家栖鼠维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1 VKORC1基因启动子及第二外显子序列分析

目的探讨不同家栖鼠VKORC1基因片段大小是否存在差异,分析不同家栖鼠VKORC1基因启动子及第二外显子序列是否存在差异及与抗药性的关联。方法对捕自南通市3个区的家栖鼠提取尾组织DNA,采用sanger测序法对VKORC1基因启动子及第二外显子进行序列分析,通过SPSS 16. 0软件进行χ~2检验。结果黄胸鼠与褐家鼠的VKORC1基因片段大小存在差异。黄胸鼠VKORC1基因启动子序列共存在6处缺失突变和16个单核苷酸多态性(SNPs)。黄胸鼠第二外显子第90位氨基酸存在一个错义突变,3只抗药鼠均发生该错义突变,6只敏感鼠有3只发生了该错义突变。结论本研究发现VKORC1基因第二外显子第90位氨基酸的错义突变可能与鼠抗药性密切相关,有望为探讨家栖鼠发生抗药的分子机制奠定一定的基础。     

湛江地区家鼠抗药性的动态及其治理对策

目的探讨家鼠抗药性的动态及防制对策。方法根据家鼠抗药性和鼠情监测资料用百分率和χ2检验方法进行统计分析。结果使用抗凝血灭鼠剂灭鼠17年后黄胸鼠产生了群体抗性,抗性个体百分率为17.7%(10.6%～33.3%);不同调查地点和不同鼠种的抗药性水平差异均有显著性(P<0.05)。结论湛江地区家栖黄胸鼠已产生群体抗药性;建议继续加强抗药性监测,并根据抗性动态变化选用对应灭鼠药物,灭鼠措施应向综合防制转变。     

雷州半岛两种家栖鼠对第一代抗凝血灭鼠剂抗药性研究

目的　探讨家栖鼠对抗凝血灭鼠剂的抗药性变化。方法　按全国鼠类抗药性监测协作组统一方法,进行无选择性摄毒试验。结果　经对雷州半岛内湛江市区的赤坎区和霞山区、徐闻县城区、廉江市安铺镇区捕捉的257只褐家鼠、165只黄胸鼠,进行抗药性监测,褐家鼠暂未发现抗药性个体;黄胸鼠的抗性率为7 .88%,其存活摄药剂量在145. 90mg/kg以上,按家栖鼠抗药性检验标准,黄胸鼠产生抗药性个体。结论　雷州半岛的鼠类控制工作仍可继续使用第一代抗凝血灭鼠剂,但应加强对灭鼠药物的敏感性监测,科学、合理用药。     

长春市褐家鼠对抗凝血灭鼠剂抗药性调查

目的掌握褐家鼠对抗凝血灭鼠剂的抗药性情况,为家栖鼠的控制提供依据。方法按全国鼠类抗药性监测协作组统一方法,进行无选择性摄毒试验。结果对长春市内捕获的29只褐家鼠进行抗药性监测,其抗性率为3.45%,总平均摄药剂量为19.86mg/kg,按家栖鼠抗药性检验标准,褐家鼠未形成抗药性种群,只有抗药性个体产生。结论长春市城镇灭鼠可继续使用第一代抗凝血灭鼠剂,但应加强对灭鼠药物的敏感性监测,科学、合理用药。     

抗凝血灭鼠剂对家栖鼠的抗药性和药效比较

目的：探讨家栖鼠对抗凝血灭鼠剂的抗药性及毒效。方法：有选择性和无选择性摄食试验。结果：10年来圻春3种家栖鼠抗性发生率无大变化,反而试鼠的纯药平均致死剂量明显下降,但平均致死天数有所延长。4种抗凝血灭鼠剂对褐家鼠的毒杀率均在91%以上,单个笼养和围栏群养摄食系数依次为杀鼠迷0.85和1.58、溴敌降0.76和0.69、杀鼠灵0.38和0.31、敌鼠钠盐0.35和0.25。结论：两次抗性测定均表明圻春3种家栖鼠对抗凝血灭鼠剂具有高度敏感性,无抗药性种群发生,4种灭鼠剂对褐家鼠均有较高的毒杀效果,其中以杀鼠迷的适口性最好。     

广东省家柄鼠对第一代抗凝血灭鼠剂抗药性研究

目的 探讨广东省家栖鼠对抗凝血灭鼠剂的抗药性变化。方法 按全国鼠类抗药性监测协作组统一方法，进行无选择性摄毒试验。结果 经对广东省5市所捕捉的769只褐家鼠、303只黄胸鼠进行抗药性监测，其抗性率分别为1．69％和12．21％，总平均摄药剂量分别为10．36和131．96mg／kg，按家栖鼠抗药性检验标准，黄胸鼠和褐家鼠均对第一代抗凝血剂杀鼠灵产生抗药性个体。结论 以黄胸鼠为优势种的场所，要考虑使用第二代抗凝血灭鼠剂；而以褐家鼠为主的场所，则可继续使用第一代抗凝血灭鼠剂。同时应加强对灭鼠药物的敏感性监测。科学、合理用药。     

广州市家栖鼠对第一代抗凝血灭鼠剂抗药性研究

目的探讨家栖鼠对抗凝血灭鼠剂的抗药性变化。方法按全国鼠类抗药性监测协作组统一方法,进行无选择性摄毒试验。结果经对广州市所辖9区内捕获的130只褐家鼠、31只黄胸鼠、18只小家鼠进行抗药性监测,其抗性率分别为8.5%、45.2%和27.8%,总平均摄药剂量分别为17.72、278.46和1164.24mg/kg,按家栖鼠抗药性检验标准,黄胸鼠和小家鼠对第一代抗凝血剂杀鼠灵已形成抗药性种群,褐家鼠有抗药性个体产生。结论以黄胸鼠和小家鼠为优势种的场所,要考虑使用第二代抗凝血灭鼠剂;以褐家鼠为主的场所,则可继续使用第一代抗凝血灭鼠剂,但应加强对灭鼠药物的敏感性监测,科学、合理用药。     

广东省家栖鼠对第一代抗凝血灭鼠剂抗药性研究

目的 探讨广东省家栖鼠对抗凝血灭鼠剂的抗药性变化.方法 按全国鼠类抗药性监测协作组统一方法,进行无选择性摄毒试验.结果 经对广东省5市所捕捉的769只褐家鼠、303只黄胸鼠进行抗药性监测,其抗性率分别为1.69%和12.21%,总平均摄药剂量分别为10.36和131.96 mg/kg,按家栖鼠抗药性检验标准,黄胸鼠和褐家鼠均对第一代抗凝血剂杀鼠灵产生抗药性个体.结论 以黄胸鼠为优势种的场所,要考虑使用第二代抗凝血灭鼠剂;而以褐家鼠为主的场所,则可继续使用第一代抗凝血灭鼠剂,同时应加强对灭鼠药物的敏感性监测,科学、合理用药.     

佛山市城区两种家栖鼠对杀鼠灵的抗药性调查

目的 调查佛山市城区家栖鼠对第一代抗凝血剂杀鼠灵的抗药性。方法 按全国鼠类抗药性监测协作组统一方法，进行无选择性摄食试验。结果 经对佛山市城区内捕获的30只褐家鼠、38只黄胸鼠进行抗药性监测，其抗性率分别为0和34．21％，总平均摄药剂量分别为15．27和395．52mg／kg，按家栖鼠抗药性检验标准，黄胸鼠对杀鼠灵已形成抗药性种群。结论 以黄胸鼠为优势种的场所，要考虑使用第二代抗凝血灭鼠剂；而以褐家鼠为主的场所，则可继续使用第一代抗凝血灭鼠剂，同时应加强对灭鼠药物的敏感性监测，科学、合理用药。     

江门市家栖鼠对第一代抗凝血灭鼠剂抗药性研究

目的探讨家栖鼠对抗凝血灭鼠剂的抗药性变化。方法按全国鼠类抗药性监测协作组统一方法,进行无选择性摄毒试验。结果经对江门市城区(蓬江、江海、新会区)内所捕获的129只褐家鼠、37只黄胸鼠、15只小家鼠进行抗药性监测,其抗性率分别为0、10.81%和46.67%,总平均摄药剂量分别为12.00、143.12和582.41 mg/kg,按家栖鼠抗药性检验标准,小家鼠对第一代抗凝血剂杀鼠灵已形成抗药性种群,黄胸鼠有抗药性个体产生。结论以小家鼠为优势种的场所,要考虑使用第二代抗凝血灭鼠剂;而以褐家鼠、黄胸鼠为主的场所,则可继续使用第一代抗凝血灭鼠剂,但应加强对灭鼠药物的敏感性监测,科学、合理用药。     

Haplogroup analysis of vitamin-K epoxide reductase (VKORC1) gene: novel element in the optimization of anticoagulant therapy

Warfarin and acenocoumarols are the most commonly prescribed anticoagulants that is difficult to use because of the wide intra- and interpatient variation in the dose requirements, the narrow therapeutic range and the risk of serious bleeding. Vitamin K epoxide reductase (VKORC1) is the site of inhibition by coumarins. Mutations in the VKORC1 gene affect the sensitivity of the epoxy reductase enzyme for warfarin. The three main haplotypes of VKORC1 gene, *2, *3, *4, explain most of the genetic variability in warfarin dose among Caucasians. In the current paper we focus on this subject in view of our experience gained during molecular genetic tests for the main VKORC1 haplotypes in Hungarian patients with anticoagulant therapy and unusual clinical response. A total of 28 selected cases were characterized for VKORC1 G-1639A, G9041A and C6009T alleles. Genotyping has been carried out by molecular biology techniques, including PCR-RFLP assay and direct sequencing. In patients undergoing anticoagulant therapy we could identify VKORC1 *1*2, *2*2, *2*3, *1*4, *2*4 and *3*4 haplotypes. Patients with A haplotype group (14% of the studied patients) require much lower warfarin doses than other patients (2.7+/-0.2 mg/day). In our patients we found some with B haplotype group (25%) who require high warfarin dose (6.2+/-0.3 mg/day). There were also subjects bearing the A/B haplotype group (61%) with intermediate warfarin dose (4.9+/-0.2 mg/day), estimated by the haplotype analyses of the VKORC1 gene. Results presented here underline the need of VKORC1 haplotyping in anticoagulated patients with unusual clinical anticoagulant response, and the examination can have further therapeutic consequences.     

雷州市黄胸鼠对杀鼠灵的抗药性调查

目的检测捕自广东省雷州市的黄胸鼠在应用第二代抗凝血灭鼠剂数年后对第一代药物的抗性发生水平。方法将捕自雷州市郊的黄胸鼠室内预饲一段时间后,选择合格试鼠,配制0.005%杀鼠灵毒饵采用无选择性摄食试验法饲毒（LFP法）,观察并分析试鼠的死亡率与食毒量的关系。结果黄胸鼠抗性检测合格试鼠共36只,检测结束后试鼠因药物死亡32只,试鼠对杀鼠灵的抗性发生率为11.11%,接近抗性种群形成临界水平;死亡试鼠性别间在致死剂量和死亡时间上差异无统计学意义（df=30,Pd=0.987,Pt=0.971）;全部死亡试鼠平均食毒剂量（115.71±53.84）mg/kg,平均死亡时间（7.2±2.4）d。结论在抗凝血灭鼠剂的使用过程中要定期监测害鼠对药物的敏感度变化趋势,为药物灭鼠的选择提供依据,以节省有限的药物资源。     

胆钙化醇灭鼠剂的研究

长期高强度的施用抗凝血灭鼠剂,家栖鼠已经出现较大范围的拒食和耐药现象,需要研发一种可以有效克服抗凝血灭鼠剂耐药性或抗药性的新型灭鼠剂。胆钙化醇灭鼠剂(cholecalciferol)是一种安全性好、可以防治对抗凝血灭鼠剂产生抗药性鼠的新型灭鼠剂,在美国、新西兰等发达国家得到广泛应用。本文综述了胆钙化醇灭鼠剂的毒力、现场灭效、适口性及对抗药鼠灭效等国内外研究进展,以此展望胆钙化醇灭鼠剂在我国的应用潜力。     

南通市黄胸鼠对杀鼠灵的抗药性研究

目的了解南通市区黄胸鼠对杀鼠灵的抗药性。方法 PT测定采用仪器法,无选择性摄食实验在实验室进行,摄食0.05%杀鼠灵毒饵。结果 22只实验黄胸鼠其PT(以INR值表示)平均值为0.94;在9 d的摄食过程中,平均摄药量为148.9 mg/kg,在25 d的观察期内,16只死亡,6只存活;存活的黄胸鼠中,其摄药量均超过黄胸鼠143 mg/kg的抗药性标准,抗药性发生率达到了27.3%。结论南通市区黄胸鼠对第一代抗凝血灭鼠剂杀鼠灵可能已产生群体抗药性。     

Rodentizidresistenz und Konsequenzen

Resistance to anticoagulant rodenticides, such as warfarin was first described in 1958. Polymorphisms in the vitamin K epoxide reductase complex subunit 1 (VKORC1) gene and respective substitutions of amino acids in the VKOR enzyme are the major cause for rodenticide resistance. Resistant Norway rats in Germany are characterized by the Tyr139Cys genotype, which is spread throughout the northwest of the country. Resistant house mice with the VKOR variants Tyr139Cys, Leu128Ser and Arg12Trp/Ala26Ser/Ala48Thr/Arg61Leu (spretus type) are distributed over a number of locations in Germany. Resistance can reduce management attempts with consequences for stored product protection, hygiene and animal health. Anticoagulants of the first generation (warfarin, chlorophacinone, coumatetralyl) as well as bromadiolone and difenacoum are not an option for the control of resistant Norway rats. The same applies for house mice whereby the tolerance to compounds can be different between local incidences. Due to the higher toxicity and tendency to persist, the most potent anticoagulant rodenticides brodifacoum, flocoumafen and difethialone should be applied but only where resistance is known. In other cases less toxic anticoagulants should be preferred for rodent management in order to mitigate environmental risks. Resistance effects of further VKOR polymorphisms and their combinations, the spread of resistant rats and conditions supporting and reducing resistance should be investigated in order to improve resistance management strategies.     

淡色库蚊对常用杀虫剂的抗性研究

目的了解南通市淡色库蚊幼虫对4种杀虫剂的抗性状况，为科学合理使用杀虫剂提供依据。方法采用区分剂量法，测定淡色库蚊的抗性。结果南通市淡色库蚊对4种杀虫剂均产生不同程度的抗性，即对敌敌畏抗性级别为高抗，溴氰菊酯为中抗，氯氰菊酯、氯菊酯为低抗。结论经过长期的化学防治，蚊虫对一些杀虫剂产生了明显的抗性。应根据抗药性调查结果科学合理使用杀虫剂，积极提倡综合治理。     

广州市斯氏屋顶鼠对第一代抗凝血灭鼠剂抗药性初步研究

目的探讨斯氏屋顶鼠对抗凝血灭鼠剂的抗药性变化。方法参照全国鼠类抗药性监测协作组统一方法,进行无选择性摄毒试验。结果经对广州市所辖9个区内所捕获的53只斯氏屋顶鼠进行抗药性监测,存活率为3．8％,其总平均摄药剂量为30．31mg／kg,存活平均摄药剂量为58．29mg／kg。经与同期同地家栖鼠抗药性比较,该鼠种对第一代抗凝血灭鼠剂敏感性介于黄胸鼠与褐家鼠之间。结论控制斯氏屋顶鼠可使用第一代抗凝血灭鼠剂,但应加强对灭鼠药物的敏感性监测,科学、合理用药。     

河北省汉族人群CYP450 2C9和VKORC1基因多态性与华法林剂量相关性研究

目的 了解河北省汉族人群CYP450 2C9和VKORC1的基因多态性分布与其他不同民族之间的差异,探讨CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G基因多态性与华法林剂量的关系.方法 随机选取门诊体检的健康人487名,检测CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G基因型及其分布频率,并与国外多个民族的CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G的基因多态性进行比较.选取服用华法林稳定剂量的患者101例,检测其基闪型并结合其个体差异和华法林的稳定剂量进行分析.结果 487名正常人CYP450 2C9*3+1075C/A基因型中,AA型为449名(92.2%),AC型36名(7.4%),CC型2名(0.4%);VKORC1-1639A/G基因型中AA型为415名(85.2%),GA型72名(14.8%),未发现GG型(0.0%).采用多元逐步回归得出有关华法林稳定剂量的方程:In(D)=0.346+0.017(体重)-0.376(CYP450 2C9~*3+1075C/A)+0.148(VKORC1-1639A/G)-0.002(年龄)(r=0.827,P=0.02).结论 汉族人群CYP450 2C9和VKORC1存在明显的基因多态性.CYP450 2C9~*3+1075C/A和VKORC1-1639A/G的基因型和患者个体之间的体重、年龄差异是影响华法林稳定剂量的因素.     

Structural Modeling Insights into Human VKORC1 Phenotypes

Vitamin K 2,3-epoxide reductase complex subunit 1 (VKORC1) catalyses the reduction of vitamin K and its 2,3-epoxide essential to sustain γ-carboxylation of vitamin K-dependent proteins. Two different phenotypes are associated with mutations in human VKORC1. The majority of mutations cause resistance to 4-hydroxycoumarin- and indandione-based vitamin K antagonists (VKA) used in the prevention and therapy of thromboembolism. Patients with these mutations require greater doses of VKA for stable anticoagulation than patients without mutations. The second phenotype, a very rare autosomal-recessive bleeding disorder caused by combined deficiency of vitamin K dependent clotting factors type 2 (VKCFD2) arises from a homozygous Arg98Trp mutation. The bleeding phenotype can be corrected by vitamin K administration. Here, we summarize published experimental data and in silico modeling results in order to rationalize the mechanisms of VKA resistance and VKCFD2.