5-羟色胺1受体对酸灌注脊髓损伤猫膀胱排尿的影响

目的 观察5-羟色胺1(5-HT1)受体激动剂对酸灌注脊髓损伤(SCI)猫膀胱排尿的影响.方法 手术彻底离断雌猫脊髓12只,术后饲养2个月,氯醛糖麻醉猫后予膀胱置管,注入0.5％乙酸溶液同时行膀胱压力测定.静脉给与5-HTlA受体激动剂8-OH-DPAT(0.30 ～30.00μg/kg)或GR-46611 (0.03 ～300.00 μg/kg),最后给予5-HT1A受体拮抗剂WAY-100635(300.00 μg/kg),记录膀胱容量阈值、膀胱容量、残尿量、排尿量和血压,同时记录尿道外括约肌肌电图(EUS-EMG).结果 8-OH-DPAT作用酸灌注脊髓损伤猫后,其膀胱容量阈值、膀胱容量、残尿量等均呈剂量依赖性增加,剂量≥10μg/kg时反应明显,差异有统计学意义.而GR-46611无类似效应.WAY-100635能逆转8-OH-DPAT的大部分效应,但对GR-46611无影响.8-OH-DPAT和GR-46611对EUS-EMG均无作用.结论 5-HTlA受体激动剂可增加生理盐水灌注及酸灌注脊髓损伤猫的膀胱容量,提示以后可能作为临床上治疗脊髓损伤患者的药物,改善慢性脊髓损伤患者的膀胱过度活动及增加脊髓损伤患者的膀胱容量.     

5-羟色胺1A受体激动剂改善脊髓损伤大鼠排尿功能障碍的实验研究

目的 研究5-羟色胺-1A(5-HTlA)受体激动剂对慢性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠排尿障碍的改善作用. 方法 雌性SD大鼠14只,体质量175 ～ 200 g.随机分为2组:实验组7只显微镜下大鼠T10棘突水平行脊髓离断建立脊髓损伤模型,正常对照组7只.8周后乌拉坦(1.3 g/kg)麻醉下,2组大鼠颈静脉和膀胱内置管,连接压力感受器,记录膀胱最大容量、残余尿量、排尿量和尿道外括约肌的肌电活动.静脉注入5-HTI A/7受体激动剂8-羟基-丙胺-四氢萘(8-OH-DPAT,0.03 ～1.00 mg/kg),得出剂量—效应曲线后再给予5HTIA受体抑制剂WAY-100635 (0.3g/kg).观察比较2组大鼠用药前后尿动力学指标的变化. 结果 随着8-OH-DPAT剂量增加,SCI大鼠膀胱容量从(33.2 ±8.3)ml降至(22.8±2.4) ml,排尿量从(0.14±0.08)ml增至(0.38 ±0.09) ml,残余尿量从(3.68±1.36)ml降至(1.84±0.21)ml,而膀胱最高压力从(27.1±3.6)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)降至(22.8±2.4) mm Hg,用药前后差异均有统计学意义(P＜0.05).对照组大鼠用药前后排尿情况变化差异无统计学意义.肌电图显示8-OH-DPAT引起SCI大鼠尿道外括约肌强直收缩中出现阶段性的松弛,正常对照组大鼠作用无明显改变. 结论 8-OH-DPAT可以剂量依赖性地部分恢复SCI大鼠的尿道外括约肌协调性松弛,从而降低膀胱容量,增加排尿量,减少残尿量,增加排尿效率,改善排尿障碍.     

5-HT7受体激动剂改善脊髓损伤大鼠排尿障碍

目的:研究五羟色胺-7受体激动剂对慢性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠排尿障碍的改善作用。方法:体重175～200g之间的SD雌性大鼠,脊髓损伤模型7只,正常对照8只。乌拉坦麻醉下,在正常大鼠和脊髓损伤的模型的大鼠颈静脉和膀胱内置管,连接压力感受器,记录膀胱最大容量、剩余尿量、排尿量和尿道外括约肌的肌电活动。静脉注入5-HT7受体激动剂LP44(3～300μg/kg)得到剂量-效应曲线随后再给予5-HT7受体抑制剂SB269970(100μg/kg)。结果:LP44剂量依赖性的降低SCI大鼠膀胱最大容量,并且增加排尿量、减少剩余尿量从而增加排尿效率。但是不能引起脊髓完好的大鼠排尿的改变。SB269970注入后可以逆转LP44的作用。同时LP44引起脊髓损伤大鼠尿道外括约肌强直收缩中出现阶段性的松弛,而对于脊髓完好的大鼠作用无明显改变。结论:LP44可以剂量依赖性地部分恢复SCI大鼠的尿道外括约肌协调性松弛,从而降低膀胱容量,增加排尿量,减少剩余尿量,结果增加排尿效率,改善排尿障碍。     

侧脑室注射高选择性5-HT_（1A）受体拮抗剂或激动剂对大鼠神经病理性疼痛的影响

目的观察侧脑室注射高选择性5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT或拮抗剂WAY100635对大鼠神经病理性疼痛的影响。方法慢性结扎损伤（CCI）坐骨神经大鼠128只分为WAY100635组（W组,n=64）和8-OH-DPAT组（D组,n=64）,每组又分为8个亚组：WAY100635（1、2、4、8μg）-曲马多组（W1T组、W2T组、W4T组、W8T组）;WAY100635（1、2、4、8μg）-生理盐水组（W1N组、W2N组、W4N组、W8N组）;8-OH-DPAT（1、2、4、8μg）-曲马多组（D1T组、D2T组、D4T组、D8T组）;8-OH-DPAT（1、2、4、8μg）-生理盐水组（D1N组、D2N组、D4N组、D8N组）。另设空白对照组以同样方法暴露结扎坐骨神经（NN组,n=8）,建立CCI模型后腹腔和侧脑室均注射生理盐水。测定大鼠热痛敏阈（PWL）和机械痛敏阈（PWT）值。结果与NN组比较,W1T、W2T、W4T、W8T、W2N、W4N、W8N、D1T、D2T、D4T、D8T组PWL、PWT值明显升高（P〈0.01）。W4T、W8T、W2N、W4N、W8N组PWL、PWT值分别高于D4T、D8T、D2N、D4N、D8N组（P〈0.01）。结论曲马多的镇痛作用可以在中枢水平部分被5-HT1A受体激动剂拮抗,侧脑室注射5-HT1A受体拮抗剂WAY100635可以产生一定的镇痛作用。     

骶髓5-HT_(2A)受体对于正常大鼠排尿的影响

目的:探讨骶髓控制尿道外括约肌的Onuf's核中是否存在5-HT2A受体,并观察髓腔内给予该受体的拮抗剂酮舍林对于正常大鼠排尿的影响。方法:体重175~200g的SD雌性大鼠14只,随机分为两组:实验组7只,在脊髓L6~S1节段建立脊髓髓腔内置管模型,给予不同浓度的酮舍林(0.01~0.1mg/kg),得到剂量依赖性曲线后再给予5-HT2A受体激动剂DOI(2,5-dimethoxy-4-iodophenyl)-2-aminopropane hydrochloride(0.1mg/kg)。对照组7只,如上述建立脊髓髓腔内置管模型,在脊髓腔内给予生理盐水。3天后在乌拉坦麻醉下,在实验组和对照组大鼠的膀胱内置管连接压力感受器,分别记录实验组和对照组膀胱内压图(CMG)及排尿量、剩余尿量、膀胱容量。待测压结束后,用4%多聚甲醛进行血管灌注取出L6~S1脊髓做冷冻切片并做免疫组化染色,观察并记录5-HT2A受体在脊髓Onuf's核中不同运动神经元的分布情况。结果:对照组大鼠的排尿是节律性的舒缩活动,排尿效率高,高频震荡波(HFOs)的排列整齐并稳定;实验组大鼠在给予酮舍林后,排尿时HFOs的个数呈剂量依赖性减少,同时这种作用可以完全或部分被DOI所逆转,和对照组相比差异有统计学意义,而排尿量、膀胱容量及排尿效率有减少的趋势,但和对照组相比,差异无统计学意义。免疫组化结果显示在大鼠L6脊髓的背后外侧核(RDLN核)、脊髓前角的Ounf's核的背外侧核(DLN)、腹内侧核(VMN)有不同数量的5-HT2A受体免疫反应阳性产物蓄积。结论:骶髓控制大鼠尿道外括约肌舒缩活动的Onuf's核中存在5-HT2A受体,其拮抗剂酮舍林通过与5-HT2A受体特异性结合可以抑制尿道外括约肌的舒缩活动,但由于正常高位中枢的调节作用和受体数量的限制,不会对正常大鼠的排尿功能造成太大影响。     

K-2阿片受体激动剂诱发大鼠膀胱括约肌和尿道外括约肌失协调

目的：通过脊髓鞘内给与选择性K1（U50,488）和K-2（GR89,696）阿片受体激动剂来验证脊髓K阿片受体亚型在大鼠尿道外括约肌控制中的作用。方法：乌拉坦麻醉雌性大鼠,膀胱顶部插管充盈膀胱诱发排尿进行膀胱测压,肌电图评估尿道外括约肌（EUS）功能,脊髓鞘内或静脉注射给药。结果：大鼠排尿时EUS在基础的（连续的）收缩活动之上出现高频舒张收缩以利于排空尿道完成排尿。GR-89,696（0．05to5μg鞘内注射it）使EUS每次排尿时的舒张收缩的次数呈剂量依赖性减少。它使排尿效率降低,大剂量时导致EUS排尿时的舒张收缩消失,呈持续收缩状态,出现膀胱逼尿肌和EUS协同失调和充盈性尿失禁。非选择性阿片受体拮抗剂纳洛酮（1mg／kg静脉注射iv）可阻滞GR89,696的效应。U-50,488（0．05 to 5μg鞘内注射it）对膀胱内压和EUS肌电图参数无影响。结论：大鼠有效的排尿需要依靠脊髓信号发生器刺激EUS运动神经元产生信号．使EUS产生舒张收缩,从而导致尿道快速的舒张与收缩以利于排空。脊髓鞘内注射K2阿片受体激动剂可以抑制信号发生器,减少每次排尿期舒张收缩的次数,但并不影响与尿道关闭有关的基础收缩。由此产生膀胱逼尿肌和EUS协同失调,导致排尿效率降低。和大鼠脊髓损伤导致的膀胱逼尿肌和EUS协同失调排尿障碍相似。因此,应该进一步研究K-2阿片受体在脊髓损伤导致的排尿障碍中的作用。     

远位触液神经元5-HT1A受体在大鼠神经病理性痛中的作用

目的 评价远位触液神经元5-羟色胺1A(5-HT1A)受体在大鼠神经病理性痛中的作用.方法 雄性SD大鼠40只,体重230～270 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=10):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)、二甲基亚砜组(DMSO组)和8-羟基-2-(双-正丙胺基)-四氢萘满组(8-OH-DPAT组).采用坐骨神经慢性压迫法(CCI制备大鼠神经病理性痛模型,S组仅暴露坐骨神经,但不结扎.CCI后第7天,8-OH-DPAT组和DMSO组向远位触液神经元分别缓慢注射5-HT1A受体特异性激动剂8-OH-DPAT或DMSO 1 μl,5 min内注射完毕.分别于CCI前(T0)、CCI后第7天(T1)和给药后3、6 h(T2,3)时,测定缩足潜伏期(PWL)和缩足阈值(PWT).于给药后6 h时处死大鼠,取脑组织,采用免疫荧光标记法检测远位触液核神经元5-HT1A受体的表达.结果 与S组比较,NP组、DMSO组和8-OH-DPAT组T1时PWL缩短,PWT降低(P＜0.01);与DMSO组比较,8-OH-DPAT组T2和T3时PWL延长,PWT升高(P＜0.01).与S组比较,NP组和DMSO组5-HT1A受体表达下调(P＜0.01);与NP组和DMSO组比较,8-OH-DPAT组5-HT1A.受体表达上调(P＜0.01);NP组和DMSO组间5-HT1A受体表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 远位触液神经元5-HT1A受体参与了大鼠神经病理性痛的调控.

Abstract：

Objective To evaluate the role of 5-HT1A receptors in distal cerebrospinal fluid (CSF)-contacting neurons in neuropathic pain (NP) in rats. Methods Forty male SD rats weighing 230-270 g were randomly divided into 4 groups (n = 8 each): sham operation group (group S); NP group; dimethyl sulfoxide (DMSO) group and 8-OH-DPAT (a specific 5-HT1A receptor agonist) group. NP was induced by chronic constrictive injury (CCI) in groups NP, DMSO and 8-OH-DPAT. Four silk ligatures were placed on the sciatic nerve at 1 mm intervals . In group S, the sciatic nerve was exposed but not ligated. 8-OH-DPAT and DMSO 1 μl were injected into the region where most of CSF-contacting neurons are present over 5 min on 7th day after CCI in groups 8-OH-DPAT and DMSO respectively. Paw withdrawal latency (PWL) and paw withdrawal threshold (PWT) were measured before CCI, on 7th day after CCI, and at 3 and 6 h after administration. The rats were sacrificed 6 h after administration, and the brain tissues removed for determination of the expression of 5-HT1A receptors in the distal CSF-contacting neurons by immunofluorescence. Results Compared with group S, PWL was significantly shorten and PWT decreased at T, in groups NP, DMSO and 8-OH- DPAT (P ＜ 0.01) . Compared with group DMSO, PWL was significantly prolonged and PWT increased at T2 and T3 in group 8-OH-DPAT ( P ＜ 0.01). The 5-HT1A receptor expression was significantly down-regulated in groups NP and DMSO compared with group S, while up-regulated in group 8-OH-DPAT compared with groups NP and DMSO ( P ＜ 0.01). There was no significant difference in 5-HT1A receptor expression between groups NP and DMSO ( P ＞ 0.05). Conclusion 5-HT1A receptors in distal CSF-contacting neurons are involved in the regulation of NP in rats.     

基于5-羟色胺调控的翘芍方干预早泄大鼠的实验研究

目的:观察翘芍方对运用5-羟色胺1A(5-HT1A)受体激动剂8-羟基-2-(二丙基氨基)四氢萘氢溴酸盐(8-OH-DPAT)建立的早泄动物模型的干预效果,并探讨其可能的作用机制。方法:将雄性Wistar大鼠72只随机分为空白组、模型组、翘芍方组(高、中、低剂量)和达泊西汀组,各12只,以8-OH-DPAT腰骶脊髓节段蛛网膜下腔囊内注射建立早泄动物模型。造模成功后连续给药干预4周,模型组、空白组每天用生理盐水[10 ml/(kg·d)]灌胃;翘芍方低[5 g/(kg·d)]、中[10 g/(kg·d)]、高[20 g/(kg·d)]剂量组,每天灌胃1次;达泊西汀组合笼前3 h给予300 mg/kg盐酸达泊西汀灌胃。雌性Wistar大鼠45只,摘除双侧卵巢后,于合笼前36 h皮下注射苯甲酸雌二醇20μg/只以诱导雌鼠发情。在第2周和第4周时,分别将雄性大鼠和激素诱导的雌性大鼠合笼,进行交配实验,每次30 min。检测指标:观察和记录雄鼠的交配行为,包括骑跨潜伏期(ML)、插入潜伏期(IL)、射精潜伏期(EL)、骑跨次数(MF)、插入次数(IF)、射精次数(EF)。第4周交配试验后,分离出下丘脑并称重,测定5-羟色胺(5-HT)含量。结果:与空白组相比,模型组5-HT含量923.4 ng/g,ML(8.69±2.48)s、IL(12.08±1.39)s、MF(7.53±1.84)次、EL(502.35±46.72)s分别低于空白组的5-HT含量1 257.1 ng/g,ML(11.22±3.60)s,IL(22.33±2.45)s、MF(13.28±.24)次、EL(712.35±36.77)s,差异均有统计学意义(P0.05);药物干预后,与模型组比较,翘芍方高剂量组和达泊西汀组的5-HT含量均升高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,翘芍方各剂量组和达泊西汀组EL明显延长,差异有统计学意义(P0.05)。结论:翘芍方可延长早泄大鼠的射精潜伏期,这可能与其增加了下丘脑5-HT含量有关,具体机制还需进一步研究。     

高位脊髓损伤大鼠外周α1-肾上腺素受体敏感性的变化

目的评价高位脊髓损伤大鼠外周α1-肾上腺素受体敏感性的变化.方法健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为脊髓损伤组(L组,n=24)和对照组(C组,n=6).L组大鼠采用改良Allens打击法建立脊髓胸4节段损伤动物模型,术后3周随机分为4个亚组(n=6),分别静脉注射苯福林1μg/kg(P1亚组)、2μg/kg(P2亚组)、3μg/kg(P3亚组)和4μg/kg(P4亚组),C组亦分次分别静脉注射苯福林1、2、3和4μg/kg,观察注药前、后大鼠心率、收缩压及舒张压的变化.结果与C组比较,L组大鼠给药前体重减轻、心率减慢,收缩压和舒张压降低.与基础值比较,C组和L组给药后心率减慢,收缩压和舒张压升高.与C组比较,L组给药后心率、收缩压、舒张压变化率增高(P＜0.05或0.01).结论高位脊髓损伤后,大鼠外周α1-肾上腺素受体敏感性增强.     

5-羟色胺受体与泌尿反射调控的研究进展

下泌尿道储尿和排尿功能涉及脊髓反射和脊髓上反射,研究表明5-羟色胺能系统参与调节这两个反射通路.5-羟色胺(5-HT)受体根据对不同的5-HT的激动剂/拮抗剂的反应和不同的基因结构分为7大类(5-HT1-7)和至少14种结构不同的受体亚型.其中5-HT1A、5-H12、5-HT3、5-HT5A、5-HT7受体提示涉及控制泌尿反射,而5-HT1A、5-HT2受体在泌尿反射调控中存在明显的物种差异性.