抗凋亡基因BAG-1与肿瘤

抗凋亡基因与肿瘤的发生、发展密切相关，其通过抑制细胞的正常凋亡而延长细胞生存时间，甚至导致细胞恶变。Bcl-2结合抗凋亡基因（BAG-1基因）是一个新近发现的抗凋亡基因，其可通过与多种靶蛋白作用而发挥抑制细胞凋亡的作用。现将其与肿瘤发生、发展的关系及机制综述如下。     

急性肝功能衰竭大鼠中凋亡相关蛋白的表达

细胞凋亡为急、慢性肝病的主要特征之一.近来研究表明,Bcl-2家族蛋白在细胞凋亡的胞内信号转导途径中发挥重要作用[1-3].目前发现,Bcl-2家族蛋白有20余种,其中Bcl-2、Bcl-xL蛋白具有抗凋亡作用,而Bad、Bax和Bid等具有促凋亡作用[2-4].     

自噬在预处理心肌保护中的作用研究进展

预处理可通过调节自噬发挥心肌保护作用。缺血预处理对自噬的调节可能与 Bcl-2结合的抗凋亡蛋白 BAG-1、自噬相关蛋白 Beclin-1相关。此外,多种药物预处理也可以通过诱发自噬,减轻缺血-再灌注引发的心肌损伤。该文介绍自噬在预处理心肌保护中的作用及机制。     

Ki—67与BcL—2、Bax抗原性良性前列腺增生中的表达及意义

Ki- 67是一种存在于增殖细胞核内的非组蛋白性核蛋白 ,与细胞增殖密切相关[1] 。Bcl- 2基因家族是调节细胞凋亡的重要基因家族。Bcl- 2、Bax是 Bcl- 2家族极其重要的成员。Bcl- 2基因对细胞凋亡具有明显的抑制作用 ,Bax蛋白具有对抗 Bcl- 2蛋白抑制细胞凋亡的作用 ,Bcl- 2与 Bax的比例是决定细胞凋亡的关键因素[2 ] 。本文采用免疫组化法研究 Ki- 67与Bcl- 2、Bax抗原在正常及增生前列腺组织中的表达 ,探讨其在前列腺增生中表达的意义。1　资料与方法1 .1　一般资料　正常前列腺 ( NP)组织标本 1 0例来自尸体供肾者 ,年龄 2 1～ 2 7岁…     

白藜芦醇通过SDF-1/CXCR4信号通路诱导大肠癌细胞株SW480凋亡

[目的]探讨白藜芦醇(Res)对大肠癌细胞株SW480增殖、凋亡的影响,并研究Res对SDF-1/CXCR4信号通路的作用。[方法]以20、40、80μmol/L Res处理SW480细胞后,采用CCK8方法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western Blot方法分析细胞中凋亡相关蛋白Cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2及SDF-1/CXCR4信号通路相关蛋白的表达水平。[结果]Res处理SW480细胞后,细胞增殖抑制率明显升高,且呈时间和剂量依赖性(P0.05);Res处理后SW480细胞凋亡率也显著升高(P0.05);药物处理组中促凋亡蛋白Cleaved caspase-3、Bax表达显著升高,而抗凋亡蛋白Bcl-2及SDF-1、CXCR4蛋白表达水平显著降低,表现出剂量依赖性(P0.05)。[结论]Res抑制大肠癌细胞株SW480增殖、诱导其凋亡,其作用机制可能与降低SDF-1/CXCR4信号通路活化相关。     

钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ致血管平滑肌细胞凋亡的影响及其机制

目的探讨钩藤碱和异钩藤碱对血管紧张素Ⅱ致血管平滑肌细胞凋亡的影响及其机制。方法建立血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞凋亡模型,通过倒置相差显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞术和逆转录聚合酶链反应观察钩藤碱和异钩藤碱对细胞形态、细胞凋亡率、细胞[Ca2 ]i浓度、Bcl-2和Bax蛋白表达与mRNA转录的影响。结果钩藤碱和异钩藤碱能诱导血管平滑肌细胞凋亡,提高细胞凋亡百分率,降低细胞[Ca2 ]i浓度,下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达,升高BaxmRNA/Bcl-2mRNA的比值。结论钩藤碱和异钩藤碱具有诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用,其机制与降低细胞[Ca2 ]i浓度、下调Bcl-2蛋白表达及mRNA转录、上调Bax蛋白表达及mRNA转录有关。     

苦参碱对体外诱导人结肠HT29细胞凋亡作用的实验研究

[目的]研究苦参碱（matrine,MA）对体外诱导人结肠癌HT29细胞的凋亡作用及其机制。[方法]不同浓度MA（0-32mg／m1）作用HT29细胞24h后,流式细胞仪检测细胞凋亡,线粒体跨膜电位检测试剂盒（3C-1）检测线粒体膜电位（Apm）变化,分光光度法检测caspase-3,9酶活性,Westernblot法检测线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bcl-2表达。[结果]MA显著诱导HT29细胞凋亡;16mg／mlMA作用HT29细胞24h后,caspase-9,-3酶活性明显升高;Westernblot结果显示：MA处理组促凋亡蛋白Pax表达明显升高,抗凋亡蛋白Bcl2表达明显降低。[结论]MA具有促进结肠癌细胞凋亡的作用,且具有剂量依赖性,其机制与线粒体凋亡途径有关。     

健脾理气合剂对糖尿病胃轻瘫大鼠胃组织凋亡及相关基因Bcl-2、Bax的影响

[目的]观察健脾理气合剂对糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)大鼠胃组织细胞凋亡及相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。[方法]建立DGP模型,分别予生理盐水、吗丁啉混悬液、健脾理气合剂(高、低剂量)连续灌胃给药3周,检测血糖、胃组织细胞凋亡率,以及胃组织中Bax,Bcl-2蛋白表达。[结果]健脾理气合剂高剂量组与低剂量组、吗丁啉组比较,其胃平滑肌细胞凋亡率明显降低(P0.05),胃壁组织的Bax基因表达明显减少(P0.05),Bcl-2基因表达明显增加(P0.05)。[结论]健脾理气合剂可以减少糖尿病轻瘫大鼠胃壁组织平滑肌细胞凋亡,良性调控胃壁组织的Bax和Bcl-2蛋白表达。     

沉默EZH2基因对胃癌细胞增殖及凋亡的影响

[目的]探讨沉默胃癌细胞株MGC803中的EZH2基因对细胞增殖及凋亡的影响。[方法]采用siRNA沉默胃癌细胞中的EZH2基因并用qRT-PCR及western blot验证沉默效率;MTT法评估细胞增殖情况,运用western blot分析凋亡蛋白相关蛋白Bcl-2及Bax的表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡变化。[结果]胃癌细胞中的EZH2基因被成功沉默;沉默组细胞的增殖情况较正常组和阴性对照组明显降低(P0.05),而凋亡率相对于其他2组明显升高(P0.05);沉默组中Bcl-2蛋白的表达量降低而Bax蛋白表达显著升高(P0.05)。[结论]沉默胃癌细胞中的EZH2基因能抑制该肿瘤细胞的增殖并促进其凋亡。     

黄芪多糖和水蛭素联合干预对巨噬细胞脂质积聚的影响及其机制

目的]明确黄芪多糖和水蛭素联合干预对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞内脂质积聚、线粒体膜电位和细胞凋亡相关蛋白的影响。 [方法]采用100 mg/L ox-LDL孵育RAW264.7细胞24 h建立泡沫细胞模型,采用优化浓度的黄芪多糖和水蛭素联合干预,设立对照组、模型组、黄芪多糖组、水蛭素组和二者联合干预组。采用油红O染色和氧化酶法检测ox-LDL诱导的巨噬细胞内胆固醇含量,流式细胞仪检测巨噬细胞早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率,激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位的变化,Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白Caspase-3和Bax的表达水平。 [结果]与水蛭素组、黄芪多糖组相比,黄芪多糖和水蛭素联合干预组细胞内胆固醇含量降低更明显(P＜0.05)。与模型组相比,黄芪多糖＋水蛭素联合干预组可显著降低ox-LDL诱导的巨噬细胞早期凋亡率和总凋亡率(P＜0.01)、上调巨噬细胞线粒体膜电位(P＜0.01),并显著降低Caspase-3和Bax蛋白表达量,升高Bcl-2蛋白表达量(P＜0.05)。 [结论]黄芪多糖和水蛭素联合干预可降低巨噬细胞内脂质积聚,且优于单独用药干预,两者联合干预可降低ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡率,其作用机制可能与调控线粒体膜电位和改善促凋亡蛋白Caspase-3、Bax以及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。     

β-榄香烯对肝星状细胞凋亡相关蛋白Bcl-2家族的影响

[目的]研究β-榄香烯对肝星状细胞(HSC)凋亡及凋亡相关蛋白的影响。[方法]传代培养的大鼠HSC系HSC-T6与不同剂量β-榄香烯(终浓度为10、5、2.5 mg/L)共同培养48 h后,应用Annexin-V-碘化丙锭染色检测β-榄香烯对HSC凋亡的影响,免疫组化检测凋亡相关蛋白BcL-2/Bax。[结果]β-榄香烯可使HSC凋亡率明显增多,同时可使凋亡抑制分子Bcl-2表达下调,促凋亡分子Bax表达增强(P<0.01)。[结论]β-榄香烯可通过下调Bcl-2/Bax比率,促进HSC凋亡。     

Ki-67与BcL-2、Bax抗原在良性前列腺增生中的表达及意义

Ki-67是一种存在于增殖细胞核内的非组蛋白性核蛋白,与细胞增殖密切相关[1].Bcl-2基因家族是调节细胞凋亡的重要基因家族.Bcl-2、Bax是Bcl-2家族极其重要的成员.Bcl-2基因对细胞凋亡具有明显的抑制作用,Bax蛋白具有对抗Bcl-2蛋白抑制细胞凋亡的作用,Bcl-2与Bax的比例是决定细胞凋亡的关键因素[2].本文采用免疫组化法研究Ki-67与Bcl-2、Bax抗原在正常及增生前列腺组织中的表达,探讨其在前列腺增生中表达的意义.     

PCSK9-siRNA在抗ox-LDL诱导的THP-1源性巨噬细胞凋亡中对Bax、Bcl-2表达的影响

目的 研究PCSK9siRNA在抗ox-LDL诱导的THP-1源性巨噬细胞凋亡中对Bax、Bcl-2表达的影响.方法 用不同浓度ox-LDL处理THP-1源性巨噬细胞不同时间,免疫印迹法检测Bax、Bcl-2表达变化.应用Lipofectamine2000分别转染30、50 nmol/L和80 nmol/L PCSK9 siRNAs 进THP-1 源性巨噬细胞中,作用24 h后加入ox-LDL 处理48 h,免疫印迹法分析细胞Bax、Bcl-2表达,Hoechst33258染色观察形态评价细胞凋亡.结果 随着ox-LDL浓度的增加,Bax蛋白表达上调,而Bcl-2蛋白表达下调,呈浓度依赖性,80 μg/mL ox-LDL处理组作用最为明显;80 μg/mL ox-LDL处理THP-1源性巨噬细胞不同时间后,Bax蛋白表达上调,而Bcl-2蛋白表达下调,呈时间依赖性,48 h处理组作用最为明显;PCSK9 siRNA能明显下调Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,且均呈浓度依赖性;Hoechst33258染色显示,PCSK9 siRNA转染组细胞凋亡明显减少.结论 PCSK9 siRNA在抗ox-LDL诱导的THP-1 源性巨噬细胞凋亡中下调促凋亡蛋白Bax表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达.     

特发性肺纤维化的发病机制的研究进展

目前认为,特发性肺纤维化(IPF)是由于持续或反复的有害刺激,使肺泡上皮细胞损伤增加,正常肺泡结构再生修复发生障碍,成纤维细胞激活进行异常修复,最终导致纤维化.我们就此机制进行阐述. 一、上皮细胞的异常 1.肺泡上皮细胞凋亡:国际上普遍采用博莱霉素诱导的鼠类肺纤维化模型来研究特发性肺纤维化的发病机制.凋亡相关通路主要有Fas/FasL介导的死亡受体通路和线粒体通路.有研究[1]表明,博莱霉素诱导的肺泡上皮细胞凋亡依赖的活性氧激活的线粒体途径是一条非Fas/FasL依赖的途径.线粒体途径是通过Bc1-2蛋白家族的促凋亡蛋白和抗凋亡蛋白进行调节的,关键的调控步骤是Bcl-2家族蛋白通过在线粒体上形成离子通道改变线粒体膜的通透性,进而调控CytC释放.因此,线粒体途径也可被称为Bcl-2敏感的细胞凋亡途径.     

姜黄素对人胃癌MGC803的体外抑制作用

[目的]观察姜黄素对人胃癌MGC803细胞的生长抑制作用,观察药物作用时间浓度的关系并探究其诱导凋亡的机制。[方法]MTT法建立细胞剂量效应、时间效应曲线;caspase 3、caspase 9活性检测试剂盒及Western Blot实验分别检测caspase 3、caspase 9活性变化情况和Bax、Bcl-2蛋白表达情况。[结果]姜黄素对人胃癌MGC803细胞有明显的剂量-时间依赖效应;姜黄素干预后,caspase 3、caspase 9活性明显升高;Bcl-2蛋白水平显著下降,Bax蛋白表达明显升高。[结论]姜黄素在体外对人胃癌MGC803细胞的增殖具有抑制作用,其促凋亡可能是通过调控Bax、Bcl-2、caspase 3、caspase 9蛋白来实现的。     

大肠腺癌组织中BAG-1及其各亚型表达的临床意义

目的探讨凋亡抑制基因BAG-1及其各亚型表达在大肠癌发生、发展中的作用。方法用免疫组织化学SABC法分别检测正常大肠黏膜组织、大肠腺癌组织中BAG-1表达情况;蛋白印迹法检测BAG-1蛋白亚型在大肠腺癌组织、正常大肠组织及大肠腺瘤组织中的表达,并比较BAG-1及其亚型与大肠腺癌临床病理特征的关系。结果免疫组化结果显示,BAG-1蛋白表达在胞质（BAG-1S和／或BAG-1M）和胞核（BAG-1L）。大肠腺癌组织BAG-1蛋白表达阳性率明显高于正常大肠黏膜（P〈0．05）。BAG-1蛋白与大肠腺癌分化程度、Duke’s分期及淋巴结转移有关（P〈0．05）;BAG-1蛋白在大肠腺癌中表达亚型是BAG-1S;BAG-1S蛋白在大肠腺癌和大肠腺瘤中的表达均显著高于正常大肠黏膜（P〈0．01）;BAG-1S与大肠腺癌的分化程度有关（P〈0．01）。结论BAG-1蛋白参与了大肠腺癌的发生发展;起主要作用的亚型是BAG-1L和BAG-1S,其中BAG-1L可能与大肠腺癌的分化程度有关。     

BAG-1基因沉默对非小细胞肺癌放射敏感性的影响及机制

目的探讨BAG-1基因与非小细胞肺癌放射敏感性的关系,为非小细胞肺癌个体化治疗提供理论依据。方法对A549肺腺癌细胞、H460大细胞癌及NCL-H520鳞癌细胞三株非小细胞肺癌细胞株及人胚肾细胞株HEK293行细胞放射敏感性试验,采用Western blot法检测各细胞株中BAG-1蛋白表达情况。选择其中对放射线相对较抗拒、BAG-1蛋白表达最高的A549细胞株,构建干扰载体pGCsi-BAG-1并筛选BAG-1基因沉默细胞株,用shRNA-2转染,酶标仪检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,放射敏感性试验观察细胞对放射线的敏感性。结果 shRNA-2转染的细胞株生长受到抑制,且随时间延长抑制作用明显,而阴性对照质粒转染的A549细胞株生长无明显变化;6 Gy射线照射后24 h,shRNA-2转染细胞凋亡率为(49.6±4.23)%,未转染的A549细胞为(15.3±2.11)%,阴性对照质粒转染细胞为(14.8±3.55)%,shRNA-2转染细胞凋亡率较未转染细胞增加了3.2倍(P<0.01),而阴性对照转染细胞与未转染细胞间相比差异无统计学意义;亲本A549细胞和阴性对照转染细胞之间的放射敏感性无差异(P>0.05)。而shRNA-2转染细胞的放射敏感性明显增加,与前二者比较差异有显著性(P<0.05)。结论 BAG-1基因沉默可增强非小细胞肺癌放射敏感性,可能机制为BAG-1基因沉默后抑制细胞生长,抗凋亡作用减弱,细胞内BAG-1分布发生改变,细胞对射线更敏感。     

Bax蛋白与胃癌及胃癌前病变关系的研究进展

Oltvai等[1]在1993年首先在白细胞介素3(IL-3)依赖细胞的凋亡过程中发现了bax基因,bax基因是编码21 kDa的蛋白质,由192个氨基酸组成,Bax蛋白与Bcl-2蛋白同源性较高,因mRNA剪接方式不同,Bax-mRNA有α、β、δ、γ、σ、ζ6种亚型[2].Bax是bcl-2家族中第一个被确认有细胞凋亡促进作用的成员.     

三叶青黄酮对结肠癌SW620细胞增殖凋亡的影响

[目的]观察三叶青黄酮对结肠癌SW620细胞增殖凋亡的作用并探讨可能的机制。[方法]采用体外细胞培养技术,MTT法观察三叶青黄酮对SW620细胞增殖的影响,流式细胞术分析细胞凋亡率,Western Blotting检测Cle-caspase3、Cle-caspase9、Bax、Bcl-2蛋白表达改变。[结果]三叶青黄酮能显著地抑制SW620细胞增殖,并且具有剂量和时间依赖性。三叶青黄酮能显著地促进SW620细胞凋亡,并且呈剂量依赖性上调Cle-caspase3、Clecaspase9、Bax表达,下调Bcl-2表达。[结论]三叶青黄酮对人结肠癌SW620细胞具有抑制增殖和促进凋亡的作用。     

BAG-1与肿瘤

BAG-1是最近发现的一个多功能抗凋亡蛋白，它有多种亚型，并与细胞内多种分子靶向物质结合，参与正常细胞和恶性肿瘤细胞的生长控制信号转导。因此，BAG-1与肿瘤的关系引起肿瘤研究者们的浓厚兴趣，并探讨其是否能为未来肿瘤的早期预测、预后及治疗开辟一个新途径。下面我们简要介绍一下BAG-1的基本生物学特性及其与人类肿瘤的关系。