乳杆菌发酵烟梗制备生物塑料前体物L-乳酸的研究

为资源化利用废弃烟梗,从甘薯淀粉加工废水中分离到1株L-乳酸产生菌XJL,并对XJL培养特性、形态特征及生理生化特性进行了检测,同时结合其16S rDNA基因序列同源性分析,初步鉴定为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei,L.casei)。XJL能够发酵废弃烟梗提取液(Tobacco stem extraction,TSE)产生L-乳酸。在装载量100 mL/150 mL、接种量7.5%、35℃条件下静置培养48 h,废弃烟梗发酵产L-乳酸的最高值为143 g/kg。     

废弃烟梗固态发酵生产假丝酵母

为资源化利用废弃烟梗,以废弃烟梗为底物固态发酵生产假丝酵母.在单因子试验的基础上,利用Plackett-Burman设计法筛选出影响假丝酵母HZ19生物量的重要影响因子.结果表明,最适发酵条件为温度30℃、发酵时间3d、接种量100 mL/kg、装载量10 g/250 mL、烟梗大小4.0～5.0 cm;通过Plackett-Burman试验分析,蔗糖、酵母粉、葡萄糖对假丝酵母HZ19生物量有显著影响,试验中最大生物量干质量为103.24 g/kg.     

L-精氨酸产生菌发酵培养基及发酵条件优化的初步研究

本文以钝齿棒杆菌诱变菌为实验菌株,采用摇瓶发酵的方式,研究了培养基组分(碳源、有机氮源、无机氮源及无机盐离子)与发酵培养条件(温度、接种量、初始p H及发酵液体积)对菌种产L-精氨酸的产量的影响。结果表明,该菌产L-精氨酸发酵培养基的最佳组分为:葡萄糖12%、硫酸铵4.5%、玉米浆2.5%、KH2PO40.005%、Mg SO4·7H2O0.01%、Fe Cl3·6H2O 0.01%、Mn SO4·H2O 0.05%及碳酸钙3%;最佳发酵条件是:培养温度为30℃、接种量为10%、初始p H为7.0及装液量为15m L/250m L。该菌以最优结果发酵,L-精氨酸的产量较基本培养基提高27.7%,达到了11.23g/L。     

茁芽短梗霉P1012产普鲁兰多糖的条件优化

研究了培养基组分(蔗糖、米糠和L-抗坏血酸)及发酵条件(pH、温度、接种量和转速)对茁芽短梗霉P1012(Aureobasidium pullulans P1012)产普鲁兰多糖的影响,以期提高普鲁兰多糖的产量。研究对培养基组分进行单因素试验及优化发酵条件,再结合正交试验考察了三因素(米糠、蔗糖和L-抗坏血酸)两水平对普鲁兰多糖产量的影响,从而优化茁芽短梗霉P1012发酵工艺,并通过上5 L发酵罐发酵培养验证。试验确定最佳培养基配方为蔗糖70 g/L、米糠3 g/L和L-抗坏血酸3 g/L。发酵条件控制为温度28℃、p H 5.0、接种量4%以及转速200 r/min。经5 L发酵罐培养后,测定普鲁兰多糖产量达到43.77 g/L,糖转化率为62.53%。发酵液pH由5.00升至6.56,黏度达到52.10m Pa·s,具有特别的芳香气味。获得茁芽短梗霉P1012的发酵工艺参数,为进入工业化生产提供依据。     

响应面法优化产磷脂酶C菌株的培养条件

为了得到发酵法制取磷脂酶C(PLC)的最佳培养条件。首先通过单因素试验考察接种量,培养时间,培养温度,培养基初始p H等对PLC酶活水平的影响,然后选择装液量,培养温度,培养基初始p H 3个主要影响因素,采用Box-Behnken设计,得到摇瓶产PLC的最佳产酶条件为:接种量3.92%,温度32.43℃,发酵时间24 h,初始p H 6.98,在此培养条件下,蜡样芽孢杆菌深圳株754-1PLC的产酶水平最大达到25.23 U/m L。     

响应面法优化覆盆子浆果果酒发酵工艺研究

根据单因素实验研究结果,利用响应面法对覆盆子浆果果酒发酵条件进行优化研究,通过响应面实验分析建立了以上四因素(酵母菌接种量、初始糖浓度、发酵温度、初始p H)和覆盆子果酒酒精度之间的回归方程模型,确立了覆盆子果酒发酵的适宜工艺条件为,酵母菌接种量1.3 g/L;初始糖浓度19.5°Bx;发酵温度25℃;初始p H3.3,此条件下,覆盆子果酒酒精度为11.6%(体积比),经验证,该工艺切实可行,适宜于工业生产。     

以油茶籽粕为底物发酵生产蛋白酶培养条件的优化研究

优化了枯草芽孢杆菌KD-N2利用茶籽粕等为底物液体发酵生产蛋白酶的发酵条件。单因素实验结果表明,在初始p H 8.0、种龄30h、转速230r/min、接种量12%(v/v)、培养温度28℃、装液量30m L时,发酵液中蛋白酶活性较高。正交试验结果表明,接种量5%(v/v),装液量30m L,初始p H值7.2时为最佳条件,在30℃、30h种龄、200r/min培养18h后蛋白酶活性达到104.2U。文章同时对发酵过程可溶性蛋白质含量和发酵液p H值变化进行了分析,为提高发酵产酶总量,发酵条件还需进一步进行优化。     

干酪乳杆菌XJL发酵废弃烟梗产L-乳酸的Plackett-Burman优化

目的寻求L-乳酸发酵的廉价基质和资源化利用废弃烟梗。方法以废弃烟梗为材料制备水提取液(tobacco stem extraction,TSE),以菌株XJL发酵废弃烟梗提取液制备L-乳酸,通过Plackett-Burman优化设计实验对影响菌株XJL发酵废弃烟梗提取液制备L-乳酸的相关变量因素进行分析评估。结果所选10个相关变量因素中,当发酵时间为24 h时,酵母粉和碳酸钙是影响菌株XJL发酵制备L-乳酸的重要正效应因子,当发酵时间为42 h时,酵母粉、果糖、磷酸氢二钠和碳酸钙是影响菌株XJL发酵制备L-乳酸的重要正效应因子。在Plackett-Burman优化实验设计中,发酵时间为24 h和42 h时,L-乳酸的最高产率分别为307.5 g/kg和315.0g/kg。结论在Plackett-Burman实验中,发酵时间的延长对L-乳酸产率的提高影响不大,营养添加物能够提高L-乳酸的产量。     

发酵型百香果酒的研制

该文研制一款发酵型百香果酒,重点对发酵工艺进行优化。首先通过单因素试验考察接种量、发酵温度及发酵液初始p H值3个重要因素对发酵液糖度变化的影响,确定适宜的参数范围。然后在此基础上设计正交试验考察各因素对酒体感官品质的影响。最优发酵工艺参数为:酵母接种量为体积百分比1.8%、发酵温度为20℃、发酵液初始p H值为3.6,在此条件下获得的百香果酒感官评分最高。经质量检测,产品酒精度为11.5%Vol,感官品质良好。     

洋葱伯克霍尔德菌产脂肪酶的条件研究

以课题组从海鳗肠道内容物中筛选获得的洋葱伯克霍尔德菌ZF-16为试验菌株,采用单因素试验和均匀设计试验对其培养基成分和发酵条件进行研究,得到优化的产酶条件为:玉米淀粉0.5%,蛋白胨3.0%,橄榄油10.0%(体积分数),MgSO_4·7H_2O 0.05%,K_2HPO_40.1%,培养基初始pH 6.0~7.0;培养温度30℃,摇床转速120r/min,装液量50 m L/250 m L,接种量2%(体积分数),接种龄18 h,发酵时间68 h。在此条件下发酵,洋葱伯克霍尔德菌ZF-16的脂肪酶活力为72.59 U/m L,较优化前(12.71 U/m L)提高了4.71倍。     

米根霉发酵木薯淀粉产L-乳酸的工艺优化

以培养基配方（糖化液、蛋白胨、酵母膏、麦芽粉添加量）和培养条件（培养温度、pH、培养时间、接种量）的单因素试验结果为 依据,选取糖化液质量分数、培养时间、pH和培养温度4因素,以发酵液中L-乳酸含量为评价指标,基于Box-Behnken试验设计响应面 法优化了米根霉发酵木薯淀粉产L-乳酸的发酵工艺参数。 结果表明,最优发酵工艺参数为糖化液26%、蛋白胨6 g/L、酵母浸膏4 g/L、 麦芽粉10 g/L、KH2PO4 0.3 g/L、MgSO·4 7H2O 0.4 g/L、ZnSO4·7H2O 0.3 g/L、CaCO3 45 g/L、培养时间80 h、培养温度29 ℃、初始pH 5.5、接 种量6%。 该优化条件下,发酵液中L-乳酸的含量可达84.33 g/L,发酵液中葡萄糖对L-乳酸的转化率为71.34%,其光学纯度为75.62%, 比旋光度为+2.12。     

副干酪乳杆菌ZG19发酵烟草废水产L-乳酸的响应面优化

烟草废水中含有大量的可溶性糖、含氮化合物和矿物质等营养成分。为资源化利用烟草废水,以本实验室分离并保藏的一株产L-乳酸的副干酪乳杆菌（Lactobacillusparacasei）ZG19为发酵菌株,以烟草废水为发酵底料,L-乳酸产量为响应值,采用响应面法（RSM）优化发酵工艺。 通过Plackett-Burman试验筛选出对L-乳酸产量影响最显著的因素,进一步设计爬坡试验逼近最优区域,然后设计Box-Behnken响应面优化,分析并确定最佳发酵工艺。 结果表明,在发酵温度39 ℃、发酵时间30 h、菌种接种量10%条件下,得到 L-乳酸实际产量为15.16 g/L,与预测值（15.35 g/L）拟合度达到98.76%,L-乳酸产量显著提高。 因此,采用此方法得到的优化工艺合理而有效,具有实际应用价值。     

Optimization and scale-up of L-lactic acid fermentation by mutant strain Rhizopus sp. MK-96-1196 in airlift bioreactors

We determined the optimum culture conditions such as inoculum size, initial starch concentration, pH during the fermentation and aeration rate for L-lactic acid production by Rhizopus sp. MK-96-1196 in a 3-l airlift bioreactor. More than 90 g/l of L-lactic acid was produced from only partially enzymatically hydrolyzed corn starch with a production rate of 2.6 g/l/h and a product yield of 87% based on the starch consumed under the optimum conditions in the 3-l airlift bioreactor. Scale-up from the 3-l to a 100-l airlift bioreactor for L-lactic acid fermentation was carried out using V(s)(cm/s) as a scale-up criterion. The production rates and yields of L-lactic acid in both bioreactors appeared to be fairly well correlated with k(L)a (1/h).     

一株利用木糖产L-乳酸细菌的发酵特性研究

对高效木糖乳酸菌Lt的发酵特性进行了研究,同时对其发酵玉米芯L-乳酸进行了初步探讨。Lt菌株生长需要氧气,延迟期约为6h,16h以后进入稳定期,可利用木糖、葡萄糖、D-甘露糖、L-阿拉伯糖产L-乳酸,转化率为88.0%-98.7%。最适发酵温度为46℃,从46-52℃产酸量均较高。用6%的纯木糖发酵48h,L-乳酸产量为57.35g/L,转化率约为95%;用含6%还原糖的玉米芯磷酸水解液发酵48h,L-乳酸产量为31.30g/L。该菌株具有发酵温度高、适温范围宽、发酵时间短、转化率高、L-乳酸纯度高等优点。     

耐氨米根霉的分批补料发酵及发酵动力学初探

以氨水为中和剂,替代CaCO3,对耐氨米根霉R.oryzaeJS-N0-2-02进行15L自动发酵罐的分批和分批补料发酵及其发酵动力学的初步研究,结果表明,降低起始糖浓度,产酸期补糖可明显提高菌体L-乳酸比生产速率和耗糖产酸能力,提高L-乳酸产量和纯度,降低残糖。在发酵起始时添加1 g/L CaCO3能进一步提高补糖发酵的L-乳酸比生产速率,增强发酵后期菌体耗糖产酸能力,从而进一步提高L-乳酸产量和纯度,降低残糖。发酵结果:起始糖浓度为120 g/L,25h时补糖使最终发酵总糖浓度达137 g/L,发酵培养60 h,L-乳酸产量可达101.8 g/L,纯度97.3%,菌体耗糖转化率76%,比生产速率0.27 g/g.h,残糖降至3 g/L。     

产柚苷酶黑曲霉SL2K发酵条件优化

该研究以黑曲霉（Aspergillus niger）SL2K为研究对象,对其产柚苷酶的液态发酵条件进行优化。 通过单因素试验对碳源、氮 源、诱导物、接种量、初始pH值和培养时间进行考查,在单因素基础上,选取麸皮粉添加量、蛋白胨添加量、接种量、初始pH值4个因素 进行4水平正交试验优化。 结果表明,优化后的产酶发酵条件为麸皮粉添加量3%,蛋白胨添加量5%,接种量8%,初始pH值为5.0,鼠李 糖0.08%、KH2PO4 1 g/L,KCl 0.5 g/L,MgSO·4 7H2O 0.5 g/L,FeSO4 0.01 g/L,装液量为100 mL/250 mL,摇床转速180 r/min,培养温度28 ℃, 培养时间96 h。 在此优化条件下,柚苷酶活力为233.89 U/mL,是优化前的2.13倍。     

产L－乳酸的菌种的筛选及L－乳酸生产新途径

本实验以大豆秸秆酶解液为原料,发酵制备L- 乳酸。首先对产L- 乳酸的四株菌进行筛选,选出性能优良、糖利用率和乳酸产量均较高的干酪乳杆菌作为实验用菌种。然后对乳酸菌发酵大豆秸秆酶解液制备L- 乳酸的影响因素进行了研究,研究结果表明：干酪乳杆菌发酵的最佳接种量为10%,最适发酵温度为30℃,最佳pH 值为5.5;在发酵42h 时,大豆秸秆酶解液中残留糖浓度接近于零,此时,随底物浓度的增高,乳酸产量相应增加,并且酶解液浓度达到34.98g/L 时,乳酸生产没有受到抑制。     

CHU-R菌株产虾青素的发酵工艺研究

本文通过对获得的虾青素产生菌CHU-R进行最佳培养基、培养温度、接种量、初始pH等发酵工艺参数的优化研究,得到CHU-R菌产虾青素的最佳培养基为:6％蔗糖、1％糖蜜、0.5％硫酸铵、0.3％ Na2HPO4、0.05％ KI、0.05％ MgSO4·7H2O; 50 L罐最适发酵工艺条件为:温度28℃,通风量1:0.1～0.15(V/V/min)、初始转速120 r/min、罐压0.05～0.08 MPa、装液量30L、初始pH 6.8～7.0、接种量6％,发酵过程维持溶氧量在40～60％之间.由此得到的虾青素含量近达23 mg/g干菌体重.     

莓实假单胞菌产低温胆固醇酯酶发酵条件优化

为了提高莓实假单胞菌（Pseudomonas fragi）Q-06产低温胆固醇酯酶的能力,在单因素试验基础上,结合Plackett-Burman设计和最陡爬坡试验确定影响酶活的3个显著影响因子为葡萄糖添加量、摇瓶装液量、培养温度,确定最优发酵培养基配方为葡萄糖3.0%,酵母粉1.3%,（NH4）2SO4 0.010%,MgSO4·7H2O 0.050%,KH2PO4 0.400%,运用Design-Expert软件Box-Behnken试验设计对P. fragi Q-06发酵产生甾醇酯酶的培养基条件和发酵条件进行优化。结果表明,最适发酵条件为温度28 ℃,转速180 r/min,接种量4%,初始pH 7.5,装液量80 mL/250 mL。在此最佳条件下,甾醇酯酶酶活由优化前360.00 U/L提高至479.64 U/L,是优化前的1.33倍。海洋微生物发酵甾醇酯酶工业化生产有望创造可观的经济效益,具有潜在的研究开发价值。     

海洋低温BS041208菌株选育及发酵培养基的研究(Ⅱ)

建立了海洋低温蛋白酶菌株(Bacillussubtilis简写为BS041208)发酵最适pH值、温度、时间、接种量、通气量分别为5.0、14℃、48h、8%、150mL;在最适发酵条件下,BS041208菌株50L发酵罐中低温蛋白酶活性为1371.8U/mg。