针刺肾俞穴对SAMP6小鼠股骨生物力学性能的影响

目的 探讨针刺肾俞穴治疗骨质疏松的机制。方法 采用放免法测定快速老化小鼠P6(senescence accelerated mouse prone 6,SAMP6)及其正常对照抗快速老化小鼠R1(senescence accelerated mouse resistant 1,SAMR1)血清睾酮（T）、骨钙素（BGP）水平;三点弯曲试验法测定其股骨生物力学性能,观察针刺对SAMP6小鼠股骨力学性能、骨矿含量等的影响。结果 与SAMR1 〔T（20.91±3.41）nmol/L, BGP(6.71±2.07) μg/L 〕比较,SAMP6小鼠血清T 〔(11.09±1.48) nmol/L〕水平下降（P<0.01）,BGP 〔（12.29±2.29）μg/L〕水平上升（P<0.01）;股骨弯曲强度下降,脆性增加。针刺肾俞穴后,上述指标均有不同程度改善,并趋于正常,血清T（15.05±2.63）nmol/L、BGP（8.88±1.85）μg/L,与SAMP6组比较,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。 结论 针刺肾俞穴可有效阻止SAMP6小鼠骨丢失,增强其骨强度。其治疗作用部分是通过促进性激素分泌,改善骨代谢,降低骨转换率,增加骨量等达到的。     

针刺对快速老化骨质疏松模型小鼠SAMP6骨生物力学的影响

目的:探讨针刺对骨质疏松的防治作用。方法:SAMP6小鼠随机分为针刺组、非穴组及SAMP6对照组;并设正常老化小鼠SAMR1作对照。观察针刺对股骨最大载荷、弹性载荷、最大挠度和弹性挠度等参数的影响。结果:经针刺治疗后,股骨的最大载荷较P6对照组显著升高(P<0.05),最大载荷、弹性载荷和最大挠度均明显高于非穴组(P<0.05或P<0.01)。结论:针刺在一定程度上能改善SAMP6小鼠的骨生物力学特性,是防治骨质疏松症的有效方法之一。     

通淋汤对尿毒症患者血管钙化因子BMP-2,OPG表达的影响

目的探究通淋汤对尿毒症患者血管钙化因子骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和骨保护蛋白(OPG)表达的影响。方法将80例尿毒症患者随机分为对照组与观察组,每组40例。对照组给予血液透析等常规治疗,观察组在对照组基础上给予通淋汤口服治疗,观察2组治疗效果、用药安全性及治疗前后血清BMP-2、OPG水平及营养指标变化。结果治疗组显效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组血清BMP-2、OPG水平均显著降低(P均<0.05),且观察组水平显著低于对照组(P均<0.05);2组前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白、总胆固醇及血红蛋白水平均显著升高(P均<0.05),且观察组上述指标水平均显著高于对照组(P均<0.05)。2组均未发现明显不良反应。结论通淋汤治疗尿毒症患者有利于抑制血管钙化因子BMP-2、OPG表达,改善患者营养不良状况,且安全性好,值得推广应用。     

补肾壮骨通络中药联合碳酸钙D3治疗骨质疏松性骨折疗效及对ALP、BGP、BMP-2的影响

目的观察补肾壮骨通络中药联合碳酸钙D3治疗骨质疏松性骨折疗效及对碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)的影响。方法将150例骨质疏松性骨折患者随机分为2组,对照组75例给予碳酸钙D3治疗,观察组70例在此基础上给予补肾壮骨通络中药治疗,统计2组近期疗效,观察2组治疗前后骨痂生长评分、VAS评分、股骨颈骨密度、ALP、BGP及BMP-2水平变化情况。结果观察组近期总有效率显著高于对照组(P0.05);2组治疗后骨痂量、骨痂密度、骨痂边缘及断端边缘骨痂生长评分均显著高于治疗前(P均0.05),且观察组各项评分均显著高于对照组(P均0.05);2组治疗4周、8周及12周后VAS评分均显著低于治疗前(P均0.05),且观察组治疗后各时间点VAS评分均显著低于对照组(P均0.05);2组治疗后股骨颈骨密度及ALP、BGP、BMP-2水平均显著改善(P均0.05),且观察组各项指标改善情况均显著优于对照组(P均0.05)。结论补肾壮骨通络中药联合碳酸钙D3治疗骨质疏松性骨折可促进骨折愈合,降低疼痛程度,提高骨密度,调节ALP、BGP及BMP-2水平,值得推广应用。     

SAMP6鼠主动脉OPG、BMP-2表达的意义及针刺影响

目的探讨针刺干预快速老化骨质疏松小鼠SAMP6主动脉钙化的分子机制.方法采用HE和von Kossa 染色法观察各组动物主动脉钙化情况;Westem Blot方法测定主动脉护骨素(OPG)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达.结果SAMP6鼠主动脉中膜存在轻微钙化现象.针刺可改善主动脉结构,并促进局部骨代谢因子OPG表达上调,BMP-2表达下调.结论SAMP6鼠发生血管钙化与OPG和BMP-2等表达异常有关.针刺可能通过保护血管壁细胞,良性调节主动脉中局部骨代谢因子的表达而抑制钙盐在主动脉的沉积.     

针刺对快速老化小鼠SAMP10氧化应激相关基因表达的影响

【目的】探讨快速老化小鼠SAMP10脑衰老的机制，揭示“益气调血、扶本培元”针法改善SAMP10脑衰老症状的部分机制。【方法】应用cDNA阵列技术(cDNA Array)，观察快速老化小鼠SAMP10与正常老化小鼠SAMR1前脑588个基因表达的差异，同时观察“益气调血、扶本培元”针法对上述基因表达的影响。【结果】SAMP10与SAMR1相比，谷胱甘肽S转移酶、热休克蛋白86、成纤维细胞生长因子8、NF-kappa-B转录因子p65亚单位4个与氧化应激反应有关的基因表达上调，而针刺可使这些基因的表达下调。【结论】SAMP10的快速老化可能与其脑内的氧化应激水平升高有关，针刺可改善氧化应激水平进而达到延缓脑衰老的作用。     

益骨胶囊含药血清对晚期糖基化终末产物作用下成骨细胞分化及BMP-2和OPG的影响

目的研究益骨胶囊含药血清对晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)作用下成骨细胞分化活性及对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein2,BMP-2)和骨保护蛋白(osteopro-tegerin,OPG)的影响,探讨益骨胶囊防治骨质疏松(osteoporosis,OP)的作用机制。方法选取10月龄SD雌性大鼠40只,随机分为益骨胶囊高、中、低剂量组及空白组,每组10只。运用大鼠灌胃的方法制备含药血清和对照血清。二次酶消化法分离培养新生SD大鼠颅骨成骨细胞,传代后分为空白对照组、模型组、中药低、中、高剂量组。模型组用AGEs(400mg/L)处理,中药低、中、高剂量组分别用AGEs(400mg/L)和低、中、高剂量含药血清共同处理,分别用pNPP、ELISA、茜素红染色法检测成骨细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,ColⅠ)、骨钙素(bone gla protein,BGP)以及矿化结节,RT-PCR测定成骨细胞中BMP-2、OPG mRNA的表达,ELISA法检测BMP-2、OPG蛋白的表达量。结果原代分离培养的新生大鼠成骨细胞具有典型的成骨细胞特征;与空白对照组比较,模型组成骨细胞(OB)ALP、ColⅠ、BGP、BMP-2、OPG蛋白及BMP-2、OPG mRNA表达降低,矿化结节减少,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,中药各剂量组ALP、ColⅠ、BGP、BMP-2、OPG蛋白及BMP-2、OPG mRNA表达升高,矿化结节增加,且随剂量增加而明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论益骨胶囊含药血清提高AGEs作用下成骨细胞分化和矿化能力,提高BMP-2、OPG的表达,这可能是益骨胶囊防治OP的机制之一。     

补肾益骨方对去势大鼠成骨细胞增殖及BMP-2表达的影响

目的:观察补肾益骨方对去势大鼠成骨细胞增殖及骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响。方法:取12周龄Wistar雌性大鼠40只,随机分为A(模型组)、B(治疗组)、C(阳性对照组)、D(正常对照组)四组,每组10只,前3组行完整双侧卵巢摘除术,D组行假手术,术后常规饲养12周,再分别予以生理盐水、补肾益骨方水提液、α-D3水溶液及生理盐水灌胃治疗12周,处死大鼠,取右胫骨上端做病理切片,通过HE染色观察成骨细胞增殖、免疫组化染色观察BMP-2表达。结果:治疗组成骨细胞数量明显增加,而且通过免疫组化染色发现BMP-2棕色深染的阳性细胞比例明显高于模型组。结论:补肾益骨方能促进成骨细胞分化、增殖,加速骨形成,具有治疗骨质疏松的作用。推测骨中BMP-2含量增加是其重要的治疗机理之一。     

针刺对快速老化脑萎缩模型小鼠脑抗氧化酶活性的影响

目的：观察针刺“水沟”,“内关”,“太冲”穴对快速老化脑萎缩模型小鼠（SAM－P／10）脑丙二醛含量（MDA）,超氧化物歧化酶（SOD）,过氧化氢酶（CAT）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)活性的影响,结果：针刺可降低模型动物MDA含量,提高抗氧化酶活性,结论：抗氧化酶活性降低可能是脑老化的重要因素,针刺可从整个抗氧化体系水平提高机体抗氧化能力,减少自由基代谢产物,从而起到延缓脑老化的作用。     

葛根素对糖尿病性骨质疏松小鼠骨密度及氧化应激的影响

目的：观察葛根素对糖尿病性骨质疏松（DOP） 小鼠骨密度及氧化应激的影响。方法：将45 只KKAy 小鼠给予高糖高脂饲料饮食和链脲佐菌素腹腔注射构建DOP 模型,造模成功后随机分为模型组、二甲双胍组及葛根素组各15 只,另取15 只C57BL/6J 小鼠作为对照组。治疗8 周后,观察各组小鼠骨密度（BMD）、糖代谢指标［空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、空腹胰岛素（FINS） ］、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、8-羟基脱氧鸟苷（8-OHDG）、骨桥蛋白（OPN）及转化生长因子-β（TGF-β） 水平;苏木精-伊红（HE） 染色观察各组小鼠胰腺组织病理学改变;实时荧光定量聚合酶链反应法（RT-PCR） 及蛋白免疫印迹法分别检测各组小鼠胰腺组织骨形态发生蛋白-6（BMP-6） 和血管内皮生长因子（VEGF） mRNA 及蛋白表达情况。结果：与对照组比较,模型组小鼠BMD、FINS、CAT 和SOD 明显降低（P＜0.05）,FBG、HbA1c、MDA、8-OHDG、OPN、TGF-β 及胰腺组织BMP-6 和VEGF mRNA及蛋白表达水平明显升高（P＜0.05）;模型组小鼠胰腺组织紊乱,细胞间隙增宽,可见大量中性粒细胞,细胞核受损。与模型组比较,二甲双胍组及葛根素组小鼠BMD、FINS、CAT 和SOD 水平明显上升（P＜0.05）,FBG、HbA1c、MDA、8-OHDG、OPN、TGF-β 及胰腺组织中BMP-6 和VEGF mRNA 及蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）;二甲双胍组及葛根素组干预后,小鼠胰腺组织损伤程度明显改善。结论：葛根素能够调节DOP小鼠胰腺组织BMP-6、VEGF mRNA 及蛋白的表达,改善BMD,减少氧化应激损伤。     

三七总皂苷对快速老化模型小鼠SAMP8脑内APP基因转录的影响

目的:研究三七总皂苷(PNS)对快速老化模型小鼠(SAMP8)学习记忆能力及脑内淀粉样前体蛋白(APP)基因转录水平的影响。方法:将SAMP8随机分为PNS高剂量组、PNS低剂量组、石杉碱甲(阳性对照组)组、模型组,各给药组分别按设定剂量灌胃给药,模型组给予等体积双蒸水灌服,连续8 w后应用Morris水迷宫、实时逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,检测PNS高、低剂量组SAMP8学习记忆和脑内APP mRNA含量的影响。结果:PNS能改善SAMP8的学习记忆能力(P<0.05或P<0.01),PNS高剂量还能显著降低其脑内APP mRNA含量(P<0.05)。结论:PNS能显著改善SAMP8的学习记忆能力,其作用途径可能与在转录水平下调APP基因的表达有关。     

针刺对肾性高血压大鼠6-酮-前列腺素F1及血栓素B2影响的研究

目的：探讨针刺治疗高血压的机理。方法：选用大鼠制备肾性高血压模型，以传统针刺治疗，观察了针刺对肾性高血压大鼠的血压、6-酮-前列腺素Fl(6-Keto-PGF1)、血栓素B2(TXB2)及6-Keto-PGF1／TXB2的影响。结果：针刺能够明显降低肾血管性高血压大鼠的血压并能明显升高6-Keto-PGF1左血浆中的含量及6-Keto-PGFl／TXB2比值。结论：针刺能增加6-Keto-PGF1的含量及它与TXB2的比值，以达到持续而稳定的降压效果。     

地黄饮子对快速老化小鼠 SAMP8线粒体通路细胞凋亡的影响

目的：研究地黄饮子对快速老化小鼠P8线粒体通路细胞凋亡的影响,探讨其治疗AD的药效及作用机制。方法：运用RT-PCR检测地黄饮子对SAMP8小鼠Caspase -3、Caspase -9、Apaf -1基因mRNA表达的影响,观察小鼠细胞凋亡情况。结果：地黄饮子能下调海马Caspase-3 mRNA、Caspase -9mRNA、Apaf-1mRNA的表达,且均有统计学意义。结论：地黄饮子可通过对细胞凋亡的线粒体途径的影响,抑制促凋亡基因,减少神经元的丢失,从而改善学习记忆能力。     

脑还丹对快速老化小鼠学习记忆能力的影响

目的 观察脑还丹对快速老化( SAMP/8)小鼠学习记忆能力的影响.方法 用6月龄雄性SAMP/8小鼠随机等分为脑还丹高、低剂量组和模型组,6月龄正常老化(SAMR/1)小鼠为正常对照组.给药8周后,运用Morris水迷宫方法测试各组小鼠的定位航行和空间探索能力.结果 SAMP/8小鼠的学习记忆能力明显低于同月龄SAMR/1小鼠,表现为逃避潜伏期从第2天起显著延长,原平台象限停留时间缩短.给予脑还丹8周治疗,SAMP/8小鼠逃避潜伏期明显缩短(P＜0.001～0.05).原平台象限停留时间明显延长(P＜0.001～0.05),且有一定的量效关系(P＜0.05).结论 脑还丹能显著改善SAMP/8小鼠方向辨别的学习能力及记忆巩固、再现能力.     

“双固一通”针法对绝经后骨质疏松症模型大鼠骨组织白细胞介素-6 mRNA表达水平的影响

目的:探讨双固一通针法治疗绝经后骨质疏松症(PMO)的可能作用机制。方法:采用60只6月龄雌性SD大鼠,切除双侧卵巢后饲养90d,造成实验性骨质疏松症动物模型,然后随机分成对照组、常规取穴组、双固组、一通组、双固一通组5组,每组12只。对照组不做任何治疗;常规取穴组取背俞穴脾俞、胃俞、肾俞,气海俞;双固组取关元、足三里;一通组取肾俞、膈俞、大杼;双固一通组取关元、足三里、肾俞、膈俞、大杼。电针治疗每天1次,每次15min,留针10min,连续治疗6d后休息1d,连续治疗12周。利用RT-PCR技术检测IL-6 mRNA在骨组织细胞的分布。结果:与对照组比较,所有针刺组的IL-6 mRNA表达均减弱(P<0.05),双固一通组表达明显减弱(P<0.01);双固一通组较常规取穴组、双固组、一通组减弱(P<0.05);常规取穴组、双固组、一通组三组之间比较无显著性差异(P>0.05)。结论:针刺能够降低绝经后骨质疏松症模型大鼠骨组织的IL-6 mRNA表达水平,且双固一通针法优于其他三治疗组。     

远针近推疗法对老年性骨质疏松症骨代谢生化指标的影响

目的:比较远针近推疗法与口服碳酸钙D3片对老年性骨质疏松症患者骨代谢生化指标影响的效应差异,探寻治疗骨质疏松症的较佳疗法。方法:将64例患者随机分为针推组和碳酸钙组。碳酸钙组(30例)口服碳酸钙D3片,连续服用12周。针推组(34例)采用"远针近推"疗法,即针刺患者双侧下肢委中、太溪穴,同时在患者腰部进行推拿治疗,共治疗30次。分别观察和比较两组治疗前后骨代谢生化指标血钙、血磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)、尿脱氧吡啶酚(DPD)的变化。结果:两组治疗后均血P降低、BGP升高、DPD降低,治疗前后差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),但是上述指标组间尚未表现出统计学差异。结论:口服钙制剂和"远针近推"疗法均能有效改善老年性骨质疏松症患者的骨代谢生化指标,对骨质疏松的防治有积极意义,但尚不足以证明上述哪种疗法对于保钙更优。     

快速老化小鼠SAMP8模型粪便代谢物和肠道菌群改变的研究

目的研究快速老化小鼠SAMP8模型老化过程中粪便代谢物和肠道菌群的变化。方法采用1H-NMR代谢组学和宏基因组学技术,探索衰老相关的代谢标志物和肠道菌群,并对代谢物与肠道菌群进行Pearson关联分析。结果 SAMP8小鼠粪便中指认出31种内源性代谢物,与SAMR1小鼠相比,13种代谢物发生显著改变。差异代谢物主要富集在4条代谢途径:苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢,组氨酸代谢。肠道菌群分析发现10月龄快速老化小鼠SAMP8肠道菌群多样性明显改变,10种菌群的相对丰度显著改变。相关性分析结果表明,Christensenellaceae菌科与苯丙氨酸、组氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和尿苷酸均呈正相关;Dehalobacterium菌属与酪氨酸,Planococcaceae动球菌科与缬氨酸均呈负相关。结论通过研究快速老化小鼠SAMP8模型粪便代谢物和菌群的变化规律,为衰老机制及抗衰老药物研究提供实验依据。     

地黄饮子对快速老化小鼠SAMP8学习记忆能力及海马神经元结构的影响

目的研究地黄饮子对快速老化小鼠P8(SAMP8)学习记忆能力及海马组织病理形态的影响,探讨其治疗老年性痴呆的药效及作用机制。方法运用小鼠跳台行为学实验检测地黄饮子对SAMP8小鼠的学习记忆能力的影响;HE染色和电镜观察检测SAMP8小鼠海马形态结构和超微结构。结果模型组SAMP8小鼠跳台实验潜伏期缩短(第1天208.19±65.42,第2天254.76±48.99),与空白组SAMR1小鼠(第1天248.17±27.59,第2天296.35±3.17)比较有非常和/或显著差异(P<0.05,P<0.01)。给药后,地黄饮子组潜伏期(第1天277.06±7.86,第2天295.36±5.17)与模型组(第1天208.19±65.42,第2天254.76±48.99)比较非常显著性延长(P<0.01)。相同组的第2天潜伏期与第1天比较,除模型组以外,其他各组均非常显著延长(P<0.01)。模型组与空白组比较,伴有海马锥体细胞形态结构、超微结构的改变。给药后,地黄饮子减轻SAMP8小鼠的海马病理损伤状况。结论地黄饮子对SAMP8小鼠的学习记忆能力有改善作用。     

金骨片防治激素性股骨头坏死对VEGF和BMP-2表达的影响

目的:探讨金骨片防治激素性股骨头坏死过程中血管内皮生长因子和骨成型蛋白2表达的影响及促进骨折愈合的作用机理。方法:将日本大耳兔分为5组,正常组、模型组、阳性对照组、高剂量组、低剂量组;除正常组外,其余各组给予甲基强的松龙10mg/kg注射,同时对阳性对照组、高剂量组、低剂量组给予相应的药物防治干预,7周后处死动物采用组织病理学观察和免疫组织化学方法检测,分析5组动物股骨头VEGF和BMP-2的表达。结果:免疫组织化学染色显示,正常组VEGF和BMP-2的表达高于其他组,差异有显著性意义(P<0.05);高剂量组和阳性对照组的VEGF和BMP-2的表达明显强于低剂量组和模型组,差异有显著性意义(P<0.05);低剂量组强于模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:金骨片防治激素性股骨头坏死过程中促进VEGF和BMP-2表达,这可能是金骨片防治激素性股骨头坏死作用的机制之一。