应用PCR方法检测大肠癌组织中的HPVDNA

本文采用聚合酶链式反应的方法，对２０例大肠癌患者的手术切除标本进行了人体头瘤病毒ＤＮＡ的检测。结果发现４例ＨＰＶ１６型扩增阳性，其中１例显示ＨＰＶ１６．１８型双重阳性，初步表明大肠癌组织中存在ＨＰＶ的感染。     

HPV16型DNA在大肠腺癌组织中表达的研究

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交技术，检测５０例大肠腺癌、３８例大肠腺瘤和２０例正常大肠粘膜组织的ＨＰＶ１６型ＤＮＡ序列。结果显示：三组病人ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性率依次为４２％、３１．６％和０。大肠腺癌和腺瘤分别与正常大肠粘膜组织比较，ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性率有显著差异（Ｐ＜０．０５）；大肠腺癌和腺瘤之间比较ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性率无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。但ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性的１２例大肠腺癌组织均伴组织细胞异型增生。结果表明：ＨＰＶ１６型与国人的大肠腺癌有关，是大肠癌的病因之一     

宫颈癌细胞中人乳头瘤病毒感染对DNA含量及细胞周期的影响

目的探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染在宫颈癌变过程中的作用。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和流式细胞计量术（ＦＣＭ）对３９例宫颈癌标本中ＨＰＶ１６和１８型感染、ＤＮＡ含量和细胞周期分布进行检测和分析。结果３１例鳞癌中ＨＰＶ１６阳性１１例（３５．５％），ＨＰＶ１８阳性１例；７例腺癌中ＨＰＶ１６全部阴性，ＨＰＶ１８阳性２例（２８．６％）；１例腺鳞癌ＨＰＶ１６和１８均阴性。总的异倍体率为５９％，二倍体率为４１％。鳞癌异倍体率为７１％（２０／３１），腺癌为４３％（３／７）。鳞癌中ＨＰＶ１６阳性组与阴性组间ＤＮＡ指数和Ｓ期比率有明显差异，而异倍体率无差异。结论ＨＰＶ感染与宫颈癌发生有关。     

原位核酸杂交检测喉鳞状细胞癌人乳头状瘤病毒DNA

用生物素（Ｂｉｏｔｉｎ－１１－ｄｕｔｐ）经缺口翻译标记人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）６．１１．１６和３０亚型的ＤＮＡ探针，对４０例喉鳞状细胞癌石蜡切片进行原位核酸杂交。检出ＨＰＶＤＮＡ阳性结果为２３例（５７．５％），其中６例ＨＰＶ１１阳性（１５％），１４例ＨＰＶ１６阳性（３５％），３例ＨＰＶ３０阳性（７．５％），ＨＰＶ６全部阴性。对照实验组全部阴性。原位杂交阳性物质主要存在于癌细胞核内呈紫黑色阳性颗粒。实验结果表明，ＨＰＶ１１、１６、３０与喉鳞状细胞癌的发病有关，其中ＨＰＶ１６占优势。     

食管鳞癌人乳头瘤病毒DNA的检测研究

目的：对新疆食管鳞状细胞癌中进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ检测。方法：采用多重引物聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术。结果：新疆５个地区４个民族１０４例食管鳞癌中ＨＰＶＤＮＡ阳性者占５０．９６％（５３／１０４），其中ＨＰＶ１６型为４９．０６％（２６／５３），ＨＰＶ１８型５．６％（３／５３），ＨＰＶ６／１１型７．５％（４／５３）；１６型和１８型同时阳性者２０．７５％（１１／５３），１８型和６／１１型１１．３２％（６／５３），１６型、１８型和６／１１型三者同时阳性５．７％（３／５３）；两个或三个类型的混合感染占３７．７％（２０／５３）。５个地区的食管鳞癌中均有不同程度的ＨＰＶＤＮＡ感染，４个民族中以哈萨克族食鳞癌ＨＰＶ感染率较高（８０．４８％）。结论：新疆地区食管鳞状细胞癌中ＨＰＶ有较高的感染率，以１６型为主，伴随与其它类型的混合感染，哈萨克族食管癌的发生发展与ＨＰＶ具有密切关系。     

人乳头瘤病毒DNA6／11,16,18在成人喉乳头状瘤中的表达探讨

为探讨乳头瘤病毒在成人喉乳头状瘤的表达变化，采用原位杂交技术，用荧光素标记的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）６／１１，１６，１８型探针，对３６例尔马林固定，石蜡包埋的喉乳头瘤组织进行了ＨＰＶ６／１１，１６和１８型检测，结果：３６例喉乳头状瘤中２１例ＨＰＶ６Ｂ／１１阳性，３例ＨＰＶ１６阳性，ＨＰＶ１８无一例阳性，且阳性细胞主要分布于乳头浅层。结果提示喉乳头状瘤的发生与ＨＰＶ６／１１和１６型有关，乳头浅层可能是     

85例成人呼吸系统肿瘤中人乳头瘤病毒感染的特点分析

用多重ＰＣＲ和原位杂交法在８５例国内成人咽喉肿瘤和肺部鳞状上皮肿瘤中检测到ＨＰＶＤＮＡ阳性１３例（１５．３％），其中６例出自３６例咽喉肿瘤中（１６．７％），７例出自４９例肺鳞癌中（１４．２％）。检出的ＨＰＶ均以ＨＰＶ／１１型居多（６／６，６／７），少数伴ＨＰＶ１６型感染（１／６，２／７）。值得提出的是，肺癌中以ＨＰＶ６／１１型居多的结果与国外肺癌中以ＨＰＶ１６型为主的报道不一致。许多原位杂交示ＨＰＶ阳性的肿瘤细胞相似于生殖道湿疣中的凹空细胞。在上下呼吸道肿瘤中检出类似的ＨＰＶ基因型，且均以ＨＰＶ６／１１型为主；检出率相近且由高至低；感染的肿瘤组织有类似的组织学改变等形成了呼吸道肿瘤ＨＰＶ感染的特点。表明上下呼吸道肿瘤的ＨＰＶ感染关系密切，感染途径相同。     

人膀胱移行细胞癌HPV16／18型感染与c—erbB2,H—ras,c—my …

目的：研究人膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）中ＨＰＶ－１６／１８型感染与ｃ－ｅｒｂＢ２、Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白产物表达的相互关系。方法：应用免疫组织化学法检测经聚合酶链反应证实的３４例ＨＰＶ－１６／１８感染阳性、２０例ＨＰＶ－１６／１８感染阴性的ＴＣＣ组织和７例正常膀胱组织中ｃ－ｅｒｂＢ２、Ｈ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ蛋白产物的表达,并经统计学处理。结果：ＨＰＶ－１６／１８感染阳性组ｃ－ｅｒｂＢ２、Ｈ－ｒａ     

山东青岛地区宫颈癌组织中ＨＰＶ１６型Ｅ６和Ｅ２基因突变分析

目的　通过分析山东青岛地区宫颈组织中ＨＰＶ１６型Ｅ６和Ｅ２基因突变情况,探讨其与该地区宫颈癌的关系。方法　从１０４例青岛地区宫颈疾病组织中提取ＤＮＡ作为模板,采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术筛选出高危型ＨＰＶ及ＨＰＶ１６阳性标本,扩增出ＨＰＶ１６型Ｅ６、Ｅ２全长基因,ＰＣＲ产物纯化后测序,与德国ＨＰＶ标准株进行比对分析。结果　宫颈组织中高危型ＨＰＶ阳性率为９３.２７％（９７／１０４）,ＨＰＶ１６阳性率为６９.２３％（７２／１０４）。ＨＰＶ１６阳性标本中扩增出Ｅ６基因３７例,有５例与标准株序列相同,３２例存在突变,其中２５例突变型别为Ｔ１７８Ｇ或Ｔ１７８Ａ（Ｄ２５Ｅ）。在Ｅ２基因全序列测序中,２３例均存在Ｃ３６８４Ａ（Ｔ-Ｋ）,１４例同时存在Ｔ３５２４Ｃ、Ｃ３６８４Ａ（Ｔ-Ｋ）和Ｃ３７８７Ａ（Ｄ-Ｅ）,９例同时存在Ａ２９２６Ｇ、Ｃ３１５９Ａ（Ｔ-Ｋ）、Ｇ３２４９Ａ（Ｒ-Ｑ）、Ｔ３３８４Ｃ（Ｉ-T）、Ｃ３４１０Ｔ（Ｐ-Ｓ）和Ｃ３６８４Ａ（Ｔ-Ｋ）。结论　山东青岛地区宫颈癌患者ＨＰＶ１６型Ｅ６、Ｅ２基因与德国标准株比较存在多处变异,Ｅ６与Ｅ２基因突变可能存在相关性。     

HPV-16E7、Rb、p16蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其意义

探讨ＨＰＶ－１６Ｅ７、Ｒｂ、ｐ１６蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其相互关系。方法：利用过氧化酶标记的链霉卵白素染色法,检测５８例宫主细胞癌中的ＨＰＶ－１６Ｅ７Ｒｂ、ｐ１６蛋白表达。结果在５８例宫颈鳞状细胞癌中,ＨＰＶ－１６Ｅ７Ｒｂ和ｐ１６阳性表达率分别为８７．９％（５１／５８）、３４．５％（２０／５８）和８１．０％（４７／５８）。在５０例Ｒｂ蛋白阴性和弱阳性表达的宫颈鳞状细胞癌组织中,ＨＰＶ－１６     

Human papillomavirus 16 in breast cancer of women treated for high grade cervical intraepithelial neoplasia (CIN III).

Women with both a history of high grade cervical intraepithelial neoplasia (CIN III) and breast carcinoma as second primary cancer were selected for studying the presence of HPV in breast carcinomas. Paraffin embedded material from 38 patients with 41 breast carcinoma cases after CIN III were examined by polymerase chain reaction (PCR) and in situ hybridization. By PCR we detected HPV 16 DNA in 19 out of 41 cases (46%) of the breast carcinomas. One case proved to be HPV 16 positive also by in situ hybridization. HPV 16 was also detected in 32 out of the 38 patients with CIN III (84%). All HPV 16 positive breast carcinomas were HPV 16 positive in their corresponding CIN III lesions. Eight patients with diagnosed breast cancer before the CIN III lesions were used as controls. None of these had HPV positive breast carcinomas. No cases were positive for HPV 11, 18, or 33. HPV 16 was detected in the primary tumours, in local metastases from HPV 16 positive tumours, in a distant HPV 16 positive breast carcinoma metastasis to the colon, and in other primary cancers in patients with HPV 16 positive breast carcinomas and HPV 16 positive CIN III. Estrogen and progesterone receptors were quantified in the HPV positive and HPV negative breast carcinomas, and there was no significant difference in the fraction positive in the two groups. Oncogenic HPV DNA might be transported from an original site of infection to other organs by blood or lymph, and possibly be a factor in the development of cancer in different organs.     

采用原位杂交法检测生殖系统尖锐湿疣和鳞状细胞癌内乳头瘤病毒的感染

目的　探讨HPV感染与生殖系统尖锐湿疣和鳞状细胞癌的关系。方法　采用HPV6 /11、16 /18原位杂交试剂盒 ,对 5 5例生殖系统不同病变中乳头瘤病毒感染状况进行分析检测。结果　 2 0例生殖系统尖锐湿疣 19例阳性 ,其中 17例为HPV6 /11型 ,2例为HPV16 /18型。 2 0例生殖系统鳞状细胞癌中 ,15例阳性 ,均为HPV16 /18型。 10例正常生殖系统鳞状上皮组织和 5例外阴白斑组织均呈阴性。结论　HPV6 /11多与生殖系统良性疣状病变有关 ,而HPV16 /18感染多见于生殖系统恶性病变。     

宫颈癌中HPV16 E5基因的变异与病毒物理状态的研究

目的研究HPV16DNA在宫颈癌组织中的物理状态及其与E5转化基因的变异的关系。方法用斑点杂交方法确定HPV16阳性的宫颈癌标本,采用Southern印记杂交技术检测HPV16DNA在宫颈癌组织中的物理状态,并结合E5基因的扩增及序列测定来综合探求HPV16基因组在宿主细胞中的物理状态及其与E5片段变异的关系。结果60例宫颈癌组织中HPV16阳性率为58%(35/60);其中有22%(8/35)的HPV16DNA是以游离状态存在于宿主细胞内。在HPV16以游离型存在的宫颈癌标本中,仅有1例(1/8)发生了变异。结论不同病理分期的宫颈癌组织HPV16的物理状态无明显差异。在游离型HPV16致癌机制中,E5的变异似乎不占主导地位。所得结果为揭示HPV16致宫颈癌的分子机制尤其是为E5在游离型HPV16致癌机制提供了新资料。     

Detection of human papillomavirus (HPV) DNA in carcinoma of uterine cervix and genital tract diseases in Jiangsu province, China]

Pst-1 cleaved DNA restriction fragment length polymorphism (RFLP) of biopsy samples from 41 patients with squamous cell carcinoma of uterine cervix collected in Jiangsu province, China were examined for HPVs by Southern blot hybridization using HPV 16 DNA as a probe. 20 of the 41 samples were positive for HPVs when hybridized under non-stringent condition. HPV was not detectable in samples collected in the same time period from patients with cervical adenocarcinoma (N = 2), vaginal carcinoma (N = 3), vulval carcinoma (N = 1) and benign cervicitis (N = 8). Of the 20 positive samples, 7 (17.1%) had CHPV X1, a new type of NPV previously discovered is China, 6 (14.6%) had HPV 16, 4 (9.9%) had HPV 31, and in 3 (7.2%) the HPV type is as yet undetermined. Our data indicate that HPV 16 and CHPV X1 may be more closely related to cancer of the uterine cervix in Jiangsu province.     

结直肠癌HPV16型感染与核因子-κB活化的关系研究

 目的　探讨结直肠癌HPV16型感染与核因子 κB(NF κB)活化的关系。方法　应用凝胶电泳迁移率分析 (EMSA)检测 5 0例结直肠癌、30例结直肠腺瘤和 2 0例正常大肠组织核因子NF κBDNA结合活性 ,并用多聚酶链反应 (PCR)和southernblot检测HPV16型DNA。结果　结直肠癌、腺瘤分别与正常结直肠组织比较 ,NF κBDNA结合活性和HPV16型DNA阳性率均明显增高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;结直肠癌和结直肠腺瘤比较 ,NF κBDNA结合活性和HPV16型DNA阳性率差异均无显著性 (P>0 .0 5 )。HPV16型DNA阳性和阴性结直肠癌患者比较 ,NF κBDNA结合活性差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　NF KB活化参与HPV16型在结直肠癌的致癌过程     

宫颈癌细胞DNA含量和HPV16的对比研究

作者对３３例宫颈癌患者的活检组织进行了ＤＮＡ含量和ＨＰＶ１６检测。结果显示：宫颈癌细胞ＤＮＡ异倍体率为６６．７％，ＨＰＶ１６阳性率３３．３％。异倍体患者ＨＰＶ１６阳性率显著高于二倍体患者（Ｐ＜０．０５）；在异倍体病例中，不同倍体类型者ＨＰＶ１６阳性率明显不同，其顺序为多异倍体＞非整倍体＞四倍体＞近二倍体。ＨＰＶ１６阳性者的ＤＩ、ＳＰＦ、＞２Ｃ％均显著高于ＨＰＶ１６阴性者（Ｐ＜０．０１）。该结果提示，ＨＰＶ１６不仅与宫颈癌的发生关系密切，而且和癌细胞ＤＮＡ含量、增植特性、肿瘤恶性度也有一定关系。     

Occurrence of human papillomavirus DNA in primary lung neoplasms.

The occurrence of human papillomavirus (HPV) DNA in primary lung carcinomas and in squamous metaplasia of the bronchus was studied using in situ hybridization techniques and commercially available biotinylated DNA probes to HPV subtypes 6/11, 16/18, and 31/33/35. The authors found HPV DNA in six of 20 cases of squamous cell carcinoma and one of six cases of large cell undifferentiated carcinoma. There were two cases each of the 6/11 serotypes and the 16/18 serotypes and three cases of the 31/33/35 serotypes. Infected cells of the squamous carcinomas uniformly showed koilocytosis. No case of adenocarcinoma, bronchioloalveolar carcinoma, or small cell carcinoma was positive (of 32 cases). Areas of squamous metaplasia in infected tumors showed similar HPV DNA expression in 15% of cases, especially in those with condylomatous atypia. In 5.8% of random bronchial biopsies of squamous metaplasia, HPV DNA was identified. The relationship of HPV infection to the development of upper and lower respiratory tract carcinomas is discussed.     

子宫颈癌患者血清、盆腔淋巴结HPV检测及其相关性探讨

目的：检测宫颈癌患者原发灶、血清及其盆腔淋巴结中HPVDNA及亚型,探讨其相关性及临床意义。方法：选取16例行广泛全子宫切除术和盆腔淋巴结清扫术宫颈癌患者的原发灶组织、术前静脉血与盆腔淋巴结石蜡组织,运用PCR方法对上述标本进行HPVDNA及亚型的检测。结果：宫颈癌原发灶组织、血清标本中HPVDNA阳性率为50％（8／16）。16例盆腔淋巴结石蜡组织中13例为HPVDNA阳性（13／16,81．25％）,其中总共切除的133个淋巴结中60个为阳性（60／133,45．1％）,8例淋巴结HPVDNA阳性的病例其对应的原发灶组织也为阳性且两者亚型相同。盆腔淋巴结中的HPVDNA阳性率为45．1％（60／133）,显著高于病理证实的淋巴结转移率1．5％（2／133）。6例患者（6／16,37．5％）原发灶、血清、盆腔淋巴结同时均为HPVDNA阳性;2例患者（2／16,12．5％）原发灶、盆腔淋巴结中HPVDNA表达阳性,而血清为阴性;1例患者（1／16,6．25％）淋巴结、血清HPVDNA阳性,而原发灶为阴性;未发现原发灶、血清HPVDNA表达阳性而淋巴结为阴性的病例,而且以上HPVDNA阳性的病例同一个患者对应的HPV亚型也相同。结论：宫颈癌患者血清中HPVDNA检出率与临床分期无关。宫颈癌患者盆腔淋巴结的HPVDNA检测可提高病理诊断淋巴结转移的阳性率,并且淋巴结中HPVDNA的检出率与原发灶的分化程度相关。宫颈癌原发灶、血清、盆腔淋巴结中HPV感染可能存在相关性。     

早期宫颈癌前哨淋巴结中高危型HPV16/18 DNA表达的检测及临床意义

目的：探讨早期宫颈癌患者前哨淋巴结（SLN）中人乳头状瘤病毒（HPV）16/18 DNA表达检测对于微转移的临床意义。方法选取72例早期宫颈癌患者,予患者均行广泛性子宫切除加双侧盆腔淋巴结清扫术,术中采用染料法识别SLN的宫颈癌患者有46例,应用基因检测法（FQ-PCR）检测SLN中HPV16/18 DNA阳性表达情况,并分析其与各种临床病理因素的关系;对SLN病理阴性的33例患者进行长期随访,分析SLN中HPV16/18 DNA阳性与淋巴结转移的关系。结果46例宫颈癌患者SLN中HPV16/18 DNA阳性表达者共22例,其中13例淋巴结病理阳性患者中有10例阳性,而33例淋巴结病理阴性患者中仅12例阳性（P=0.013）;46例患者共检出前哨淋巴结102枚,均用FQ-PCR法检测HPV16/18 DNA,结果13例淋巴结病理阳性患者检出的37枚SLN中有29枚HPV16/18 DNA阳性,而33例淋巴结病理阴性患者检出的65枚SLN中仅有36枚阳性（P=0.033）;分析46例成功检出SLN的早期宫颈癌患者的临床资料,发现SLN中HPV16/18 DNA阳性表达仅与临床分期有关,具有统计学意义（P=0.034）;长期随访33例SLN病理阴性的患者,发现HPV16/18 DNA阳性的患者复发率高于HPV16/18 DNA阴性的患者,具有统计学意义（P=0.02）。结论检测宫颈癌SLN组织中HPV16/18 DNA表达可能是预测早期宫颈癌淋巴结微转移的可行方法。     

Prevalence of Human Papillomavirus Types 16 and 18 in Cervical Carcinomas: A Study by Dot and Southern Blot Hybridization and the Polymerase Chain Reaction

Histologically classified biopsies from 83 women with invasive cervical carcinoma were analyzed by dot blot hybridization for human papillomavirus (HPV) types 16 and 18 infection. Sixty of the 83 (72.3%) were found to contain HPV DNA, of which 43 (51.8%) contained HPV 16 DNA, 12 (14.5%) contained HPV 18 DNA and 5 (6.0%) contained both HPV 16 and 18 DNAs. Southern blot analysis on 65 specimens gave similar results. Of 23 specimens negative by dot blot, 21 were tested by the polymerase chain reaction. Seventeen of the 21 were positive for HPV DNA, of which 13 contained HPV 16 DNA and 4 contained both HPV 16 and 18 DNAs. In all, 95.1% (77/81) were positive for HPV 16 and/or 18 DNA sequences.