中国主要地区结缕草属植物种质资源抗旱性变异分析

抗旱性是植物重要的节水性状,探索结缕草属（Zoysia Willd.）植物种质资源的抗旱性变异可为该属植物抗旱育种和抗旱机理研究奠定重要基础。以目前国内园林绿化中广泛应用的青岛结缕草（Z. japonica‘Qingdao’）和沟叶结缕草（Z. matrella）为对照,采用表征永久萎蔫系数法对中国结缕草属植物5种、2变种共31份种质的抗旱性变异进行研究。结果表明：中国结缕草属植物的表征永久萎蔫系数存在丰富的变异,其变异范围为4.34%～9.28%,变异系数为24.41%;且植物抗旱性存在极显著差异,表征永久萎蔫系数显著低于青岛结缕草的有14份种质,显著低于沟叶结缕草的有7份。不同种植物抗旱性也不同,各种及变种的表征永久萎蔫系数依次为：日本结缕草（Z. japonica）<细叶结缕草（Z.tenuifolia）<沟叶结缕草<青结缕草（Z. japonica var. pollida）<中华结缕草（Z. sinica）<长花结缕草（Z. sinica var. nipponica）<大穗结缕草（Z. macrostachya）;4个种的变异系数依次为：细叶结缕草<中华结缕草<沟叶结缕草<日本结缕草。抗旱性在日本结缕草和中华结缕草种内存在极显著差异;中国结缕草属植物、日本结缕草和中华结缕草的抗旱性与地理分布均不具有明显相关性。     

结缕草属草坪草在中国的名称与应用

结缕草属草坪草是低矮、匍匐性、草皮型的暖季型多年生禾本科草本。在中国的分布与应用大约有 5种 :1 结缕草 ;2 中华结缕草 ;3 大穗结缕草 ;4 细叶结缕草 ;5 沟叶结缕草。另外 ,从日本引入一个栽培种 ,通名叫做半细叶结缕草。结缕草属草坪草属于公园、风景区、庭园和运动场草坪草以及水土保持覆盖大地之用。     

结缕草属植物种间关系和遗传多样性的SSR标记分析

利用SSR分子标记技术对结缕草属(Zoysia Willd.)5种、1变种共96份种质材料进行遗传多样性分析,结果表明:(1)结缕草属种质间存在丰富的遗传多样性,29对SSR引物共扩增出282条清晰谱带,其中多态性条带272条,多态性比率(PPB)为96.45%,Nei’s基因多样性指数(H)为0.2203,Shannon信息指数(I)为0.3504。(2)应用Nei—Li相似系数法估算了96份材料间的遗传相似系数(GS),范围在0.5922~0.9362,平均为0.7811,在不同种之间,结缕草(Z.japonica Steud.)与中华结缕草(Z.sinica Hance.)、沟叶结缕草(Z.matrella(L.)Merr.)与细叶结缕草(Z.tenuifloia Willd.ex Trin.)中的遗传相似系数较高,大穗结缕草(Z.macrostachya Franch.)Z010、长花结缕草(Z.sinica var.nipponica)Z122与其它结缕草的遗传相似系数均相对较低。结缕草、中华结缕草和沟叶结缕草的种内遗传变异较大,GS分别为0.5922~0.9362,0.6879~0.9078和0.6738~0.8582。(3)通过分子系统聚类法,将96份种源分为6个大类群,其中第一大类主要包括结缕草、中华结缕草和少量沟叶结缕草,占所有材料的90.6%。沟叶结缕草和细叶结缕草聚成一小类,大穗结缕草Z010、长花结缕草Z122、沟叶结缕草(Z.matrella)Z095和结缕草(Z.japonica)Z115聚为一类。从亚群来看,基本上结缕草与中华结缕草交叉相聚,沟叶结缕草与细叶结缕草交叉相聚,沟叶结缕草与结缕草、中华结缕草也有交叉聚类现象。本研究明确了结缕草属植物不同种质间亲缘关系及遗传多样性、部分种质的种类归属,还为其进一步研究与利用提供了分子水平的依据。     

结缕草酯酶同工酶的研究

以台湾原产中华结缕草、沟叶结缕草，山东原产中华结缕草，日本结缕草，日本原产日本结缕草和细叶结缕草共２０２个样品为材料，检验其酯酶同工酶谱。结果发现了２６条酯酶带，构成了１３０个酶谱类型，各酶带出现频率随草种和原产地而异，以各酶带出现的频率，利用尤克利氏距离公式算出各族群的距离，发现中华结缕草和沟叶结缕草间的距离最近，合成一群集，细叶结缕草和日本结缕草距离最远，各成一群集。以上结果表明，酯酶同工酶不     

中国结缕草属植物种质资源水分利用效率变异分析

以目前园林绿化中广泛应用的‘青岛结缕草’和马尼拉为对照,对中国结缕草属5种1变种52份野生种源的水分利用效率进行了测定分析.结果表明:中国结缕草属52份种源水分利用效率的变异范围为0.141％～0.377％,变异系数为19.66％,中国结缕草属内不同种源的水分利用效率存在极显著的差异,排序为:细叶结缕＜结缕草＜沟叶结缕草＜中华结缕草＜长花结缕草＜大穗结缕草,变异系数最大的为结缕草;在结缕草、中华结缕草种内水分利用效率存在着极显著的差异,且结缕草种内水分利用效率变异高于中华结缕草种内变异.在52份供试种源中,水分利用效率高于马尼拉的有15份种源,水分利用效率高于‘青岛结缕草’的有11份种源.中国结缕草属植物和结缕草的水分利用效率与纬度呈极显著的正相关,与经度无明显相关性,中华结缕草的水分利用效率与经纬度均无显著的相关性.     

结缕草属植物种间关系的等位酶研究

分析结缕草属(Zoysia Willd.)9种1变种共59份种源的苹果酸脱氢酶(MDH),酯酶(EST)及过氧化物酶(POD)三种等位酶特征,研究其种间亲缘关系,结果表明:①种内遗传分化大小依次为:沟叶结缕草(Z.matrella(L.)Merr.)>结缕草(Z.japonica Steud.)>中华结缕草(Z.sinica Hance)>朝鲜结缕草(Z.koreana Mez);②聚类结果显示:结缕草、中华结缕草、长花结缕草(Z.sinicavar.nipponica Ohwi)、大穗结缕草(Z.macrostachya Franch.)聚为一类;沟叶结缕草、细叶结缕草(Z.tenuifolia Willd.ex Trin.)先聚为一类,然后小结缕草(Z.minima Zotov)、太平洋结缕草(Z.pacifica Hotta ex Kuroki)、大花结缕草(Z.macrantha Desvaux)也聚到这一类;而朝鲜结缕草自成一类,聚类结果与外部性状特征和地理分布位置相统一;③结缕草属植物为开放式的外繁育系统,种内各种源间遗传变异大于种间变异。     

结缕草属草坪草在中国的名称与应用

结缕草属草坪草是低矮、匍匐性、草皮型的暖季型多年生禾本科草本.在中国的分布与应用大约有5种1.结缕草;2.中华结缕草;3.大穗结缕草;4.细叶结缕草;5.沟叶结缕草.另外,从日本引入一个栽培种,通名叫做半细叶结缕草.结缕草属草坪草属于公园、风景区、庭园和运动场草坪草以及水土保持覆盖大地之用.     

华东地区结缕草属植物形态类型及其坪用价值

依据１０个重要的外部检索性状对华东地区４３份结缕草属植物进行聚类分析，在欧氏距离０．９３处，可将其分为五个形态类型，即结缕草，宽叶型中华结缕草，中间型中华结缕草，长花结缕草以及细叶型结缕草。根据主成分分析结果，制订出各类型外部性状检索表。各类型坪用价值排序为：细叶型结缕草〉中间型中华结缕草〉宽叶型中华结缕草〉结缕草〉长花结缕草。     

结缕草属植物蒸散量评价

以‘兰引3号’结缕草(Z077)(Zoysia japonica cv.Lany in No.3)、青岛结缕草(Z081)(Z.japonica cv.Qing dao)和马尼拉(Z014)(Z.matrella)为对照,研究结缕草属5个种48份种源的蒸散量。结果表明:供试材料的蒸散量变异范围为1.78-2.74mmol·m^-2·s^{- 1},变异系数9.01%;蒸散量显著低于3个对照的有12份;蒸散量在供试材料间差异极显著(P<0.01);5个种的蒸散量排序为:细叶结缕草>中华结缕草>结缕草>沟叶结缕草=大穗结缕草,其中结缕草的变异系数最大;结缕草和中华结缕草种内蒸散量差异极显著;中华结缕草的蒸散量与经度呈极显著线性负相关,而与纬度的相关不显著;结缕草的蒸散量与经度和纬度均呈显著线性负相关。     

结楼草属草坪草在中国的名称与应用

结缕草属草坪草是低矮、匍匐性、草皮型的暖季型多年生禾本科草木。在中国的分布与应用大约有5种：1. 结缕草；2.中华结缕草；3.大穗结缕草；4.细叶结缕草；5.沟叶结缕草。另外，从日本引入一个栽培种，通名叫做半细叶结缕草。结缕草属草坪草属于公园、风景区、庭园和运动场草坪草以及水土保持覆盖大地之用。     

H1N1亚型猪流感病毒的生物学特性测定及其HA基因序列分析

测定了A/Swine/Guangdong/1/01(H1N1)猪流感病毒的部分生物学特性;运用RT-PCR方法扩增其HA基因,并对其进行了克隆和序列分析。结果表明,该株病毒的EID50/0.2 mL及TCID50/0.1 mL分别为10-2.3和10-2.1,小鼠感染试验亦说明该病毒具有致病性。序列分析表明,HA基因全长为1 701 bp,与国内外流行株同源性达90.8%~99.0%。     

G蛋白偶联受体50在牦牛卵母细胞体外成熟过程中的表达与亚细胞定位研究

试验旨在研究G蛋白偶联受体50（G protein-coupled receptor 50,GPR50）在牦牛卵母细胞体外成熟过程中的表达与定位规律,为进一步解析卵母细胞成熟的分子机制及理解牦牛繁殖的特异性提供依据。通过牦牛卵母细胞体外成熟培养,利用免疫荧光染色监测不同时间点（0~24 h）纺锤丝形态和核相的变化,确定牦牛卵母细胞减数分裂4个时期,包括生发泡期（germinal vesicle,GV）、生发泡破裂期（germinal vesicle break down,GVBD）、第一次减数分裂中期（metaphase Ⅰ,MⅠ）与第二次减数分裂中期（metaphase Ⅱ,MⅡ）的时间点。在此基础上,通过实时荧光定量PCR检测GPR50基因在牦牛卵母细胞成熟过程中的动态表达量,免疫荧光染色检测GPR50蛋白在卵母细胞成熟过程中的的亚细胞动态定位情况。结果表明,牦牛卵母细胞体外成熟0 h时90%处于GV期,6 h时94%处于GVBD期,16 h时92%细胞处于MⅠ期,24 h时94%处于MⅡ期。实时荧光定量PCR结果表明,GPR50基因在牦牛卵母细胞GV期即有表达,并在GVBD、MⅠ、MⅡ期成熟过程中逐渐升高,在MⅡ期达到顶峰,且极显著高于GV与GVBD期（P<0.01）。GPR50蛋白在牦牛卵母细胞GV期时集中在膜上表达,并随着成熟进程的发展在细胞质和细胞膜均大量表达,在MⅡ期高亮度弥散表达。以上结果表明,GPR50基因参与牦牛卵母细胞减数分裂过程并发挥重要作用,为研究GPR50在牦牛卵母细胞成熟过程中的作用及机制提供了依据。     

中和温度对鸡新城疫、鸡传染性支气管炎二联活疫苗中鸡传染性支气管炎病毒含量影响的研究

采用分别测定每羽份疫苗成品和每0．1mL半成品胚液鸡胚半数感染量(EID50)的方法探讨了中和温度对鸡新城疫、鸡传染性支气管炎二联活疫苗中鸡传染性支气管炎病毒含量的影响。结果显示，中和温度对该二联活疫苗中鸡传染性支气管炎病毒的EID50有显著的影响。测定病毒含量时，中和条件以中和温度控制在20℃、中和时间45～60min较为合适。     

川楝素腹腔注射对小白鼠半数致死量(LD50)的测定

用寇氏(karber)法测定了川楝素腹腔注射对小鼠的半数致死量(LD50).取90只小鼠,雌雄各半,体重(25±2)g.以10%丙二醇生理盐水为溶媒,按序贯法测出川楝素腹腔注射小鼠100%致死率;将高剂量组与低剂量组的组间剂量比设定为1.2,染毒测定其LD50.结果川楝素腹腔注射对小鼠的LD50为13.84 mg/kg,95%可信限为12.46～15.37 mg/kg.     

不同毒力基因型大肠杆菌的毒力测定

为确定不同毒力因子对大肠杆菌毒力的影响,选用7株不同毒力基因型(分别为Stx2e 、LEE 、LEE HPI 、Stx2e HPI 、F18 Stx2e 、F18 Stx2e LEE 和F18 Stx2e ST1 LT1 LEE )的猪源大肠杆菌为材料,以消化道为感染途径,测定了其对30日龄健康ICR小鼠的半数致死量(LD50)。结果表明,以上7株大肠杆菌的LD50分别为1.504×109,5.986×108,3.777×108,1.504×108,5.986×107,3.777×107cfu/mL和1.504×107cfu/mL;确定了不同毒力基因型的大肠杆菌之间存在毒力差异,其中S462234株(F18 Stx2e ST1 LT1 LEE )的毒力最强,S452623株(Stx2e )的毒力最弱,S462234株的毒力是S452623株的100倍。     

基于两种动物模型测定猪伪狂犬病病毒LD50与TCID50比较研究

伪狂犬病活疫苗作为一种安全有效、全国广泛推广使用的疫苗,其效力检验十分必要,而伪狂犬强毒毒价测定则是效力检验的一个必要前提。本实验选用BHK-21细胞及家兔和小鼠实验动物,来检测PRV的TCID50和LD50,旨在找出基于家兔和小鼠两种实验动物PRVTCID50和LD50之间的关系,以简化该苗的效力检验过程。结果表明:用兔子做效力检验时,可以用TCID50代替测LD50。     

中国假俭草种质资源抗寒性初步鉴定

采用电解质渗透法，对有代表性的38份中国假俭草及2份美国假俭草种源(品种)的抗寒性进行了初步研究，得出如下结果，1)中国假俭草种源半致死温度(LT50)的变化范围为-4．1～-13．0℃，平均为-6．2℃，变异系数为26．49％，假俭草种内抗寒性差异较大；2)中国假俭草种源半致死温度与经度、纬度及海拔均无显著的线性关系；3)中国假俭草种源E033与美国进口假俭草Common和新品种TifBlair的抗寒性相近，而E006的半致死温度分别较“Common”和“TifBlair”低2．6和2．3℃，其他36份种源的抗寒性均明显低于“Common”和“TifBlair”。     

三聚氰胺等4种物质的毒性比较研究

试验旨在通过细胞毒性试验、急性毒性试验对三聚氰胺及其类似物的毒性进行了初步研究。结果表明,三聚氰胺、三聚氰酸、双氰胺、单氰胺的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为10.11、3.17、22.56、0.305 mg/ml,而三聚氰胺、三聚氰酸、双氰胺的半数致死量（LD₅₀）均大于5000 mg/kg,单氰胺的半数致死量（LD₅₀）小于500 mg/kg。表明三聚氰胺、三聚氰酸、双氰胺为微毒或基本无毒,单氰胺为高毒。     

猪口蹄疫O型灭活疫苗PD50效检试验

中国农业科学院兰州兽医研究所、中牧股份兰州生物药厂、金宇集团内蒙古生物药厂分别按500 ID50、1000 ID50、1000 ID50攻毒剂量各进行3批猪口蹄疫O型灭活疫苗(Ⅰ)的PD50效检试验.试验结果表明,500ID50攻毒剂量组有2批疫苗达到了3 PD50,1 000 ID50攻毒剂量组有1批疫苗达到了3 PD50.     

肉鸡三氧化二砷急性毒性试验研究

用Ｗｅｉｌ’ｓ表的平均移动法进行了Ａｓ２Ｏ３对肉鸡的ＬＤ５０测定,以组间距（对数剂量差值）为ｄ＝０．０５８７,,测得Ａｓ２Ｏ３对肉鸡口服的ＬＤ５０为２４．４９３４ｍｇ／ｋｇ体重,９５％可信限为２０．２３４８－２９．６５５１ｍｇ／ｋｇ体重。