成果产品简讯

我院微生物研究所,在进行耕牛锥虫病诊断研究的同时,采用DEAE纤维素层析柱分离锥虫的新技术,从人工感染伊氏锥虫动物的血液内,获得了纯净的锥虫(无红细胞、白细胞和血小板).用纯净锥虫浸出液制造的间接血凝诊断抗原,效价很高,以四川生物制品所生产的标准锥虫阳性血清做试验,最高效价可达1:81,920—327,680;自然感染牛血清试验,最高效价可达1:20,480.三批阳性牛的检出率为94.0—96.57%.为解决耕牛现场查病需要,我室现在已少量试产耕牛锥虫病间接血凝诊断抗原(抗原与抗原对照液均为5毫升装),提供各地试用.此外,我们还将纯净锥虫速冻成冻干粉(20、50毫克安瓿装),每毫克冻干粉     

静脉注射免疫丙种球蛋白柱层析分离的研究

用凝胶渗透谱色法(GPC)检测了柱层析分离纯化后所得的免疫丙种球蛋白(IgG)组分.结果表明,使用DEAE 阴离子交换纤维素-葡聚糖凝胶A-50柱层析法能从人血浆蛋白中分离出不含聚集体的纯IgG 单体.对肌注IgG 制剂使用葡聚糖凝胶Sephacryl S-200凝胶过滤法能除去IgG 中的聚集体,但却不能分离出存在于其中的小量血清白蛋白;但使用DEAE阴离子交换纤维素柱层析法效果却恰好相反.     

黑曲霉(UV—11)葡葡糖淀粉酶的分离纯化和酶的多型性性质的初步研究

以黑曲霉UV—11的工业酶制剂为材料,分离纯化葡萄糖淀粉酶。蒸馏水抽提,硫酸铵盐析,凝胶过滤脱盐和DEAE一纤维素DE_(52)柱层析,得到4个部分(峰Ⅰ—Ⅳ),4个部份提纯0.92—1.84倍,酶活收率为26.6％。黑曲霉UV—11葡萄糖淀粉酶具有多型性,经聚丙烯酰胺凝胶水平板电泳共分出5条区带。粗酶和纯化的酶经电泳染色结果表明黑曲霉UV—11葡萄糖淀粉酶为一种糖蛋白。     

鄱阳湖滨湖水牛锥虫病的研究——二、间接血凝试验抗原的制备及其应用

本文介绍以DEAE纤维素层析法从感染动物的血液内获得纯净的锥虫后,用来制备间接血凝抗原,先后试制18批,其效价均达1:2,560—327,680.抗原低温保存,有效期可达半年以上.现场对比试验表明,阳性率可达96.50%,阴性符合率为96.83%.1984年在江西、云南、湖南等省大面积试用,并用血纸代替血清做间凝试验,检查耕牛近30万头,使大批病斗得到确诊和及时治疗,收到明显的经济效益.     

废弃芦蒿秸秆多组分分离提取工艺设计及优化

芦蒿秸秆是一种农业废弃物,因其富含纤维素、半纤维素、木质素和其他成分而具有巨大的资源潜力。以芦蒿秸秆为原料,系统研究了芦蒿秸秆中的黄酮类物质和木质纤维素三组分的分离方法。首先采用乙醇溶液回收黄酮组分;然后采用微波乙醇法对芦蒿秸秆进行脱木质素预处理,同时使用Na OH溶液溶解并结合醇沉过程回收半纤维素;最后使用酸性亚氯酸钠溶液提纯纤维素。在最优条件下,黄酮提取率达到1. 61%;木质素、半纤维素、纤维素的回收率分别达到59. 34%、72. 94%、80. 64%;纤维素经两次提纯处理后纯度高达93. 8%。该分离方法为芦蒿秸秆的综合利用提供了一条可行的路线。     

用液膜技术提取和浓缩稀土的研究

含有稀土矿石过去采用酸法或碱法分解,其浸出液经草酸或其它沉淀剂沉淀,然后转化为稀土化合物(如稀土氧化物、氯化物、硝酸盐),进一步的提纯则采用离子交换或溶剂萃取方法。1958年以来,J.W.W.WINCHESTER用P_(204)(磷酸二(2—乙基己基)脂)及氧化铝粉为载体的色层柱分离稀土,1961年FLDELIS.L用T.B.P——硅藻土固定相,硝酸系统分离重稀土,1962年E.CERROI用HDEHP——纤维素柱、盐酸系统分离稀土。六     

血细胞分离单采术在血液病护理中的应用分析

文章探讨血细胞分离单采术在血液病护理中的应用效果.选择2019年3月—2020年6月接收的50例血液成分单采治疗患者,分析运用血细胞分离机,做好血细胞分离单采术、白细胞分离单采术、血小板单采术,分析血常规指标在该采集前后的变化情况.在RBC、Hbg、WBC、PLT等血常规指标上,各指标在采集后的变化程度明显,对比有统计...     

皖南山区尖吻蝮蛇毒新出血毒素的纯化及其性质的初步研究

用DEAE·Sephadex A-50,Sephadex G-75,DE_(52)纤维素和Sephadex G-100柱层析,从尖吻蝮蛇毒中纯化出一新的出血毒素(AaH—IV),是糖蛋白,有酪蛋白水解酶和纤溶酶活性,但无精氨酸酯酶等的一些酶活性.其分子量51,000,pI 是5.4.     

真菌多糖的研究——1、亚香棒虫草水溶性多糖的分离和部分性质

本文报道安徽产亚香棒虫草Cordyceps hawesii Gray)水溶性多糖分离、纯化及单糖组成和部分性质。DEAE—纤维素分级洗脱和Sepharose6B柱层析、得到两个级份精糖Ch—1和Ch—2、凝胶过滤和醋酸纤维薄膜电泳测定,证明有良好的均一性。纸层析和硅胶薄板层析,表明他们均由甘露糖和半乳糖组成。红外光谱分析和高碘酸氧化反应表明,这两种精糖可能是以(1→4)键为主链,含有(1←3)和(1→2)键,带有(1→6)键分枝的β—半乳甘露聚糖。     

小远志总多糖的微波提取及抗肿瘤活性研究

将微波技术运用于水提醇沉法提取小远志多糖。脱蛋白后得到总多糖，得率为3．35％．总多糖经二乙氨基乙基纤维素(DEAE—52)柱层析。分离得到两种均一组分．对总多糖进行了抗S180癌细胞活性研究。结果表明小远志总多糖对S180癌细胞具有明显的抑制作用。     

马勃多糖的研究——1.分离纯化及其性质

马勃用热水提取,从提取物中除去蛋白质及核酸便可得马勃多糖粗品.此粗品与 CTAB(溴代十六烷基三甲胺)络合,再经 DEAE—纤维素和 Sephadex G—75柱层析可得白色粉末—马勃多糖精品.体外实验表明马勃多糖对移植内瘤 S—180细胞具有明显的抑制作用.     

猪末端转脱氧核苷酸酶的分离纯化

末端转脱氧核苷酸酶催化脱氧垓苷三磷酸连接到单链多聚脱氧核苷酸的3′—OH末端。猪胸腺匀浆抽提液,经磷酸纤维素吸附层析,硫酸铵分级沉淀,DEAE—纤维素负吸附,葡聚糖凝胶G100过滤和两次羟基磷灰石柱层析,分离后得到该酶,纯化倍数达2736倍。葡聚糖凝胶G100过滤分离出三个活力峰,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示其分子量分别为60000,53000和32000道尔顿,其中53000组分比活最高,达每毫克蛋白3135活力单位。     

鼠棒状杆菌的分离与鉴定

<正> 鼠棒状杆菌(Corynebacterium murium)也叫科屈氏棒状杆菌(Corynebacterium kutscheri),于1894年由Kutscher首先分离到,专性寄生鼠类,引起大白鼠和小白鼠的伪结核病。德国、英国美国、日本以及澳大利亚都曾报道过本病,国内尚未见报告。鼠棒状杆菌的感染多呈隐性,隐性感染的鼠除影响生长外,常在各种因素,如:X—射线照射、泛酸缺乏、可的     

猪丹毒杆菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)有效抗原的分离纯化及其免疫学性质

一、用0。05M、PH7.5磷酸缓冲液抽提 C43—5猪丹毒菌株丙酮粉,用 DEAE—纤维素柱层析分离抽提液,得到 A、B 两个峰。二、将 A、B 两峰的冻干粉用去离子水配成一定浓度后,分别同马抗猪丹毒高度免疫血清起反应,结果均有沉淀线出现,表明 A、B 两峰所包含的组分具有血清学活性。但用小白鼠作保护性试验,组分 A 无免疫原性,对小白鼠的保护率为零,面组分 B 有免疫原性,对小白鼠的保护率为100%。三、用 Sephadex G—100层析组分 B,在层离曲线上出现Ⅰ、Ⅱ两峰,两峰所包含的组分具有血清学活性。用主动免疫法对小白鼠作免疫原性检定,结果峰Ⅰ组分的保护率为90%,峰Ⅱ组分的保护率为零。四、用圆盘电泳分析,峰Ⅰ呈三条区带,峰Ⅱ呈两条区带。峰Ⅱ两条区带的电泳迁移率与峰Ⅰ三条区带中的两条相同。峰Ⅰ中有一条迁率较慢的为峰Ⅱ所没有。五、实验结果证明固体培养的 C43—5猪丹毒杆菌的有效抗原存在于 SephadexG—200分子筛层析的Ⅰ峰,即圆盘电泳中泳动较慢的大分子组分.其分子量大于200,000。     

玉米芯水热预处理对纤维素结构的影响

针对预处理成本高、会产生二次污染、后续提纯除杂步骤复杂等问题,在水热预处理条件下添加干冰作为辅助介质,研究了操作条件(温度、处理时间和干冰添加量)对玉米芯中纤维素的解聚行为以及木质素脱除率的影响关系,并采用傅里叶转换红外线光谱分析仪(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)和X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)进行分析,得到了纤维素结构在预处理过程中的变化规律,对优化预处理工艺有重要的理论指导意义.研究结果表明:当温度超过160?C时纤维素无定型区域的链结构开始断裂;当温度升高到180?C时纤维素聚合度(degree of polymerization,DP)急剧下降,同时木质素去除率达到最高(31.6%).FTIR分析结果表明:与预处理前相比,预处理后纤维素中的C—O—C吸收峰减弱,说明纤维素的糖苷键被破坏,纤维素链发生了断裂.XRD分析结果表明:在预处理过程中玉米芯中纤维素的结晶度增大,说明在预处理过程中纤维素的无定型部分被脱除,同时部分纤维素Ⅰ转化为纤维素Ⅱ.     

绞股蓝多糖脱蛋白工艺及相对分子质量的测定

采用Sevag法、木瓜蛋白酶-Sevag法、TCA-Sevag法对绞股蓝粗多糖脱蛋白工艺进行研究.通过DEAE—52纤维素柱层析和葡聚糖凝胶G—200柱层析对粗多糖进行分离纯化,采用高效液相色谱分析法对精制多糖GPM—21的相对分子质量进行测定分析.结果表明:木瓜蛋白酶-Sevag法效果最佳,蛋白脱除率高且多糖损失量小,累计蛋白脱除率可达63.08%,多糖保留率为77.34%.液相渗透色谱法测定GPM—21的相对分子质量为200 576.     

地衣芽孢杆菌碱性蛋白酶分离纯化研究

对产白地表茅孢杆菌(B.licheniformis)的碱性蛋白酶通过乙醇沉淀、盐析、DEAE阴离子交换层析,凝胶层析4步纯化.以酶比活力为指标,对碱性蛋白酶分离纯化条件进行了优化.结果发现:提纯酶的比活力达62098U/mg,纯化倍数为23.7,活性回收率为15.7%.     

芥篮叶超氧化物歧化酶的分离提纯

本文建立硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100层析,DEAE 纤维素(DE-52)拄层析方法从芥篮(B.alboglabra Baileg)叶肉中提纯超氧化物歧化酶,纯化倍数45.2,比活力97.3u/mg-pr(肾上腺素测定).南 DEAE-DE52层折获得的 SOD 活性部分,按 Weber与 Osborn 法作 SDS-PAGE,呈现单一斑带,分子量为13,000.此酶对热稳定性不高,70℃保温90min,活力全部丧失.纯酶液的最大吸收波长为204nm,芥篮叶中有四种 SOD同工酶.     

东海原甲藻钙调蛋白的分离纯化及鉴定

以东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense Lu)为材料,经热变性、离心处理,上清液依次经DEAE纤维素阴离子交换层析和苯基-Sepharose CL- 4B疏水层析分离纯化钙调蛋白(CaM).SDS-PAGE和Western blot检测结果显示:东海原甲藻中CaM的相对分子质量为16 ku.采用该实验方法首次有效地从海洋浮游植物东海原甲藻中分离纯化出钙调蛋白.     

文昌鱼的酶学研究——Ⅰ.偏碱性蛋白酶的分离提纯及其动力学的初步研究

通过硫酸铵分级分离,DEAE—交换纤维素柱层析及SephadexG-200凝胶过泸等方法,从厦门文昌鱼中部份提纯一种偏碱性蛋白酶,并对该酶的某些性质作了初步的研究.该酶作用于酪蛋白的最适pH为7.0,最适温度30℃,测得其米代常数(K_M)值为3.08×10~(-4)M,而pH不影响其K_M值。对几种蛋白质的水解速度不同,其中对血红红蛋白的水解速度最快。某些化学试剂如半胱氨酸及谷胱甘肽(都为10~(-3)M)能增进酶活力,而P-CMB及碘代乙酰胺(都为10~(-3)M)则比较明显的降低酶活力。