菌种培养基灭菌技术

培养基装管装瓶（袋）后，应立即进行消毒灭菌，如灭菌不彻底，就容易产生杂菌，给生产造成损失。 1．母种培养基灭菌法 母种培养基灭菌一般用手提式高压锅，灭菌时将试管7～10支扎成一捆，再用防潮纸或牛皮纸包住试管棉塞，管口朝上，防止灭菌时棉塞受潮湿。高压灭菌的时间，在1．2kg-1．5kg／cm^2压力下保持15～20分种即可。     

玉米素灭菌方式和浓度对蓝莓试管苗增殖的影响

在蓝莓试管苗增殖培养基配制过程中对ZT分别采取高温和过滤两种方式灭菌,以便探讨不同灭菌方式对ZT作用的影响;在WPM培养基中分别添加不同浓度的ZT,接种蓝莓试管苗茎段进行增殖培养。结果表明,在ZT浓度为1.0 mg/L和2.0 mg/L时,ZT高温灭菌和过滤灭菌两种处理的蓝莓试管苗繁殖系数无显著差异,高温灭菌对ZT的作用无明显不利影响;对于‘蓝丰’‘北陆’和‘爱国者’3个蓝莓品种,在ZT浓度为0.5～3.0 mg/L的范围内,ZT浓度为0.5 mg/L处理的试管苗繁殖系数较高,这3个蓝莓品种试管苗增殖培养基以采用WPM+ZT 0.5 mg/L为宜。     

土壤支撑培养下的‘玫瑰香’葡萄组培快繁

本文旨在探讨‘玫瑰香’葡萄组织培养快速繁殖技术。分别于6月下旬和9月下旬取‘玫瑰香’葡萄当年生新梢茎段,用次氯酸钠灭菌并离体培养,无菌茎芽在含有不同浓度IBA的培养基中增殖,在土壤支撑的培养基中生根,并进行带坨移栽试验。结果表明,6月27日取材,用2%次氯酸钠浸泡10～15 min可以获得较好的灭菌培养效果。在不含激素的GS培养基中试管苗的繁殖系数可以达到3.6,添加0.1～0.4 mg/L的IBA对增殖没有明显的促进效果。在土壤支撑的培养基中接种双节茎段,试管苗的生根率达到84.4%,与琼脂培养基中的试管苗无显著差异,并且试管苗具有根毛。土壤支撑培养的试管苗带坨移栽的成活率为75.0%,显著高于琼脂培养基中的试管苗。本项结果将为建立‘玫瑰香’葡萄组织培养快速繁殖技术体系提供依据。     

马铃薯脱病毒与快繁技术研究

[目的]获得马铃薯脱毒试管苗及使长期保存导致生长势退化的试管苗复壮。[方法]设置不同的灭菌方法和不同的培养基进行马铃薯茎尖脱病毒及脱毒苗的快繁技术研究。[结果]芽外植体灭菌效果以质量分数5%的NaClO灭菌时间2 min与0.1%的HgCl2灭菌时间3 min组合效果最佳;茎尖诱导的最佳培养基为MS+GA30.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L,平均诱导率为58.25%;从MS液体和MS固体2种不同的培养基来看,MS液体培养基可以起到壮苗的作用;从扦插和平铺2种不同接种方式来看,平铺的接种方式可以加快脱毒苗繁殖速度。[结论]为马铃薯的组织培养快繁提供了参考依据。     

丛生紫荆培养基厚度、灭菌时间对抗污染及组培苗的影响

培养基的分装厚度和灭菌时间是培养基抗污染的关键，直接影响组培苗的生长和生产，对降低污染意义重大。通过不同灭菌时间及不同分装厚度丛生紫荆培养基抗污染效果试验、不同分装厚度培养基对丛生紫荆组培苗生长发育的影响试验，筛选出MS丛生紫荆培养基最佳灭菌时间为20 min、最佳分装厚度为2.0 cm。本试验可降低组培过程中受污染的风险，降低组培苗成本，减少经济损失，为丛生紫荆规模繁育、工厂化生产提供良好的技术平台。     

不同水质制作培养基对葡萄试管苗生长发育的影响

通过对自来水、凉开水、井水、车间蒸汽回流水、蒸馏水等5种不同水质制作的培养基,用于葡萄试管苗的扩大繁殖,研究其培养基对葡萄试管苗生长发育的影响,认为在葡萄试管苗的室内扩繁中前期可以用凉开水或井水等代蒸馏水,但以车间蒸汽回流水效果最佳,可以在一定程度上降低葡萄试管苗的生产成本。     

白花丹参组培快繁技术试验研究

通过对白花丹参茎尖、茎段及叶片等不同材料进行组织培养试验,调查不同灭菌时间对白花丹参接种的影响,不同培养基对试管苗生长的影响,不同生长调节剂组合对试管苗生根的影响,不同基质处理对白花丹参组培苗炼苗的影响,从中筛选出适合白花丹参接种组培快繁及炼苗移栽的整套技术。     

附加生长延缓剂和无菌水覆盖延长葡萄试管苗

为有效延长葡萄试管苗种质离体保存的继代间隔时间,降低接种频率,本试验以‘巨峰’‘赤霞珠’‘四倍体玫瑰香’‘克瑞森无核’葡萄为试材,研究培养基中附加缩节胺或烯效唑及培养基表面覆盖无菌水对葡萄试管苗延缓生长的影响。结果表明：培养基附加250 mg/L缩节胺可用于‘赤霞珠’试管苗延缓生长保存,接种后180 d存活率由对照的零存活提高到100%,去掉缩节胺后试管苗当代即恢复生长。培养基中附加0.5～1.0 mg/L的烯效唑对延长‘巨峰’‘四倍体玫瑰香’和‘克瑞森无核’葡萄试管苗继代间隔时间有良好作用;培养基表面覆盖20～40 mL无菌水能有效减少培养基水分蒸发,延长继代间隔时间,且对‘巨峰’‘四倍体玫瑰香’和‘克瑞森无核’试管苗生长状态无显著影响;培养基附加1.0 mg/L烯效唑及表面覆盖40 mL无菌水的组合处理有效延长了‘巨峰’‘四倍体玫瑰香’和‘克瑞森无核’试管苗保存时间,180 d时,3个品种试管苗存活率分别由只加烯效唑单一处理的55%、50%和70%提高到组合处理的100%。附加烯效唑处理的试管苗除‘巨峰’试管苗在第1代恢复正常生长外,其它品种在常规培养第2代恢复正常生长。     

甘露醇对马铃薯试管苗生长和有效保存期的影响

为给马铃薯试管苗生长和有效保存提供试验依据,以费乌瑞它脱毒试管苗为试验材料,添加不同甘露醇浓度(1％～5％)的继代培养基对其进行增殖培养,比较不同甘露醇浓度对试管苗生长和有效保存期的影响.结果表明:所试甘露醇浓度均对马铃薯试管苗的生长有不同程度的抑制作用,同时还延长了试管苗的保存时间,其中以继代培养基中添加1％～2％的甘露醇的保存效果最为理想,可使试管苗保存7个月以上,成活率达50％,且不影响试管苗继代.     

桑葚果汁超高压灭菌工艺研究

【目的】研究超高压处理在桑葚果汁加工中的应用工艺,确定其最佳参数,为建立和推广桑葚果汁超高压灭菌工艺提供依据。【方法】以待灭菌的桑葚果汁为研究对象, 利用正交试验设计方法探讨不同处理压力和时间对果汁中微生物（细菌总数、大肠杆菌、霉菌、致病菌、酵母菌）灭菌效果的影响。【结果】压力≥400 MPa时,菌落总数、大肠杆菌、霉菌、酵母菌数目均已达到商业灭菌标准;压力为200～500 MPa时,随着压力的升高,灭菌效果呈直线上升趋势;处理时间≤25 min时,随着超高压时间的延长,灭菌效果呈明显增强趋势。影响桑葚果汁超高压灭菌效果的次序为：处理时间>处理压力,两者对桑葚果汁的灭菌效果均达显著水平。【结论】在一定处理时间或压力范围内,桑葚果汁的超高压灭菌效果随着压力的增高或时间的延长而增强;桑葚果汁超高压灭菌过程中,处理时间起主要作用,压力起次要作用,其最佳参数为：压力500 MPa、时间20 min。     

桑甚果汁超高压灭菌工艺研究

【目的】研究超高压处理在桑葚果汁加工中的应用工艺,确定其最佳参数,为建立和推广桑葚果汁超高压灭菌工艺提供依据。【方法】以待灭菌的桑葚果汁为研究对象,利用正交试验设计方法探讨不同处理压力和时间对果汁中微生物(细菌总数、大肠杆菌、霉菌、致病菌、酵母菌)灭菌效果的影响。【结果】压力≥400MPa时,菌落总数、大肠杆菌、霉菌、酵母菌数目均已达到商业灭菌标准;压力为200～500MPa时,随着压力的升高,灭菌效果呈直线上升趋势;处理时间≤25min时,随着超高压时间的延长,灭菌效果呈明显增强趋势。影响桑葚果汁超高压灭菌效果的次序为:处理时间>处理压力,两者对桑葚果汁的灭菌效果均达显著水平。【结论】在一定处理时间或压力范围内,桑葚果汁的超高压灭菌效果随着压力的增高或时间的延长而增强;桑葚果汁超高压灭菌过程中,处理时间起主要作用,压力起次要作用,其最佳参数为:压力500MPa、时间20min。     

绿茶饮料微波灭菌技术研究

利用微波技术研究了不同作用时间、不同微波功率对绿茶饮料的灭菌效果.结果表明,在700 W功率下,随着灭菌时间延长,卫生检验趋向合格同时茶汤色泽加深.作用时间120 s,不同灭菌功率的茶汤色泽差异性达极显著水平.正交试验结果表明,得到700 W、120 s和30 mL的微波灭菌组合,对绿茶饮料的色泽稳定和灭菌效果都是较为理想的.     

木薯组织培养外植体选择和灭菌研究

以木薯品种华南205为材料,研究外植体类型与不同灭菌方法对其组织培养的影响。试验结果表明:9—10月份室外取材灭菌效果最理想,Hg Cl2灭菌处理7—8月份取的外植体的时间需控制在10 min内,而灭菌处理9—10月份取的外植体的时间需控制在5 min。此外,室内水培木薯茎段和室外茎段的中部均可作为组织培养的良好材料。     

PBO对葡萄试管苗繁殖和移栽成活率的影响

在葡萄组培快繁当中,为了解决试管苗生长细弱,对继代扩繁和移栽成活影响较大的问题,在改良B5+IAA0.2mg/L培养基中加入不同浓度的PBO,设空白对照,行单因素试验。经统计分析结果表明,PBO各个浓度均可使葡萄试管苗植株高度降并进低,茎杆粗度增加,以添加PBO0.06mg/L的培养基扩繁效果最佳,增殖率达7.2倍,以添加PBO0.03mg/L的培养基培养的苗木移栽成活率最高,达89.0%。     

植物生长延缓剂B9对马铃薯种质资源离体保存的影响

以MS为基本培养基,以马铃薯(Solarium tuberosum L.)品种鄂马铃薯5号脱毒试管苗为试验材料,研究不同浓度B9对马铃薯试管苗离体保存的影响。结果表明,B9对马铃薯试管苗的生长有不同程度的抑制作用,延长了试管苗的保存时间,其中浓度为60 mg/L的B9的保存效果最为理想,可以使试管苗保存10个月以上,且生长健壮,成活率达76%,不影响试管苗继代。     

绿豆种子组织培养的几种灭菌方法

组织培养的关键是对外植体灭菌，目前效果最佳的灭菌剂氯化汞属于剧毒试剂，对环境及人体均有危害。为探究更加安全有效的灭菌方式，本研究以绿豆为试验材料，以75%乙醇+30%次氯酸钠联合灭菌、4%过碳酸钠、氯气3种灭菌处理方式搭配灭菌时间共8组处理，统计其萌发及污染情况，并在7 d时统计长势相关数据。另外，每组在接种3 d时制备外植体转接至分化培养基，观察统计污染及丛生芽状况，根据数据分析结果选出最优灭菌剂及灭菌时间。结果表明，75%乙醇30 s+30%次氯酸钠30 min处理下其污染率为4%,丛生芽分化率为82%,生长速率与生长状况良好。因此，该方法最适合于绿豆组织培养的种子灭菌，有利于愈伤组织的诱导。     

千层塔组织培养中外植体消毒灭菌研究初报

本文通过对不同的外植体，使用不同的灭菌剂，不同的灭菌时间，并结合紫外线照射等试验研究。初步筛选出相对有效的灭菌剂、浓度、灭菌时间及比较理想的外植体，即：茎尖用HgCl2（0．1％w／v）作灭菌剂灭菌时间5—6min效果较好。     

提高葡萄试管苗移栽成活率的技术

<正> 试管苗从培养基中移入大田是植物组织培养中重要的一环。本试验以葡萄为试材,研究了葡萄试管苗移栽于盆土及大田中的技术,试管苗移栽成活率达95％～100％。另外,以棉花、芦笋为移栽材料,也取得了较理想的效果。材料与方法 (一)材料试管苗是由葡萄“胜利”品种花药、花药诱导的愈伤组织,经过体细胞胚发生途径产生。移栽的试管苗取自:1)由胚性愈伤组织分化产生的试管苗,2)胚性愈伤组织     

蓝莓芽诱导、再生与驯化技术研究

以兔眼蓝莓当年生枝条为外植体,对灭菌剂种类与处理时间的选择、不同激素处理对芽诱导的影响、IBA浓度对试管苗生根的影响、不同基质对蓝莓试管苗驯化成活率的影响等多种因素进行试验,建立了蓝莓组培体系。试验结果表明,外植体以0.1%升汞处理10 min,污染率为20%,同时萌发的正常芽率也达84.4%,为适宜的灭菌方法。蓝莓芽诱导受细胞分裂素的影响,其中附加ZT1-2mg/L效果较好,增殖倍率可达4~5倍。蓝莓试管苗附加IBA 0.2mg/L效果最佳,有效生根率达57.5%。蓝莓试管苗驯化以泥炭∶黄泥=3∶2的混合物作为基质,驯化苗成活率可高达79.9%。     

Cu~(2+)对“郑巨1号”葡萄试管苗生长的影响

[目的]了解不同浓度Cu2+对"郑巨1号"葡萄试管苗生长的影响及作用机理。[方法]培养基中添加不同浓度的Cu SO4,检测铜胁迫下葡萄试管苗生长的各项指标(生根数、根长、株高、叶片数等)以及Cu2+对葡萄试管苗叶绿素含量的影响。[结果]低浓度(小于5mg/L)Cu2+对试管苗生长的影响不明显,随着Cu2+浓度的升高(大于10 mg/L),对试管苗生长的抑制作用也逐渐增强。[结论]Cu2+的毒害可通过减少叶绿素的合成等延缓或抑制"郑巨1号"葡萄试管苗的生长。