重庆某种猪场猪瘟、口蹄疫、伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征抗体的ELISA检测

利用ELISA方法,对重庆市渝北区某种猪场种公猪、保育猪、育成猪、后备种猪、基础母猪不同类型和生长阶段猪群的猪瘟病毒抗体、O型口蹄疫抗体、口蹄疫病毒非结构蛋白抗体、伪狂犬病抗体、猪伪狂犬病病毒gpI抗体、猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体进行了监测和分析,结果表明:猪瘟、口蹄疫、猪伪狂犬病免疫总体水平较高,在上半年和下半年的抗体检测合格率均达到100%;猪繁殖与呼吸综合征病毒在上半年和下半年的抗体平均阳性率分别为9.8%和62%,抗体阳性率分别在95%～100%和40%～80%,由于该种猪场未曾免疫猪繁殖与呼吸综会征疫苗,表明猪繁殖与呼吸综合征病毒的感染程度较高,且在不同猪群普遍存在,应予以充分重视。     

昆明集约化猪场几种繁殖障碍性疾病的血清学调查

应用抗体金标快速检测试纸条对昆明地区12个集约化猪场的236份血清进行了猪瘟、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征以及猪圆环病毒感染的抗体检测。结果表明大部分猪场存在猪瘟、伪狂犬病的威胁,在所检测血清中猪瘟抗体水平在保护范围的（1：16-1：128）占27.4%（68/236）;猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒感染的抗体水平在保护范围（1：40-1：320）,分别占30.13%（66/208）、41.46%（86/212）和56.0%（44/84）。通过这次调查我们发现大部分猪场不重视免疫,缺乏科学的免疫程序,其中猪瘟、猪伪狂犬病仍然是昆明地区的主要繁殖障碍性疾病,应加强对这2种疾病的免疫预防工作。     

规模化猪场主要疫病监测及防制

本试验采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、正向间接血凝试验（IHA）和乳胶凝集试验（LAT）对曲靖市 16个规模化猪场的2751份血清的8种猪病血清抗体进行了检测。检测结果显示,猪瘟病毒（HCV）、猪O型口蹄疫非结构蛋白（NS）、猪伪狂犬病病毒 gE基因（ADV gE）、猪细小病毒（PPV）、猪日本乙型脑炎病毒（JEV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV 2）和布鲁氏杆菌的血清抗体阳性率分别为0%、0%、22.28%、32.93%、52.99%、29.96%、21.88%和0%;猪瘟（HC）、猪O型口蹄疫（FMD）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）免疫血清抗体阳性率分别为59.43%、64.56%、48.55%。结果表明,所检测的规模化猪场未感染猪瘟、O型口蹄疫、布鲁氏杆菌病野毒,但存在不同程度地猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪日本乙型脑炎病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒感染;猪瘟、O型口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征总体免疫效果不佳。     

云南地区部分猪场猪呼吸道疾病综合征致病病毒感染的流行病学调查

为了解云南地区猪场猪呼吸道疾病的流行病学,从而为有效防制该疾病提供科学依据,利用ELISA和RT-PCR方法检测了春、夏、秋、冬四季,云南地区不同区域规模养殖场1 164份血清和全血样品中的猪瘟抗原、猪繁殖与呼吸综合征抗原、猪伪狂犬gE抗体、猪圆环病毒2型特异抗体。结果显示:猪瘟抗原阳性率为11.34%,猪圆环病毒2型抗体阳性率为50.86%,猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为35.40%,猪繁殖与呼吸综合征抗原阳性率为44.51%。表明云南地区规模化猪场存在猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病野毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,不同季节和猪群年龄阶段感染情况有一定差异性。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC30株感染的诊断与防控策略

2019年10月初，福建闽南地区某猪场出现疑似猪繁殖与呼吸综合征疫情，主要表现为25日龄断乳仔猪出现发热、采食量下降、扎堆、毛长、喘气等现象。为确定发病原因，将随机采集的血清样品165份送至国内某重点实验室进行猪瘟抗体、猪繁殖与呼吸综合征抗体和猪伪狂犬病野毒抗体检测，采集4份肺等病料对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒进行PCR检测，PCR产物送上海某公司进行基因测序。结果发现，送检的165份样品中，猪伪狂犬病gE抗体阳性率为0%、g B抗体阳性率为96.19%(101/105)，猪瘟抗体阳性率为84.24%(139/165)，猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率为92.73%(153/165)；病原学检测结果显示，未检出猪瘟病毒、伪狂犬病病毒，但猪繁殖与呼吸综合征病毒的检出率达100%；测序结果表明，4个样品的PCR产物序列均与NADC30毒株的同源性高达92%～93%。结果提示，该场暴发PRRS是类NADC30毒株感染所致，可采取与类NADC30毒株同源性高的疫苗接种和提高生物安全防控水平等方式对该病进行科学防控。     

贵州省开阳县某猪场主要猪病的血清学抗体检测分析

为了解贵州省开阳县某猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪O型口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒的免疫及感染情况,通过采用ELISA检测方法对猪场30份血清进行相关抗体检测。结果:(1)猪O型口蹄疫病毒、猪伪狂犬病毒gB、猪瘟病毒免疫抗体合格率均>70%,免疫效果较好。(2)猪口蹄疫3-ABC抗体阳性率为0,表明猪群无口蹄疫病毒感染。(3)猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫抗体合格率为26.7%,未达到国家农业农村部规定≥70%的要求,需加强免疫。(4)猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为70%,表明猪群存在伪狂犬病病毒感染。结论:猪场需加强猪繁殖与呼吸综合征的免疫和防控,同时要做好猪伪狂犬病的检疫与净化工作。     

清远市部分规模化猪场四种疫病的抗体检测与分析

为评价清远市部分规模化猪场猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪圆环病毒病(PCVD)和猪伪狂犬病(PR)疫苗免疫水平,从7家规模化猪场采集了322份血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测了猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病和猪伪狂犬病病毒gB抗体和gE抗体。结果表明:猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病和猪伪狂犬病病毒gB抗体阳性率分别为93.48%、89.13%、90.37%、92.24%,离散度分别为22.69%、56.61%、36.13%、31.12%。说明这7家猪场四种疫病疫苗免疫效果良好,其中有1家猪场怀疑伪狂犬野毒流行。     

福建漳州部分规模猪场4种主要疫病抗体检测与分析

为了解福建省漳州市规模猪场主要疫病抗体水平,在2018年下半年,分别对漳州市9个县(市)的14个规模猪场进行采样抽血,应用血清学ELISA方法进行口蹄疫、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病等4种疫病免疫抗体检测和伪测狂犬病野毒(gE)抗体检测,结果显示,0型口蹄疫免疫抗体平均合格率为85.3%(448/525),猪瘟免疫抗体平均合格率为80.6%(423/525),猪繁殖与呼吸综合征免疫抗体平均阳性率为94.1%(494/525),猪伪狂犬病gB抗体免疫平均阳性率为90.9%(450/495),表明4种主要疫病的疫苗免疫抗体水平总体达到要求;猪伪狂犬病gE抗体平均阳性性率为25.9%(128/495),表明部分猪场有伪狂犬病野毒存在。     

鲁豫冀交界地区重要猪病的流行病学调查

开展鲁豫冀交界地区重要猪病的流行病学调查对于控制和减少该地区重要猪病的发生具有重要意义。2016年3月—2017年10月从鲁豫冀交界地区采集了1 196份样本,采用ELISA检测试剂盒检测猪瘟（classical swine fever,CSF）、猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）、猪伪狂犬病（porcine pseudorabies,PR）、猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea,PED）抗体及抗原。结果表明,猪瘟抗体阳性率为82.94%（496/598）,抗原阳性率为2.56%（6/234）;猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率为81.94%（490/598）,出现繁殖障碍性疾病的病料中抗原阳性率为20.73%（51/246）;猪伪狂犬病的g B抗体阳性率为72.78%（484/665）,g E抗体阳性率为14.59%（97/665）;PEDV抗体阳性率为47.50%（95/200）,其中免疫群体的阳性率为63.30%,未免疫群体的阳性率为35.00%。该调查结果表明,在以上地区重要猪病的免疫情况不容乐观,有待于进一步加强相关疾病的免疫工作。     

粤西地区三种猪病毒病抗体检测与分析

为了评价粤西地区猪群的免疫情况,应用ELISA对2016~2017年采自粤西地区20个不同规模养猪场的409份血清进行猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征以及猪伪狂犬病抗体检测。检测结果表明,猪场猪瘟抗体平均合格率为65.31%,猪繁殖与呼吸综合征抗体合格率为67.65%,猪伪狂犬病抗体合格率为92.60%;不同存栏数的猪场猪伪狂犬病抗体合格率均较高,可达83.80%以上,其余2种抗体检测结果显示,猪场规模越小,抗体合格率越低。提示本次调查中猪伪狂犬病的抗体平均合格率较高,而猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征的平均合格率均较低,应加强对这两种疫病的监测与强化免疫。     

Seroprevalence of economically important viral pathogens in swine populations of Trinidad and Tobago,West Indies

The objective of this study was to evaluate the seroprevalence and identify the strains of swine influenza virus (SwIV), as well as the seroprevalence of porcine parvovirus (PPV), transmissible gastroenteritis virus (TGEV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), porcine respiratory coronavirus (PRCV), porcine circovirus type 2 (PCV-2), and classical swine fever virus (CSFV) in pigs in Trinidad and Tobago (T&T). Blood samples (309) were randomly collected from pigs at farms throughout T&T. Serum samples were tested for the presence of antibodies to the aforementioned viruses using commercial ELISA kits, and the circulating strains of SwIV were identified by the hemagglutination inhibition test (HIT). Antibodies against SwIV were detected in 114 out of the 309 samples (37%). Out of a total of 26 farms, 14 tested positive for SwIV antibodies. HI testing revealed high titers against the A/sw/Minnesota/593/99 H3N2 strain and the pH1N1 2009 pandemic strain. Antibodies against PPV were detected in 87 out of the 309 samples (28%), with 11 out of 26 farms testing positive for PPV antibodies. Antibodies against PCV-2 were detected in 205 out of the 309 samples tested (66%), with 25 out of the 26 farms testing positive for PCV-2 antibodies. No antibodies were detected in any of the tested pigs to PRRSV, TGEV, PRCV, or CSFV.     

广西德保县黑猪主要疫病病原学和血清学检测

为了解德保黑猪主要疫病流行状况和免疫效果,2018—2020年采集166个德保黑猪饲养场点的300份病死猪样品进行非洲猪瘟(ASF)、猪瘟(CSF)、口蹄疫(FMD)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)、猪圆环病毒病(PCV-2)、猪支原体病(PPLO)、猪传染性胸膜肺炎(PCP)、猪链球菌病(SS)、猪流行性腹泻(PED)、猪传染性胃肠炎(TGE)等11种主要疫病的病原学检测,2017—2020年采集35个场点的临床健康德保黑猪血清样品840份进行FMD、CSF、PRRS抗体检测。结果显示:PCV-2样品平均阳性检出率为68.3%,PRRS、PR、PED、PPLO、SS等疫病的病原阳性检出率分别为1.7%、1.0%、1.0%、0.3%、0.3%;CSF平均抗体阳性率为95.8%,而FMD、PRRS平均抗体阳性率较低,分别为79.3%、73.2%,且各年份变化较大。结果表明,德保黑猪主要疫病防控效果较好,大部分疫病得到有效控制,但PCV-2感染仍较严重,这是导致德保黑猪发病死亡以及FMD、PRRS免疫效果不佳的主要因素之一,需要重点加强控制。     

2017-2020年浙江省猪主要病毒性传染病的流行病学调查与分析

为了解浙江省猪主要病毒性传染病的流行情况及变化规律,本试验对2017-2020年浙江省不同地区规模化猪场送检的血清和病料样品进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)4种疫病痛原和抗体检测.抗体检测结果显示:PRRSV、CSFV、PCV2、PRV...     

猪瘟病毒和不同型猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR检测方法的建立

为建立能同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的方法,针对CSFV和PRRSV的基因序列设计3对特异性引物,第1对引物扩增CSFV毒株NS2基因508bp片段,第2对引物扩增PRRSV美洲型经典毒株和变异毒株Nsp2基因338bp/248bp片段,第3对引物扩增PRRSV欧洲型毒株ORF5基因614bp片段。经过反应条件的优化,建立了能同时检测并区分CSFV毒株和PRRSV美洲型经典毒株、变异毒株及欧洲型毒株的多重RT-PCR方法。该方法可以特异扩增CSFV和PRRSV,而与猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)均无交叉反应;对CSFV和PRRSV 4种重组质粒标准品的检出下限均为1.67×103拷贝/μL。对采集的106份临床疑似病料进行检测,结果CSFV和PRRSV变异株混合阳性4份,占3.77%(4/106);CSFV阳性7份,占6.60%(7/106);PRRSV变异株阳性17份,占16.04%(17/106)。结果表明,建立的多重RT-PCR检测方法可以用于CSFV和PRRSV的临床快速鉴别诊断和流行病学调查。     

新疆北疆地区某规模化猪场主要传染病抗体检测与分析

为了解新疆北疆地区某规模化猪场几种主要传染病的抗体水平,便于及时发现猪场潜在的疾病风险。本试验采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）方法对某规模化猪场各阶段猪群进行猪瘟病毒（CSFV）抗体、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）抗体、猪圆环病毒2型（PCV2）抗体、猪O型口蹄疫病毒（FMDV-O）抗体,及猪伪狂犬病病毒（PRV）gB与gE蛋白抗体进行检测。试验结果表明,该场的CSFV、PRRSV、PCV-2、FMDV-O、PRV-gB蛋白、PRV-gE蛋白的平均抗体阳性率分别为83.57%、90.56%、90.29%、71.86%、82.84%、18.29%;不同类别猪群间抗体水平参差不齐,种猪群的PRRSV抗体阳性率仅为52.63%,保育猪群的CSFV抗体阳性率仅为44.12%,育肥猪群的PRV-gB抗体阳性率为30.00%,种公猪的PRV-gE抗体阳性率为30.00%,育肥猪群的FMDV-O抗体阳性率为6.25%,基于以上试验结果,为该场免疫程序的制定和优化提供参考依据,以期达到有效控制及逐渐净化疫病的目的。     

河南省部分猪群主要疫病疫苗免疫抗体水平监测与效果分析

2009年1月—2011年12月,从河南省信阳和驻马店地区62个猪场共收集免疫过猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)疫苗的猪血液,利用ELISA方法对样品进行抗体水平的检测。结果显示:该地区猪场猪群的疫苗免疫合格率最高是PRV疫苗(87.06%);其次是CSFV疫苗(76.24%);PRRSV和PCV2的疫苗免疫合格率较低,分别为65.20%和50.78%。4种疫苗免疫抗体合格率在不同规模的猪场有较大的差别,规模猪场的猪群某些疫病的抗体未必比散养猪群高。种猪群的4种疫苗的免疫合格率最高,商品猪中各个生长阶段的免疫后抗体合格率比较后发现,断奶仔猪群PRRSV抗体合格率明显高于哺乳仔猪,育肥猪群合格率要比哺乳仔猪群和断奶仔猪群的抗体合格率低。     

广西猪繁殖与呼吸综合征病毒感染状况调查

采用RT-PCR技术,对2004年1月至2005年4月期间,广西13个市104个疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染猪场,无菌采取231头病、死猪的组织病料(肺脏、淋巴结、脾脏)进行了病毒检测。同时,对鉴定为PRRSV阳性的组织病料和猪场进行了猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)和猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,以确定猪群中PRRSV与PCV2、CSFV和PRV混合感染情况。结果从12个市的115份组织病料中检出PRRSV,病料的平均阳性率为49.78%(115/231),猪场的平均阳性率为61.54%(64/104),不同地市有一定的差异。PRRSV与PCV2、CSFV和/或PRV二重或多重混和感染的组织病料总数为53份,猪场总数为39个,混合感染的组织病料和猪场的总阳性率分别为22.94%(53/231)和37.50%(39/104)。混合感染的组织病料占PRRSV阳性组织病料的46.09%(53/115),混合感染的猪场占PRRSV阳性猪场的60.94%(39/64)。其中以PCV2和PRRSV混合感染的组织病料和猪场数最多。由此可见,PRRSV感染在广西猪场已普遍存在,与其他病毒混合感染现象逐渐趋向复杂化。     

猪五种繁殖障碍性疫病病原体多重PCR的建立及初步应用

为了建立能够同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)的多重PCR,并用于猪场感染情况的动态监控以及临床诊断,根据GenBank中已发表的5种病毒的基因序列,针对CSFV的E2、PRRSV的Nsp2、PRV的gB、PCV2的ORF2和PPV的VP2基因,分别设计了特异性引物。在建立的单项PCR基础上,通过优化反应条件,建立了能同时检测5种病毒的多重PCR,并具有较高的灵敏性和良好的特异性。采用建立的多重PCR对127份疑似病猪的扁桃体活体组织进行检测,检出了5种病毒的存在,其中感染2种及以上病毒的样品比例为38.6%(49/127),表明该方法是一种快速、灵敏、高效的病原学检测手段。     

5种猪病多重PCR检测方法的建立

To establish a method for simultaneous detection of classical swine fever virus (CSFV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), pseudorabies virus (PRV), porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine parvovirus (PPV), a multiplex PCR was developed with a set of specific primers designed based on the conserved sequences of CSFV, PRRSV, PRV, PCV2 and PPV. Under the optimized conditions of multiplex PCR,five special fragments of 167 (CSFV),433 (PRRSV),305 (PRV), 559 (PCV2) and 882 bp (PPV) were amplified with a detection limit of 220, 1.6, 72, 400 and 370 pg, respectively. But the multiplex PCR amplification results of swine influenza virus （SIV）, Japanese encephalitis virus （JEV）, Streptococcus suis （SS） and porcine epidemic diarrhea virus （PEDV） were negative．The results showed that the multiplex PCR method was capable of CSFV, PRV, PRRSV, PCV2, PPV infection of single or mixed clinical samples for rapid diagnosis.