树突状细胞瘤苗诱导的抗神经胶质瘤作用体外实验研究

目的 :研究负载自体神经胶质瘤抗原的树突状细胞 (DCs)瘤苗在体外诱导的特异性细胞毒性淋巴细胞 (CTL)对神经胶质瘤细胞的杀伤效应。方法 :以组合酶消化法从新鲜神经胶质瘤手术标本中获取神经胶质瘤细胞 ,冻融制备神经胶质瘤抗原。GM -CSF、IL -4体外诱导外周血单个核细胞 (PBMC)获得DCs并负载神经胶质瘤抗原 ,继而以其刺激自体T淋巴细胞制备神经胶质瘤抗原特异性CTL ;用CytoTox96TM检测CTL对患自身神经胶质瘤细胞体外杀伤效应。结果 :负载神经胶质瘤抗原DCs诱导的特异性CTL对患者自身神经胶质瘤细胞的杀伤率达88 17 % ,显著高于LAK细胞的杀伤率 (P<0 05)。且其对同种不同分化类型的神经胶质瘤细胞株 (P<0 01)。结论 :负载神经胶质瘤抗原的DCs体外可诱导出高效而特异的抗神经胶质瘤效应 ,提示以DCs为中心的肿瘤生物治疗作用可望提高神经胶质瘤综合治疗水平     

基因修饰的树突状细胞体外免疫功能的初步研究

目的 制备转染乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因、人外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞(DC)疫苗,观察HBcAg的表达效率,检测其在体外诱导的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTL)对HepG2.2.15细胞的杀伤效应.方法 体外诱导并培养DC;将HBcAg基因导入...     

树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞疗法对心脏的影响

目的探讨树突状细胞/细胞因子诱导的杀伤细胞（DC/CIK）疗法对心脏的影响。方法回顾性分析152例接受DC/CIK细胞治疗的癌症患者的心电图资料。结果 152例患者中有15例出现心电图异常,发生率为9.8%,其中窦性心动过缓3例,窦性心动过速6例,心肌缺血6例。结论 DC/CIK细胞治疗对癌症患者心脏有一定影响。但是,如果给予高度重视,早期发现,早期处理,可避免严重后果。     

大黄素对体外诱导人血来源树突状细胞的影响

目的探讨大黄素对体外诱导培养的人血来源树突细胞(DC)的影响。方法分离健康人外周血单核细胞,经培养后获得未成熟DC(iDC),重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF,106IU.L-1)和重组人白细胞介素4(rhIL-4,8×105IU.L-1)诱导获得成熟DC(mDC)。实验分为iDC组、mDC组和大黄素组,mDC组于d 5加入脂多糖(LPS,1 mg.L-1)刺激,大黄素组采用mDC在d 5经LPS刺激后于d 7加入大黄素(100 mg.L-1)共培养2 d。用倒置显微镜和电镜观察DC细胞形态,用流式细胞仪检测DC表面共刺激分子的表达水平。结果经rhGM-CSF、rhIL-4诱导和LPS刺激,培养9 d后可获得表面有丰富分叉状胞浆突起的毛刺状mDC。大黄素组DC表面突起短而少,呈iDC形态。大黄素组CD80、CD83和CD86表达率分别为(13.4±6.6)%、(9.3±2.2)%和(84.2±6.3)%,低于mDC组[分别为(39.3±8.6)%、(30.7±5.6)%和(95.4±3.2)%,P<0.01];大黄素组CD14表达率为(8.4±2.8)%显著高于mDC组的(3.7±2.3)%(P<0.01)。大黄素组HLA-DR及CD11c表达与mDC组比较无显著差异(P>0.05)。结论大黄素能干扰DC表面突起的形成和表面共刺激分子的表达。     

基泰体外对慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能影响的初步研究

目的:探讨基泰对慢性乙型肝炎(简称慢乙肝)患者(chronic hepatitis B,CHB)树突状细胞(dentritic cell,DC)生物学性状的影响.方法:分离慢乙肝患者外周血单核细胞,在含GM-CSF/IL-4及不同浓度的基泰培养条件下制备DC.观察DC形态学变化,流式细胞仪(FCM)测其细胞表型分子CD1a,CD83,CD80及HLA-DR的表达,MTT法测定DC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力.结果:与对照组相比,实验组倒置显微镜观察显示出典型的DC形态.基泰(100 μg/mL)处理组的DC膜表面分子CD1a及CD80表达均增高(P<0.05);刺激同种异体淋巴细胞增殖能力(SI)增强(P<0.05).结论:基泰一定程度上可改善CHB的DC免疫学活性.     

树突状细胞诱导免疫效应细胞对胰腺癌细胞PC3凋亡和抑制的实验研究

目的 观察人树突状细胞(Dendritic cells，DC)体外扩增及其诱导免疫效应细胞对胰腺癌细胞系(PC3)凋亡和抑制作用。方法 用淋巴细胞分离液分离抗凝新鲜全血以获得单核细胞(Peripheral blood mononudear cells，PBMC)，用贴壁法获取DC和去DC的单核细胞(即免疫效应细胞)，并分别用人粒／巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)、人白介素4(IL-4)、人肿瘤坏死因子(TNF—α)、PC3肿瘤相关抗原(PC3TAA)和人白介素2(IL-2)培养正常人或胰腺癌病人DC和免疫效应细胞，5—6天后将DC和免疫效应细胞混合培养1—2天并计数细胞。观察DC生长状况，检测DC表型(CD1a、CD80、CD83、CD86)。用乳酸脱氢酶法(1actate dehydrogenase)和MTT法检测DC诱导免疫效应细胞对PC3的抑制作用，TdT法检测培养上清液对PC3细胞的凋亡作用。结果 体外多种细胞因子和肿瘤相关抗原能有效引起DC增殖，并高表达CD80、CD83、CD86；体外实验中，酶法：最大抑制(杀伤)效率为62．4％，MTT法：最大抑制(杀伤)效率为98．1％；DC培养上清液和DC混合免疫效应细胞培养上清液均能有效地引起PC3凋亡。结论 DC在抗胰腺肿瘤中有重要作用。     

多抗甲素对脐血树突状细胞体外扩增、成熟的影响

目的观察多抗甲素(polyactin A,PA)对脐血树突状细胞(dendritic cell,DC)体外扩增、成熟的影响。方法分别用加有PA、GM-CSF+TNF-α+IL-4(GTI)及GTI+PA(GTIP)的RPMI-1640培养液体外诱导培养脐血单核细胞,培养d7,Elivision免疫组化方法检测各组细胞CD1a、CD83、HLA-DR、CD34抗原表达情况,透射电镜观察细胞形态。结果PA组、GTI组及GTIP组均有一定数量的典型DC,电镜观察该细胞表面有大量粗细不等的树枝状突起;PA组CD1a+、CD83+细胞比例分别达19·63%±3·61%、14·52%±5·79%,高于对照组(即单纯培养液组);GTIP组CD1a+细胞比例升高最明显,高于GTI组。结论PA不仅能促进脐血DC体外扩增、成熟,还能协同GM-CSF、TNF-α、IL-4促进DC生成,PA是一种实用的DC活化剂。     

树突状细胞与IL-2联合治疗大肠癌的体外增殖实验研究

目的探索把两种肿瘤生物治疗方法即DC治疗和细胞因子治疗有效结合起来的可行性,为肿瘤的生物治疗开辟更有效的途径。方法用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法,在DC：T为1∶100,1∶330,1∶1000三种比例,分三组检测cpm值,即：抗原冲击的DC组、抗原冲击的DC加白介素-2组和抗原未冲击的DC组。结果3种梯度抗原冲击的DC组与未冲击组,加入IL-2组与未加入组相比均有显著性的差别（P〈0.05）。结论抗原冲击的DC能明显的刺激荷瘤鼠脾T细胞增殖,加入IL-2能进一步提高T细胞增殖能力。     

RetroNectin诱导的细胞因子诱导的杀伤细胞联合树突状细胞对肝癌细胞株杀伤的体外研究

<正>细胞过继免疫治疗是肿瘤综合治疗的重要组成部分,树突状细胞(dendritic cell,DC)是目前发现的功能最强的抗原递呈细胞,可有效激发T细胞应答,从而引发一系列的免疫应答。细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killercells,CIK)由斯坦福大学Schmidt Wolf首次发现,具有增殖快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、且几乎无毒副作用等优点,     

鼻咽癌PF方案时辰化疗的临床研究

目的对比研究鼻咽癌放疗联合PF方案静脉化疗之时辰化疗与常规化疗,观察其疗效、临床毒副反应的情况。方法所有病例均行鼻咽癌放疗,辅以PF方案静脉化疗。静脉化疗分为时辰化疗与常规化疗2组,统计最常见毒副反应发生率,治疗后复查以评价肿瘤控制情况。结果时辰化疗对最常见毒副反应均有不同程度的减轻,而有效率则有一定程度的提高,两组有显著性差异。结论应用时辰化疗,可以在两方面受益,一是减少副反应,提高生活质量;二是可以提高治疗效果。     

靶向NBS1的RNA干扰对鼻咽癌CNE-2细胞放射增敏作用的研究

目的:研究靶向NBS1的RNA干扰对鼻咽癌CNE-2细胞的放射增敏作用。方法:靶向NBS1的小干扰RNA转染鼻咽癌CNE-2细胞48小时后,4Gy剂量X射线照射。照射后24小时,流式细胞仪分析鼻咽癌细胞凋亡率。结果:X线照射+RNAi-NBS1组的细胞凋亡率显著高于单独X线照射组和X线照射+RNAi-阴性对照组(P<0.01)。结论:靶向NBS1的RNA干扰在鼻咽癌CNE-2细胞中有显著的放射增敏作用,诱导细胞凋亡是其放射增敏的重要机制之一。     

鼻咽癌外周血单个核细胞Fas/FasL的表达与预后的相关性研究

目的:研究凋亡相关基因Fas/FasL在鼻咽癌患者诱导化疗前后外周血单个核细胞中的表达,探讨其与鼻咽癌预后的相关性。方法:采用流式细胞仪对2002年收治的38例鼻咽癌诱导化疗前后及15例健康对照组外周血单个核细胞中Fas/FasL的表达进行检测,并结合临床资料进行分析。结果:5a生存率为65.8%(25/38),死亡13例。鼻咽癌患者外周血单个核细胞中Fas/FasL的表达明显高于健康对照组(P<0.05);Ⅲ+Ⅳa期的表达明显高于Ⅱ期(P<0.05)。化疗后与化疗前比较,Fas表达明显增高(P<0.05),FasL表达稍增高(P>0.05)。化疗前死亡组Fas/FasL的表达明显高于生存组(P<0.05);化疗后死亡组Fas的表达明显高于生存组(P<0.05),FasL的表达明显低于生存组(P<0.05)。生存组化疗后Fas/FasL明显高于化疗前(P<0.01,P<0.05)。死亡组化疗后Fas明显高于化疗前(P<0.01),FasL稍低于化疗前(P>0.05)。结论:外周血单个核细胞Fas/FasL的表达及诱导化疗前后的改变与鼻咽癌分期、预后有关,在鼻咽癌患者中对其进行检测可能具有重要临床意义。     

鼻咽癌患者精确放疗的新进展

介绍鼻咽癌的致病原因及临床症状表现,致病原因包括遗传因素、地理因素和病毒感染等,临床症状有头痛、鼻塞、涕中带血、耳鸣、听力下降、复视等;然后介绍了鼻咽癌患者放疗的早期及近代发展,包括二维放疗、三维立体适形放疗和精确放疗;最后介绍近年来新兴的精确放疗在治疗鼻咽癌方面的一些新进展以及所取得成就。     

局部区域晚期鼻咽癌同期放化疗联合辅助化疗不良反应的临床分析

目的探讨局部区域晚期鼻咽癌同期放化疗联合或不联合辅助化疗的治疗毒性及治疗顺应性。方法选取中山大学附属第五医院放疗科2007年6月至2009年12月44例鼻咽非角化型癌（WHO病理分型）,第六版AJCC分期Ⅲ-IVb期（T3-4N1或N2-3M0）的患者入组。将患者随机分为同期放化疗组（对照组）和同期放化疗联合辅助化疗组（试验组）。两组均采用根治性常规分割放疗,放疗期间均同时给予顺铂40mg/m^2,d1,1次/周,连续7次。试验组患者放疗结束后1个月开始辅助化疗,采用顺铂80mg/m^2,d1,5-氟尿嘧啶800mg/m^2d1-5,每四周一个疗程,共三个疗程。结果采用意向性分析,比较两组治疗毒性及顺应性。结果两组病例的性别、年龄、一般状况评分、分期方法及临床分期等均具有可比性。两组36.4%（16/44）患者完成7次同期化疗,81.8%（36/44）患者完成6次同期化疗,90.9%（40/44）患者完成5次同期化疗。试验组72.7%（16/22）患者完成3个疗程辅助化疗。全组放疗期间3级以上急性毒性反应为79.5%（35/44）。辅助化疗期间试验组89.4%（17/19）患者发生3级以上毒性反应。结论局部区域晚期鼻咽癌患者使用同期放化疗联合辅助化疗是NCCN推荐的标准治疗。本研究试验组比对照组治疗毒性大,顺应性差,建议对局部区域晚期鼻咽癌患者进行分层治疗,根据年龄、临床分期、一般状况评分进行分层,改善治疗顺应性。     

急性心肌梗死患者治疗前后外周血树突状细胞亚群变化

目的:探讨急性心肌梗死患者治疗前后外周血树突状细胞亚群数量及比例变化情况。方法:入选病例为我院从2006年1月～2006年12月共20例急性心肌梗死患者;分别留取入院即刻及治疗1周后上述患者外周血标本。借助四色荧光标记技术对外周血髓源性树突状细胞(myeloid DCs,mDCs)和浆细胞样树突状细胞(plasmacytoid dendritic cell,pDC)占DCs细胞比例进行流式细胞术测定。结果:治疗1周后,患者外周血mDCs和pDC占PBMC比例分别为(15.02±7.3)‰、(0.82±0.65)‰,mDC比例较治疗前((4.97±2.7)‰)有显著性差异(P<0.05)。结论:急性心肌梗死患者经治疗1周后,外周血mDC亚群比例和数量明显升高,提示mDC亚群比例和数量的变化与冠心病病情发展密切相关。     

环孢素在体外对再生障碍性贫血的干预作用

目的：观察环孢素（CsA）在体外对再生障碍性贫血（AA）的粒／巨噬系祖细胞（CFU-GM）和红系祖细胞（CFU-E）的作用，为临床应用提供实验依据。方法：采用RPM11640琼脂和MeCoy＇s5A甲基纤维素半固体平皿法，观察了CsA在体外对54例AA患者CFU-GM和CFU-E的影响，并以30例正常人作对照。结果：①AA患者的CFU-GM、CFU-E较对照组明显减低（P〈0．01）。②CsA能明显促进AA患者CFU-GM、CFU-E的增殖，这种促增殖作用随CsA剂量增加而增加。③重型AA患者CFU-GM和CFU-E对CsA的有效率较慢性AA高。④CFU—GM和CFU—E值中、重度减低的AA患者对CsA的有效率较无CFU—GM和CFU—E生长的AA患者高。结论：CsA在体外可促进部分AA患者CFU—GM、CFU—E的增殖，故可作为治疗AA的一种有效方法。     

鼻咽癌患者外周血T淋巴细胞群的临床意义

目的分析比较鼻咽癌患者经过放疗、化疗、免疫综合治疗前、后鼻咽癌患者细胞的免疫功能。方法应用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法(APAAP)对44例患者外周血T淋巴细胞亚群进行检测,并将治疗前、后复发-残留-转移者与无复发-残留-转移者组的检测结果进行比较分析。结果鼻咽癌患者治疗后复发-残留-转移组CD4 /CD8 较无复发-残留-转移组明显降低(P<0.05),而鼻咽癌患者治疗前、后以及治疗前复发-残留-转移组CD4 /CD8 与无复发-残留-转移组的CD3 、CD4 、CD8 、CD4 /CD8 无明显变化(P>0.05)。结论鼻咽癌患者治疗后的CD4 /CD8 可预测其复发、残留或转移,免疫治疗对于鼻咽癌患者有积极意义。     

环孢素在体外对再生障碍性贫血的干预作用

目的:观察环孢素(CsA)在体外对再生障碍性贫血(AA)的粒/巨噬系祖细胞(CFU-GM)和红系祖细胞(CFU-E)的作用,为临床应用提供实验依据.方法:采用RPMI1640琼脂和McCoy's5A甲基纤维素半固体平皿法,观察了CsA在体外对54例AA患者CFU-GM和CFU-E的影响,并以30例正常人作对照.结果:①AA患者的CFU-GM、CFU-E较对照组明显减低(P＜0.01).②CsA能明显促进AA患者CFU-GM、CFU-E的增殖,这种促增殖作用随CsA剂量增加而增加.③重型AA患者CFU-GM和CFU-E对CsA的有效率较慢性AA高.④CFU-GM和CFU-E值中、重度减低的AA患者对CsA的有效率较无CFU-GM和CFU-E生长的AA患者高.结论:CsA在体外可促进部分AA患者CFU-GM、CFU-E的增殖,故可作为治疗AA的一种有效方法.