桃红四物汤调控NF-κB/TGF-β1/Smad通路抑制宫腔粘连的机制

目的 研究桃红四物汤治疗宫腔粘连（IUA）的作用机制。方法 选取50只SPF级雌性SD大鼠为研究对象,通过机械和感染双重损伤建立IUA大鼠模型,随机分为IUA模型组、桃红四物汤高（18 g/kg）、中（9 g/kg）、低剂量（4.5 g/kg）组,每组各10只,同时选取10只大鼠作为正常组。连续灌胃24 d后收集各组大鼠子宫组织,分别采用RT-qPCR、ELISA和Western blot检测子宫组织中α-SMA、Col Ⅰ、FN、TNF-α、IL-6和IL-18 mRNA及蛋白表达水平,以及NF-κB、p-NF-κB、TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad、Smad3、p-Smad7及Smad7蛋白表达水平。结果 与正常组比较,IUA模型组子宫组织中α-SMA、Col Ⅰ、FN、TNF-α、IL-6、IL-18、p-NF-κB、NF-κB、TGF-β1、p-Smad2、Smad2、p-Smad3、Smad3水平明显上调,p-Smad7、Smad7水平明显下调（P＜0.05）;与IUA模型组比较,桃红四物汤组可显著降低α-SMA、Col Ⅰ、FN、TNF-α、IL-6、IL-18、p-NF-κB、NF-κB、TGF-β1、p-Smad2、Smad2及p-Smad3、Smad3的表达,上调p-Smad7、Smad7的表达（P＜0.05）,且中、高剂量组效果更显著（P＜0.05）。结论 桃红四物汤可通过抑制NF-κB/TGF-β1/Smad信号通路的活化,进而抑制IUA大鼠子宫组织纤维化及炎症反应。     

六味地黄丸通过调控NF-κB及TGF-β/Smad双信号通路减轻糖尿病肾病炎症及纤维化

【目的】基于核因子kappa B(NF-κB)及转化生长因子β(TGF-β)/Smad双信号通路,观察六味地黄丸对糖尿病肾病炎症及纤维化的影响,探讨其对肾保护作用机制。【方法】将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组10只。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素法复制糖尿病大鼠模型。中药组给予大鼠六味地黄丸(剂量为6.75 g·kg-1·d-1)灌胃,正常组、模型组给予大鼠等体积生理盐水灌胃。给药12周后取材,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、24h尿蛋白量(24h-Pro),采用苏木素—伊红(HE)与Masson染色观察肾组织病理变化,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肾组织NF-κB、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、TGF-β、alpha平滑肌抗体(α-SMA)、Smad2、Smad3、Smad7的表达。【结果】生化指标结果显示:与正常组比较,模型组大鼠FBG、BUN、SCr、24h-Pro升高(P0.01);六味地黄丸治疗后上述指标均有所改善(P0.05)。HE与Masson染色结果显示,模型组肾小球官腔变窄、系膜基质增生及炎症细胞浸润,而中药组有所改善。Western blot结果显示:与正常组比较,模型组的NF-κB、MCP-1、TGF-β、α-SMA、Smad2、Smad3表达均呈明显上调,而Smad7表达降低(P0.01);中药组NF-κB、MCP-1、TGF-β、α-SMA、Smad2、Smad3表达下调,Smad7表达上调(P0.05)。【结论】六味地黄丸具有肾脏保护作用,其机制可能与通过调控NF-κB及TGF-β/Smad双信号通路,从而减轻糖尿病肾病炎症损伤和纤维化有关。     

益肾降浊冲剂对5/6肾切除模型大鼠肾纤维化及NF-κB和TGF-β_1/Smad3信号通路的影响

目的:探讨益肾降浊冲剂对5/6肾切除大鼠肾组织纤维化的影响及其机制。方法:利用大鼠5/6肾切除模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、益肾降浊冲剂低、中、高剂量组和大黄素组,每组10只。益肾降浊冲剂按照低、中、高剂量(9 g/kg,18 g/kg,36 g/kg)配成水煎剂,大黄素的剂量为500 mg/kg,灌胃量为1 mL/100 g,模型组和假手术给予等体积蒸馏水灌胃,连续用药8周。治疗结束后,取腹主动脉血检测各组大鼠尿素氮(BUN)、肌酐(SCR);ELISA法检测各组大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;Masson染色观察肾脏纤维化程度;免疫组化法检测肾组织核因子κB(NF-κB)、转化生长因子β_1(TNF-β_1)及Smad3蛋白含量。结果:与假手术组相比,模型组大鼠血清BUN、SCR水平升高(P0.01),肾组织纤维化程度加重,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平升高(P0.05,P0.01),NF-κB、TGF-β_1、Smad3蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。与模型组相比,益肾降浊冲剂各剂量组大鼠血清BUN、SCR水平下降(P0.01),肾组织纤维化程度减轻,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P0.05,P0.01),NF-κB、TGF-β_1、Smad3表达下降(P0.05,P0.01)。结论:益肾降浊冲剂可以改善尿毒症大鼠的肾脏功能,减轻肾脏纤维化,其机制可能与下调NF-κB和TGF-β_1/Smad3通路进而改善尿毒症大鼠肾纤维化有关。     

雷公藤多苷对溃疡性结肠炎模型大鼠炎症相关因子及核因子-κB、β-arrestin1、Bcl-2表达的影响

目的:观察雷公藤多苷对溃疡性结肠炎模型大鼠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、β-arrestin1、Bcl-2表达的影响。方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、雷公藤多苷组和硫唑嘌呤组。除对照组外,其他组分别采用TNBS/乙醇联合灌肠的方法制备溃疡性结肠炎模型。各组分别给予相应药物连续灌胃,对照组和模型组给予生理盐水灌胃14 d,第16天处死大鼠,取结肠标本,分别选择Elisa和Western blot法检测结肠组织中TNF-α、TGF-β1及NF-κB、β-arrestin1、Bcl-2蛋白的表达。结果:造模3 d后模型组大鼠体质量降低、精神倦怠、懒动,出现不同程度的腹泻及便血,疾病活动指数评分高于对照组(P0.05),大鼠结肠肠管变粗、肠壁与周围组织粘连,黏膜多处片状充血、水肿。与对照组比较,模型组的大鼠结肠组织TGF-β1明显降低(P0.05),TNF-α及NF-κB、β-arrestin1、Bcl-2表达水平明显升高(P0.05);与模型组比较,雷公藤多苷组与硫唑嘌呤组TGF-β1显著增高(P0.05),TNF-α及NF-κB、β-arrestin1、Bcl-2蛋白表达明显下降(P0.05)。结论:雷公藤多苷对溃疡性结肠炎模型大鼠有治疗作用,其机制可能与升高TGF-β1,降低炎症因子水平和NF-κB、β-arrestin1、Bcl-2蛋白表达有关。     

托伐普坦联合达格列净对心衰大鼠心肌纤维化的影响

目的 探讨托伐普坦(TLV)和达格列净(DAPA)对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。 方法 将雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、TLV-L组、TLV-H组、DAPA组和TLV-H+DAPA组。除空白对照组外,其他各组大鼠均给予腹腔注射阿霉素3 mg/kg,1次/周,6周造模,心脏彩超检查射血分数<60%提示心衰大鼠造模成功,随机分组后药物干预30 d。采用苏木精-伊红染色法观察大鼠心脏组织形态学变化,采用Masson染色法检测心肌纤维化程度,并计算胶原容积分数(CVF);采用TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡指数;采用Western blotting法检测各组大鼠左心室心肌组织中TGF-β1、磷酸化Smad2(p-Smad2)及磷酸化Smad3(p-Smad3)的蛋白水平。 结果 与空白对照组相比,模型对照组心肌纤维排列紊乱,较多炎性细胞浸润,心肌纤维化显著,细胞凋亡增加,TGF-β1蛋白表达显著升高,p-Smad2和p-Smad3蛋白水平下降(P<0.05);与模型对照组相比,TLV组、DAPA组及TLV-H+DAPA组心肌纤维化程度明显降低,心肌凋亡指数明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1蛋白表达明显降低;p-Smad2和p-Smad3蛋白水平明显升高(P<0.05)。 结论 TLV与DAPA单用及联合应用均可通过抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路发挥抑制心肌纤维化的作用,且联合用药的效果优于单独用药。     

芪贞降糖颗粒对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/Smad信号通路的调控作用

目的 观察芪贞降糖颗粒对糖尿病肾病大鼠TGF-β1/Smad信号通路的调控作用,探讨其改善糖尿病肾病的作用机制。方法 采用高脂饲料喂养联合链尿佐菌素腹腔注射方法复制2型糖尿病肾病大鼠模型,选取模型复制成功的大鼠,随机分为模型组,二甲双胍组,芪贞降糖颗粒低、中、高剂量组,每组10只,另取10只正常大鼠作为正常对照组。灌胃给药8周,检测各组大鼠尿α1微球蛋白、β2微球蛋白和白蛋白含量。苏木素-伊红染色观察大鼠肾组织的损伤程度,免疫荧光染色观察大鼠肾组织转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）和转化生长因子βⅠ型受体（transforming growth factor beta type Ⅰ receptor,TGF-βRⅠ）的表达分布。RT-PCR检测肾组织TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad3和Smad7 mRNA的表达水平,Western blot检测肾组织TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad3、p-Smad3、Smad7和p-Smad7的蛋白表达水平。结果 与正常对照组相比,模型组大鼠尿α1微球蛋白、β2微球蛋白及白蛋白含量均明显增加（P＜0.05）,肾组织损伤明显,TGF-β1和TGFβ-RⅠ表达增加;TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad3 mRNA表达水平显著增高（P＜0.05）,Smad7 mRNA表达水平显著降低（P＜0.05）,TGF-β1、TGF-βRⅠ、Smad3和p-Smad3蛋白表达水平显著增加（P＜0.05）,Smad7和p-Smad7蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。与模型组相比,芪贞降糖颗粒组上述指标均具有不同程度的逆转,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 芪贞降糖颗粒能够改善糖尿病大鼠肾组织的损伤程度,其机制可能与调控TGF-β1/Smad信号通路的蛋白表达有关。     

二甲双胍对饱和脂肪酸诱导的大鼠H9C2型心肌细胞损伤的保护作用研究

目的 探讨二甲双胍(Met)对饱和脂肪酸所诱导的大鼠H9C2型心肌细胞损伤作用的保护机制.方法 在对照、棕榈酸(PA)及3种不同浓度梯度Met与PA联合组培养液中培养大鼠H9C2型心肌细胞株24 h.采用蛋白质印迹法(Western blot)测定各组细胞核因子κB(NF-κB)p65、细胞间黏附因子(ICAM1)、磷酸化核因子κB抑制蛋白(p-IκBα)及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)的蛋白表达,实时荧光定量PCR测定各组细胞NF-κB、单核细胞趋化因子(CCL2)和ICAM1的mRNA表达.结果 与对照组相比,PA组的细胞中NF-κB p65、ICAM1、p-IκBα蛋白表达量增加(P<0.05);与PA组相比,Met+PA联合组细胞NF-κB p65、ICAM1、p-IκBα的蛋白表达量随Met浓度梯度增加表现为不同程度递减(P<0.05),p-AMPK蛋白表达量随Met浓度增加而显著增加(P<0.05).与对照组相比,PA组CCL2、ICAM1的mRNA表达量增加(P<0.05);与PA组相比,Met+PA联合组细胞CCL2和ICAM1的mRNA表达量下降(P<0.05).结论 Met可以减轻由饱和脂肪酸诱导细胞黏附因子和趋化因子表达增加而引起的大鼠H9C2型心肌细胞损伤.     

颅痛颗粒对偏头痛模型大鼠行为学及NF-κB信号转导通路的影响

【目的】观察颅痛颗粒(袪风药合虫类药)对偏头痛模型大鼠行为学及核因子κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨其作用机制。【方法】将60只雄性大鼠随机分为正常组,模型组,西药组,中药高、中、低剂量组,每组10只。中药高、中、低剂量组大鼠分别给予颅痛颗粒(剂量为4.0、2.0、1.0 g·kg-1·d-1)灌胃,西药组给予舒马普坦(剂量为6.0 mg·kg-1·d-1)灌胃,正常组、模型组给予等体积蒸馏水灌胃,连续灌胃7 d后,给予大鼠颈背部皮下一次性注射10 mg/kg硝酸甘油复制偏头痛模型,观察大鼠行为学改变,Western blot法检测脑干NF-κBp65、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)的表达。【结果】(1)行为学变化:与正常组比较,模型组大鼠挠头及爬笼次数均明显增加(P 0.05),于造模后2～5 min出现双耳发红现象;与模型组比较,中药高、中、低剂量组及西药组大鼠挠头及爬笼次数均明显减少,耳红出现时间延后,耳红持续时间缩短(P 0.05),且中药各剂量组的治疗作用呈剂量依赖性。(2)NF-κBp65、p-IκBα的表达:与正常组比较,模型组脑干NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达升高;与模型组比较,中药高、中、低剂量组及西药组NF-κBp65、p-IκBα蛋白表达均降低(P 0.05),且中药各剂量组的治疗作用呈剂量依赖性。【结论】颅痛颗粒可改善偏头痛大鼠的行为学变化,其作用机制可能与抑制脑干NF-κB信号通路的激活有关。     

沙库巴曲/缬沙坦治疗腹膜透析合并慢性心力衰竭的疗效分析

目的观察沙库巴曲/缬沙坦治疗腹膜透析合并慢性心力衰竭的疗效及安全性。方法将50例规律行腹膜透析合并慢性心力衰竭患者按照随机数表法分为缬沙坦组(n=25)和沙库巴曲/缬沙坦组(n=25)。缬沙坦组接受缬沙坦胶囊80 mg治疗,沙库巴曲/缬沙坦组患者接受沙库巴/曲缬沙坦片50 mg治疗。比较两组疗效、治疗前后血浆脑钠肽(BNP)、心功能指标[左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、每搏输出量(SV)、左室射血分数(LVEF)]及不良反应情况,并统计两组6个月内再住院率。结果沙库巴曲/缬沙坦组有效率较缬沙坦组高(P<0.05)。与治疗前相比,两组治疗后BNP、LVESD、LVEDD均下降,而SV、LVEF均上升,且沙库巴曲/缬沙坦组上述指标改善情况均优于缬沙坦组(均P<0.05)。沙库巴曲/缬沙坦组结束后6个月再住院率较缬沙坦组低(P<0.05);两组不良反应差异无统计学意义(P>0.05)。结论沙库巴曲/缬沙坦治疗腹膜透析合并慢性心力衰竭疗效显著,改善心功能,降低血浆BNP水平和再住院率,且安全性良好。     

绞股蓝总皂苷对CCl_4诱导的大鼠肝纤维化TGF-β_1/Smad信号通路的影响

目的：观察绞股蓝总皂苷对大鼠肝纤维化转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad信号通路的影响。方法：将Wistar雄性大鼠设为正常组、模型组、绞股蓝总皂苷组、秋水仙碱组,除正常组外采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型。造模第7周开始予相应的药物干预,每日给药剂量为股蓝总皂苷200 mg/kg、秋水仙碱0.1 mg/kg,共3周。观察大鼠一般情况变化,肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量,肝组织病理及胶原沉积;检测肝组织肝星状细胞（HSC）活化标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达,肝组织TGF-β1/Smad信号通路指标TGF-β1、TGF-β1受体1（TβR-Ⅰ）、TGF-β1受体2（TβR-Ⅱ）、Smad2/p-Smad2、Smad3/p-Smad3蛋白表达。结果：模型组大鼠一般状态较差,肝组织Hyp含量较正常组显著增高,肝小叶被破坏,肝细胞脂肪变性伴炎性细胞浸润,并有大量纤维结缔组织增生;大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad2、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达均显著升高,而Smad3蛋白表达与正常组比较无差异。绞股蓝总皂苷组及秋水仙碱组大鼠肝组织Hyp含量显著降低,肝组织病理改善;绞股蓝总皂苷组大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、Smad2、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达均较模型组显著下降,TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及Smad3蛋白表达无显著变化;秋水仙碱组大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、Smad2、p-Smad3蛋白表达均较模型组显著下降,TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、p-Smad2及Smad3蛋白表达无显著变化。结论：绞股蓝总皂苷对CCl4诱导的大鼠肝纤维化有显著的干预作用,其作用机制可能与抑制HSC活化、TGF-β1分泌及其信号通路中p-Smad2、p-Smad3表达有关。     

基于NF-κB/NLRP3信号轴探讨大血藤对CIA大鼠的治疗作用及机制

目的  考察大血藤对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠的症状改善作用和机制。 方法   建立大鼠CIA模型,持续观察大鼠体质量、关节肿胀度、关节炎指数,ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18水平;Western blot法检测大鼠关节滑膜RANKL、p-IκB-α、NF-κB/p65、p-NF-κB/p65、NLRP3、Caspase-1表达。 结果   模型组大鼠自第2周出现体质量增长的趋势明显减缓(P < 0.01),而关节炎指数和关节肿胀度均显著增加(P < 0.05),大鼠关节有红肿进而不能负重状态,而大血藤能显著改善CIA大鼠相关症状,表现为降低足肿胀、关节炎指数评分以及改善体质量数据。与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18水平以及关节滑膜RANKL、p-IκB-α、NF-κB/p65、p-NF-κB/p65、NLRP3、Caspase-1表达显著升高(P < 0.01), 而大血藤中、高剂量组上述指标较模型组显著降低(P < 0.05, P < 0.01)。 结论   大血藤能改善CIA大鼠的炎症反应,延缓病理进展,其机制可能与降低促炎因子的释放及抑制NF-κB/NLRP3信号通路有关。      

VEGF对上皮间充质转化的抑制与Smad信号途径及SnoN表达的变化

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞发生肾小管上皮-间充质细胞转化(EMT)的过程中对Smad2/3,Smad7信号途径以及SnoN表达的影响。方法体外培养的HK-2细胞分为:①正常对照组;②TGF-β1(5μg/L)阳性对照组;③VEGF165(100μg/L)作用组;④TGF-β1(5μg/L)+VEGF165(100μg/L)共同作用组。采用WesternBlot法和RT-PCR分别检测各组细胞p-Smad2/3和Smad2/3(共同作用30和60min),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad7、SnoN的表达水平(共同作用48h)。结果 TGF-β1组α-SMA蛋白和mRNA表达与正常对照组比较明显增强,TGF-β1与VEGF165共同作用组α-SMA蛋白和mRNA表达与TGF-β1单独作用组比较明显减弱(P0.05)。体外HK-2细胞,TGF-β1组刺激30、60min,与正常对照组比较,(p-Smad2/3)/(Smad2/3)比值明显升高,TGF-β1+VEGF165组与TGF-β1单独作用组相比明显下降,且以30min时下降明显。TGF-β1组作用48h与正常对照组比较,Smad7蛋白和mRNA表达明显下降,VEGF165+TGF-β1组较TGF-β1单独作用组Smad7表达明显升高(P0.05)。VEGF165组与正常对照组相比,α-SMA、(p-Smad2/3)/(Smad2/3)、Smad7蛋白和mRNA表达的差异无统计学意义(P﹥0.05)。TGF-β1组SnoN蛋白表达与正常对照组比较明显增强(P0.05),TGF-β1与VEGF165共同作用组SnoN蛋白表达与TGF-β1单独作用组相比差异无统计学意义(P﹥0.05),各组SnoNmRNA表达差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论 VEGF165抑制TGF-β1诱导HK-2细胞EMT的机制可能与直接抑制Smad2/3磷酸化、上调Smad7信号表达有关,而与调节SnoN表达无关。     

Smad signal transduction pathway involved in supression of VEGF on TGF-β1 induced EMT of HK-2 cells

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导HK-2细胞发生肾小管上皮-间充质细胞转化(EMT)的过程中对Smad 2/3,Smad 7信号途径以及SnoN表达的影响.方法 体外培养的HK-2细胞分为:①正常对照组;②TGF-β1(5μgL)阳性对照组;③VEGF165(100μg/L)作用组;④TGF-β1(5 μg/L)+ VEGF165(100 μg/L)共同作用组.采用Western Blot法和RT-PCR分别检测各组细胞p-Smad 2/3和Smad 2/3(共同作用30和60 min),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad 7 、SnoN的表达水平(共同作用48 h).结果 TGF-β1组α-SMA蛋白和mRNA表达与正常对照组比较明显增强,TGF-β1与VEGF165共同作用组α-SMA蛋白和mRNA表达与TGF -β1单独作用组比较明显减弱(P＜0.05).体外HK-2细胞,TGF-β1组刺激30、60 min,与正常对照组比较,(p-Smad 2/3)/(Smad 2/3)比值明显升高,TGF-β1 +VEGF165组与TGF-β1单独作用组相比明显下降,且以30 min时下降明显.TGF-β1组作用48h与正常对照组比较,Smad7蛋白和mRNA表达明显下降,VEGF165+TGF-β1组较TGF-β1单独作用组Smad 7表达明显升高(P＜0.05).VEGF165组与正常对照组相比,α-SMA、(p-Smad 2/3 )/(Smad 2/3)、Smad 7蛋白和mRNA表达的差异无统计学意义(P＞0.05).TGF-β1组SnoN蛋白表达与正常对照组比较明显增强(P＜0.05),TGF-β1与VEGF165共同作用组SnoN蛋白表达与TGF-β1单独作用组相比差异无统计学意义(P＞0.05),各组SnoN mRNA表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 VEGF165抑制TGF-β1诱导HK-2细胞EMT的机制可能与直接抑制Smad 2/3磷酸化、上调Smad 7信号表达有关,而与调节SnoN表达无关.     

柴胡渗湿汤对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β_1、NF-κB影响的研究

目的探讨柴胡渗湿汤对肺纤维化模型大鼠肺组织中转化生长因子-β1、核因子-κB表达的影响,揭示其治疗肺纤维化的可能作用机理。方法将90只雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、模型对照组、泼尼松组、柴胡渗湿汤组、柴胡渗湿汤+泼尼松组,每组18只。除正常对照组外,其余各组以支气管内注入博莱霉素的方法建立肺纤维化动物模型,于造模后第2天给予相应药物干预;于给药后14 d、28 d在光镜下观察部分大鼠肺组织的病理变化情况,并用免疫组化法检测大鼠肺组织中TGF-β1及NF-κB的表达。结果光镜下模型对照组较正常组肺组织炎症细胞浸润、结构破坏、肺纤维化明显,正常对照组大鼠肺组织TGF-β1和NF-κB的含量较模型对照组显著降低(P0.05),提示造模成功;分别与柴胡渗湿汤相比,模型对照组肺组织TGF-β1和NF-κB的含量显著增高(P0.05),泼尼松组两种指标的含量差异无统计学意义(P0.05),而柴胡渗湿汤+泼尼松组两种指标的含量显著降低(P0.05)。结论柴胡渗湿汤可能通过抑制肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1及NF-κB的表达,从而延缓大鼠肺纤维化的进展。     

沙库巴曲缬沙坦联合阿托伐他汀对心力衰竭患者心功能的影响

目的探讨沙库巴曲缬沙坦联合阿托伐他汀对心力衰竭(HF)患者心功能的影响。方法选取2018年1月至2019年8月河南科技大学第一附属医院收治的60例HF患者,按治疗方案分为参照组和联合组,每组30例。两组患者均接受常规治疗。在此基础上,参照组患者接受阿托伐他汀治疗,联合组患者接受沙库巴曲缬沙坦联合阿托伐他汀治疗。比较两组治疗前后纽约心脏学会(NYHA)心功能分级、血清N末端脑钠肽原前体(NT-proBNP)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)水平。结果治疗后,联合组NYHA分级优于参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清NT-proBNP和TGF-β_1水平均低于治疗前,联合组血清NT-proBNP和TGF-β_1水平均低于参照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论采用沙库巴曲缬沙坦联合阿托伐他汀治疗HF,有助于更好地改善心功能。     

白黎芦醇联合厄贝沙坦对肾间质纤维化大鼠模型的影响

目的观察白藜芦醇联合厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾间质纤维化的影响并探讨其可能机制。方法制备UUO肾间质纤维化大鼠模型,将40只大鼠随机分为5组,即假手术组、模型组、白藜芦醇组、厄贝沙坦组以及白藜芦醇和厄贝沙坦联合组,每组8只。术后2周处死大鼠,过碘酸-Schiff染色和脂氢过氧化病理分析肾间质纤维化指数,并应用免疫组织化学方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA),用Western Blot分析α-SMA、fibronectin、p-Smad3、p NF-κBp65、ICAM-1、TNF-α,用ELISA检测过氧化物酶体增殖剂激活受体(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARs)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、巨噬细胞炎症蛋白2(marcophage inflammatory protein-2,MIP-2)和单核细胞趋化因子1(monocyte chemtaticprotein-1,MCP-1)。结果过碘酸-Schiff染色和脂氢过氧化结果显示模型组肾小管损伤面积远大于其它各组。免疫组化分析模型组中α-SMA的表达高于其它各组,联合治疗组α-SMA的表达在治疗组中表达较少,但高于假手术组。模型组大鼠肾间质α-SMA、fibronectin、p-Smad3、p NF-κBp65、ICAM-1、TNF-α的表达增多,联合治疗组较厄贝沙坦和白藜芦醇组的表达减少(P0.05),但厄贝沙坦和白藜芦醇组之间差异无统计学意义(P0.05)。模型组TGF-β1、MIP-2和MCP-1的水平高于其它各组,在治疗组中,联合治疗组这些细胞因子的水平低于另外2组。与模型组比较,其它组PPAR(α、β和γ)酶活性增加(P0.05)。结论白藜芦醇和厄贝沙坦可抑制NF-κB、TGF-β1等途径减缓肾纤维化的病程进展,且联合治疗对肾纤维化的减缓更显著。     

沙库巴曲/缬沙坦对心肌肥厚兔半乳糖凝集素-3以及基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的:研究沙库巴曲/缬沙坦对压力负荷诱导的心肌肥厚新西兰兔半乳糖凝集素-3(Gal-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:24只健康雄性8周龄新西兰兔随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、沙库巴曲/缬沙坦组(Sacu/Vals),每组8只,后两组行腹主动脉缩窄术构建心肌肥厚模型,8周建模成功后沙库巴曲/缬沙坦组予以药物灌胃,其余两组予以等体积生理盐水。16周末取所有兔心,测左心室质量指数和全心质量指数以及取左心室心肌组织行HE染色评估心肌肥厚水平,western blot检测心肌组织Gal-3、MMP-9的表达。结果:⑴与假手术组相比,模型组、沙库巴曲/缬沙坦组HMI、LVMI增加(P<0.05);与模型组相比,沙库巴曲/缬沙坦组HMI、LVMI降低(P<0.05)。⑵假手术组心肌纤维排列整齐,呈束状排列,形态完整,未见明显纤维组织。模型组心肌纤维排列紊乱,大部分断裂,细胞水肿,心肌间质可见纤维结缔组织。沙库巴曲/缬沙坦组与模型组相比,心肌纤维排列基本整齐,细胞水肿明显减轻。⑶与假手术相比,模型组、沙库巴曲/缬沙坦组Gal-3、MMP-9蛋白表达量增加(P<0.05);与模型组相比,沙库巴曲/缬沙坦组Gal-3、MMP-9蛋白表达量降低(P<0.05)。结论:沙库巴曲/缬沙坦能减轻兔心肌肥厚,其机制可能跟下调Gal-3、 MMP-9蛋白表达相关。     

阿魏酸联合脂肪间充质干细胞调节TGF-β/Smad信号转导通路对肝星状细胞凋亡的影响研究

目的 探讨阿魏酸(FA)联用大鼠脂肪间充质干细胞(ADMSCs)调节TGF-β/Smad信号转导通路对肝星状细胞(HSCs)凋亡的影响.方法 实验将HSCs分为4组:空白组、FA组、ADMSCs组、FA+ADMSCs组.流式细胞术检测各组HSCs的凋亡率;qRT-PCR检测HSCs中TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA的表达水平;Western blot检测HSCs中TGF-β1和Smad7蛋白、Smad2/3磷酸化(p-Smad2/3)表达变化.结果 与其他3组比较,FA+ ADMSCs中HSCs凋亡率明显升高(P＜0.05);TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达明显下降,Smad7 mRNA表达明显升高(P＜0.05);TGF-β1蛋白、p-Smad2/3表达明显降低,而Smad7蛋白表达明显升高(P＜0.05).结论 FA能增强ADMSCs对HSCs中TGF-β1表达的下调作用,进而导致下游p-Smad2/3活性下降及Smad7表达升高,从而参与促进细胞凋亡.     

基于TGF-β1/Smad3信号通路观察促血小板生成素对阿霉素致心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨促血小板生成素(TPO)对阿霉素致心力衰竭(CHF)大鼠抗心肌细胞凋亡的作用以及其对TGF-β1/Smad3信号的调控机制。方法将大鼠随机分为对照组、模型组、治疗组、抑制剂组;模型组、治疗组、抑制剂组采用腹腔注射阿霉素构建心衰模型,治疗组每日腹腔注射5μg/kg TPO;抑制剂组每日腹腔注射1. 2 mg/kg SB431542、TUNEL染色、免疫荧光、Western blot检测大鼠心肌细胞的凋亡、Caspase-3、TGF-β1及p-Smad3的表达水平。结果与对照组相比,模型组心肌细胞凋亡率、TGF-β1、p-Smad3、Caspase-3的表达明显升高,与模型组相比,治疗组、抑制剂组心肌细胞凋亡率、TGF-β1、p-Smad3、Caspase-3的表达明显降低,差异均具有统计学意义(P0. 05)。结论 TPO能够降低由阿霉素导致CHF大鼠的心肌细胞凋亡率,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号有关。     

毛冬青皂酮胶囊对急性脑梗死模型大鼠神经保护作用

目的:分析毛冬青皂酮胶囊对急性脑梗死模型大鼠神经保护作用并初步探索其保护机制。方法:从60只SPF级SD大鼠中随机选取50只,建立大鼠动脉闭塞模型(middle cerebral artery occlusion,MCAO),余下10只记作假手术组。将成功建模大鼠随机分为模型组,对照组,毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组。对照组给予0.03 g·kg~(-1)莫尼地平溶于2 mL生理盐水灌胃,毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组分别使用0.2 g·kg~(-1)、0.1 g·kg~(-1)、0.05 g·kg~(-1)毛冬青皂酮胶囊颗粒溶于2 mL生理盐水灌胃,假手术组和模型组给予2 mL生理盐水灌胃,连续用药6 d,每天1次。治疗6 d后,在第7天时,按照Longa评分标准对大鼠进行神经功能评分,并取大鼠眼底静脉丛血,收集血清,通过酶联免疫吸附实验法检测大鼠血清炎性因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;断头法处死大鼠后取模型大鼠大脑皮层梗死部位组织和假手术组大鼠相同位置的大脑皮层组织,通过HE染色观察大脑皮层病理变化;通过RT-qPCR检测大鼠大脑皮层组织中IκBα、核因子κBp65(nuclear factorκ-Bp65,NF-κBp65)、κB抑制蛋白激酶β(inhibitor of nuclear factorκB kinaseβ,IKKβ) mRNA表达水平;通过蛋白免疫印迹法检测大鼠大脑皮层组织中κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κBα,IκBα)、NF-κBp65、IKKβ、磷酸化κB抑制蛋白激酶β(phosphorylation inhibitor of nuclear factorκB kinaseβ,p-IKKβ)水平。结果:神经功能评分结果显示:对照组、毛冬青皂酮胶囊高剂量组、毛冬青皂酮胶囊中剂量组、毛冬青皂酮胶囊低剂量组在治疗后评分均降低(P0.05),给药前模型组、对照组、毛冬青皂酮胶囊高剂量组、毛冬青皂酮胶囊中剂量组、毛冬青皂酮胶囊低剂量组均高于假手术组,给药后模型组高于假手术组(P0.05),对照组和毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组均低于模型组(P0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组和毛冬青皂酮胶囊中剂量组均低于毛冬青皂酮胶囊低剂量组和对照组(P0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组低于中剂量组(P0.05);血清IL-1β和TNF-α水平模型组高于假手术组(P0.05),对照组和毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组均低于模型组(P0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组和中剂量组均低于毛冬青皂酮胶囊低剂量组和对照组(P0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组低于中剂量组(P0.05);大脑皮层组织HE染色结果显示,模型组细胞水肿严重,对照组和毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组均有所减轻,高剂量组病理变化与假手术组最接近;大脑皮层组织IκBα和IKKβmRNA和蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P0.05);NF-κBp65 mRNA和蛋白表达水平及p-IκBα、p-IKKβ水平比较:模型组显著高于假手术组(P0.05),对照组和毛冬青皂酮胶囊高剂量组、中剂量组、低剂量组均低于模型组(P0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组和中剂量组低于毛冬青皂酮胶囊低剂量组和对照组(P0.05),毛冬青皂酮胶囊高剂量组低于中剂量组(P0.05)。结论:毛冬青皂酮可显著降低急性脑梗死大鼠神经功能评分,减轻炎症反应,减轻神经细胞水肿,其减轻大鼠神经炎性损伤的机制为下调NF-κBp65、IκBα基因、蛋白表达水平,抑制p-IκBα、p-IKKβ水平,从而对急性脑梗死大鼠神经具有保护作用。