hBMP-2基因修饰的组织工程化骨修复兔桡骨节段性缺损

目的利用免桡骨节段性骨缺损模型，比较评估hBMP-2基因修饰的组织工程化骨修复骨缺损的能力。方法利用腺病毒载体Adeno-X^TM将hBMP-2基因转染新西兰大白兔骨髓间充质干细胞（BMSCs），培养扩增3周后接种于磷酸钙／纤维蛋白胶复合支架材料，构建成基因修饰的组织工程化骨（A组）；将自体BMSCs培养扩增3周后接种于磷酸钙／纤维蛋白胶复合支架材料（B组）和单纯磷酸钙／纤维蛋白胶复合支架材料（c组）作为对照组，与A组同时回植于供体兔桡骨节段性骨缺损。另外骨缺损模型自行修复组（D组），作为空白对照。分别于术后4周、8周、12周行大体观察，X线摄影，99^m Tc-MDP SPECT和组织学检查并比较其骨愈合率。结果实验组（A、B、C组）骨缺损部位均有新骨生成，12周时，均能达到骨性愈合，而空白对照（D组）仍为纤维组织充填；A组成骨数量，成骨速度和骨愈合率均高于B、c组，而B、C组之间差异无统计学意义。结论hBMP-2基因修饰的组织工程化骨成骨能力强，骨愈合率高，是一种理想的骨移植材料。     

犬自体气管移植中骨形态发生蛋白复合不同载体的成软骨比较

目的：以三种可溶性物质作为重组人骨形态发生蛋白－2（rhBMP-2)的载体，寻求适合作为rhBMP-2在犬的自体气管移植段内诱发新生软骨的缓释载体。方法：32只犬随机等分4组，颈部切取5环气管段作为移植段。等量的rhBMP-2分别与葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）和胶原复合，另设无载体作为对照，均注射入各移植段内。然后将移植段埋入自体的腹腔大网膜中。于术后4周处死动物取材，行大体及组织学观察。结果：移植段固有软骨环被部分地吸收。PVP和胶原组软件环间rhBMP-2复合物樾入区有大量新生软骨形成，且以胶原组更明显。结论：PVP和胶原均可协助rhBMP-2诱发气管移植段软骨再生，胶原更适合充当rhBMP-2的缓释载体。     

藻酸钙凝胶/自体红骨髓修复骨缺损的试验研究

目的研究藻酸钙凝胶/自体红骨髓修复骨缺损的效果,探索治疗骨缺损的新方法。方法新西兰白兔60只,分3组,每组20只,所有动物均建立左侧桡骨中段的骨缺损。A组采用藻酸钙凝胶/自体红骨髓修复,B组采用藻酸钙凝胶修复,C组设置空白对照。于术后4、8周各组10只兔子处死后分别行大体观察,摄X线片以及观察组织学情况。结果藻酸钙凝胶植入后,局部未见红肿、积液、渗出等异常反应。A组缺损8周时被硬性组织所修复,X线片见A组骨缺损处有连续性骨痂通过。B组及C组缺损处修复组织较软,X线仍显示部分缺损,组织学观察A组缺损处为骨质替代,而B组及C组大部分为纤维组织替代。结论藻酸钙凝胶/自体红骨髓在体内有良好的成骨能力,可为治疗骨缺损以及骨不连提供一种新的植骨方法。     

rhBMP-2/PLA复合物构建生物活性涂层种植体的实验研究

目的观察rhBMP-2/PLA生物活性涂层的骨诱导活性及对种植体周骨组织愈合的影响。方法采用精密车床机械切削纯钛种植体,利用乳化溶剂挥发法制备聚乳酸种植体涂层,通过冷冻干燥法将聚乳酸涂层与rhBMP-2复合,构建rhBMP-2/PLA复合涂层种植体。对9只日本长耳白兔双侧股骨行种植术,每侧制备3个种植孔,随机植入纯钛种植体、rhBMP-2/PLA复合涂层种植体,术后4、8、12周处死动物,对种植体周围骨组织进行大体观察、X线检查、组织学观察及Ⅴ型胶原的免疫组化检测,比较两组种植体周骨组织愈合情况。结果 X线观察显示种植体周骨组织随植入时间延长而密度不断增加,植入后4周、8周rhBMP-2/PLA组种植体周相对骨密度值明显高于纯钛组(P<0.05),差异有统计学意义;12周rhBMP-2/PLA组种植体周相对骨密度值略高于纯钛组(P>0.05),差异无统计学意义。组织学观察:镜下4周rhBMP-2/PLA组可见种植体界面处大量局灶性编织骨形成,新骨边缘衬有一层排列紧密的成骨细胞,成骨活跃;纯钛组种植体界面处均可见少量编织骨,未见成骨细胞活跃增殖。8周rhBMP-2/PLA组种植体界面处编织骨数量明显增加,钙化程度有所增加,且出现部分板层骨;纯钛组种植体界面处仍为局灶性编织骨,且钙化度较低,板层骨不明显。12周rhBMP-2/PLA组种植体界面处板层骨数量继续增加,骨髓腔不断扩大,且新骨融合成蜿蜒迂曲的骨小梁,正在形成哈佛氏系统。纯钛组种植体界面处也出现部分板层骨及骨小梁结构。结论rhBMP-2/PLA复合涂层具有良好的骨诱导活性,能促进种植体周骨组织的早期愈合。     

骨缺损区不同移植物对胫骨平台生物力学性能的影响

目的比较胫骨平台骨缺损区植入自体带双层皮质骨的松质骨条或自体松质骨颗粒对兔胫骨平台生物力学性能的影响。方法选择健康中国白兔24只，12～13个月龄。将24只实验动物制成右膝胫骨平台负重区骨缺损模型后，随机分成A、B两组，每组12只，A组骨缺损区植入自体带双层皮质骨的松质骨条，周围再植人少量松质骨，B组植入自体松质骨颗粒。12周后处死所有动物，取材后进行大体观察，并进行生物力学测试。结果A组术后胫骨关节面均无塌陷，B组术后2例发生胫骨平台塌陷。生物力学测试A组胫骨平台生物力学性能显著高于B组。结论自体带双层皮质骨的松质骨条植骨修复兔胫骨平台骨缺损区，术后抗塌陷性明显高于自体松质骨颗粒。     

透明质酸/壳聚糖复合支架的制备及成骨的实验研究

目的模拟天然骨组织的结构和成分,寻找适合骨组织工程的新型支架材料。方法以透明质酸、壳聚糖为基质材料,制备出一种深度矿化的透明质酸/壳聚糖复合支架。通过SEM、EDS等对支架进行表征,研究支架的形貌、成分及力学强度等性能,并通过原位植入兔股骨髁上骨缺损,通过组织学等手段检测其骨修复效果。结果 SEM观察显示,支架材料具有比较均匀的多孔结构,孔径大小为100²00μm。EDS结果表明,复合支架在一次冻干之后形成的是磷酸氢钙(DCPD),随着陈化时间的延长,DCPD逐渐向羟基磷灰石(HAP)转化。透明质酸/壳聚糖复合支架在兔体内能够修复大段骨缺损。结论透明质酸/壳聚糖复合支架可作为骨组织工程的新型支架材料用于修复骨缺损。     

BMSCs复合壳聚糖-胶原蛋白修复兔大块关节软骨缺损

目的使用同种兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）修复关节软骨缺损。方法体外培养扩增兔BMSCs。采用软骨诱导分化培养基对P2代细胞进行成软骨诱导，同时制备兔关节软骨缺损模型。诱导后细胞与事先制备好的“壳聚糖-胶原蛋白”支架复合，移植到软骨缺损区。术后于2、4、8、16周进行组织学评分并杀死动物行组织学染色。结果术后16周移植的细胞一致分化为软骨细胞，大部分软骨缺损区被新生软骨修复。结论应用BMSCs结合“壳聚糖-胶原蛋白”复合物可以修复关节软骨缺损。     

不同浓度的SIM对rhBMP-2诱导大鼠异位成骨的实验研究

目的在重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）诱导异位成骨过程中，局部应用不同浓度的辛伐他汀（SIM），探讨SIM对rhBMP-2诱导成骨的作用。方法①以牛松质骨为原料经过脱脂、脱蛋白等步骤制备牛骨基质明胶载体．将辛伐他汀和rhBMP-2分别与BMG载体复合。②将45只雄性sD大鼠随机分为3组。A组：高剂量实验组：B组：低剂量实验组：C组：对照纽。③将复合体植入大鼠股后部肌袋中，术后15d、30d、60d对实验大鼠进行大体观察、X线检测。结果①大体观察：各组组织块均随着时间延长而变硬，范围变大。（耋）X线结果，各组植入部位术后15d、30d未见显影，于术后60天各组可见不同密度的影像，B组和C组钙化明显，成高密度影像；A组成低密度影像。成骨区灰度值A组明显低于B组和C组。结论高浓度辛伐他汀可明显抑制rhBMP-2的促进成骨作用：低浓度辛伐他汀的抑制作用则不明显；证实了rhBMP-2在促进成骨方面有重要作用。     

仿松质骨生物活性人工骨修复兔尺骨大段缺损的动态实验研究

目的本研究的目的是研究由南京脉迪森医药科技有限公司生产的仿松质骨生物活性人工骨（磷酸氢钙／胶原复合人工骨）诱导大段骨缺损的动态过程。方法使用5只新西兰大白兔作为实验动物，所有动物被戊巴比妥钠溶液局部麻醉后在一侧尺骨造成1cm全缺损．在缺损处植入上述人工骨。在术后立即及0、7、14、21、35、42、49、55、62、69、76天拍X线照片，最后处死动物进行解剖观察及组织学观察。结果X线照片显示术后7天可见缺损处骨组织大量增生，至术后49天可见缺损处合拢但尚未完全愈合，术后49至55天出现明显的过度增生及与桡骨粘连，此后经历增生与吸收的过程直至完全愈合，术后76天可见完全愈合。处死动物进行解剖可见与桡骨粘连处已被吸收，缺损处修复与未手术部位外观接近。组织切片可见缺损处形成骨板并完全骨化、骨单位明显、尚未形成明显的层状骨板，散布的骨窝中有骨细胞、中央管可见新生血管，未见人工骨残留，人工骨被彻底降解吸收。结论本实验表明南京脉迪森医药科技有限公司生产的仿松质骨生物活性人工骨可替代自体骨移植修复大段骨缺损．植入后3个月内即诱导自体骨再生而使缺损部位完全复原，是一种性能优异的骨修复材料。     

双层壳聚糖／羟基磷灰石复合支架的制备及性能研究

目的：探索制备一种壳聚糖（CS）／羟基磷灰石（HA）双层复合支架的方法，对支架的理化性质进行检测。方法：在3％（m/V）壳聚糖溶液中加入一定量的聚乙二醇，离心去除气泡。将HA支架放入模具中．取配好的壳聚糖溶液，倒入模具中，放入冰箱冷冻，在冷冻抽干机中冻干，制成HA／壳聚糖（CS）支架。采用外观、红外光谱、电镜、乙醇替代、生物力学测定等方法检测支架的材料、内部结构（孔径、孔相通性）、孔隙率、力学性能，考察将其作为骨软骨组织工程支架材料应用的可行性。结果：双层复合支架外观上模拟骨软骨组织学结构．材料为壳聚糖、羟基磷灰石，平均孔径分别为CS层300μm，HA层350μm，孔相通性好，CS孔隙率为（76．00±5．01）％，HA孔隙率为（72．00±4．23）％。CS支架弹性模量为（2．8±0．5）MPa，HA支架的弹性模量为（150±11）MPa。结论：壳聚糖（CS）／羟基磷灰石（HA）双层复合支架符合骨软骨组织工程支架要求．具有较好的应用前景。     

骨感染性炎症与骨肿瘤的影像学比较

目的探讨分析四肢长骨感染性炎症和骨肿瘤的影像学改变,以实现四肢长骨感染性炎症和骨肿瘤的鉴别诊断,为临床资料提供参考依据。方法调查2006年1月-2013年2月住院156例患者,分为四肢长骨感染82例和骨肿瘤组74例患者;骨质异常的X线、CT和MRI征象以回顾性分析进行界定、观察、记录和统计学比较,采用SPSS 13.0统计软件进行分析。结果骨感染组死骨形成、髓腔内脓肿发生率均为100.00%,骨肿瘤组死骨形成、髓腔内脓肿发生率均为0,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论使用X线平片、CT、MRI、DSA等多种影像学检查手段,充分了解、运用各征象的意义,可以对四肢长骨感染性炎症和骨肿瘤进行正确的鉴别诊断,避免误诊。     

骨髓活检在诊断骨髓转移瘤中的价值

目的探讨骨髓活组织检查在诊断骨髓转移瘤中的价值。方法骨髓转移瘤患者行一步法骨髓抽吸取材,活检塑料包埋切片行HGF、Gomori染色,骨髓涂片行瑞特氏染色。结果骨髓活检检出率为97.1%,骨髓涂片检出率为60.9%,骨髓活检与骨髓涂片诊断相符率为57.9%;骨髓活检检出率明显高于骨髓涂片(P<0.01)。结论骨髓活检可作为诊断骨髓转移瘤的常规检测手段。     

Effect of dietary calcium deficiency on bone matrix-induced ectopic bone

The effect of dietary depletion of calcium on collagenous bone matrix-induced ectopic bone was studied, following thirty days of deficiency. While the molar ratio of phosphorus and calcium did not exhibit any significant differences between the control and experimental groups, individual concentrations of these minerals showed significant reduction in the ossicles derived from experimental rats. A concomitant decrease and increase in urinary excretion of calcium and phosphate was noted in the calcium deficient group; the serum levels of these parameters, however, were not affected. Both hexosamine and hydroxyproline levels appeared higher in calcium deficient ossicles. A significant elevation of alkaline and acid phosphatase as well as aryl sulfatase was observed in calcium deficient ossicles. There appeared to be no difference between control and experimental rats in the rate of calcification as measured by ⁴⁵Ca uptake. These results suggest that dietary deficiency induces significant resorption of ectopic bone without altering mineralization capacity. It is suggested that matrix-induced ectopic bone may be used as a suitable experimental model to study pathophysiology of bone loss under various experimental conditions.