陈旧肾脏HE染色切片退掉盖玻片后行免疫组化检测

<正>在临床和科研工作中切片大部分都是以HE染色树胶封片,这样可样将切片长期保存。但是往往因为原有组织块丢失而或其他原因需要在原有石蜡HE染色切片原位基础上行免疫组织化学检测。本文就上述问题做了尝试并得到了较好的效果。1材料与方法实验室中存放的陈旧HE染色小鼠肾脏组织切片     

肺及肺癌组织芯片PBK/TOPK蛋白表达:检测的可靠性

背景:组织芯片技术可高通量检测组织中的生物分子。但是组织芯片所用的组织很小,直径仅0.6mm,且肿瘤细胞具有异质性,所以组织芯片检测结果是否可靠尚不清楚。目的:比较石蜡组织芯片和对应组织常规石蜡切片PBK/TOPK蛋白在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、人胚胎肺泡上皮细胞、肺癌原发灶和相应的淋巴结转移灶的表达差异,探讨组织芯片检测PBK/TOPK蛋白表达的可靠性。方法:采用组织微阵列技术按照正常成人肺组织,胚胎肺组织,肺鳞癌原发灶及其相应淋巴结转移癌,肺腺癌原发灶及其相应淋巴结转移癌,肺小细胞癌原发灶及其相应淋巴结转移癌,肺大细胞癌原发灶及其相应淋巴结转移癌的顺序依次构建包含760点阵的石蜡组织芯片。应用免疫组化SP法,检测石蜡组织芯片和对应组织常规石蜡切片PBK/TOPK蛋白的表达。应用LeicaQ500MC图像分析系统分别对石蜡组织芯片和常规石蜡切片上PBK/TOPK蛋白表达的阳性单位和阳性表达率进行定量测试。结果与结论:组织芯片和对应常规切片相应细胞中PBK/TOPK的阳性强度及阳性表达率基本相同,相对偏差不足0.6%,两者比较差异无显著性意义。结果说明石蜡组织芯片和常规组织切片检测PBK/TOPK蛋白表达结果高度一致;应用组织芯片检测肺癌、胚胎肺及正常肺组织中PBK/TOPK蛋白的表达结果可靠。     

石蜡切片组织透射电镜样品制备方法的比较分析

<正>透射电子显微镜(透射电镜)技术及石蜡包埋切片技术是临床病理诊断的重要手段[1-3]。一些穿刺或微小的组织,石蜡包埋切片数量有限,尤其某些特殊的微小结构仅能在少数切片上呈现,当需要做进一步的超微结构检测时,往往因切片不足而受限,因此,常需要在不影响原有结果的前提下,对切片进行二次检测。作者对石蜡切片组织透射电镜顶扣     

档案保存石蜡组织中抗原丢失的评估

<正>福尔马林固定石蜡包埋组织(formalin fixed paraffin embedded, FFPE)是病理科常规档案保存标本,其对患者预后和后续治疗评估具有重要作用,也是进行临床科学研究的不可替代资源。研究发现,石蜡组织切片长时间保存会导致组织中抗原丢失[1]。本文对一组不同年限的石蜡组织块行免疫组化检测,评估常见细胞核、质、膜表达抗原在档案蜡块中的表达,现将实验结果报道如下。1材料与方法1.1 蜡块收集1988～2     

石蜡切片荧光显示肥大细胞法

用石蜡切片以吖啶橙染色显示组织的肥大细胞国内文献尚未见报道,作者参考Juraj Jagatic,et al:A fluorescent Method for Staining Mast Cells (Arch Path 1966 82(5):430)方法并加以改进。与原法对比,方法简单,效果更好。与冰冻切片相比,具有细胞图象清晰,不需低温冰冻切片设备,组织块可长时间保存等优点,更适于回顾性科研工作。     

5种固定液对冷冻切片免疫组织化学显色效果的比较

冷冻切片免疫组织化学在科研及临床方面应用得越来越多,它具有操作简单,实验过程较短,对抗原保存较好等优点,并且认为是评估和确定新抗体的金标准,目前还有很多抗体只能用冷冻切片,石蜡切片则做不出结果;但它也有不利于保存和进行回顾性研究、组织结构较模糊,清晰度不够好,抗原弥散等缺点[1].     

免疫组化和组织化学双重染色技术在组织芯片上的应用

组织芯片是从组织块中挑选典型部位的组织以获得数百个圆柱状的样本，并按次序排列在一个新的石蜡块上，制作成HE切片，然后按研究的需要进行免疫组化及原位杂交等研究。组织芯片技术最重要的特点是：一次可以同时对多个组织块检测研究而对原来的组织材料破坏很小。此外，利用组织芯片仪还可以进行组织切片的精确定位和多种类型的分子生物学分析。     

二次包埋法手工制作病理学教学组织芯片

目的探讨手工制作教学组织芯片方法的可行性。方法利用组织芯片制备系统,通过二次包埋法,手工制作病理教学组织芯片,经HE染色,光镜下检测组织芯片制作质量。采用四川省病理技术专业委员会对石蜡切片HE制片质量评定得分标准对切片进行评分,并与传统教学组织切片比较。结果组织微阵列(TMA)蜡块中的组织芯点排列整齐,与受体蜡块融合紧密;组织芯片切片基本完整,厚薄均匀,经HE染色后组织形态可利用率为94%～100%,切片质量评分优秀率79%,良好率10%。二次包埋法手工制作的教学组织芯2片与传统组织切片制作方法制作的教学组织切片质量无明显差异性(χ=3.073,P0.05)。结论二次包埋法手工制作教学组织芯片方法简便易行,经济实用低消耗,具有高效快速染色均一性好、自身内对照和可比性强的特点,可在病理教学中推广应用。     

γ-GT酶组织化学染色中低熔点石蜡切片代替冰冻切片的方法

酶组织化学染色的效果取决于标本组织中酶的含量和活性 ,标本组织的处理及制片过程对于酶的保存十分重要。常规石蜡切片因组织浸蜡温度高 ,易使酶变性 ,因此酶组织化学染色通常选用冰冻切片。寻找一种较理想的切片方法 ,是研究人员的迫切愿望和要求 ,我们在谷氨酰转肽酶 (γ -ＧＴ)染色中 ,摸索采用低熔点石蜡切片代替冰冻切片 ,取得了良好的效果 ,现介绍如下 :1　材料与方法正常兔肾新鲜标本 ,①冰冻切片 :取 1ｃｍ× 0 5ｃｍ×0 2ｃｍ组织 ,立即放入 - 2 0℃恒冷冰冻切片机 ,冷冻 10ｍｉｎ ,切片厚 8μｍ ,放 4℃冰箱备用 ;②低熔点石蜡…     

旋转式切片机切火棉胶切片的方法

旋转式切片机主要用于石蜡切片,所以人们又称之为石蜡切片机。我们在实际教学和科研工作中,用旋转式切片机代替滑行式切片机切火棉胶切片,使用起来十分方便,效果也好。方法:1.用火棉胶包埋的一般组织材料,切片时同石蜡切片法一样,但得采用湿切的方法,每切一片时需用蘸有70%酒精的湿毛笔湿润一下刀口及材料切面。如果做连续切片,可以用吸水纸将一张张切片隔开,按顺序叠放在70%酒精中保存。2.用火棉胶包埋的含骨质等较硬的组织材料,则要采用拉切的办法,即将切刀一端顶起,材料在通过刀口时形成一定倾角滑过。3.在切几十个微米的厚片时,旋转式切片机微调装置上仅仅有25个刻度,即25微米,则可采用“顺-逆-顺”旋     

石蜡切片与冰冻切片在胰腺原位杂交中的应用与比较

石蜡切片与冰冻切片在胰腺原位杂交中的应用与比较赵春芳，李枫，郭雯媛（河北医科大学组织胚胎教研室石家庄０５００１７北京医科大学组胚系北京１０００８３）胰腺经石蜡包埋，切片在原位杂交过程中不易脱片，而且能较好地保存组织中的ＲＮＡ和微细结构。１材料与方法取...     

可长期保存抗原与核酸活性的石蜡包埋法──AMeX法

可长期保存抗原与核酸活性的石蜡包埋法──ＡＭｅＸ法苏敏，田东萍，牛恕淼组织细胞经常规福马林或酒精固定后，一些脆弱抗原易丢失。冰冻切片可良好保存抗原，但冰冻切片不易保存，且镜下结构不如石蜡切片清晰。有学者曾采用干燥石蜡包埋法。国内也有学者试用塑料包埋剂...     

人胚胎肠标本石蜡制片方法的探讨

石蜡切片因操作简单,易保存等优点而成为现代组织学、胚胎学、病理学等医学科学研究领域最常使用的一种方法。石蜡切片制作包括取材、固定、脱水、透明、浸蜡等许多环节,每一环节都直接影响石蜡切片制作结果。目前动物标本及     

超声快速石蜡切片对免疫组化抗原检测的影响

超声快速石蜡切片因其制片质量可以与常规石蜡切片相媲美,并且随着技术的不断改进,制片的时间能满足术中快速诊断的需要,使得超声快速石蜡切片在一些中小医院的应用较为广泛.免疫组化染色技术已经广泛应用到各级医院的临床病理诊断中,对疾病分型和预后判断起着至关重要的作用.我们对超声快速石蜡切片对免疫组化抗原检测是否产生影响这一问题进行探讨,介绍如下.     

不同时期小鼠胚胎整体石蜡标本的制备技术

目前研究小鼠胚胎发育国内外大多采用液氮冰冻胚胎切片方法进行,具有简便、省时、快捷等优点,但整体胚胎尤其大的胚胎切片技术要求高,胚胎切片的完整性和连续性难度大,组织结构较差,另外胚胎长期保存困难,因此我们通过不断探索,采用石蜡包埋技术制备出不同时段小鼠整体胚胎石蜡切片,     

微波应用在石蜡切片中检测p53蛋白的体会

微波应用在石蜡切片中检测ｐ５３蛋白的体会孙保存赵秀兰惠京张乃鑫ｐ５３蛋白易受固定液影响，在福尔马林固定、石蜡包埋切片上进行免疫组化检测常难以获得较高的阳性率。本文应用微波抗原修复方法在乳腺癌和大肠癌石蜡切片上进行了ｐ５３蛋白的免疫组化检测，获得了较高...     

甲基丙烯酸羟乙酯塑料包埋切片技术在小鼠胎脑组织学分析中的应用

目的 探索塑料包埋切片法在小鼠胎脑组织学分析中的应用。 方法 取胚胎期13.5d（E13.5）小鼠,4% 多聚甲醛4℃固定过夜,分离胎鼠头部,甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)塑料包埋组织并切片;对切片进行HE 染色。 结果 与石蜡包埋相比,采用HEMA塑料包埋的方法进行胎鼠脑组织学分析,形态结构保存较完整、HE染色效果较清晰。 结论 利用塑料包埋技术进行小鼠胎脑组织学分析,优于石蜡包埋方法。     

改良PAS染色法在冷冻切片中的应用

正在日常病理诊断和技术工作中,我们经常会遇到临床怀疑为肺部真菌感染的病例。如果等常规石蜡组织切片来进行诊断,因组织处理时间长,临床等候结果需要花费很多时间。为缩短临床等候病理诊断的时间,本科室在组织冷冻切片上行改良PAS染色,并与石蜡切片PAS染色对比,提高了对真菌的快速检出率,现介绍如下。1材料与方法1.1材料收集福建医科大学附属漳州市医院2016年度接收的术中怀疑真菌感染病例41例,术后常规石蜡病理明     

单纯微波固定在组织制片中的应用

在组织制片过程中,组织的正确固定具有重要意义,适当而完好的固定是优良组织切片的基础,特别在免疫组化染色时尤为重要。良好的固定能保存细胞内的物质接近其生活状态时的形态和位置,尽量减少抗原成分弥散或丢失,以保证染色的特异性及敏感性。在临床病理及科研工作中,又常需要我们在短时间内制作出高质量的切片,为此笔者尝试利用微波技术进行组织固定,探索单纯微波固定在组织制片中的应用,以期缩短制片时间,提高制片染色质量。     

微小组织结构石蜡切片的制备

正微小组织结构是指在组织工程构建过程中获得,具有体积小、结构相对简单等特点的组织样结构;与从成体器官分离、临床病理穿刺活检等途径获取的组织显著不同,因此在制备微小组织结构石蜡切片时,存在诸多问题。本科室根据微小组织的结构特点,通过改良和优化经典石蜡包埋、切片制备方法,分析适合微小组织结构石蜡包埋切片的制作方案,最终完成厚度为5 μm连续石蜡切片的制作,其蜡带完整,HE染色可见微小组织结构的细胞形态正常、着色效果好、色泽对比饱满、各层次结构