polymorphism of CYP1A1 Furthermore, it will help to evaluate the relationship between CYP1A1 polymorphism and individual sensitivity to xenobiotics that may affect the incidence of lung cancer.     

Associations of clinical features in neurofibromatosis 1 (NF1)

Neurofibromatosis 1 (NF1), an autosomal dominant disease, exhibits extreme clinical variability. This variability greatly increases the burden for affected families and impairs our ability to understand the pathogenesis of NF1. Recognition of heterogeneity within a disease may provide important pathogenic insights, therefore we tested clinical data from three large sets of NF1 patients for evidence that certain common features are more likely to occur in some NF1 patients than in others. Clinical information on 4,402 patients with NF1 was obtained from three independent databases. We examined associations between pairs of clinical features in individual affected probands. We also examined associations between the occurrence of individual features in affected relatives. Associations were summarized as odds ratios with 95% confidence intervals. We found associations between several pairs of features in affected probands: intertriginous freckling and Lisch nodules, discrete neurofibromas and plexiform neurofibromas, discrete neurofibromas and Lisch nodules, plexiform neurofibromas and scoliosis, learning disability or mental retardation and seizures. We also found associations between the occurrence of Lisch nodules, macrocephaly, short stature, and learning disability or mental retardation as individual features in parents and children with NF1. Our observations suggest that, contrary to established belief, some NF1 patients are more likely than others to develop particular manifestations of the disease. Genetic factors appear to determine the development of particular phenotypic features.     

郴州市甲型H1N1流感流行态势研究

目的了解郴州市甲型H1N1流感流行特征,分析流行原因,为防控工作提供科学依据。方法收集郴州市2009-2010年甲型H1N1流感疫情、监测资料,运用描述性流行病学进行分析。结果郴州市2009-2010年报告甲型H1N1流感病例4 459例,发病率95.61/10万,其中重症病例17例（占0.38%）,死亡3例,病死率0.67‰;疫情从2009年8月上旬发生输入性病例开始,发病数快速上升,11月份达到发病高峰,2010年1月份快速下降,并维持在较低水平;病例多为在校学生,占病例数的95.70%,男性发病数明显多于女性;发生暴发疫情38起,其中发生在学校36起,续发率3.98%;流感监测显示：9月份以后甲型H1N1流感病毒迅速取代季节性流感病毒,成为流行优势病毒株;甲型H1N1流感病毒感染状况调查IgG抗体阳性率32.28%。结论郴州市甲型H1N1流感疫情通过综合措施得到有效防控;通过加强监测,积极开展疫苗接种,能够有效遏制甲型H1N1流感快速传播。