非小细胞肺癌患者肿瘤组织多驱动基因联合检测及其临床意义

目的探讨EGFR、KRAS基因突变及ALK、ROS1基因融合在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中的检出率,并分析与NSCLC临床病理特征的关系。方法收集NSCLC手术标本86例,采用荧光PCR法检测EGFR、KRAS突变及ALK、ROS1基因融合,并分析EGFR、KRAS、ALK及ROS1基因改变与患者性别、年龄、吸烟史、组织学类型、有无淋巴结转移等临床病理特征的相关性。结果 NSCLC肿瘤组织中驱动基因总突变率为62.8%(54/86),其中EGFR基因突变占总突变的76.0%(41/54);KRAS基因突变占总突变的9.3%(5/54);ALK基因融合占总突变的13.0%(7/54),其中1例患者存在EGFR 19缺失突变与ALK融合共存;ROS1基因融合占总突变的3.8%(2/54)。NSCLC的临床病理特征显示,EGFR基因突变在女性、腺癌患者中突变率高(P0.05);与患者年龄、是否吸烟、有无淋巴结转移无明显相关(P0.05);KRAS、ALK、ROS1基因改变与NSCLC的临床病理特征无明显相关(P0.05)。结论 NSCLC中EGFR、ALK基因均存在较高的突变率,临床医师应给予高度重视;KRAS、ROS1基因改变以及驱动基因双突变共存型基因突变率虽低,但其意义重大不容忽视。     

EGFR及KRAS基因突变与非小细胞肺癌临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者EGFR及KRAS基因突变与其临床病理特征的关系。方法采用毛细管电泳法及荧光探针法分别检测64例NSCLC组织中EGFR及KRAS基因的突变类型。结果 64例NSCLC中发生EGFR基因突变27例(占42.2%)、KRAS基因突变8例(占12.5%),同时发生EGFR和KRAS基因突变者4例(占6.25%)。EGFR基因突变与患者性别、组织学类型及吸烟史有关(P0.05),与患者年龄、分化程度、有无淋巴结转移及TNM分期无关(P0.05)。肺腺癌中KRAS基因突变率明显高于肺鳞癌(P0.01),KRAS基因突变与患者性别、年龄、有无吸烟史、分化程度、有无淋巴结转移及TNM分期均无关(P0.05)。结论 NSCLC患者中EGFR基因突变率高于KRAS基因突变率,EGFR突变率在女性、肺腺癌、不吸烟患者中较高,KRAS基因突变率在腺癌患者中较高,且EGFR和KRAS基因突变可以同时发生。     

基于二代测序的300例非小细胞肺癌中驱动基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)常见驱动基因的突变特点及其与临床病理特征的关系。方法采用二代测序技术(next generation sequencing,NGS)检测300例NSCLC石蜡包埋组织中常见驱动基因如EGFR、KRAS、ALK、ROS1、BRAF、MET、RET、HER-2等的突变情况。结果 300例NSCLC中,EGFR、KRAS、ALK、ROS1、BRAF、MET、RET、HER-2等基因的突变率分别为52. 00%、10. 33%、6. 67%、1. 67%、3. 67%、3. 33%、1. 00%、2. 33%。EGFR 21外显子L858R突变合并LINCO1446-EGFR基因融合1例; EGFR 20外显子C797S与T790M呈顺式或反式存在并合并EGFR敏感突变各1例; EGFR基因点突变合并MET基因拷贝数扩增3例。EGFR突变多见于不吸烟的女性肺腺癌患者(P 0. 05); KRAS突变多见于吸烟男性患者(P 0. 05); ALK突变与患者年龄有关(P 0. 05),在小于60岁患者中更常见; ROS1融合突变与患者性别有关(P 0. 05),女性多见; BRAF、MET、RET、HER-2基因突变与患者性别、年龄、吸烟、组织学类型及c TNM分期无关。结论 EGFR可与其他驱动基因突变共存;基因突变与患者性别、年龄、吸烟与否、组织学类型有相关性; BRAF、MET、RET、HER-2的突变率低,其临床意义有待探讨; NGS发现的共存型基因突变及少见突变应引起重视。     

非小细胞肺癌表皮生长因子受体、间变性淋巴瘤激酶、ROS1基因突变及突变共存的临床病理学意义

目的探讨非小细胞肺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因突变、间变性淋巴瘤激酶(ALK)及ROS1基因融合突变情况与临床病理特征的关系,并分析驱动基因共突变的病例。方法收集福建医科大学附属协和医院1508例非小细胞肺癌患者临床病理资料,采用荧光PCR法检测EGFR基因突变及ALK、ROS1基因融合突变情况,统计分析驱动基因突变状态与临床病理特征的关系。结果1508例非小细胞肺癌中,EGFR、ALK、ROS1基因突变率分别为52.9%(797/1508)、6.2%(93/1508)、2.7%(40/1508);EGFR基因突变类型以外显子19 del与外显子21 L858R为主(90.6%,722/797),EGFR基因突变多见于女性、无吸烟史、腺癌患者(P<0.05);ALK及ROS1基因融合多见于年龄<60岁、晚期患者(P<0.05)。其中携带共突变基因的非小细胞肺癌患者共16例(1.1%,16/1508),包括EGFR/ALK基因共突变7例、EGFR/ROS1基因共突变8例、ALK/ROS1基因共突变1例,驱动基因共突变患者多为女性、腺癌患者。16例驱动基因共突变患者中,8例使用酪氨酸激酶抑制剂治疗,疗效为3例部分缓解、2例疾病稳定、3例疾病进展。结论非小细胞肺癌驱动基因可出现突变共存的状态,多基因联合检测可为临床靶向药物治疗策略的制定提供参考意义。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变在外周血与淋巴结针吸标本中的对比分析

目的检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者外周血与淋巴结针吸标本EGFR基因突变率及两者的一致性,探讨外周血标本EGFR基因突变的临床应用价值。方法采用ARMS法检测105例NSCLC患者淋巴结针吸标本及其配对外周血EGFR基因突变状态,比较外周血和淋巴结针吸标本基因突变的一致性,分析EGFR基因突变与NSCLC临床病理特征的关系。结果 105例外周血中检出45例突变(突变率为42.86%),淋巴结针吸标本中检出50例突变(突变率为47.62%),两者一致性为83.81%(88/105),差异有统计学意义(Kappa=0.674,P0.001)。外周血标本EGFR基因突变与患者性别、是否吸烟、临床分期及病理类型有关(P0.05),与患者年龄及淋巴结直径无关(P0.05);淋巴结针吸标本EGFR基因突变状态与患者性别、是否吸烟及病理类型有关(P0.05),与患者年龄、淋巴结直径及临床分期无关(P0.05)。结论 NSCLC患者外周血与淋巴结针吸标本EGFR基因突变一致性较高,在无法获得组织及细胞学标本时可以检测外周血EGFR基因状态,为NSCLC患者提供临床诊疗帮助。     

肺腺癌基因谱分析及p53、KRAS的表达及意义

目的分析肺腺癌基因谱,探讨p53和KRAS在肺腺癌中的表达及其意义。方法采用二代测序技术检测29例肺腺癌石蜡样本中26个常见肿瘤相关热点基因;采用免疫组化法检测99例肺腺癌组织中p53蛋白和KRAS蛋白的表达,分析两者表达与肺腺癌临床病理特征的关系。结果 26个被检基因中发现6个基因发生突变,分别是EGFR(21/29)、p53(12/29)、KRAS(3/29)、ROS1(3/29)、ALK(1/29)和RET(1/29);EGFR突变多发生在19号(9/21例)和21号(10/21例)外显子上,2例发生在20号外显子上(其中1例在20和21号外显子上均有突变),1例发生在18号外显子上;p53突变位于6号(4/12)、4号(2/12)、5号(2/12)和8号(2/12)、7号(1/12)和10号(1/12)外显子上;KRAS突变均发生在2号(3/3)外显子上。29例中14例存在共突变,其中1例发生3种基因共突变(EGFR、KRAS、ROS1),13例发生双基因突变(10例EGFR和p53,1例EGFR和KRAS、1例EGFR和ROS1,1例p53和KRAS),12例发生单基因突变,3例未检出基因突变。免疫组化检测结果显示肺腺癌组织中p53阳性率为30.3%,KRAS阳性率为23.2%,两者表达无明显相关(r=0.054,P=0.594)。肺腺癌中p53表达与患者性别、年龄、病理亚型、肿瘤大小、有无淋巴结转移、TNM分期和分化程度均无关(P0.05),KRAS表达也与患者年龄、病理亚型、肿瘤大小、有无淋巴结转移、TNM分期和分化程度无关(P0.05),但KRAS在男性(36.4%)肺腺癌中的表达高于女性(12.7%)(P0.05)。结论肺腺癌组织中存在多种基因突变,并可发现共突变,EGFR突变多在19和21号外显子上,p53突变多集中在6、4、5和8号外显子上,KRAS突变多在2号外显子上,且KRAS突变更多见于男性患者。     

非小细胞肺癌患者肿瘤组织中驱动基因的分子病理检测分析

目的：探讨非小细胞肺癌患者肿瘤组织中驱动基因EGFR、KRAS、ALK、ROS1、c-Met和Her-2基因各亚型改变情况。方法：应用Taqman-ARMS方法检测273例非小细胞肺癌石蜡组织中EGFR基因、KRAS基因、ALK基因、ROS1基因、c-Met基因和Her-2基因改变情况。结果：非小细胞肺癌肿瘤组织中EGFR基因总突变率为36.26%(99/273),外显子18、19、20和21的突变率分别为0(0/273)、16.12%(44/273)、4.49%(15/273)和17.95%(49/273);EGFR基因各外显子之间双重突变共12例(4.40%);KRAS基因总突变率为4.76%(13/273);ALK融合基因总阳性率为9.16%(25/273);ROS1融合基因总阳性率为2.20%(6/273);c-Met基因总扩增率为3.66%(10/273);Her-2基因总突变率为0.73%(2/273);各驱动基因双突变共存型11例(4.03%),其中EGFR基因突变与ALK融合基因阳性共存型2例(0.73%),EGFR基因突变与KRAS基因突变共存型3例(1.10%),EGFR基因突变与c-Met基因扩增共存型6例(2.20%)。结论：非小细胞肺癌患者中EGFR基因19和21外显子突变和ALK融合基因均存在较高的突变率,基因突变亚型分类能指导精准医学的个体化靶向治疗,KRAS、ROS1、c-Met、Her-2基因改变以及驱动基因双突变共存型基因突变率虽低但不容忽视。     

非小细胞肺癌中BRAF V600、EGFR基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中BRAF V600、EGFR基因突变及其与临床病理特征的关系。方法采用PCR-DNA测序法检测146例NSCLC标本中BRAF V600、EGFR基因突变情况,并分析基因突变与临床病理特征的关系。结果 BRAF V600基因突变率为7.5%(11/146),与患者吸烟史有关(P=0.045),而与患者性别、年龄、组织学类型及分化程度等无关(P0.05)。EGFR基因突变率为46.6%(68/146),多见于女性、不吸烟、腺癌患者(P0.05)。共检测出4例同时具有BRAF V600(3例V600E及1例V600D)及EGFR基因突变(19号外显子缺失2例,21号外显子L858R突变2例),两者未见相关性(P0.05)。结论 NSCLC患者BRAF V600基因突变与患者性别、年龄、组织学类型及分化程度等无关,多见于无吸烟史患者。     

EGFR/ALK/ROS1三联检测在非小细胞肺癌中的临床意义

目的探讨EGFR-TKI敏感突变、T790M耐药突变及ALK、ROS1融合基因突变在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的活检小标本中联合检测的检出率,筛选适合的靶向药物实现晚期NSCLC的精准治疗。方法收集经皮肺穿刺、经支气管镜活检、气管镜刷片、胸水富集细胞等肺癌小标本合计40例,采用荧光定量PCR法联合检测EGFR、ALK、ROS1基因状态,并分析敏感突变患者与靶向治疗疗效的相关性。结果 NSCLC小标本中,驱动基因的总突变率为42. 5%(17/40),EGFR敏感突变为35. 0%(14/40),EGFR耐药突变Exon20 T790M 2. 5%(1/40),ALK融合基因突变5. 0%(2/40),ROS1未检测到突变。临床随访资料表明,驱动基因敏感突变患者在应用TKI治疗后,临床客观缓解率达90. 0%(9/10)。结论利用荧光定量PCR对NSCLC的小标本中EGFR/ALK/ROS1突变进行联合检测,可以用于临床指导肺癌的靶向治疗。     

吸烟与非小细胞肺癌EGFR基因突变状态的关系

目的探讨吸烟与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突变状态的关系。方法采用ARMS法对628例NSCLC组织中EGFR基因第18、19、20和21号外显子进行突变检测,分析EGFR基因突变状态与患者性别、年龄、吸烟及临床分期的相关性,并复习相关文献。结果在NSCLC中,EGFR突变率与患者年龄、临床分期无相关性,与患者性别、吸烟状态相关。EGFR基因突变在腺癌、鳞癌、腺鳞癌及其他类型肺癌中的突变率分别为47.8%、12.5%、54.5%和0;吸烟NSCLC患者中,EGFR突变率(27.4%,77/281)低于非吸烟患者(56.8%,197/347);但吸烟NSCLC患者EGFR基因突变中的少见突变(23.3%,18/77)高于非吸烟患者(9.6%,19/197),非吸烟患者双突变中主要以Exon19 Del合并Exon20 T790M为主,吸烟患者中,可见多种多突变类型。结论 EGFR基因在腺癌、腺鳞癌及非吸烟患者中突变率较高;吸烟是NSCLC中EGFR突变率及少见突变的重要影响因素。     

肺癌根治术患者血清EGFR、ALK、ROS1基因表达与预后的关系

目的 探讨肺癌根治术患者血清表皮生长因子受体(EGFR)、间接性淋巴瘤激酶(ALK)、肉瘤致癌因子1受体酪氨酸激酶(ROS1)基因表达与预后的关系,以为肺癌根治术患者预后的评估提供参考.方法 收集2016年1月至2018年1月我院诊治的110例肺癌根治术患者病例资料,检测病例患者血清EGFR、ALK、ROS1基因表达情况,电话或复诊形式随访患者预后,分析肺癌根治术患者预后的影响因素,并对血清EGFR、ALK、ROS1基因表达与患者预后的关系进行相关性分析.结果 110例肺癌根治术患者术前血清EGFR基因突变率为34.55％,而ALK、ROS1基因阳性表达率分别为5.45％、4.55％,术后30个月随访结果显示肺癌根治术患者复发率为22.73％,死亡率为10.00％.复发组年龄≥60岁占比、EGFR基因突变率、ALK、ROS1基因阳性表达率较无复发组明显升高(P<0.05);死亡组年龄≥60岁占比、EGFR基因突变率、ALK、ROS1基因阳性表达率较存活组明显升高(P<0.05).年龄、EGFR基因突变、ALK、ROS1基因阳性表达是肺癌根治术患者预后的危险因素(P<0.05).血清EGFR、ALK、ROS1基因表达与肺癌根治术患者术后复发率、死亡率呈明显正相关(P<0.05).结论 肺癌根治术患者血清EGFR基因突变和ALK、ROS1基因阳性表达是患者术后复发和死亡的影响因素,且血清EGFR基因突变和ALK、ROS1基因阳性表达与预后密切相关.     

非小细胞肺癌中九基因联合检测突变分析

目的通过ARMS-PCR法联合检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers, NSCLC)中9个驱动基因(ALK、ROS1、RET、EGFR、KRAS、HER-2、PIK3CA、NRAS和BRAF)的突变情况,分析其突变状态及临床意义。方法采用ARMS-PCR技术检测2018年2月～2019年2月陆军军医大学第一附属医院病理科存档的522例NSCLC肿瘤组织中的9个驱动基因的突变情况。结果 522例NSCLC中ALK、ROS1和RET的融合突变率分别为5.17%、1.34%、1.34%,EGFR、KRAS、HER-2、PIK3CA、NRAS和BRAF的突变率分别为47.32%、7.28%、1.72%、1.72%、0.95%和0.57%。女性患者中EGFR突变和ALK融合突变率明显高于男性患者(P0.001),而KRAS突变率低于男性患者(P0.001)。EFGR和KRAS突变在肺腺癌中显著高于肺鳞癌(P0.001)。无吸烟史患者中EGFR突变和ALK融合发生率均高于吸烟患者(P0.001),KRAS突变在吸烟患者的发生率显著高于无吸烟史患者。利用ARMS法联合检测9个基因在单点检测EGFR基础上增加了10.15%的患者可使用靶向药物(P0.01)。结论在9个驱动基因突变中,EGFR突变、ALK融合、KRAS突变与患者性别、吸烟以及组织学类型密切相关,其它较为罕见驱动基因突变并未发现与组织学类型、患者性别及吸烟与否相关。九基因联合检测可作为NSCLC更简便适用的药物靶向检测方法。     

非小细胞肺癌中EGFR基因突变与ERCC1、Ki-67表达及临床病理特征的关系

目的：探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中EGFR基因突变与切除修复交叉互补基因1(excision re-pair cross-complementation group 1, ERCC1)、Ki-67蛋白表达及其临床意义。方法采用DNA测序法检测EGFR基因突变,免疫组化EnVision法检测ERCC1、Ki-67蛋白表达,分析与临床病理特征的关系。结果 EGFR 基因突变率为49．1%(143/291),多见于女性、不吸烟、腺癌患者。 EGFR基因突变在腺癌的不同亚型中差异有显著性(P=0．008);EGFR基因突变组肿瘤直径的中位数小于野生型组(P=0．020);EGFR基因突变与患者年龄、淋巴结有无癌转移无相关性(P>0．050);鳞状细胞癌中ERCC1阳性率高于腺癌(P=0．039)。 Ki-67表达与肺癌分化程度有关,低分化高于高、中分化(P=0．010);ERCC1、Ki-67表达与EGFR基因突变无相关性(P>0．050)。结论 EGFR基因突变与NSCLC患者性别、组织学类型、分化程度等相关,存在多种突变。 EGFR基因突变与ERCC1、Ki-67表达无相关性。     

非小细胞肺癌中EGFR、ALK、KRAS基因突变及PD-L1表达的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中EGFR、KRAS、ALK基因突变状态及与PD-L1蛋白表达的关系。方法收集中国科学技术大学附属第一医院2019年9月30日～2020年9月30日收治的128例NSCLC,采用免疫组化法及二代测序(next generation sequencing, NGS)技术对其PD-L1表达、EGFR、ALK、KRAS基因突变状态进行检测,结合患者临床资料,对PD-L1蛋白表达、EGFR、KRAS、ALK基因突变的临床病理特征及相关性进行分析。结果 NSCLC中,女性、非吸烟、肺腺癌患者的EGFR突变率较高(P0.05);ALK融合在女性患者中阳性率高,且更易发生胸膜转移(P0.05);PD-L1蛋白阳性率为69.53%,男性(P=0.073)、非吸烟患者(P=0.022)的PD-L1阳性率相对较高。相关性分析显示,PD-L1表达与KRAS基因突变呈正相关(r=0.203,P=0.022),与EGFR基因突变呈负相关(r=-0.149,P=0.093),与ALK基因突变无相关性(r=0.067,P0.05)。结论 NSCLC中PD-L1表达与EGFR、KRAS基因突变有相关性,需要进一步研究其对临床免疫治疗相关的预测意义。     

晚期非小细胞肺癌中c-MET、ALK、ROS1基因突变的相关性及临床意义

目的探讨晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中发生c-MET扩增、ALK和ROS1基因重排的阳性率、基因变异,及其与临床病理特征的相关性。方法采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测91例晚期NSCLC中c-MET、ALK、ROS1基因,分析发生c-MET扩增、ALK/ROS1基因重排的阳性率及其相互间发生变异的相关性。结果 NSCLC患者c-MET基因的阳性率为8.79%(8/91),女性c-MET扩增率显著高于男性(19.4%vs 1.82%,P=0.006);≥60岁患者c-MET扩增阳性率高于60岁(8.89%vs 7.5%);Ⅲ期患者阳性率高于Ⅳ期患者(9.62%vs 7.69%);腺癌患者c-MET扩增阳性率为9.2%,鳞癌患者中未发现c-MET扩增。NSCLC中ALK和ROS1融合的阳性率分别为10%和13.3%,且发现1例患者同时存在c-MET扩增和ROS1基因重排。结论 NSCLC中c-MET基因扩增阳性率与患者性别相关,女性患者发生率明显高于男性,而与患者年龄、病理类型和临床分期相关性不明显。c-MET基因扩增与ALK/ROS1基因重排的发生几乎无共存,但并非完全排斥;该实验首次发现1例患者同时存在c-MET扩增和ROS1基因重排。     

非小细胞肺癌中PD-L1表达及其与肺癌相关驱动基因的关系

目的探讨程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达,及其与临床病理特征、肺癌相关驱动基因的关系。方法采用免疫组化En Vision法检测323例NSCLC肿瘤细胞、肿瘤浸润性免疫细胞PD-L1的表达;应用二代测序技术检测肺癌相关驱动基因(EGFR、KRAS、ALK)突变情况;分析PD-L1在肿瘤细胞、肿瘤浸润性免疫细胞中的表达,及与NSCLC临床病理特征及肺癌驱动基因的关系。结果 NSCLC肿瘤浸润性免疫细胞PD-L1的表达明显高于肿瘤细胞(P 0.001);肿瘤细胞PD-L1在鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)中的表达高于腺癌(P 0.05)。当NSCLC肿瘤细胞中PD-L1阳性率≥50%时,PD-L1表达与患者性别、吸烟、肿瘤大小及淋巴结转移有关(P 0.05);腺癌中PD-L1表达仅与肿瘤大小及淋巴结转移相关(P 0.05)。肿瘤细胞PD-L1的表达与EGFR、KRAS基因突变相关(P 0.01)。NSCLC肿瘤浸润性免疫细胞PD-L1阳性率≥10%,PD-L1的表达与EGFR、KRAS基因突变有关(P 0.05),而腺癌PD-L1的表达仅与KRAS基因突变相关(P=0.036)。结论当肿瘤细胞PD-L1阳性率≥50%或肿瘤浸润性免疫细胞PD-L1阳性率≥10%,NSCLC、腺癌中PD-L1的表达与KRAS基因突变相关,提示伴KRAS基因突变的肺癌患者有可能从抗PD-1/PD-L1免疫治疗中获益,从而提高生存率。     

重庆地区924例非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的探讨重庆地区非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者EGFR基因突变及与临床病理特征的关系。方法收集2012～2015年陆军军医大学/第三军医大学第一附属医院就诊的NSCLC患者924例,采用ADx-ARMS法分析患者的EGFR基因突变类型,统计突变发生率及其与临床特征的关系。结果重庆地区NSCLC患者EGFR基因突变率为38.85%(359/924),其中女性患者突变率明显高于男性患者(63.84%vs 25.74%),腺癌患者突变率显著高于鳞状细胞癌等其他类型患者(48.90%vs 7.91%),无吸烟史患者突变率显著高于有吸烟史患者(60.98%vs 21.21%),不饮酒患者突变率高于饮酒患者(50.00%vs 29.54%)。19-del和L858R两种突变类型分别占总突变的48.19%及40.11%。结论重庆地区NSCLC患者的EGFR基因突变率与患者性别、病理分型、有无吸烟史、是否饮酒、原发肿瘤大小、区域淋巴结转移及是否发生远处转移相关。     

非小细胞肺癌PD-1、PD-L1 mRNA与EGFR基因突变的相关性分析

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)程序性死亡分子-1(programmed death-1,PD-1)/程序性死亡分子配体-1(programmed death ligand 1,PD-L1) mRNA与EGFR基因突变的相关性。方法采用RNAscope法检测PD-1、PD-L1 mRNA的表达,应用基因测序法检测EGFR基因的突变类型。结果 64例NSCLC患者中,PD-1、PD-L1 mRNA的阳性率分别为40. 6%和35. 9%。PD-1、PD-L1 mRNA的表达与患者性别、吸烟史、分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无关(P0. 05)。PD-L1 mRNA的表达与患者年龄相关,60岁以上患者PD-L1 mRNA阳性率较高(P 0. 05)。64例NSCLC样本中发生EGFR基因突变27例(占42. 2%),EGFR基因突变与患者性别、吸烟史、组织学类型及分化程度相关(P 0. 05)。EGFR基因突变率在女性、无吸烟史、腺癌及高分化患者中突变率高。相关分析显示,PD-L1 mRNA表达与EGFR基因突变呈正相关(r=0. 283,P 0. 05)。结论 NSCLC患者PD-L1 mRNA表达与EGFR基因突变呈正相关。     

非小细胞肺癌患者ALK,EGFR及KRAS基因的检测及临床病理特征

目的:研究汉族非小细胞肺癌患者中间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及Kirsten鼠肉瘤基因(Kirstenrat sarcoma,KRAS)突变的阳性率及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)的方法检测ALK融合基因异常表达,采用PCR检测EGFR基因和KRAS基因突变,采用x2检验及Fisher精确概率法进行数据分析.结果:共2 267例进行了ALK融合基因检测,其中1 655例同时进行了EGFR突变检测,951例同时进行了KRAS检测.ALK融合基因、EGFR基因及KRAS基因突变阳性率分别为7.28％(165/2 267)、48.58％(804/1 655)、11.40％(108/947).ALK基因突变多见于年轻、腺癌患者;EGFR基因突变多见于女性、腺癌患者;KRAS基因突变多见于老年、男性、腺癌患者.1 655例同时进行了ALK与EGFR检测的病例中,共6例存在双基因突变(0.36％);947例同时进行了ALK与KRAS检测,共4例存在双基因突变(0.42％);943例同时进行了EGFR与KRAS突变检测,未发现双突变病例.结论:非小细胞肺癌患者ALK,EGFR和KRAS基因的突变与患者的年龄、性别、组织学类型均存在相应的联系,个别病例可以出现ALK融合基因与EGFR或KRAS突变共存.     

云南地区非小细胞肺癌患者外周血EGFR基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨云南地区非小细胞肺癌外周血中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变及与临床病理特征的关系,为该地区的肺癌个体化靶向治疗奠定基础。方法应用突变扩增阻滞系统(amplification refractory mutation system,ARMS)检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)外周血中EGFR基因第18、19、20及2l外显子突变情况,统计分析各类突变与患者临床病理特征的相关性。结果在364例患者中,EGFR基因突变者93例(25.5%)。其中EGFR 18 G719X突变占3.2%(3/93),EGFR 19缺失突变占48.4%(45/93),EGFR 20 S768I、T790M、20ins突变分别占3.2%(3/93)、2.2%(2/93)、3.2%(3/93),EGFR 21 L858R、L861Q突变分别占26.9%(25/93)、1.1%(1/93);双突变比例占11.8%,其中3例样本3.2%(3/93)存在G719X、S768I双突变,4例样本4.3%(4/93)存在19Del、T790M双突变,1例样本1.1%(1/93)存在19Del、L858R双突变,1例样本1.1%(1/93)存在L858R、S768I双突变,2例样本2.2%(2/93)存在S768I、T790M双突变。EGFR基因突变与患者性别、临床分期、组织学类型相关(P0.005),而与患者年龄、是否吸烟无明显相关(P0.05)。结论云南地区ⅢB~Ⅳ期NSCLC患者外周血中,女性腺癌突变率较高,且该地区NSCLC患者外周血EGFR基因突变存在外显子19缺失突变为主及双突变率较高的特征。使用ARMS技术检测NSCLC患者外周血EGFR基因突变可为临床使用EGFR-TKIs提供准确的指导。