越鞠丸对LPS抑郁模型小鼠抗抑郁作用的机制研究

目的探究越鞠丸(YJ)对脂多糖(LPS)诱导抑郁模型小鼠的抗炎及抗抑郁作用的机制。方法腹腔注射LPS 4d诱导小鼠产生抑郁样症状,给予YJ或氯胺酮(Ket)24h后,对小鼠进行新奇抑制摄食(NSF)、糖水偏好(SPT)、悬尾测试(TST)和强迫游泳测试(FST);采用蛋白免疫印迹法检测小鼠海马中BDNF和TrkB蛋白含量;利用Elisa法检测小鼠海马和血清中IL-1β、TNF-α、IL-10含量。结果与模型组相比,YJ和Ket组小鼠糖水偏好均显著性升高(P0.05);YJ和Ket组摄食潜伏期明显减少(P0.05)、单位摄食量显著增加(P0.05);而在TST和FST中,YJ和Ket组的不动时间较模型组均显著降低(P0.05)。蛋白免疫印迹检测中,与模型组相比,YJ和Ket组小鼠海马中BDNF和TrkB含量均明显升高(P0.05)。Elisa检测中,与模型组相比,YJ组小鼠血清中IL-1β、TNF-α、IL-10含量显著降低(P0.05),Ket组则无明显改变;而YJ和Ket组小鼠海马中IL-1β、TNF-α、IL-10含量均没有明显变化(P0.05)。结论 YJ可能通过提高海马中BDNF、TrkB表达及降低外周血清中炎症因子含量来产生抗抑郁作用。     

逍遥散对脂多糖诱导抑郁样行为的影响

目的探讨逍遥散对脂多糖诱导抑郁样行为的影响。方法脂多糖诱导抑郁样小鼠模型,小鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组(3.03 mg/kg)及逍遥散低、高剂量组(15、30 g/kg),检测强迫游泳实验、悬尾实验中不动时间,血清、海马、皮层IL-6、TNF-α水平,海马、皮层IDO、5-HT水平,尼氏染色观察海马神经元形态学变化。然后,脂多糖诱导大鼠海马神经元细胞炎症模型,细胞随机分为空白组、模型组、氟西汀组(10μmol/L)及空白血清、含药血清低、高剂量组(4%、8%),检测上清液NO、IL-6、TNF-α水平,裂解液5-HT、IDO水平,IL-6、TNF-α、5-HT1A、IDO1 mRNA表达。结果与模型组比较,逍遥散组显著缩短强迫游泳实验中不动时间(P0.01),显著降低血清IL-6水平及皮层IL-6、TNF-α、IDO水平(P0.05,P0.01),显著升高海马5-HT水平(P0.01);高剂量组显著缩短悬尾实验中不动时间(P0.01),显著上调皮层5-HT水平(P0.01),显著增加海马平均光密度(P0.05);低剂量组显著降低海马IL-6水平(P0.05)。与模型组比较,含药血清组显著下调IL-6、TNF-α、IDO1 mRNA表达(P0.05,P0.01),显著上调5-HT1A mRNA表达(P0.01);高剂量组显著下调NO、IL-6、TNF-α、IDO水平(P0.01),显著上调5-HT水平(P0.01);低剂量组显著降低IDO水平(P0.01)。结论逍遥散对脂多糖诱导抑郁样行为有拮抗作用,其机制可能与抑制炎症反应有关。     

降浊升清汤对Apo-E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化病理组织形态学、斑块面积和炎症反应的影响

目的:探讨降浊升清汤对Apo-E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化(As)炎症反应的影响及其稳定As斑块作用可能机制.方法:35只6～8周龄Apo-E基因敲除小鼠予高脂饮食喂养6周后,随机处死5只,取主动脉根部,HE染色普通光镜下观察,确定As形成后,其余小鼠随机分为3组:实验组(降浊升清汤组)、中药对照组(复方鳖甲软肝片组)、西药对照组(辛伐他汀组),给药6周后,处死检测血清中Ⅱ-6、TNF-α及主动脉病理组织形态学和斑块面积的变化情况.结果:与中药对照组比较,降浊升清汤组、西药对照组对Apo-E基因敲除小鼠血清IL-6、TNF-α的含量明显降低,同时减缓了动脉粥样硬化的发展程度和减小了斑块面积.结论:降浊升清汤具有抗动脉粥样硬化的作用,其机制可能与下调IL-6、TNF-α的表达有关.     

降浊升清汤对Apo-E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化炎症反应的影响

目的:探讨降浊升清汤对Apo-E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化(As)炎症反应的影响及其稳定As斑块的作用机制.方法:将35只6～8周龄Apo-E基因敲除小鼠予高脂饮食喂养6周后,随机处死5只,取主动脉根部,HE染色普通光镜下观察,确定As形成后,将剩余30只小鼠随机分为3组:实验组(降浊升清汤组)、中药对照组(复方鳖甲软肝片组)、西药对照组(辛伐他汀组)各10只,3组小鼠分别给药6周后处死,检测血清中IL-6、TNF-α的变化情况.结果:与中药对照组比较,实验组、西药对照组对Apo-E基因敲除小鼠血清IL-6、TNF-α的含量明显降低.结论:降浊升清汤具有抗动脉粥样硬化的作用,其机制可能与下调IL-6、TNF-α的表达有关.     

银杏叶提取物对衰老大鼠前额叶皮层和海马炎性细胞因子及胶质细胞超微结构的影响

目的 探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract 50,GBE50)对衰老模型大鼠前额叶皮层和海马炎性细胞因子以及胶质细胞损伤的作用及可能的机制。方法 45只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（12只）、模型组（11只）、GBE50低剂量组（10只）和GBE50高剂量组（12只）。采用D-半乳糖腹腔注射42天的方法建立衰老大鼠模型;造模第22天开始,GBE50低、高剂量组分别给予GBE50 75、150mg/(kg·d)灌胃给药,持续21天。用药结束后采用放射免疫分析法和实时荧光定量聚合酶链反应检测各组大鼠前额叶皮层和海马IL-1β、IL-6和TNF-α蛋白含量和mRNA表达;透射电镜观察海马CA1区胶质细胞的超微结构。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠前额叶皮层和海马IL-1β、TNF-α蛋白含量及mRNA表达均明显升高(P<0.05,P<0.01),海马IL-6蛋白含量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,GBE50低、高剂量组前额叶皮层和海马IL-1β蛋白含量及mRNA表达明显下调;GBE50低、高剂量组前额叶皮层和低剂量组海马TNF-α蛋白含量明显下调(P<0.05,P<0.01);GBE50低剂量组前额叶皮层和GBE50高剂量组海马IL-6蛋白含量明显上调,GBE50低、高剂量组前额叶皮层IL-6 mRNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。GBE50低、高剂量对大鼠海马CA1区胶质细胞超微结构的损伤具有明显恢复作用。结论 GBE50对衰老大鼠神经炎症反应具有抑制作用,其机制可能与其对前额叶皮层和海马细胞因子、胶质细胞超微结构有不同程度的调节作用有关。     

佐太对慢性束缚应激抑郁模型小鼠的行为学影响

目的:探索藏药佐太对慢性束缚应激抑郁模型小鼠的抗抑郁作用及其机制。方法:雄性小鼠分为空白组、模型组、佐太组(6.07mg/kg、60.7mg/kg、607mg/kg)、β-HgS组(3.38mg/kg),丙咪嗪(阳性药)组(15mg/kg),空白组和模型组每天灌胃2%淀粉悬浮液0.1ml/只,其它各组小鼠每天按照上述剂量灌胃0.1ml/只,同时进行慢性束缚应激造模。实验持续21天后,选用糖水偏爱实验和悬尾实验评价受试小鼠的抑郁样行为;通过观察小鼠海马区域组织形态,评价佐太对动物海马损伤的修复;利用ELISA法分析佐太对模型小鼠血清中的促炎性细胞因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。结果:与模型组比较,各佐太组(6.07mg/kg、60.7mg/kg、607mg/kg)、和β-HgS组(3.38mg/kg)小鼠悬尾实验中不动时间显著减少;海马组织病理切片发现,佐太(6.07mg/kg、60.7mg/kg、607mg/kg)和β-HgS(3.38mg/kg)可显著修复海马齿状回和CA1区的损伤;另外,发现各佐太组(6.07mg/kg、60.7mg/kg、607mg/kg)和β-HgS组(3.38mg/kg)小鼠血清中IL-1β,IL-6和TNF-α含量减少。结论:佐太可显著改善CRS模型小鼠的抑郁样行为,可能是通过降低小鼠脑内促炎性细胞因子IL-1β,IL-6和TNF-α的分泌而实现。     

景虎通脉方抗ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的作用机制研究

目的探讨景虎通脉方对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块及炎性因子的作用及机制。方法 SPF级ApoE~(-/-)小鼠高脂饲养8周后建立AS模型,随机分为模型组、阳性药物组及景虎通脉方高、中、低剂量组(18.20、9.10、4.55 g/kg),C57BL/6/J小鼠为正常组。给药8周后HE和Masson染色观察主动脉斑块情况;ELISA检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6及检测血脂4项;免疫组化和Western blot检测主动脉Toll样受体4(TLR4)和核受体77(Nur77)表达;基因芯片杂交技术筛选差异基因进行KEGG通路富集分析。结果与模型组比较,景虎通脉方各剂量组能不同程度减低血清TC、TG、LDL-C水平,增加HDL-C水平(P0.05,P0.01);HE和Masson染色观察景虎通脉方各剂量组显著减少斑块面积,增加斑块内胶原纤维表达(P0.01);ELISA检测景虎通脉方各剂量组可减低IL-1β、TNF-α、IL-6水平(P0.01);免疫组化和Western blot显示景虎通脉方各剂量组降低TLR4表达,增加Nur77表达;miRNA芯片结果显示49个miRNA差异显著,经KEGG分析显示其作用与包括Axon guidance及TLR4下游在内的多条通路相关。结论景虎通脉方可明显减少AS小鼠主动脉斑块面积,其机制可能与其调节血脂、减低炎症因子、干预Nur77和TLR4蛋白及包括Axon guidance在内的多条通路相关。     

银杏酮酯对抑郁大鼠行为及炎症细胞因子的影响

目的:研究银杏酮酯(GBE50)对抑郁大鼠行为、血清和海马内炎症细胞因子含量的影响以探讨GBE50防治抑郁症的作用及机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、氟西汀组(10mg/kg)以及GBE50(35、70和140mg/kg)组。采用孤养结合慢性不可预见性应激抑郁模型,每日给予一种应激刺激,共21d。在应激的同时每日灌胃给药,每周监测体重,造模结束后进行糖水偏爱度实验检测,之后腹主动脉取血、分离海马组织,ELISA法检测各实验组血清和海马炎症细胞因子的含量。结果:模型组体重明显低于空白对照组,各用药组体重与模型组之间没有明显区别,但GBE50各剂量组体重较模型组有增长的趋势。模型组糖水偏爱度明显高于空白对照组;与模型组相比,氟西汀组和GBE50(70和140mg/kg)组明显降低。模型组血清和海马内TNF-α、IL-1β、IL-6水平均明显高于空白对照组,血清IL-10水平明显低于空白对照组,而海马内IL-10水平明显高于空白对照组。与模型组相比,GBE50各剂量组血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及氟西汀组血清TNF-α、IL-6水平均有不同程度降低;海马内GBE50(70和140mg/kg)组以及氟西汀组这些促炎症细胞因子以及IL-10的水平均明显下降。结论:抑郁大鼠体重明显减轻,表现出对糖水的异常偏爱,其血清和海马内促炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量升高,同时血清抗炎症细胞因子IL-10的含量降低,而海马内IL-10水平升高;GBE50可以明显改善模型大鼠抑郁样行为,逆转抑郁大鼠这些血清和海马炎症细胞因子的含量,这可能是GBE50抗抑郁作用的重要机制之一。     

祛痰、化瘀和祛痰化瘀方对apoE~(-/-)小鼠全身和主动脉血管局部免疫反应影响的对比研究

目的:观察祛痰方、化瘀方和祛痰化瘀方对高脂饮食导致的apo E~(-/-)小鼠全身和主动脉血管局部免疫反应的影响。方法:12周龄雄性apo E~(-/-)小鼠给予高脂饮食,治疗组同时给予基础方、祛痰方、化瘀方或祛痰化瘀方干预。4周后,检测血脂水平、外周血粒、单核细胞比例及其表面受体TLR4的表达;检测主动脉病理变化和细胞因子表达水平;进一步采用LPS刺激检测血浆细胞因子的水平。结果:4周高脂饮食导致apo E~(-/-)小鼠外周血TC和LDL水平显著增高;粒和单核细胞比例及其TLR4的表达显著升高;LPS刺激后,IL-12、TNF-α和MCP-1水平显著升高;主动脉组织不仅MCP-1、IL-1β和IL-6表达显著升高,IL-10也显著升高,Arg-1显著降低。4周的中药干预并未引起血脂明显改善,但祛痰化瘀方降低外周血粒细胞比例;对于LPS刺激高脂饲喂apo E-/-小鼠,基础方和活血化瘀方降低IL-12表达水平;对于主动脉血管局部,基础方降低主动脉血管IL-1β和IL-6表达,提高Arg-1表达;祛痰方显著抑制MCP-1、IL-1β和IL-6表达,而对抑炎因子无明显作用;活血化瘀方降低MCP-1、IL-1β和IL-6表达,提高IL-10和Arg-1表达;祛痰化瘀方仅抑制IL-1β表达,但提高IL-10、TGF-β和Arg-1表达。结论:高脂饮食引发apo E~(-/-)小鼠全身性炎症反应和血管局部炎症反应。中药祛痰方、化瘀方及祛痰化瘀方通过不同免疫调节机制,以独立于降脂作用的方式调节高脂血症引发的血管局部免疫反应。     

针刺对慢性束缚应激抑郁大鼠海马及前额叶皮层胶质纤维酸性蛋白和血清白介素-10表达的影响

目的:观察针刺对慢性束缚应激(CRS)大鼠海马、前额叶皮层星形胶质细胞(AST)中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及血清白介素-10(IL-10)表达的影响,探讨针刺抗抑郁效应机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、氟西汀组,每组8只。采用28dCRS结合孤养方法建立抑郁大鼠模型。针刺组针刺"百会""印堂"和双侧"三阴交"穴20min,氟西汀组予以氟西汀灌胃治疗,均每日治疗1次,共治疗28d。采用糖水消耗实验和旷场实验进行行为学评价,用蛋白免疫印迹法、酶联免疫吸附法分别检测海马、前额叶皮层GFAP及血清IL-10含量。结果:模型组大鼠糖水消耗量、水平穿越格数和垂直竖立次数较空白组均显著降低(P0.01);针刺组、氟西汀组糖水消耗量、水平穿越格数较模型组均增加(P0.05)。模型组大鼠海马GFAP含量较空白组明显降低(P0.01);针刺组、氟西汀组海马中GFAP含量较模型组均明显升高(P0.01)。模型组大鼠前额叶皮层GFAP含量较空白组明显升高(P0.01);针刺组、氟西汀组前额叶皮层GFAP含量较模型组均明显下降(P0.01)。模型组血清IL-10含量明显低于空白组(P0.01);针刺组、氟西汀组均明显高于模型组(P0.01);氟西汀组明显低于针刺组(P0.01)。结论:针刺可能是通过调节CRS抑郁大鼠海马、前额叶皮层AST中GFAP的表达,改善海马、前额叶皮层AST的功能,并增加血清抗炎性细胞因子IL-10的含量,从而发挥抗抑郁效应。     

基于NLRP3/细胞焦亡通路研究荆芥挥发油的抗抑郁作用及作用机制

目的 观察荆芥Schizonepeta tenuifolia挥发油对慢性温和不可预知应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）模型小鼠抑郁样行为的干预作用,探究其调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)炎症小体/细胞焦亡从而抑制神经炎症的作用机制。方法 雄性ICR小鼠制备CUMS抑郁样模型,依据糖水偏好率将造模成功的小鼠随机分为模型组、氟西汀（10 mg/kg）组和荆芥挥发油高、低剂量（100、50 mg/kg）组,同时设置对照组。给予药物干预5周后,进行小鼠糖水偏好实验、强迫游泳实验、悬尾实验与飞溅实验。行为学测试结束后,取血并分离血清,取海马组织。ELISA法测定血清中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;尼氏染色法检测海马CA3区神经元尼氏小体平均吸光度值;免疫荧光法检测海马CA3区NLRP3、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cle...     

交泰丸对慢性温和不可预知性应激抑郁模型大鼠炎性细胞因子的影响

目的探讨交泰丸对慢性温和不可预知性应激(CUMS)抑郁模型大鼠致炎、抗炎细胞因子的影响。方法大鼠采用CUMS方法制备抑郁模型,比较体质量变化,进行糖水消耗实验和开场实验;并采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠血清及海马组织中炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-4、IL-10的水平,尼氏染色法观察大鼠海马神经元形态。结果与对照组比较,模型组大鼠糖水消耗量、穿越横格数和直立次数均明显减少;血清及海马内IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4明显升高,IL-10明显降低;海马神经元分层不清,排列紊乱,尼氏体浅染或消失。与模型组比较,交泰丸给药组大鼠糖水消耗量、穿越横格数和直立次数均明显增加;血清及海马内IL-1β、IL-6、TNF-α明显降低,IL-4、IL-10明显升高;海马神经元分层较明显,尼氏体浅染。结论交泰丸可明显改善大鼠抑郁样行为及海马神经元损伤,其机制可能与下调血清及海马致炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α和上调抗炎细胞因子IL-4、IL-10表达有关。     

针刺对抑郁大鼠前额叶皮层NOD样受体蛋白3炎性小体信号通路的影响

目的:观察针刺对抑郁大鼠前额叶皮层NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体信号通路上关键分子NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响,探讨针刺抗抑郁的可能机制。方法:将SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组、氟西汀组,每组8只。采用慢性不可预知温和刺激法制备大鼠抑郁模型。造模期间,针刺组大鼠针刺"百会""印堂"10 min, 1次/d,每针刺6 d休息1 d,共针刺36次;氟西汀组给予氟西汀灌胃(10 mg/kg,浓度为1 mg/mL),1次/d,共42次。采用新奇抑制实验观察大鼠摄食行为;采用Western blot法检测前额叶皮层NLRP3和ASC表达;免疫组织化学法检测前额叶皮层Caspase-1表达;酶联免疫吸附法检测前额叶皮层IL-1β的含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠新奇抑制摄食实验摄食潜伏期显著延长(P0.01);与模型组比较,针刺组和氟西汀组大鼠新奇抑制摄食实验摄食潜伏期显著缩短(P0.05)。与空白组比较,模型组前额叶皮层NLRP3、ASC、Caspase-1的表达和IL-1β含量显著增加(P0.01);与模型组比较,针刺组和氟西汀组前额叶皮层NLRP3、ASC、Caspase-1的表达和IL-1β含量显著降低(P0.01)。针刺组和氟西汀组上述指标的差异无统计学意义(P0.05)。结论:针刺可缓解大鼠抑郁样行为,其机制可能与抑制前额叶皮层NLRP3炎性小体信号通路相关分子的表达、减轻脑内炎性反应有关。     

电针通过p38 MAPK和STAT3信号通路抑制糖尿病认知障碍大鼠促炎性细胞因子生成改善学习记忆

目的:观察电针对糖尿病认知障碍大鼠海马及前额叶皮层细胞因子的影响,探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和信号转导及转录激活子3(STAT3)在电针改善学习记忆中的作用。方法:SD大鼠随机分为正常组10只,造模组90只,造模组大鼠以高脂高糖饲料喂养1个月后,采用小剂量链脲佐菌素腹腔注射法建立糖尿病模型。通过Morris水迷宫实验筛选出糖尿病模型大鼠中出现认知障碍的大鼠20只,随机分为模型组和电针组各10只。电针组大鼠予针刺"后三里""内庭"及"胰俞",其中"后三里"和"内庭"予以电针干预,每周6次,每次20 min,连续治疗4周。针刺干预结束后,检测各组大鼠随机血糖值;应用Morris水迷宫实验测定大鼠学习与记忆能力;采用Western blot及实时荧光定量PCR法检测各组大鼠海马及前额叶皮层中白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、p38 MAPK、磷酸化(p)-p38 MAPK、STAT3和p-STAT3蛋白及mRNA相对表达量;采用免疫荧光法检测各组大鼠海马及前额叶皮层中p38 MAPK和STAT3表达。结果:实验结束时,模型组大鼠随机血糖值较正常组明显升高(P0.001);与模型组比较,电针组大鼠随机血糖值明显降低(P0.05)。模型组大鼠较正常组大鼠水迷宫逃避潜伏期明显延长(P0.01);与模型组比较,电针组大鼠水迷宫逃避潜伏期明显缩短(P0.05)。模型组大鼠海马及前额叶皮层IL-6、IL-1β、TNF-α、p38 MAPK、p-p38 MAPK、STAT3和p-STAT3蛋白及mRNA表达较正常组明显升高(P0.001);与模型组比较,电针组大鼠海马及前额叶皮层IL-6、IL-1β、TNF-α、p38 MAPK、p-p38 MAPK、STAT3和p-STAT3蛋白及mRNA表达明显降低(P0.001)。模型组大鼠海马及前额叶皮层中p38 MAPK和STAT3的平均荧光强度值明显高于正常组(P0.001);与模型组比较,电针组大鼠海马及前额叶皮层中p38 MAPK、STAT3的平均荧光强度值明显降低(P0.001,P0.05)。结论:电针可以抑制糖尿病认知障碍大鼠海马和前额叶皮层中促炎性细胞因子的过量产生,p38 MAPK和STAT3信号通路可能参与其中。     

逍遥抗癌解郁方通过调控COX通路对乳腺癌并发抑郁模型小鼠的治疗作用及机制研究北大核心CSCD

研究逍遥抗癌解郁方对乳腺癌并发抑郁模型小鼠海马小胶质细胞和神经元损伤的干预作用及其机制。采用腋下接种4T1乳腺癌细胞联合皮下注射皮质酮(30 mg·kg^(-1))的方法构建乳腺癌并发抑郁小鼠模型,将造模成功的小鼠随机分为模型组,阳性药组[卡培他滨(60 mg·kg^(-1))+氟西汀(19.5 mg·kg^(-1))],逍遥抗癌解郁方组(19.5 g·kg^(-1)),每组6只,另取6只正常小鼠作为正常组。各给药组灌胃相应药物,正常组和模型组给予等体积蒸馏水,每日1次,连续给药21 d。采用糖水消耗实验、旷场实验和新奇摄食实验评价小鼠抑郁行为;苏木素-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色和抑瘤率评价腋下肿瘤变化情况;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测小鼠海马白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、环氧酶-2(cyclooxyganese-2,COX-2)、前列腺素受体(glutamyl-prolyl-tRNA synthetase,EPRs)mRNA表达;免疫组化检测海马IL-1β、IL-18、COX-2、EPRs蛋白的相对表达量,免疫荧光检测海马小胶质细胞活化标志分子CD11b的平均荧光强度;尼氏染色观察海马神经元形态变化;透射电镜观察海马神经元的超微形态变化。结果显示,与正常组比较,模型组小鼠糖水消耗、矿场总活动数均显著降低(P<0.05,P<0.01),新奇摄食实验首次摄食时间显著上升(P<0.01),抑郁样行为显著;海马中IL-1β、IL-18、COX-2、EPRs表达显著升高(P<0.05,P<0.01),海马小胶质细胞活化,神经元明显损伤。与模型组相比,阳性药和逍遥抗癌解郁方给药后小鼠抑郁行为均明显改善;海马IL-1β、IL-18、COX-2、EPRs含量均明显降低,海马小胶质细胞激活和神经元损伤情况得以缓解;阳性药抑瘤率为40.32%,逍遥抗癌解郁方抑瘤率为48.83%,肿瘤生长速度都慢于模型组。综上所述,逍遥抗癌解郁方可能通过COX信号通路的激活改善乳腺癌并发抑郁症模型小鼠海马小胶质细胞激活和神经元损伤。     

通脉降浊煎剂对慢性心理应激动脉粥样硬化ApoE~(-/-)小鼠血脂及SREBP1、ABCA1表达的影响

目的:探讨通脉降浊煎剂对慢性心理应激动脉粥样硬化ApoE~(-/-)小鼠血脂及SREBP1、ABCA1表达的影响。方法:健康雄性4周龄ApoE~(-/-)小鼠48只,随机分为A组:对照组;B组:动脉粥样硬化模型组(M1);C组:M1+辛伐他汀;D组:动脉粥样硬化+心理应激组(M1+M2);E组:M1+M2+辛伐他汀;F组:M1+M2+劳拉西泮;G组:M1+通脉降浊方;H组:M1+M2+通脉降浊方组(双病模型中药治疗组)。建立动脉粥样硬化(M1)模型(除A组之外所有其他组别):对D、E、F、H组小鼠给予心理刺激,持续20周。从第5周开始给予高脂饲料(5%猪油+1%胆固醇+基础饲料)喂养,第8周开始给予药物治疗(10 mg/kg辛伐他汀,灌胃,1次/d;0.1 mg/kg劳拉西泮,腹腔注射,1次/d),光镜下观察主动脉病理改变,检测各组血清脂含量,采用Western Blot方法检测小鼠主动脉SREBP1和肝脏ABCA1蛋白表达,Real-time PCR方法检测SREBP1和ABCA1 mRNA表达。结果:血脂方面,与D组比较,B组和H组小鼠TC和LDL-C水平降低(P0.05);与F组比较,G组小鼠TC和LDL-C含量明显降低(P0.01)。与B组相比,G组SREBP1蛋白表达水平明显降低,但作用效果低于C组,ABCA1蛋白表达G、H组较B组升高;与D组相比,E、F组SREBP1表达水平显著降低,但作用效果低于G组和H组,差异有统计学意义(P0.05);G、H组ABCA1表达明显升高,与D、E、F组比较差异有统计学意义(P0.05)。与B组相比,G组SREBP1mRNA表达水平明显降低。但作用效果低于C组;与D组相比,H、G组SREBP1的表达水平显著降低,ABCA1mRNA表达水平升高,与D、E、F组比较差异有统计学意义。结论:通脉降浊方能够有效调节高脂饮食及慢性心理应激引起的ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化,其机制可能与调节血脂,改善小鼠抑郁状态,下调SREBP1和上调ABCA1的基因、蛋白表达有关。     

红花黄色素对APP/PS 1双转基因小鼠脑组织中胶质细胞活化及炎症因子释放的影响

目的:探讨红花黄色素(SY)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease AD)转基因小鼠学习记忆能力的影响及其对脑组织中胶质细胞活化和炎症因子释放的影响。方法:选用6月龄APP/PS 1双转基因小鼠60只,随机分成5组:转基因组、多奈哌齐组(0.75 mg/kg)、红花黄色素10、30、100 mg/kg剂量组,同月龄野生型C57BL/6小鼠12只作为对照组,其中转基因组与对照组灌胃相应体积的生理盐水。连续3个月灌胃给予相应药物治疗后,进行Morris水迷宫实验。采用免疫组织化学法检测GFAP及CD45的表达,ELISA试剂盒测定各组小鼠皮层中IL-6、IL-8及TNF-α的表达。结果:与野生型小鼠相比,转基因组小鼠空间学习记忆能力明显下降,皮层及海马CA1、CA3、DG区的CD45、GFAP表达水平均增高,皮层组织中TNF-α、IL-6、IL-8水平显著增加。经红花黄色素治疗后,红花黄色素10、30、100 mg/kg剂量组学习记忆能力显著改善,其对GFAP、CD45、IL-6、IL-8及TNF-α的表达具有显著降低的作用;红花黄色素100 mg/kg剂量组对转基因小鼠海马各区CD45、皮层及海马部位GFAP以及皮层IL-6、IL-8的表达均有显著降低的作用;红花黄色素10 mg/kg剂量组对小鼠大脑海马CA1、CA3及皮层部位的CD45、海马及皮层部位的GFAP、皮层IL-8的表达有显著降低的作用。结论:红花黄色素可以提高痴呆小鼠的学习记忆能力,同时可抑制脑组织胶质细胞活化,减轻皮层组织炎症损伤。     

黄芩苷对皮质酮诱导抑郁小鼠海马NT-3表达水平的影响

目的:观察黄芩苷对皮质酮诱导抑郁小鼠海马中神经营养素(Neurotrophins,NT)-3的mRNA表达水平的影响。方法:连续21d皮下注射皮质酮(40mg/kg)建立抑郁小鼠模型,采用糖水实验和强迫游泳实验评价小鼠抑郁样行为,采用实时荧光定量PCR方法检测小鼠海马内NT-3的mRNA表达水平。结果:皮质酮组小鼠糖水摄取比例显著下降,强迫游泳实验中不动时间明显延长,海马内NT-3的表达显著增高;黄芩苷逆转了皮质酮诱导的抑郁样行为,并降低海马NT-3的表达水平。结论:降低海马内NT-3的表达,可能是黄芩苷的抗抑郁机制之一。     

香砂六君子汤对抑郁模型小鼠行为及海马神经元损伤的影响

目的:探究香砂六君子汤对慢性应激抑郁模型小鼠行为、海马神经元损伤及海马突触体内游离Ca~(2+)浓度的影响.方法:60只昆明雄性小鼠平均分为正常组、模型组、香砂六君子汤活性部位高、中、低剂量组(800,600,400 mg·kg~(-1)).采用长期不可预见性慢性应激小鼠抑郁模型,测定各组小鼠体重变化,Open-field法和糖水消耗实验测定各组小鼠的行为变化;Nissl染色法观察海马CA1,CA3区神经元形态及锥体细胞数目;以Fura-2负载及荧光分光光度计检测海马突触体内游离Ca~(2+)浓度.结果:与正常组比较,模型组小鼠呈现明显的抑郁样症状.香砂六君子汤活性部位高、中、低剂量组小鼠在第14,21天体重增长明显高于模型组,其中高、中剂量能增加抑郁小鼠的爬格数(P<0.05),但与剂量无对应关系;高剂量能增加抑郁小鼠的站立次数(P<0.001);低、中、高剂量能明显增加抑郁小鼠的糖水消耗量(P<0.01,P<0.01,P<0.001),并呈现一定的量效关系.高,中剂量组小鼠海马CA3区空泡明显减少,且锥体细胞数量显著增多(P<0.001);高、中剂量能明显降低抑郁小鼠海马突触体内游离Ca~(2+)浓度(P<0.01,P<0.001).结论:香砂六君子汤活性部位能改善小鼠的抑郁样行为;保护抑郁模型小鼠海马神经元损伤,其可能与香砂六君子汤活性部位抑制海马神经细胞外Ca~(2+)内流,阻止Ca~(2+)超载相关.     

酸枣仁汤通过抑制APP/PS1双转基因小鼠海马神经炎症发挥神经保护作用

目的:观察酸枣仁汤对APP/PS1小鼠海马神经炎症的影响,并探讨其神经保护的可能机制。方法:将小鼠随机分为空白组,模型组,多奈哌齐组(0. 92 mg·kg-1),酸枣仁汤低、高(12. 96,25. 92 g·kg-1)剂量组。各组连续给药30 d后,采用尼氏染色观察各组小鼠海马齿状回(DG)区病理形态的变化,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组小鼠海马中TNF-α,IL-1β的mRNA表达水平,采用免疫组化(IHC)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠海马中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合蛋白(IBA1)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠海马DG区颗粒细胞排列不均匀,细胞丢失明显,部分神经元胞内尼氏体消失或固缩,血清中TNF-α,IL-1β含量显著升高(P 0. 01),小鼠海马中TNF-α,IL-1βmRNA表达显著升高(P 0. 01),海马DG区中GFAP,IBA1蛋白表达显著上调(P 0. 01);与模型组比较,多奈哌齐组、酸枣仁汤低、高剂量组小鼠海马DG区颗粒细胞排列稍整齐,神经元丢失减轻,且胞内尼氏体消失或固缩情况好转,小鼠血清中TNF-α,IL-1β含量明显降低(P 0. 05,P 0. 01),小鼠海马中TNF-α,IL-1βmRNA表达明显降低(P 0. 05,P 0. 01),小鼠海马DG区中GFAP,IBA1蛋白表达明显降低(P 0. 05,P 0. 01)。结论:酸枣仁汤能改善APP/PS1双转基因小鼠神经元丢失,其机制可能与其调节小鼠海马神经炎症有关。