不同来源红缘拟层孔菌粗多糖的抗氧化活性

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、2,2’-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）阳离子自由基、羟自由基清除实验和铁氰化钾还原法,对3 种不同产地（吉林、黑龙江、云南）红缘拟层孔菌子实体（Fomitopsis pinicola fruiting body,分别记为JFPF、HFPF、YFPF）、红缘拟层孔菌菌丝体（Fomitopsis pinicola mycelium,FPM）及其发酵液（Fomitopsis pinicola fermentation broth,FPFB）粗多糖的体外抗氧化活性进行对比研究;并采用紫外线和H2O2氧化损伤酵母细胞保护实验模型,评价上述5 种粗多糖对氧化损伤酵母细胞的保护作用。结果表明：这5 种红缘拟层孔菌粗多糖均表现出不同程度的体外抗氧化活性,并均能明显提高氧化损伤酵母细胞的存活率,且呈一定的剂量依赖效应;其中,YFPF粗多糖对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、羟自由基的清除能力及还原能力在5 种粗多糖中较强;在质量浓度为5 mg/mL时,其对3 种自由基的清除率分别为78.78%、99.24%、64.38%,还原能力为0.84。FPM粗多糖对氧化损伤酵母细胞保护作用最强,可明显提高氧化损伤酵母细胞的存活率,当其质量浓度为20 mg/mL时,紫外和H2O2氧化损伤酵母细胞的存活率分别为75.48%、48.38%。因此,不同来源红缘拟层孔菌粗多糖的抗氧化活性存在差异,这为红缘拟层孔菌的开发利用提供理论依据。     

黄伞子实体多糖PAP2的分离纯化及其结构初步鉴定

从黄伞子实体中提取出水溶性粗多糖,经DEAE Sepharose Fast Flow和SuperdexTM 200柱层析分离纯化得到一种多糖组分PAP2。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)检测其为均一多糖组分,平均分子质量为2.1×106u;经高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ESLD)检测表明PAP2主要由葡萄糖组成;结合红外光谱、核磁共振1H NMR和13C NMR分析表明,黄伞子实体多糖PAP2是一种α-D-吡喃葡聚糖,主链为1-4糖苷键,存在1-6糖苷键的支链。     

桦褐孔菌多糖的分离纯化及其组成分析

为更好地开发利用桦褐孔菌这一丰富的真菌资源,采用水提法得到桦褐孔菌粗多糖(CIP),经DEAE-SepharoseCL-6B离子交换层析、SepharoseCL-6B和Sephadex G-100凝胶过滤层析得到一个桦褐孔菌多糖组分(IP2a)。采用高效液相色谱法、比旋度法及琼脂糖电泳法鉴定其纯度,气相色谱法、高效液相色谱法及红外光谱研究其组成、相对分子质量和结构。结果表明IP2a为均一组分;IP2a由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖组成,其摩尔比为2.3∶4.5∶1∶2.5,其相对分子质量为86053u,含有α-型糖苷键。IP2a是一种不含核酸和蛋白质的杂多糖,是桦褐孔菌水溶性多糖的重要组成。     

南瓜多糖PCE-CGH的制备和结构表征

探讨具有降血糖作用的南瓜多糖的分子组成与分子结构信息。以南瓜粉为原料,经过水提取、有机溶剂分步萃取和柱色谱分离纯化,得到一种水溶性多糖(PCE-CGH)。经高碘酸氧化、Smith降解并采用IR,NMR等方法对该多糖的化学结构进行了表征。结果:该多糖由鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、葡萄糖(Glu)和半乳糖(Gal)组成,摩尔比为4∶2∶3∶5。主链主要是以β-1→2糖苷键及β-1→3糖苷键连接的Gal和Ara,同时还存在一定量的Glu和Rha;侧链主要是以β-1→4糖苷键及β-1→6糖苷键连接的Rha和Glu。南瓜多糖PCE-CGH是由4种单糖组成、带有侧链的杂多糖。     

蓝靛果硒多糖的理化性质、结构表征及红细胞氧化损伤保护活性

以蓝靛果果实多糖为原料,采用微波辅助HNO₃-Na₂SeO₃法制备蓝靛果硒多糖,后经柱色谱分离后得到高含量蓝靛果硒多糖。高含量蓝靛果硒多糖中硒含量为(0.184±0.03) mg/g,重均分子质量为5 88 2 8.3k D a,由半乳糖醛酸、鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖6种单糖组成,其物质的量比为1∶3.06∶6.18∶0.29∶1.78∶13.01。核磁分析表明高含量硒多糖中存在6种糖苷键,分别为：→3)-β-D-半乳糖(1→、→4)-β-D-甘露糖-(1→、→6)-α-D-葡萄糖-(1→、→4)-α-D-半乳糖醛酸-(1→、→2,4)-α-L-鼠李糖-(1→、α-L-阿拉伯糖-(1→。红细胞氧化损伤保护实验结果表明：同H₂O₂处理红细胞损伤组相比,保护组高含量蓝靛果硒多糖质量浓度为10.0 mg/mL时,H₂O₂诱导的红细胞氧化溶血率降低了32.52%;活性氧水平降低了44.93%;丙二醛含量减少了17.04 nmo...     

提取方式对银杏果多糖的理化性质及抗氧化活性的影响

采用热水浸提工艺、摇床提取工艺、微波提取工艺提取的3种银杏果多糖,依次命名为GBSP-1、GBSP-2和GBSP-3,并对3种多糖的理化性质及抗氧化性质进行了研究。理化性质表明:3种多糖均为乳白色,溶于蒸馏水,不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂,且均不含有酚羟基和还原糖,但都含有一定量的蛋白质、多肽等,另外GBSP-2含有一定量的淀粉,GBSP-1、GBSP-2均不含有淀粉。GBSP-1和GBSP-2含有α-糖苷键、β-糖苷键和羰基,GBSP-3仅含有α-糖苷键。抗氧化性质表明3种多糖对羟基自由基和DPPH自由基均有一定的清除能力,GBSP-2的抗氧化性最好,GBSP-1次之,GBSP-3最差。     

硬毛盖孔菌胞外多糖组分分析及其在卷烟烟气中的转移率

为开发新型天然菌物香料,利用Sepharose CL-6B凝胶柱对发酵产硬毛盖孔菌胞外多糖(EPS)进行了分离纯化,采用红外光谱(IR)分析了2种多糖组分的结构,并测定了其在卷烟烟气中的转移率。结果表明:2种硬毛盖孔菌EPS组分①和②在810,880和910 cm-1处有吸收峰,说明多糖①和②含有甘露糖结构,且具有α和β糖苷键;当EPS添加量在0.02%～0.10%之间时,其在卷烟烟气中的转移率从1.58%增至3.39%。     

龙胆多糖的结构表征及其体外免疫活性

对龙胆多糖的结构和生物活性进行研究,采用甲基化分析多糖的链接方式。结果表明,龙胆多糖中存在(→1)末端和(1→5)-链接的呋喃阿拉伯糖基、(1→4)-链接的吡喃半乳糖基,同时也存在其他含量比较少的糖基和分支。龙胆多糖中糖醛酸是以(1→4)-链接的半乳糖醛酸方式存在,对龙胆多糖的生物活性起着重要的作用。龙胆多糖可以促进RAW264.7细胞增殖并产生NO,而且NO的产生是通过一氧化氮合成酶mRNA上调实现的,同时龙胆多糖可以上调细胞因子COX-2和TNF-α的mRNA表达水平。     

响应面法优化红缘拟层孔菌胞外多糖发酵培养基

为提高红缘拟层孔菌(Fomitopsis pinicola)胞外多糖(EPS)产量,采用响应面法对其发酵培养基进行优化。在单因素实验基础上,利用中心组合设计原理,以蔗糖、酵母粉、MgSO4·7H2O浓度为实验因素,以多糖产量为响应值,采用3因素5水平响应面分析方法建立数学模型。结果显示,红缘拟层孔菌产EPS的最佳培养基为:蔗糖186g/L、酵母粉7g/L,MgSO4·7H2O 27g/L,KH2PO42g/L。在此条件下,EPS产量预测值为4.02g/L,验证值为(3.92±0.18)g/L。采用响应面法对红缘拟层孔菌EPS发酵培养基进行优化,方法可行。     

拐枣不同部位多糖的结构特征及活性分析

为明确拐枣不同部位多糖的结构及生理活性的差异，采用水提醇沉法制备了三种拐枣多糖（HDP）-全果多糖（HDPW）、籽多糖（HDPS）和果梗多糖（HDPP）。通过紫外-可见光谱、高效尺寸排阻色谱、离子色谱、傅里叶红外光谱和扫描电子显微镜对其结构进行对比，研究结果表明，三种HDP均为酸性多糖，由不同摩尔比例的岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸组成，HDPW、HDPS和HDPP的分子量均有三个色谱峰，其中HDPS的中、低分子量值（45.72×104~165.75×104 u）要高于HDPW（0.34×104~12.53×104 u）和HDPP（0.51×104~21.26×104 u），红外光谱表明HDPW及HDPP含有α-糖苷键，而HDPS是一种含有β-糖苷键的多糖。HDP对DPPH自由基、ABTS自由基和α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度范围分别为0.015~0.043 mg/mL、0.47~1.21 mg/mL和0.13~9.99 mg/mL，当HDPW和HDPP的质量浓度在0.1 mg/mL及以上时，可显著提升胰岛素抵抗HepG2细胞（IR-HepG2）的葡萄糖消耗率，较模型组最高可提高7.66%。较HDPS而言，HDPW和HDPP结构相似且显示出了更好的抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性，更强的IR-HepG2葡萄糖摄取促进能力，研究为拐枣的综合利用提供一定的理论依据和数据支持。     

黑松露多糖分离纯化与抗炎活性研究

以黑松露为原料,通过水提醇沉法提取黑松露多糖。提取的黑松露多糖经过DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析柱分离得到两个块菌多糖组分,分别为TP1和TP2。检测TP1和TP2对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)增殖抑制作用、中性红吞噬能力影响。TP1进一步用葡聚糖凝胶层析柱纯化,得TP1-1并进行结构表征。结果表明:黑松露多糖两种组分TP1和TP2对RAW264.7细胞没有毒性作用,且都能显著增强RAW264.7细胞的中性红吞噬能力,但TP1的作用优于TP2。TP1-1的数均分子量为757910 u,其单糖组成为D-葡萄糖和D-甘露糖,比例分别为88.94%和1.19%。紫外光谱扫描结果显示块菌多糖TP1-1不含蛋白质和核酸。红外光谱分析结果表明,TP1-1具有吡喃环的结构,具有α-型糖苷键,含有甘露糖。     

野葛根酸性多糖的结构鉴定及免疫活性

本文采用离子交换层析结合凝胶渗透色谱技术从野葛根的热水浸提液中分离纯化得到一种新型酸性多糖,鉴定了该多糖的结构特征,并初步探究了其免疫调节活性。结果显示,该酸性多糖是一种分子量约为12300 u且具有一定支链结构的葡聚糖,不具有三螺旋空间结构,其糖苷键类型为α-(1→4)和α-(1→4,6)。以小鼠巨噬细胞RAW264.7为实验对象,研究发现该酸性多糖能有效地刺激细胞分泌细胞因子NO、TNF-α和IL-6,进而体现出较强的免疫调节活性。     

正红菇子实体多糖HAP-Ⅰ的结构和抗氧化活性评价

以正红菇子实体分离纯化后得到的单一多糖HAP-Ⅰ为研究对象,用高效凝胶渗透色谱(GPC)结合葡聚糖凝胶Sephadex G-100的分离结果鉴定其分子量分布及纯度,利用FT-IR、GC、高碘酸氧化和Smith降解、NMR研究HAP-I分子内部结构;通过体外抗氧化法清除自由基DPPH、O2-、OH以及还原力测定,评价HAP-I抗氧化能力。结果表明,HAP-Ⅰ重均相对分子量MW 16860 u;FT-IR显示HAP-Ⅰ具有多糖的特征吸收峰且为含氨基的β型D-葡萄糖环构型;GC结果显示HAP-Ⅰ含鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖4种单糖,摩尔比为1:8.29:7.45:18.13;高碘酸氧化和Smith降解结果表明,HAP-I是含有甘露糖苷的D-吡喃葡萄糖环,包括α构型和β构型,不含有1→4糖苷键,由66.7%1→3糖苷键,22.24%的1→6、1→糖残基和11.06%1→2糖残基组成;NMR表明HAP-I是含有半乳糖基的吡喃糖,既有α构型,也有β构型;体外抗氧化结果表明,HAP-I有较强的清除自由基DPPH、O2-、OH作用和还原能力。     

九州虫草菌丝体多糖Ck_3-A的分离纯化及其理化性质研究

以九州虫草 (Cordycepskyushuensis Kobayasi)发酵菌丝体为试验材料 ,采用水提法得到九州虫草菌丝体粗多糖。粗多糖经酶法结合Sevag法除蛋白、H2 O2 法脱色、透析、分级沉淀得到Ck3 ,Ck3 经DE 2 3柱层析得到多糖Ck3 A。经紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sepharose 4B柱层析等方法检测确定Ck3 A为均一组分。用苯酚 硫酸法测得Ck3 A的含糖量为 73 1% ,硫酸 咔唑法测得Ck3 A含有微量的葡萄糖醛酸。Sepharose 4B柱层析测得Ck3 A的分子量为 92 5 0 0u。红外光谱结果显示Ck3 A含有α 型糖苷键。     

白芍多糖提取工艺优化、分子特性分析及其对巨噬细胞的增殖作用

本文采用水提醇沉法提取白芍多糖,通过正交试验确定白芍多糖提取工艺参数并分析其化学组成,使用高效尺寸排阻色谱-紫外检测器-多角度激光光散射仪-示差折光检测器联机系统检测多糖分子量,利用气相色谱-质谱联用仪分析多糖的单糖组成和链接方式,采用WST法检测白芍多糖对巨噬细胞RAW264.7增殖率的影响。结果表明:白芍多糖的最佳提取工艺参数为液料比25:1 mL/g、提取温度85 ℃、提取时间3.0 h,得率12.40%。白芍多糖含有96.2%±1.2%总糖和5.5%±0.6%蛋白质,未检出硫酸根和糖醛酸,其分子质量和回转半径分别为2.3×106 u和234.9 nm。白芍多糖主要含葡萄糖,大部分是通过（1→4）糖苷键链接的。同时,白芍多糖可以在2、5、10 μg/mL浓度范围促进RAW264.7细胞增殖。其中,10 μg/mL处理组的细胞增殖率得到大幅提升,且与其他组别的细胞增殖率存在显著性差异（P<0.05）。     

降血糖南瓜寡聚糖的结构表征及构效关系初探

探讨具有降血糖作用的南瓜寡聚糖的分子组成、分子结构信息与其活性间的构效关系。以南瓜粉为原料,经水提取、有机溶剂分步萃取和柱色谱分离纯化,得到1种水溶性寡聚糖(PCE-CGL)。经高碘酸氧化、Smith降解,采用IR,NMR等方法对该多糖的化学结构进行表征。结果表明,PCE-CGL分子质量为5.030×103u,主要由葡萄糖、半乳糖和肌醇组成,物质的比为6∶1∶2,并含有少量的氨基糖。主链主要是以β-1→4糖苷键及β-1→3糖苷键连接的葡萄糖、半乳糖、葡萄糖胺及肌醇,侧链主要是以β-1→2糖苷键及α-1→6糖苷键连接的葡萄糖。提示PCE-CGL很可能作为胰岛素化学介体的类似物,通过增加化学介体的数量来改变胰岛素敏感的酶的活性,从而实现其生物学效应。     

南瓜糖蛋白的分离纯化及其糖链结构鉴定

采用水提醇沉法从南瓜粉中提取南瓜糖蛋白,分别用硫酸铵、乙醇分级沉淀及琼脂糖凝胶电泳法对南瓜糖蛋白进行分离纯化,定性检测后用碱性β-消除反应及核磁共振氢谱(Proton Nuclear Magnetic Resonance,~1H NMR)、核磁共振碳谱(Carbon 13Nuclear Magnetic Resonance,~(13)C NMR)技术测定糖肽键的结构。结果显示:纯化后的糖蛋白不含游离还原糖和淀粉,其在紫外240 nm附近南瓜糖蛋白碱水解液吸光度值发生了明显的变化,证明南瓜糖蛋白的糖肽键主要为O-糖肽键;其多糖的~1H NMR和~(13)C NMR谱图表明,该多糖组分的单糖残基中包含α-和β-两种糖苷键类型,且南瓜多糖主要含有3种端基碳分别为→4)-α-D-半乳糖-(1→、T-α-D-半乳糖-(1→和→2)-α-L-鼠李糖-(1→,在175.57和171.25处的共振吸收峰说明多糖中含有糖醛酸和脂类结构。     

黄秋葵籽多糖的组成结构及抗氧化活性研究

目的 分析黄秋葵籽多糖的组成结构并对其抗氧化活性进行评价。方法 样品经DEAE-52阴离子交换柱和Sephacryl S-400凝胶色谱柱进行分离纯化得到黄秋葵籽多糖组分(OSPs), 采用尺寸排阻色谱柱分析其分子量, 并对其化学成分、单糖组成、糖苷键链接方式、红外光谱(FTIR)结构信息及抗氧化活性进行研究。结果 分离纯化的OSPs重均分子量为7.09×105 Da, 数均分子量为7.01×105 Da, Mw/Mn为1.01, 表明OSPs有较高的纯度, 得率为0.45%。酸降解和糖醇衍生化后经气相色谱测得OSPs由甘露糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和鼠李糖组成, 摩尔百分比为38:32.84:17.14:9.13:2.88。FTIR结果表明OSPs含有甘露糖残基。高碘酸氧化、Smith降解实验结果表明OSPs主要含有1→、1→6、1→2、1→2,6糖苷键。此外, OSPs具有良好的抗氧化能力,特别是对O2-自由基的清除。结论 通过对OSPs组成结构及抗氧化活性研究, 有利于对黄秋葵籽资源的高值化利用。     

紫芝菌丝体多糖的结构鉴定及免疫活性研究

本采用热水浸提紫芝菌丝体得到粗多糖后经DEAE-sepharose Fast Flow和Sephacryl S-200 HR分离纯化出一种新型的灵芝多糖LZ1。通过采用凝胶渗透色谱法、电镜、紫外、红外光谱、气相色谱、核磁共振、高碘酸氧化和Smith降解方法等方法对LZ1进行结构鉴定和解析,结果表明LZ1是不含核酸、蛋白质的均一多糖,其分子量为7498 u;其是由鼠李糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖以0.94:0.50:1.68:26.91:4.80:17.12的摩尔比组成的酸性杂多糖,其糖苷键为1→4、1→2或1→6、1→3;刚果红实验表明LZ1没有三螺旋结构;通过小鼠巨噬细胞RAW264.7体外免疫模型,研究LZ1对TNF-α、IL-6、NO三种细胞因子的分泌情况的影响发现LZ1对这三种细胞因子的分泌有明显的促进作用,且呈现浓度相关性,表现出明显的免疫活性;通过AAPH诱导的红细胞氧化性溶血模型对LZ1的抗氧化活性进行评价,发现LZ1有很好的抑制AAPH诱导的红细胞氧化溶血的特性。     

杏鲍菇菇头多糖的结构鉴定及生物活性评价

采用热水浸提法从杏鲍菇菇头中提取粗多糖,采用凝胶渗透色谱-示差折光指数-十八角激光散射联用技术测定粗多糖的分子质量分布,气相色谱法测定单糖组成,气相色谱-质谱联用法测定糖苷键链接方式,2,2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid),ABTS）法测定抗氧化性,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法测定体外抗肿瘤活性,动物实验法检测体内抗肿瘤活性。结果表明：该粗多糖主要由葡萄糖组成（占84.4%）;其分子质量分布较广,4 个主峰分子质量分别为3.816×107、2.010×106、4.572×105 Da和1.849×105 Da;糖苷键主要链接方式为1,3-糖苷键（占42.7%）和1,6-糖苷键（占35.5%）;当质量浓度为5 mg/mL时,粗多糖对ABTS阳离子自由基的抑制率为70.9%。动物实验表明,以200 mg/（kg·d）剂量连续灌胃12 d后,粗多糖对荷瘤小鼠（宫颈癌U14）的抑瘤率可达39.84%。