P38MAPK信号通路与uPA在卵巢癌细胞及组织中表达的相关性

背景与目的：P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)信号通路参与多种肿瘤的发生、发展和转移过程,尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)在肿瘤浸润和转移中发挥着重要作用。本实验研究卵巢癌组织中P38MAPK、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine threonine kinase,AKT)及uPA的表达与临床病理特征的关系,并分析上述蛋白与uPA表达的相关性,探讨P38MAPK信号通路与uPA在卵巢癌细胞及组织中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学法检测49例卵巢癌组织中uPA、P38MAPK、ERK和AKT蛋白的表达,采用蛋白［质］印迹法(Western blot)检测不同卵巢癌细胞系HO8910、HO-8910PM、SKOV3和CAOV3中uPA和P38MAPK蛋白的表达,使用特异性抑制剂SB203580阻断P38MAPK信号通路后检测uPA蛋白表达水平的变化。结果：uPA、P38MAPK、ERK和AKT蛋白在卵巢癌组织中的表达阳性率分别为61.22%、57.14%、53.06%和55.10%。uPA蛋白的表达与P38MAPK呈正相关(r=0.865,P=0.001),且与卵巢癌组织的临床病理分期(P=0.029)、分化(P=0.03)和转移程度(P_淋巴=0.022,P_大网膜=0.012)有关,而与患者的年龄(P=0.754)及组织学类型(P=0.652)无关。ERK、AKT蛋白的表达与卵巢癌淋巴结转移(P_ERK=0.011,P_AKT=0.022)和大网膜转移(P_ERK=0.006,P_AKT=0.000)有关,而与患者的年龄(P_ERK=0.000,P_AKT=0.022)、组织类型(P_ERK=0.771,P_AKT=0.245)及病理分期(P_ERK=1.000,P_AKT=0.254)无关。卵巢癌细胞系HO-8910PM中uPA蛋白的表达水平明显高于HO8910、SKOV3和CAOV3细胞系,使用SB203580阻断P38MAPK信号通路后可降低uPA蛋白的表达,且随着SB203580浓度升高uPA蛋白表达水平逐渐降低。卵巢癌中P38MAPK及uPA蛋白的表达与卵巢癌的预后显著相关(Log-rank=3.897和11.044,P=0.048和0.001)。结论：卵巢癌组织中P38MAPK信号通路处于激活状态;P38MAPK信号通路的激活可上调uPA的表达,促进卵巢癌的恶性进展;P38MAPK信号通路和uPA可能在卵巢癌侵袭和转移的过程中发挥重要作用。P38MAPK和uPA蛋白有望成为卵巢癌预后评估的重要指标。     

p38MAPK信号通路与uPA在乳腺癌细胞及组织中表达的相关性

背景与目的:p38MAPK信号通路介导多种转移相关基因表达调控,尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)在肿瘤浸润和转移中发挥着重要作用.本实验研究人乳腺癌组织中3种信号分子p-p38、p-Akt、p-Erk及uPA表达与临床病理特征的关系,并分析它们与uPA表达的相关性,探讨p38MAPK通路对乳腺癌uPA蛋白表达的影响,分析p-p38和uPA表达与乳腺癌预后的关系.方法:应用免疫组织化学(SP)法检测p-p38、p-Akt、p-Erk和uPA在60例乳腺癌组织中的表达.Western blot检测人乳腺癌细胞MDA-MB-231及MCF-7中p-p38及uPA蛋白表达及用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路后uPA蛋白表达水平的变化.结果:p-p38、p-Akt、p-Erk、uPA蛋白在乳腺癌组织中表达阳性率分别为56.7%、95.0%、93.3%、60.0%.p-p38与uPA表达存在正相关(r=0.316,P＜0.05),并与乳腺癌的TNM分期及淋巴结转移状况相关(P＜0.05),而与患者年龄、肿瘤大小无明显相关性(P＞0.05).p-Akt、p-Erk与uPA表达无明显相关性,p-Akt和p-Erk蛋白表达与乳腺癌的淋巴结转移有关(P＜0.05)而与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期均无明显关系(P＞0.05).乳腺癌细胞MDA-MB-231中p-p38及uPA蛋白表达水平高于MCF-7.用SB203580阻断p38MAPK通路可降低uPA蛋白表达水平,且随着SB203580浓度升高uPA表达水平逐渐降低.乳腺癌中p-p38和uPA蛋白的表达与肿瘤的预后显著相关(分别为log-rank=4.98、5.40,P=0.0256、0.0201).结论:p38MAPK信号通路可能通过上调uPA的表达促进乳腺癌的恶性进展,p38MAPK信号通路可能是乳腺癌侵袭和转移的重要途径,p-p38和uPA的表达可辅助用于乳腺癌的预后评估.     

虫草素抑制食管癌细胞Eca-109增殖、迁移和侵袭的作用及机制研究

目的:探讨虫草素对食管癌细胞Eca-109的作用及其潜在的机制。方法:不同浓度（35、70、140、280 μg/mL）虫草素分别处理Eca-109细胞24 h、48 h、72 h和96 h,CCK-8检测细胞活力,筛选虫草素最佳作用浓度（70 μg/mL）和时间（24 h）。实验分为4组:对照组、虫草素组（70 μg/mL虫草素）、SB203580组（10 μg/mL SB203580）和虫草素+SB203580组（70 μg/mL虫草素+10 μg/mL SB203580）。培养24 h后,CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力;qRT-PCR和Western blot分别检测细胞周期相关、凋亡相关和p38 MAPK信号通路相关基因和蛋白的表达。结果:与对照组相比,虫草素组、SB203580组和虫草素+SB203580组细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低（P＜0.05）,细胞发生G2期阻滞,凋亡率显著升高（P＜0.05）,cyclinB1、CDK4、p-p38、ERK1和ERK2的表达下调（P＜0.05）,CKI和Caspase-3的表达上调（P＜0.05）。结论:虫草素可抑制食管癌细胞Eca-109增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其作用机制与p38 MAPK信号通路有关。     

TRPV4通过调控MAPK/ERK信号通路促进卵巢癌细胞的增殖和迁移北大核心

目的:探讨TRPV4通过影响MAPK/ERK信号通路调控卵巢癌细胞的增殖与迁移。方法:RT-qPCR和Western Blot方法检测TRPV4在卵巢癌细胞系和正常卵巢上皮细胞中的表达差异;GEPIA在线数据库分析卵巢癌患者TRPV4表达水平和预后关系;敲低TRPV4,通过RT-qPCR和Western Blot检测转染效率;通过细胞计数试剂盒(CCK8)、克隆形成实验以及Transwell迁移实验检测TRPV4在卵巢癌发生发展过程中增殖及迁移作用;通过GSEA软件富集分析信号通路并用Western Blot验证卵巢癌细胞MAPK/ERK信号通路表达量变化。结果:在卵巢癌细胞及临床组织样本中,TRPV4表达量明显增高,TRPV4表达量较高的患者预后更差。siRNA转染卵巢癌HO8910和Caov3细胞后,与Control组相比,TRPV4 mRNA和蛋白表达显著降低;细胞增殖迁移能力显著减弱;WB实验结果显示ERK总量不变,磷酸化水平降低,进一步实验中证实:敲低TRPV4后,ERK信号通路中的关键蛋白(P90RSK、MEK1/2、MSK1)磷酸化水平降低。结论:TRPV4在卵巢癌细胞及组织中高表达,可能通过正向调控MAPK/ERK信号通路,促进卵巢癌细胞增殖迁移等功能。     

EGF调节MT1-MMP和MMP-2的表达及其信号传导机制的研究

目的:探讨表皮生长因子（EGF）在宫颈癌SiHa细胞中对膜型基质金属蛋白酶（MT1-MMP）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达的调节作用,明确其相关的信号传导机制。方法:利用EGF作为干预因素,信号通路阻断剂分别阻断表皮生长因子受体（EGFR）、AKT、ERK、p38和JNK的磷酸化,来观察EGF对MT1-MMP和MMP-2表达的影响及相关信号通路。结果:EGF在mRNA和蛋白水平上诱导MT1-MMP的表达增加和抑制MMP-2的表达;MAPK和ERK激酶抑制剂在mRNA和蛋白水平上可阻断这种诱导;PI3-K抑制剂不影响EGF对MT1-MMP的诱导,但可进一步抑制MMP-2的表达。结论:EGFR通过MAPK/ERK信号通路上调MP1-MMP的表达和下调MMP-2的表达,同时还通过PI3-K/AKT的信号通路轻度上调MMP-2的表达。此外,EGF可以提高细胞培养基中MMP-2的活性。     

p38MAPK对卵巢癌顺铂耐药作用及机制的探讨

目的:研究p38MAPK在卵巢上皮癌顺铂化疗耐药中的作用,并探讨其作用机制.方法:蛋白质印迹法检测顺铂对卵巢癌中p38MAPK的激活情况 ;MTT法检测p38MAPK抑制剂SB203580处理后及p38 shRNA干扰后细胞顺铂耐药指数的变化 ;实时定量PCR技术检测SB203580处理后及p38 shRNA干扰后,耐药蛋白ERCC1、MDR、LRP、GST-π及凋亡蛋白Caspase-3、Survivin等mRNA的表达变化.结果:在一定时间浓度梯度下,顺铂可诱导卵巢癌顺铂敏感株COC1及耐药株COC1/DDP细胞内p38MAPK的激活,但耐药株的激活程度弱于敏感株 ;p38MAPK抑制剂SB203580及p38 shRNA干扰可增加卵巢癌细胞株的耐药指数(t=4.610,P=0.041 ;t=11.621,P=0.000) ;SB203580及p38 shRNA干扰后Survivin mRNA(t=5.152,P=0.007 ;t=6.008,P=0.004)、ERCC1 mRNA(t=13.742,P=0.005;t=11.621,P=0.000)及LRPmRNA(t=8.173,P=0.001 ;t=16.815,P=0.000)的表达明显上调.结论:p38MAPK受抑制可能导致卵巢上皮性癌顺铂耐药的产生,其机制可能是通过上调Survivin、ERCC1及LRP的mRNA表达来实现.     

p38MAPK 在结肠癌细胞凋亡中的作用及与COX-2 的关系

 目的 探讨结肠癌细胞p38MAPK介导celecoxib（COX-2选择性抑制剂）抗肿瘤的作用及与COX-2的关系。方法 用MTT法检测celecoxib对人结肠癌HT-29细胞生长的作用，用Western blot法测定各组细胞COX-2和Phosph—p38MAPK蛋白表达量，采用流式细胞术检测celecoxib和SB203580（p38MAPK特异性抑制剂）作用后HT-29细胞凋亡和细胞周期分布。结果 p38MAPK和COX-2蛋白表达量与对照组（0．23±0.12）（0.95±0．14）相比，celecoxib可使p38MAPK蛋白表达水平明显升高（0．62±0．11），而使COX-2蛋白表达水平降低（0、44±0．11）；SB203580使p38MAPK（0.12±0．05）及COX-2蛋白（0、23±0．13）表达水平均降低；SB203580和celecoxib共同作用后，p38MAPK表达量介于celecoxib和SB203580作用之间（0．43±0．12），COX-2表达量下降最为显著（0．15±0．10））。celecoxib和eeleeoxib＋SB203580均可显著诱导HT-29细胞凋亡（P〈0．01和P〈0．05），与对照纽（4．31％）相比，其凋亡率分别为40．95％、26．24％。结论 在HT29细胞中，celecoxib可通过活化p38MAPK而诱导结肠癌细胞凋亡，p38MAPK是COX-2的上游激酶，COX-2的表达水平受p38MAPK调控，并且COX-2可能对p38MAPK有负反馈调节作用。celecoxib是通过COX-2及其以外的p38MAPK通路诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用的。     

NID1增强人卵巢癌细胞OVCAR-3干细胞特性及分子机制研究

摘 要：［目的］ 探讨NID1对卵巢癌干细胞表型的潜在影响以及NID1与干细胞标志蛋白联合对预后的潜在价值。［方法］ 采用肿瘤干细胞球形成实验、荧光定量RT-PCR和Western blot分别检测稳定过表达外源NID1的OVCAR-3细胞的自我更新能力和卵巢癌干细胞标志物的表达情况。借助生物信息学分析评估NID1在卵巢癌临床样本中与卵巢癌干细胞标志物的相关性及两者联合对预后预测的价值。［结果］ 与空载细胞相比,稳定过表达NID1的OVCAR-3细胞自我更新能力增强（P=0.006）,同时伴随着干细胞标志物CD44（P=0.000）和ABCG2（P=0.000）表达水平升高。经ERK/MAPK通路的抑制剂U0126下调ERK1/2的磷酸化水平后,其CD44和ABCG2的水平下降。此外,基于两套卵巢癌表达谱芯片数据的生物信息学分析表明,NID1的表达水平与CD44（P=0.006;P=0.036）、ABCG2（P=0.000;P=0.000）表达水平均显著正相关,而NID1高表达并且携带干细胞表型的卵巢癌患者总体存活时间最短（P=0.026;P=0.000）。［结论］ NID1可能通过激活ERK/MAPK通路诱导卵巢癌细胞出现干细胞特性,NID1与干细胞标志物联合可能具有预后预测意义。     

米非司酮对高转移卵巢癌细胞株HO-8910PM蛋白水解作用的影响

目的研究高转移卵巢癌细胞株HO-8910PM基质金属蛋白酶的表达情况及米非司酮对HO-8910PM细胞水解基质蛋白作用的影响.方法应用免疫组化染色法,检测H0-8910PM卵巢癌细胞基质金属蛋白酶的表达情况;采用水解空斑法检测不同浓度米非司酮对HO-8910PM细胞的体外水解人血浆基质蛋白空斑的变化.结果HO-8910PM细胞MMP-10及MMP-9表达较高,MMP-2表达较低;10 μmol/L、20μmol/L米非司酮培养48小时可显著降低具有蛋白水解作用的HO-8910PM细胞的百分比(P＜0.01),而5 μmol/L米非司酮组无明显变化(P＞0.05);不同浓度的米非司酮(5 μmol/L、10 μmol/L、20μmol/L)明显缩小HO-8910PM细胞的平均水解空斑面积.结论HO-8910PM细胞可表达MMP-10、MMP-9、MMP-2;米非司酮可抑制HO-8910PM细胞体外水解基质蛋白的能力.     

脑胶质瘤细胞化疗耐药中p38MAPK信号通路的作用

探讨p38MAPK信号通路在脑胶质瘤细胞化疗耐药中的作用及相关机制。 方法 在 前期建立U251/TMZ胶质瘤耐药细胞株的基础上,用特异性阻断剂SB203580阻断耐药细胞株中 p38MAPK信号通路,替莫唑胺作用下检测耐药株的细胞活性变化,同时检测MDR1、TopoⅡ、BCL-2 等耐药相关基因的蛋白表达变化。 结果 阻断通路后替莫唑胺作用下细胞的抑制率明显低于未阻 断组,两组之间比较差异有统计学意义（P＜0.05）,阻断后耐药细胞中BCL-2、MDR1的表达明 显升高,TopoⅡ的表达明显降低,与未阻断的耐药细胞相比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结 论 U251/TMZ胶质瘤耐药细胞中p38MAPK信号通路被阻断后细胞的耐药性增强,其机制可能与耐药 株中耐药相关基因BCL-2、TopoⅡ、MDR1的表达变化有关。     

Correlation between Expression of P38 MAPK-Signaling and uPA in Breast Cancer

OBJECTIVE To study the expression of phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase(p-p38)and uPA and the correlation of their expression with breast cancer clinicopathological characteristics,and to investigate the role of the p38MAPK-signaling pathway in regulating uPA expression in breast cancer cells. METHODS Immunohistochemistry(S-P) was used to test the expression of p-p38 and uPA in 60 specimens of breast cancer tissues.Western blots were adopted to detect expression of the p-p38 and uPA proteins in MDA-MB-231 and MCF-7 breast cancer cells,and uPA expression a er treatment with SB203580,a specific inhibitor of p38 MAPK. RESULTS The positive rate of the p-p38 protein and uPA protein expression in the breast cancer tissues was 56.7% and 60.0%,respectively.The expression of p-p38 was positively related to the expression of uPA(r=0.316,P<0.05).The expression of p-p38 and uPA was related to lymph node metastas is and the TNM stage(P<0.05),but it was not related to the patient’s age or tumor size(P>0.05).The expression of p-p38 and uPA in MDA-MB-231 cells was higher than that in MCF-7 cells.SB203580 inhibited the p38 MAPK pathway and reduced uPA protein expression. CONCLUSION The p38 MAPK-signaling pathway promotes breast cancer malignant progression by up-regulating uPA expression,and it may be an important process in breast cancer invasion and metastasis.     

乳腺癌中组蛋白去甲基化酶JMJD3与上皮间质转化相关蛋白表达的相关性及临床意义CSCD

目的探讨乳腺癌组织中组蛋白去甲基化酶JMJD3与上皮细胞-间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、Vimentin和N-cadherin的表达及其相关性。方法收集120例乳腺癌及对应癌旁组织标本,采用免疫组织化学SP法检测乳腺癌组织中JMJD3、E-cadherin、Vimentin和N-cadherin的表达,并分析上述蛋白与乳腺癌临床病理特征的关系及相关性。结果乳腺癌组织中JMJD3和E-cadherin阳性率(56.67%和65.00%)显著低于癌旁组织(73.33%和83.33%)(均P<0.05),Vimentin和N-cadherin阳性率(54.17%和58.33%)显著高于癌旁组织(23.33%和20.83%)(均P<0.05)。JMJD3、E-cadherin、Vimentin及N-cadherin的表达与乳腺癌组织学分级、TNM分期和淋巴结转移均相关(均P<0.05),JMJD3与肿瘤直径相关(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,乳腺癌中JMJD3与E-cadherin表达呈正相关(r=0.204,P=0.025),与Vimentin和N-cadherin表达均呈负相关(r=-0.467,r=-0.500,均P=0.000)。结论乳腺癌中JMJD3可能通过调节乳腺癌细胞上皮-间质转化途径调控乳腺癌侵袭转移。     

肺腺癌组织中MACC1和c-Met蛋白的表达及其与患者术后复发的关系

目的 检测MACC1、c-Met蛋白在肺腺癌组织中的表达,及其在患者术后复发中的预测价值。方法 收集完全性切除的肺腺癌患者术后病理标本102例和癌旁组织57例,采用免疫组织化学技术检测MACC1和c-Met蛋白在肺腺癌和癌旁组织中的表达,对患者行定期随访,分析MACC1和c-Met 蛋白的表达与患者术后复发的关系。结果 MACC1和c-Met在癌组织中的阳性表达率分别为59.80%、54.90%,明显高于癌旁组织中的7.01%、10.53%,差异有统计学意义（P<0.05）。MACC1、c-Met蛋白的表达与性别年龄无关,与肿瘤T分期、淋巴结转移、病理TNM分期有关（P<0.05）。MACC1与c-Met 的表达之间呈正相关（r=0.262, P=0.008）。MACC1阳性组2年内复发率为73.77%,明显高于阴性组的31.71%（χ²=17.686, P<0.001）。c-Met阳性组2年内复发率为76.79%,高于阴性组的34.78%（χ²=18.272, P<0.001）。Cox回归多因素提示MACC1和c-Met蛋白的表达、术后病理分期、肿瘤T分期及淋巴结转移情况是腺癌患者复发转移的危险因素。结论 MACC1和c-Met蛋白在肺腺癌组织中表达与肿瘤T分期、淋巴结转移、病理分期有关,影响肺腺癌患者术后无瘤生存期,是复发转移的危险因素。     

胃癌中STAT3、p-STAT3和Bcl-xL的表达及临床意义

目的 检测STAT3、p-STAT3与其下游靶基因产物Bcl-x_L蛋白在胃癌组织中的表达,探讨STAT3及其靶基因产物在胃癌发病机制中的作用。方法 采用免疫组织化学SP法检测53例胃癌及44例正常胃黏膜组织中STAT3、p-STAT3及Bcl-x_L蛋白的表达,并分析其与胃癌临床病理特征的关系。结果 STAT3、p-STAT3及Bcl-x_L蛋白在胃癌组织中的阳性表达率显著高于其在正常胃黏膜组织中的阳性表达率,差异均有统计学意义(P均<0.05)。STAT3蛋白的表达与胃癌组织的分化程度及淋巴结转移显著相关（P<0.05）;p-STAT3、Bcl-xL蛋白的表达与胃癌组织的分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移及临床分期均有关(P均<0.05);三者与性别、年龄、肿瘤大小无明显相关性（P均>0.05）。胃癌组织中的p-STAT3与Bcl-xL蛋白表达之间呈正相关（r =0.346,P=0.011）。结论 STAT3信号转导通路在胃癌的发生、发展过程中起重要作用,检测胃癌组织中STAT3及靶基因Bcl-x_L的表达有助于判断肿瘤的恶性程度及病情进展。     

白细胞介素-33对急性髓系白血病细胞株HL-60、NB4凋亡和周期的调控作用及机制研究

目的  探讨白细胞介素-33（interleukin-33,IL-33）对急性髓系白血病细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法 急性髓系白血病细胞株HL-60、NB4经外源性IL-33以及p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK）特异抑制剂（SB203580）处理72 h后,采用Annexin V/DAPI双染色流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞周期检测试剂盒检测细胞周期,Western blot 检测细胞周期蛋白依赖性激酶1（cyclin-dependent kinases 1,CDK1）蛋白表达以及p38 MAPK的磷酸化水平。结果 与对照组相比,IL-33组的HL-60和NB4细胞经IL-33作用后,细胞凋亡水平降低（P<0.05）,细胞周期中S期比例升高（P<0.001）;而SB+IL-33组细胞经SB203580和IL-33联合处理后,细胞凋亡水平高于IL-33组（P<0.05）,S期细胞的百分比低于IL-33组（P<0.05）;Western blot检测结果表明,与对照组相比,IL-33组细胞的p38 MAPK磷酸化（p-p38 MAPK） 水平和CDK1蛋白表达水平均显著增高（均P<0.05）,而SB+IL-33组的p-p38 MAPK水平以及CDK1水平较IL-33组显著下降（均P<0.05）。 结论 IL-33可通过激活p38 MAPK,抑制急性髓系白血病细胞株HL-60、NB4细胞的凋亡,抑制细胞周期停滞。     

基于基因组突变数据分析肝癌预后分子标志物

目的  探讨肿瘤突变负荷（tumor mutational burden，TMB）及关键信号通路的基因变异与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）患者预后的相关性。 方法 从TCGA数据库及cBioPortal数据库schulze2015队列分别获取376例和243例HCC患者全外显子测序数据，从ICGC数据库获取JP队列 394例及FR 队列250例HCC患者全基因组测序数据。采用生存分析研究TMB、关键信号通路的基因变异与HCC患者预后的关系。结果 TCGA队列、JP队列、schulze2015队列和FR队列中，对数转换后的TMB与年龄均呈正相关（P<0.001）；在schulze2015队列中，对数转换后的TMB与肿瘤大小呈正相关（r=0.204，P=0.002）。在TCGA队列中，与低TMB组比较，高TMB 组HCC患者的OS（P<0.001）及DFS（P=0.088）均明显降低，高TMB组HCC患者的死亡风险是低TMB组的2.156倍（P<0.001）。JP队列和FR队列均未发现TMB与OS及DFS有统计学意义。TCGA队列、JP队列和FR队列中，细胞周期调控通路基因变异的HCC患者中位DFS和中位OS均低于无变异的患者（P<0.05），而复发风险和死亡风险均高于无变异患者（P<0.05）。结论 肿瘤突变负荷高和细胞周期调控通路的基因变异的HCC患者预后较差。