非小细胞肺癌组织中血清和糖皮质激素调节激酶1的表达及其临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌患者组织中血清和糖皮质激素调节激酶1（serum and glucocorticoid-induced kinase 1，SGK1）的表达及其临床意义。方法:选取2012年3月至2013年5月入住本院的70例非小细胞肺癌患者，取其肿瘤组织作为实验观察组，以35例患者癌旁的正常肺部组织作为对照组。采用免疫组织化学技术分析SGK1在两种类型组织中的表达情况，分析其表达水平与患者一般资料的相关性，采用Kaplan-Meier法对不同SGK1表达水平患者进行生存分析。结果:SGK1在非小细胞肺癌组织与正常肺部组织中的表达水平差异有统计学意义（P<0.05）。SGK1在非小细胞肺癌患者肿瘤组织中表达水平与患者临床分期和有无淋巴结转移相关（P<0.05），而与其他一般资料无关（P>0.05）。高表达SGK1患者预后显著差于低表达SGK1患者（P<0.05）。结论:SGK1与非小细胞肺癌预后有关，可作为非小细胞肺癌预后预测的重要指标。     

基于TCGA、THPA、GEO数据库挖掘PTTG1在乳腺癌中的表达及预后意义

目的:通过对癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas，TCGA)、人类蛋白组图谱(The Human Protein Atlas，THPA)和人类肿瘤相关的基因表达汇编(Gene Expression Omnibus，GEO)数据库的数据挖掘，探索垂体肿瘤转化基因1（pituitary tumor-transforming gene 1，PTTG1）在乳腺癌中的表达及预后意义。方法:从TCGA、THPA和GEO数据库提取PTTG1在乳腺癌及正常组织中mRNA和蛋白水平的变化和患者临床病理资料，GEO在线预后分析数据库Kaplan-Meier Plotter(http://kmplot.com)检索PTTG1乳腺癌预后的相关性。结果:在数据库中，PTTG1 mRNA和蛋白水平在乳腺癌队列中表达显著高于正常乳腺组织(P<0.01)；PTTG1 mRNA在不同的分子亚型中表达存在显著差异(P<0.05)；PTTG1 mRNA在ER和PR阳性乳腺癌患者组织中表达显著低于ER和PR阴性乳腺癌患者(P<0.05)；PTTG1 mRNA在进展期乳腺癌患者组织中表达显著高于早期乳腺癌患者(P<0.05)；PTTG1 mRNA随着乳腺癌患者组织学分级程度升高而降低(P<0.05)。PTTG1低表达乳腺癌患者的预后显著好于其高表达患者(P<0.001)；PTTG1高表达的ER和PR阳性、HER-2阴性乳腺癌患者的预后均显著差于其低表达者(P<0.05)。PTTG1高表达乳腺癌样本富集到细胞因子受体相互作用、趋化因子信号通路、细胞周期、自然杀伤细胞介导细胞毒性、Toll样受体信号通路和T细胞受体信号通路等相关基因集。结论:PTTG1 mRNA和蛋白在乳腺癌组织中高表达，PTTG1 mRNA表达与乳腺癌预后相关且在不同分子分型的乳腺癌中具有不同的预后监测意义，可以作为乳腺癌预后判断的标志物。     

淋巴细胞与单核细胞比值对晚期肺癌预后预测的价值

目的:探讨淋巴细胞与单核细胞比值（LMR）对晚期肺癌预后预测的价值。方法:回顾性分析2012年12月至2014年12月初次就诊我院的晚期肺癌患者，LMR分界值由受试者工作曲线（ROC）分析确定；分析LMR表达与晚期肺癌患者临床特征的关系；采用Cox风险回归模型分析影响晚期肺癌患者总生存的预后因素。结果:根据ROC曲线，LMR最佳临界值AUC=0.581，所有研究对象分为高LMR（n=34）和低LMR（n=13）。LMR水平与病理类型、临床分期、ECOG评分有关（P<0.05）；与年龄、性别、吸烟史无关（P>0.05）。高LMR组和低LMR组的中位OS分别为28.8个月和16.2个月；中位PFS时间分别20.7个月和11.6个月，两组比较均有统计学差异（P<0.05）；Cox风险比例模型显示病理类型、吸烟史和LMR水平是影响晚期肺癌患者总生存的独立预后因素（P<0.05）。结论:LMR是晚期肺癌患者预后的独立影响因素之一，且与晚期肺癌的生存呈正比关系，对晚期肺癌患者的预后具有良好的预测价值。     

基于TCGA数据库分析m6A拷贝数变异对低级别胶质瘤的预后价值

目的:基于TCGA数据库确定m6A调节因子在低级别胶质瘤中的基因特征和预后价值。方法:从TCGA数据库中下载m6A调节因子的表达数据、拷贝数变异数据和临床信息。分析研究m6A调节因子在低级别胶质瘤组和正常对照组表达量之间的差异，m6A调节因子拷贝数变异比率，m6A调节因子的拷贝数3个水平间表达量差异和m6A调节因子的拷贝数变异水平与生存之间的关系。结果:16个m6A调节因子在肿瘤组和正常对照组表达量存在差异； 9个m6A调节因子表达量存在水平间的显著差异；生存分析显示METTL3拷贝数变异两水平（缺失与正常）之间存在差异；单因素、多因素Cox生存回归分析显示METTL3的拷贝数缺失是独立的影响生存的风险因素。结论:m6A调节因子METTL3在肿瘤组中表达量上调，METTL3拷贝数缺失预示着LGG患者生存时间缩短。这一发现为进一步了解低级别胶质瘤中m6A甲基化修饰提供了线索。     

结肠癌组织中miR-802和RAB23的表达水平及临床意义

目的:检测微小RNA-802(miR-802)和RAB23在结肠癌组织中的表达水平，探究其临床意义。方法:以本院2014年3月至2015年4月收治的结肠癌患者84例为研究对象，所有患者经诊断后行结肠癌根治术，术中取患者癌组织及癌旁正常组织。实时荧光定量PCR检测miR-802和RAB23 mRNA表达水平，免疫组化分析RAB蛋白表达水平。结果:miR-802在结肠癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常组织，RAB23表达水平显著高于癌旁正常组织（P<0.05）；结肠癌组织中RAB23蛋白表达阳性率显著高于癌旁正常组织（P<0.05）；相关性分析表明结肠癌组织中miR-802表达水平与RAB23 mRNA表达水平呈负相关（P<0.05）；miR-802和RAB23表达水平与患者肿瘤大小和淋巴转移情况有关（P<0.05）；结肠癌患者中miR-802低表达者、RAB23阳性表达者生存率分别显著低于miR-802高表达者、RAB23阴性表达者（P<0.05）；COX分析显示miR-802和RAB23表达水平是影响结肠患者不良预后的独立危险因素（P<0.05）。结论:miR-802在结肠癌患者癌组织中表达水平显著降低，RAB23表达水平显著升高，与结肠癌患者预后有关，可为结肠癌患者预后判断提供参考。     

基于数据挖掘分析LUM基因在胃癌中的表达及意义

目的：通过数据库分析LUM基因在胃癌中的表达情况及意义。方法：通过Oncomine数据库分析LUM基因在胃癌中的差异性表达，基于GEPIA网站分析LUM基因表达与胃癌患者生存周期的关系；同时利用MethHC数据库分析LUM基因甲基化水平，使用基于TCGA数据集的UALCAN在线数据库对LUM在胃癌患者中的表达及预后进行验证；并通过String数据库分析LUM基因的蛋白相互作用及上下游调控关系。结果：胃癌组织中LUM的mRNA 表达较正常对照组明显增高；Meta分析进一步证实LUM基因的表达在胃癌组织中明显增高。GEPIA分析发现高表达组患者生存周期明显短于低表达组（Ｐ＜0.05）。与此同时，甲基化分析中得出LUM基因甲基化水平肿瘤组明显高于正常组；TCGA数据集验证显示LUM在胃癌组织中的表达量与预后有关；蛋白质网络分析得出，LUM可能与OGN、CHST1、CHST5、CHST6、DCH、COL1A1、COL1A2、COL3A1、COL4A2、ACAN等蛋白相互作用。结论：基于多个数据库的数据挖掘发现，LUM基因在胃癌组织中呈现高表达，且其表达水平与胃癌患者总体生存相关；LUM是与胃癌预后相关的生物标志物，参与肿瘤的发生发展，或可作为诊断和治疗的潜在靶点。     

ERCC1和Pim-1表达与非小细胞肺癌化疗疗效的相关性

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者肺癌组织标本中ERCC1和Pim-1的表达与临床特征及化疗疗效的相关性。方法:对我院病理确诊的70例NSCLC患者肿瘤组织,通过实时定量荧光PCR法检测ERCC1和Pim-1基因mRNA表达水平,回顾性分析ERCC1和Pim-1基因表达与临床病理关系、铂类化疗疗效和总生存情况。结果:70例NSCLC患者肿瘤组织中ERCC1和Pim-1高表达患者比率分别为37.14%（26/70）和61.43%（43/70）,ERCC1高表达与性别、吸烟史、组织类型、TNM 分期均无关（P＞0.05）,Pim-1高表达与性别、吸烟史相关（P＜0.05）,而与组织类型、TNM分期无关（P＞0.05）。ERCC1和Pim-1共同高表达率为20.00%（14/70）。ERCC1高表达组患者化疗有效率（19.23%,5/26）显著低于低表达组患者（47.73%,21/44）(P＜0.05)。Pim-1高表达组患者化疗有效率（34.88%,15/43）和低表达组患者（40.74%, 11/27）无统计学差异(P＞0.05)。ERCC1和 Pim-1高表达组的中位生存期（median survival time,MST）为27个月和24个月低于低表达组的33个月和 27个月,但无统计学差异（P＞0.05）。结论:NSCLC患者中ERCC1低表达组患者化疗有效率和存活率高,是化疗受益的指标。     

Ezrin pAkt在肺癌组织中的表达及相关性研究*

目的:探讨肺癌组织中Ezrin 与pAkt 表达的临床病理学意义及二者相关关系。方法:采用免疫组化二步法检测75例肺癌及16例正常肺组织中Ezrin与pAkt 的表达,并分析两种蛋白表达与临床病理特征的关系以及二者的相关性。结果:1）Ezrin蛋白在肺癌组织中阳性表达率（77.3%）低于正常肺组织（100%）,二者比较差异具有统计学意义（χ2=4.460,P=0.036）;Ezrin蛋白表达水平与肺癌患者年龄、性别、吸烟史、原发肿瘤大小,病理类型、分化程度等均无关,与有无区域淋巴结转移及远处转移有关。2）pAkt 蛋白在正常肺组织中全部阴性表达,而在肺癌组织中阳性表达率为68.0% ,二者比较差异具有统计学意义（χ2=6.954,P=0.005）。 pAkt 蛋白表达水平与肺癌患者年龄、性别、吸烟史、原发肿瘤大小、病理类型、有无区域淋巴结转移及远处转移等无关与分化程度及肺癌分期有关。3）使用Spearman 相关分析显示Ezrin与pAkt 的表达无显著相关（r=-0.137,P=0.236）。 结论:Ezrin在肿瘤肺癌组织表达下调,在肺癌的侵袭转移过程中可能发挥重要作用,有可能成为肿瘤治疗的良好靶点。pAkt 在肺癌组织表达上调,可能在肺癌晚期发挥更强的作用。Ezrin低表达的肿瘤,Ezrin可能通过pAkt 以外路径参与肿瘤的进展,也可能在pAkt 上游或间接通过pAkt 路径发挥作用。      

MicroRNA-106a在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨微小RNA-106a（miRNA-106a）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达情况,并进一步分析其与肿瘤的临床病理特征和预后的相关性。方法:收集42例NSCLC肿瘤组织和相对应的正常肺组织,采用RT-PCR方法检测miRNA-106a在组织中的相对表达量,同时在肺癌细胞株和正常支气管上皮细胞中加以验证。进一步分析miRNA-106a的表达与临床病理资料和预后的相关性。结果:肺癌组织中miR-106a表达水平（3.72±1.81）明显高于正常肺组织（1.15±0.52）（P＜0.01）;肺腺癌A549细胞和鳞癌SK-MES-1细胞中miR-106a的表达水平均高于正常人支气管上皮16HBE细胞,差异具有显著统计学意义（P＜0.01）。MiR-106a的表达水平与肺癌的EGFR基因突变、淋巴结转移及临床分期明显相关（P＜0.05）。MiR-106a低表达者生存时间明显高于高表达组（P＜0.01）。结论:MiR-106a在NSCLC肿瘤组织中表达上调,可作为NSCLC预后判断的潜在分子标志物。     

结直肠癌组织中HK2与AKT的表达、临床意义及其相关性分析

目的:对比己糖激酶2（hexokinase 2,HK2）和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（serin/threonine kinase,AKT）在结直肠癌组织及癌旁正常肠上皮组织中的表达,分析二者与结直肠癌相关临床病理特征的相关性及其预后价值,探索HK2与AKT表达间的相关性。方法:利用免疫组化法检测90例结直肠癌患者肿瘤组织中HK2及AKT的蛋白表达,以癌旁正常肠上皮组织作为对照。结合患者临床病理特征分析两蛋白的临床意义、预后价值及表达相关性。结果:90例结直肠癌组织中,HK2和AKT蛋白表达相较于癌旁正常肠上皮组织均呈更高表达。二者在结直肠癌组织中的表达与患者性别、年龄、肿瘤原发部位、肿瘤大体分型、肿瘤大小及T分期均无关,与淋巴结转移、远处转移和TNM分期均相关（P<0.05）。AKT表达还与肿瘤分化程度相关（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示:HK2、AKT与预后均显著相关,高表达患者的总生存时间均少于低表达患者（P<0.05）。COX分析显示:远处转移、HK2和AKT是影响结直肠癌患者预后的独立因素（P<0.05）。相关性分析提示:在结直肠癌组织中,HK2和AKT的蛋白表达存在显著正相关性（r=0.579,P<0.001）。结论:HK2与AKT蛋白均为结直肠癌危险因素,二者表达正相关。     

FRY蛋白在乳腺癌中的表达和临床意义及对癌细胞增殖、迁移和凋亡能力的影响

目的:探讨FRY蛋白在乳腺癌中的表达和临床意义及对癌细胞增殖、迁移和凋亡能力的影响。方法:收集2017年6月-2018年6月于我院接受手术治疗的87例乳腺癌患者癌组织及其距离癌组织超过2.5 cm处的癌旁组织，另收集同期因良性乳腺肿瘤接受手术的34例患者的病变组织，免疫组化检测FRY蛋白的表达情况。将FRY的表达与乳腺癌的相关临床病理指标进行相关性分析。构建rAAV9-FRY过表达载体和对照rAAV9-FRY-NC，转染人乳腺癌细胞株MCF7，实验分为正常组（细胞常规培养，不进行干预）、对照组（细胞转染rAAV9-FRY-NC后，常规培养）、实验组（细胞转染rAAV9-FRY后，常规培养）；EdU标记实验、 吖啶橙（acridine orange，AO）/溴化乙锭（ethidium bromide，EB）双染法、Transwell小室、裸鼠肿瘤异种移植模型、Western blot检测各组MCF细胞的增殖、凋亡、迁移、在裸鼠体内增殖与肺转移的情况、FRY和神经纤毛蛋白-1（neuropilin-1，NRP1）表达的水平。结果:免疫组化结果显示，FRY在癌旁组织中阳性率最高，FRY的阳性表达在良性肿瘤中明显高于恶性乳腺癌组织（P<0.05）。FRY的阳性表达在乳腺癌的不同分级具有统计学差异（P<0.05），不同年龄以及TNM分期的FRY表达比较差异无统计学意义（P>0.05）；而肿瘤直径和浸润深度与FRY的阳性表达相关（P<0.05）。与正常组和对照组相比，实验组MCF7细胞的EdU阳性细胞比例、迁移能力、移植瘤的瘤体重量、瘤体肺脏转移的病灶比例及NRP1的表达明显下降；细胞凋亡率、FRY的表达明显上升；差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:FRY在乳腺癌组织中表达下调，在乳腺癌细胞中FRY特异性结合NRP1来抑制细胞的增殖、迁移，并促进其凋亡。     

子宫内膜癌中FasL和Ki67的表达及临床意义

目的:检测子宫内膜癌组织中脂肪酸合成酶配体（fatty acid synthase ligand，FasL）和细胞增殖核抗原（Ki67）的表达情况，探讨二者表达的相关性及临床意义。方法:搜集2012年6月至2015年8月在我院确诊并治疗的82例子宫内膜癌标本作为研究对象，同期选取24例非典型增生子宫内膜标本和30例正常子宫内膜标本作为对照。采用免疫组化法检测不同子宫内膜组织中Ki67、FasL蛋白表达水平，分析Ki67、FasL与子宫内膜癌各项临床病理参数的相关性。采用Spearman对Ki67与FasL的相关性进行分析。结果:Ki67、FasL在正常子宫内膜、非典型增生内膜及子宫内膜癌组织中阳性率均逐渐增加，两两比较差异有统计学意义（P<0.05）。Ki67、FasL表达与子宫内膜癌患者FIGO分期、病理分级、淋巴结转移及肌层浸润密切相关(P<0.05)，与患者年龄、月经状态、脉管瘤栓形成无明显相关性（P>0.05）。经Spearman相关性分析，子宫内膜癌组织中Ki67与FasL表达呈正相关性（r=0.438，P<0.05）。Ki67高表达者2年存活率明显低于低表达者（61.76% vs 92.86%，P<0.05）；FasL高表达者2年存活率明显低于低表达者（57.14% vs 88.46%，P<0.05）。结论:Ki67、FasL在子宫内膜癌组织中显著高表达，有望共同作为诊断子宫内膜癌及判断患者预后的有效生物标志物。     

Livin蛋白和STAT3蛋白在支气管肺癌中的表达及临床意义

目的:探讨Livin蛋白和STAT3蛋白在支气管肺癌组织中的表达,及蛋白表达与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化二步法（SP法）检测在支气管肺癌组织及癌旁病理证实的正常肺组织和肺部良性病变组织中Livin蛋白和STAT3蛋白的表达情况。结果:肺癌组的Livin蛋白和STAT3蛋白阳性表达率均高于对照组(均为P<0.05)。男性肺癌患者肺组织、有淋巴结转移肺组织、吸烟指数≥400年支的肺癌患者肺组织中Livin蛋白和STAT3蛋白的阳性表达率均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。肺腺癌组织Livin蛋白的阳性表达率显著高于肺鳞癌组织,差异有统计学意义（P=0.009）。低分化肺癌组织中STAT3蛋白阳性表达率明显高于中分化肺癌组织,差异有统计学意义（P=0.004）。支气管肺癌患者的年龄、临床分期对Livin蛋白和STAT3蛋白的阳性表达率的影响均无统计学差异（P>0.05）。Livin蛋白与STAT3蛋白的表达呈正相关。结论:Livin蛋白与STAT3蛋白在支气管肺癌组织中过表达,有望为肿瘤诊断及基因治疗提供新的靶点。Livin蛋白与STAT3蛋白在支气管肺癌组织中表达呈正相关。     

基于TCGA数据库挖掘揭示高表达KIF20A是肺腺癌患者预后的独立风险因素

目的:探讨KIF20A在肺腺癌中的表达状态，进一步分析KIF20A表达水平与临床病理资料和预后的关系。方法:从癌症基因组图谱（the cancer genome atlas，TCGA）下载肺腺癌RNA-seq表达和临床数据，纳入515例肺腺癌肿瘤组织样本和59例癌旁组织样本，此外，从GEO(Gene Expession Omnibus)数据库下载GSE10072数据集作为验证集，该数据集包括58例肺腺癌肿瘤组织样本和49例癌旁组织样本。分析KIF20A mRNA高低表达与临床病理特征之间的相关性通过2检验；采用Kaplan-Meier法分析临床变量与患者预后的关系；采用Cox比例风险模型探索KIF20A对肺腺癌患者预后的独立作用。结果:KIF20A 在肺腺癌组织中的表达高于癌旁组织；KIF20A mRNA表达水平与年龄、吸烟、临床分期、T分期及N分期差异显著相关，而与性别、种族、残余瘤无明显相关；高KIF20A组在总生存率和无病生存率方面较低KIF20A组差，且在校正了相关变量后，KIF20A表达仍与总生存率和无病生存率显著相关。结论:KIF20A mRNA表达水平与年龄、吸烟、临床分期、T分期及N分期显著相关；KIF20A mRNA表达水平可作为影响肺腺癌患者预后不佳的独立因素。     

肿瘤标志物预测NSCLC患者EGFR突变概率数学模型的建立与评价

目的:利用血清肿瘤标志物建立预测非小细胞肺癌（NSCLC）患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变概率的数学模型，并评价其临床应用价值。方法:回顾性分析我院经病理学确诊的NSCLC患者107例，对组织标本采用扩增阻滞突变系统实时荧光定量PCR（ARMS-PCR）技术检测EGFR基因突变，采集外周静脉血用化学发光法检测血清肿瘤标志物水平。多因素回归分析筛选出EGFR突变的独立预测因子，建立Logistic回归模型。绘制受试者工作特征曲线（ROC）并计算曲线下面积（AUC），以评价模型准确性和临床价值。结果:107例NSCLC患者中43.9%为EGFR突变型，56.1%为EGFR野生型。Logistic回归分析显示吸烟史、CEA、CA199和CYFRA21-1在EGFR突变型和野生型组间差异有统计学意义，是EGFR突变的独立预测因子。由此建立预测模型:P=ex/(1+ex)，X=-3.664+（3.246×吸烟史）+（2.441×CEA）+（1.866×CA199）-（1.918×CYFRA21-1），e为自然对数；当截点P为0.478时，模型的敏感度为85.1%，特异性为65.0%。该模型的AUC为0.734（95%CI:0.637～0.830）。结论:非吸烟、CEA和CA199高表达及CYFRA21-1低表达是NSCLC患者EGFR基因突变的独立预测因子。由此建立的数学预测模型准确度较高，可为EGFR基因突变的预测提供有利帮助。     

非小细胞肺癌组织中Pokemon、P14ARF及E2F1的表达及其临床意义

目的:检测Pokemon、P14ARF及E2F1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达情况，探讨其在NSCLC发病中的作用和机制。方法:应用免疫组化方法检测NSCLC组和双正常对照组（即支气管对照组和肺泡对照组）中Pokemon、P14ARF及E2F1蛋白的表达情况，分析其与临床病理资料的关系及各指标间的相关性。结果:Pokemon蛋白在NSCLC组、肺鳞癌组、肺腺癌组中的表达均显著高于双对照组（P<0.05），Pokemon蛋白表达与NSCLC的TNM分期相关（P<0.05）；E2F1蛋白在NSCLC组、肺鳞癌组、肺腺癌组中的表达均显著高于双对照组（P<0.05），E2F1蛋白表达与NSCLC的TNM分期和淋巴结转移均有关（P<0.05）；P14ARF蛋白在NSCLC组、肺鳞癌组、肺腺癌组中的表达均显著低于双对照组（P<0.05），P14ARF蛋白的表达水平与临床病理资料均无关（P>0.05）；Pokemon与P14ARF表达水平呈负相关（r=-0.57，P<0.01），与E2F1表达水平呈正相关（r=0.37，P<0.05），P14ARF与E2F1表达水平呈负相关（r=-0.48，P<0.01）。结论:非小细胞肺癌发病过程中，Pokemon通过拮抗P14ARF调节E2F1表达水平来发挥促癌作用。