酶法合成2’—脱氧—5—氟尿苷

本文采用大肠杆菌核苷磷酸化酶，以5-氟尿嘧啶（FU）、2’-脱氧尿苷（dU)和磷酸盐为底物酶法合成2’-脱氧-5-氟尿苷，实验结果表明，含10mmol/L dU、30mmol/L FU、10-30mmol/L磷酸盐的混合物加入5%培养24h的大肠杆菌湿菌体于pH7.0反应3h，底物dU的转化率可达45.9%。     

利用产气肠杆菌EAM-Z1转化合成5-氟尿苷的转化率影响因素的研究

利用产气肠杆菌EAM Z1转化合成5 氟尿苷,从筛选中间体稳定剂、底物流加、底物诱导、菌体冻融和石英砂研磨等方面研究转化率的影响因素,结果:(1)转化过程中加入40 mmol/L的硼砂可以将转化率达到75.56%,提高30.28%;加入10 mmol/L的甘氨酸可以使转化率达到61.92%,提高6.76%;(2)流加5 氟尿嘧啶可以将转化率提高到87.78%;(3)培养过程中加入尿苷诱导效果并不明显,尿苷浓度为 0.001 g/L时效果最佳,提高3.63%;(4)菌体冻融和石英砂研磨使转化率下降26%。     

盐酸青藤碱对乳腺癌MCF-7细胞增殖影响的初探

目的 研究盐酸青藤碱对体外培养乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用.方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定盐酸青藤碱(SIN)、5-氟尿苷(5-FUR)、SIN+5-FUR对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.结果 SIN对人乳腺癌MCF-7细胞有增殖抑制作用,且呈浓度依赖性.SIN、5-FUR、SIN+5-FUR对MCF-7细胞的抑制强弱为:SIN＞SIN+5-FUR＞5-FUR.结论 SIN具有抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用,且抑制效果强于5-FUR及SIN+5-FUR.     

抗肿瘤药物2''''-脱氧-5-氟尿苷合成研究

目的合成抗肿瘤药物2'-脱氧-5-氟尿苷.方法以5-氟尿嘧啶核苷为原料,经丙酰澳酰化溴代得2'溴代-3',5'-O-二丙酰基-5-氟尿嘧啶核苷,然后氢化得产物2'-脱氧-3',5'-O-二丙酰基-5-氟尿嘧啶核苷,最后经皂化合成2'-脱氧-5-氟尿苷.结果以5-氟尿嘧啶核苷为起始原料经3步反应合成了2'-脱氧-5-氟尿苷.结论本合成方法工艺简便,原料易得,条件温和,总收率为72.0%,适于工业制备.     

抗肿瘤药物2′-脱氧-5-氟尿苷合成研究

目的:合成抗肿瘤药物2′-脱氧-5-氟尿苷。方法:以5-氟尿嘧啶核苷为原料,经丙酰溴酰化溴代得2′-溴代-3,′5′-O-二丙酰基-5-氟尿嘧啶核苷,然后氢化得产物2′-脱氧-3,′5′-O-二丙酰基-5-氟尿嘧啶核苷,最后经皂化合成2′-脱氧-5-氟尿苷。结果:以5-氟尿嘧啶核苷为起始原料经3步反应合成了2′-脱氧-5-氟尿苷。结论:本合成方法工艺简便,原料易得,条件温和,总收率为72.0%,适于工业制备。     

产气肠杆菌EAM-Z1荚膜的去除对胞内pyNPase活力和菌体生长量的影响

研究产气肠杆菌(EAM-Z1)荚膜去除或变薄对于胞内嘧啶核苷磷酸化酶(PyNPase)活力的菌体生长量和影响。在培养基中增加碳源以去除荚膜或使荚膜变薄,研究其对菌体生长的影响,并通过转化合成5-氟尿苷的方法研究其对PyNPase活力的影响。结果:在培养基中增加4%的D-甘露糖,1%的甲醇,2%的甘油或2%的丙酮都能使产气肠杆菌的荚膜变薄;其中增加2%丙酮时,菌体量增加43.92%,在工业生产中有重要意义,转化率为57.5%,提高2.8%,PyNPase比活力提高4.8%,转化合成5-氟尿苷的最佳反应时间为45 min,缩短了1/4。     

2''''-脱氧-5-氟尿苷的合成工艺改进

目的:改进2'-脱氧-5-氟尿苷的合成工艺。方法:参照文献方法,以氟尿嘧啶为起始原料,经硅醚化、缩合、溴化、氢化和皂化等工艺合成2'-脱氧-5-氟尿苷,并对其关键步骤进行了改进。结果:该合成工艺对2'-脱氧-5-氟尿苷有较高的收率,总收率为34.31%。结论:工艺更趋于合理,操作条件更为简单,三废易于处理,适合于工业化生产。     

化学酶法合成抗病毒药物2'''',3''''-双脱氧腺苷

2’,3’-双脱氧腺苷(ddA)具有良好的抗病毒作用。以胸苷为起始原料,经由酰化、环化、开环、催化加氢生成2’,3’-双脱氧胸苷(ddT),然后ddT和腺嘌呤在胡萝卜软腐欧文氏杆菌的作用下转化成胸腺嘧啶和ddA。结果显示在最佳酶反应条件如下:反应温度55℃,磷酸盐缓冲液pH值8.0,磷酸盐缓冲液浓度50 mmol/L,底物20 mmol/L,菌体量10%时,48 h转化率达54.2%。     

离子交换法分离纯化酶反应液中5-氟尿苷的研究

为开发从酶反应液中分离纯化5-氟尿苷的方法,研究了利用阴离子交换树脂以及硅胶柱色谱实现转化产物分离纯化的工艺;实验采用HPLC为检测方法,以5-氟尿苷含量为考察指标,从吸附量,洗脱率,回收率的角度考察了各种条件的影响。最终确定以D301树脂为吸附剂;最佳吸附条件为动态吸附,温度25℃,pH 8;动态洗脱,洗脱剂5%NaCl溶液,体积流量为3BV/h;再利用硅胶柱色谱,采用200～300目硅胶,以正己烷∶乙酸乙酯=12∶88作为洗脱剂,洗脱后结晶可得到5-氟尿苷纯品,色谱纯,最终收率72.4%。     

固定化细胞转化阿糖尿苷合成阿糖腺苷

采用聚乙烯醇、卡拉胶和聚丙烯酰胺为混合载体固定化埃希菌AEM0812细胞.以8.0％聚乙烯醇、1.0％卡拉胶和10％聚丙烯酰胺作为载体,菌体浓度为30％,在pH 7.0、含4.0％氯化钾的饱和硼酸溶液(成型剂)中处理36h,得相对酶活力为98.17％且较稳定的颗粒型固定化细胞,用来催化转化阿糖尿苷合成阿糖腺苷,在54℃、pH 6.5和缓冲液离子浓度120 mmol/L的最适条件下,阿糖尿苷的转化率为68％.固定化细胞连续5次反应的平均转化率约54.3％.