冷冻切片流程中的常见问题及优化措施

<正>冷冻切片技术是临床病理学诊断中常用的一种技术方法,其主要原理是在低温环境下使组织在较短时间内达到适合的硬度,随后进行快速切片、染色完成制片工作,进而于显微镜下观察切片对肿瘤性质进行判定,为临床医师在手术中确立手术方案提供强有力的支撑^[1]。冷冻切片质量直接影响了术中病理医师快速诊断的速度及准确率,因此,在短时间内完成一张优质的冷冻切片非常重要。     

石蜡切片免疫荧光染色在肾活检病理诊断中的应用

在肾脏的病理诊断中,肾穿刺组织必须进行冷冻切片免疫荧光染色[1,2]、石蜡切片HE、Masson、PAS、PASM染色和电镜检查等,以达到正确的诊断.光镜观察时须有10个以上的肾小球才能作出客观的诊断[3,4].在肾脏的病理诊断中,冷冻切片免疫荧光染色具有不可或缺的作用,但有时各种原因导致所取的肾小球数目不够或基层单位无冷冻切片设备等因素均给诊断带来困难.因此,我们通过对肾活检组织石蜡切片进行免疫荧光染色,取得了较好的效果,现介绍如下.     

新鲜组织短时固定对冷冻切片质量的影响

<正>冷冻切片是在低温环境下将术中取下的新鲜组织快速冷冻至一定硬度再制作切片,常用于临床病理快速诊断和部分形态学研究工作。用于临床的冷冻切片能够让外科医师在手术过程中尽快了解病变性质并及时决定手术方式[1-2]。精准的术中快速病理诊断结果,需高品质的冷冻切片作为保障。多种因素影响冷冻切片的效果,如冷冻时间与温度、取材、切片技术和染色等[3-4],而冰晶的形成是影响病理诊断的重要因素之一。因此在冷冻切片中防水是必须注意事项:     

固定液对冷冻切片质量的影响

冷冻切片是借助低温冷冻将手术切除的组织块快速冷冻达到一定硬度进行切片的一种方法。高质量的冷冻切片对确保术中病理诊断的准确性、科学性具有极其重要的作用,从而降低术中诊断的风险。固定是冷冻切片的关键,本文选取几种常用的固定液,通过HE染色后观察各自固定效果对染色结果的影响,从而筛选出一种最佳的固定液。     

显示DNA含量的快速Feulgen染色技术及应用

细胞的DNA含量分析对判断肿瘤的良恶性及预后有重要参考价值[1 3 ] ,然而传统的Feulgen染色操作时间较长 ,无法应用于冷冻切片、快速石蜡切片或组织印片等快速病理制片过程。我们尝试了应用微波处理的快速Feulgen染色 ,大大缩短了染色时间 ,并取得了良好效果 ,满足了快速病理诊断的要求。一、材料和方法1.材料 :复旦大学华山医院近期外科手术切除的各 5例乳腺纤维腺瘤及乳腺癌标本 ,例 1～ 5为纤维腺瘤 ,例 6～ 10为腺癌 ,均分别制成印片、冷冻切片、快速石蜡切片各 2份。2 .试剂及仪器设备 :常规配制的Schiff试剂、0 .5 %偏重亚硫酸钠溶…     

术中印片快速病理检查常用染色方法的应用比较

手术中快速病理诊断对临床手术方案的制定起重要的指导作用.细胞印片技术具有简单、快速的优点,可辅助甚至部分代替冷冻切片诊断,起到提高准确率和加快诊断速度的作用,目前已经被许多医院视为常规的术中诊断技术与冰冻切片同时进行.细胞印片染色最常用的染色方法包括HE染色、瑞-姬姆萨染色、甲苯胺蓝染色法等.染色方法的不同直接影响细胞印片的质量,并影响其在诊断中的应用价值.本文结合实际工作经验,对以上3种术中印片染色方法进行比较,并评价各种染色方法的优缺点.     

油红O染色在甲醛固定的乳腺富于脂质癌中的实践应用

在临床病理诊断中,常规HE切片中常可见到胞质透亮或胞质内有许多大小不等的圆形空泡,此现象是水泡样变、黏液样物质、脂肪或脂质组织,还是溶解了的糖原,往往不易区分,这就要依赖于脂肪染色、黏液染色、糖原染色等来鉴别。黏液染色和糖原染色可用石蜡包埋后切片染色即可,而脂肪染色不能用常规石蜡包埋组织切片。日常病理诊断工作中,很多标本可能未行冷冻或者在冷冻时未考虑脂肪染色的问题,但在常规HE染色切片观察时却要考虑或验证其脂质或脂肪成分。为弥补新鲜冷冻时未行脂肪染色,本文收集1例已明确诊断为乳腺富于脂质癌的剩余标本,用甲醛固定后的标本来制作冷冻切片进行油红O脂肪染色,并记录甲醛固定30天内的标本中脂肪染色情况。     

肾穿刺组织冷冻切片常见问题及对策

正肾穿刺组织冷冻切片是进行免疫荧光检查的重要环节。切片质量的优劣直接关系免疫荧光染色技术成功与否,其对肾脏疾病的诊断及分类具有重要的作用。切片内见足量的肾小球是成功的保障~[1-2]。免疫荧光检查所用的肾穿刺组织极小,制作冷冻切片具有较大的挑战性。病理技术人员只有熟练运用冷冻切片技术,掌握制片技巧,才能制作出合格的冷冻切片。肾穿刺组织冷冻切片过程中,常见下列问题:切片内无肾小球;切片不完整;切片出现冰晶空洞;切片卷曲、折叠;切     

介绍一款国产冷冻切片机的使用和保养

<正>冷冻切片是临床病理检查中的常用方法,对临床上需要进行快速病理诊断,确定病变性质及手术范围至关重要[1]。随着精准医疗的发展,对术中及术后冷冻切片的质量要求越来越高,冷冻切片的应用也越来越普遍[2]。如何合理的选择、使用及维护冷冻切片机,延长冷冻切片机的使用寿命是病理工作者必需面对的问题。现结合西京医院免疫科于     

石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用

在肾穿刺组织的病理诊断中,采用常规冷冻切片免疫荧光染色、石蜡切片HE染色、PAS染色、Masson染色、PASM染色以及电镜观察,以得到准确的病理诊断。但由于肾穿刺为有创性检查,再加上术者技术精疏有别以及患者个体差异,不仅所取组织十分细小,而且标本质量亦常不尽人意;另外,没有能力购置电镜的单位难以做超微诊断。因此需要我们摸索新的方法,以达到最大限度获得疾病信息,同时又省时、省力,且节约成本。作者实验室前期已经建立了石蜡切片免疫荧光染色法,其他学者也有相关报道[1-3]。最近又建立了肾活检组织石蜡切片免疫组化结合PAS染色方法,取得了较好的效果,现报道如下。     

冷冻切片中几种不同引导切片法的比较

<正>冷冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定的硬度,然后进行切片的方法。因其操作过程较石蜡切片快速,简便,易于操作,在组织学技术中的应用十分广泛,尤其对临床手术患者的术中快速病理诊断具有重要意义,而高质量的冷冻切片对于确保术中病理诊断的科学性和可靠性,具有至关重要的作用[1]。因此,在冷冻切片过程中,高效的切片技术     

酵素水溶液在冷冻切片染色分化中的应用

冷冻切片是保证术中病理诊断和进行科学研究的重要手段,切片质量的好坏直接影响快速诊断的结果及科研的可靠性。影响冷冻切片质量的因素很多,分化液是其中之一。酵素又称为酶,具有催化、净化等作用,现今在生产、生活中广泛应用,如清洗、灭菌、净化、美容、减肥等。有关其在病理切片制作中的应用尚未尝试。作者在不同组织冷冻切片染色中利用酵素水溶液分化,以期探索出提高切片染色清晰度、对比度,优化冷冻切片质量的方法。     

病理冷冻切片制作质量的探讨

目的 探讨病理冷冻切片制作的质量.方法 严格规范操作取材、切片、固定、染色、封片等制片过程中的各个环节,对制片质量进行观察.结果 经光镜观察切片,切片组织切面完整,厚薄均匀,效果良好,所制切片色彩鲜艳,对比清晰.结论 只有严格规范地做好制片中各个环节的技术操作,才能避免冷冻切片制作中出现各种常见问题,提高冷冻切片质量,为临床医师决定手术方式、范围,缩短手术时间,确定进一步治疗方案,提供可靠的诊断依据,对临床治疗具有重要意义.     

自动染色机应用于病理术中快速冷冻切片的效果和价值

正术中快速冷冻病理切片能帮助外科医师决定手术方式和范围,使患者免受二次手术的痛苦~([1]),而切片的染色质量直接影响病理诊断的准确性~([2])。传统手工染色步骤操作繁琐、费时费力且人为因素的影响较大,切片的同时需兼顾染色,易导致染色质量不稳定~([3])。因此,本科室引进一台NQ100S自动快速冷冻切片染色机,旨在保障冷冻切片的染色质量。虽然常规染色使用全自动染色机早已被广泛应用~([4]),但是使用自动染色机对术中快速冷冻切片进行染色的相关报道相对较少,     

EDTA脱钙在骨组织大切片制片中的应用效果

骨肿瘤病理大切片可以观察组织全貌,准确评估病灶大小、侵袭范围以及手术切缘,对于确定骨肿瘤的边界和临床预后非常重要。但骨组织中丰富的钙盐导致完整制片困难,尤其是大切片的制作。普通酸性脱钙液因破坏细胞及组织结构,影响染色、镜下观察和分子检测,已不适用于日常工作,而EDTA脱钙液性质温和,能有效保护组织内的核酸和组织抗原,日益成为骨标本处理的首选[1-2]。本科室将EDTA脱钙液应用于骨组织大切片制片及染色过程,总结了骨组织大切片的制作方法,以期在临床骨病变标本的处理中推广应用。     

病理诊断中快速冷冻切片的应用分析

正冷冻切片技术是由Pieterde Riemer首创,手术中的新鲜标本应在最短时间内冷冻,组织变硬后进行切片处理。目前冷冻切片技术在临床中运用广泛,尤其是对于肿瘤患者,病理诊断结果直接影响治疗方案[1-2]。为了做出全面完整的术中快速病理诊断,本实验以200例患者为分析对象,探讨病理诊断中快速冷冻切片的临床应用价值,现报道如下。1 材料与方法1.1 临床资料收集2017年12月～2018年12月我院存档的200例组织标本,男性     

术中冷冻切片快速免疫组化染色及其应用

随着免疫组化技术的不断改进和标准化试剂盒的出现使免疫组化染色的质量不断提高 ,染色时间大大地缩短 ,同时也使术中冷冻切片的快速免疫组化染色成为可能。笔者尝试用标记的葡聚糖聚合物法 (labeleddextranpolymer,LDP)对 4 4例术中冷冻组织样本进行快速免疫组化染色 ,旨在探讨术中冷冻样本快速免疫组化染色在冷冻组织的快速病理诊断中的作用及其可操作性和实用性。1　材料与方法1.1　材料　收集四川大学华西医院病理科 2 0 0 2年 2～ 3月部分术中冷冻切片快速诊断的组织标本 ,包括 16个解剖部位共 4 4例病变组织。其中乳腺 13例 ,腹腔或…     

冷冻切片5min快速制片染色法

冷冻切片整个过程所用时间的快与慢,切片染色质量的好与坏直接影响病理诊断的速度和准确性,如何又快又好地制好一张冷冻切片,一直是困绕病理技术员的难题.我们通过多年的不断摸索和改进,对一些特定的标本,如乳腺肿瘤、卵巢实性肿瘤、子宫肌瘤标本,在接到标本后5 min内制好2张冷冻切片,制片结果符合诊断要求,质量令人满意,现总结报道如下.     

PASM-Masson套染在肾穿刺活检中的应用

肾穿刺活检组织病理诊断是肾脏疾病诊断以及鉴别的重要方法,包括常规HE染色、特殊染色、免疫荧光染色及电镜检查等。其中,特殊染色是肾穿刺活检组织的重要辅助检查方法,主要包括PAS染色、PASM染色、Masson染色以及刚果红染色等。在日常工作中,如果对穿刺肾组织分别进行染色,所需时间长,工作量大,不利于病理医师镜下观察免疫复合物沉积及其位置[1]。     

病理实验室环境温度对常规制片染色质量的影响

病理实验室环境温度对HE切片的染色质量有很大影响,尤其对我国北部及西藏等高寒地区基层病理实验室的影响更为巨大。病理实验室环境温度已成为影响HE切片染色质量的关键因素[1]。宝鸡地区地处西北,冬季气候寒冷,每年进入冬季以后,HE切片染色质量明显下降。来年开春随着气温的回升,HE切片染色质量也逐渐好转。本科室对此现象进行深入分析,认为主要原因是低温影响的结果,我们采取针对性的措施,有效的解决低温对HE切片染色质量造成的影响。