Hsa_circ_0001946/miR-7/KLF4轴调控乳腺癌进展的研究

目的探讨环状RNAhsa_circ_0001946在乳腺癌组织中的表达情况及hsa_circ_0001946/miR-7/Kruppel样因子4（KLF4）轴调控乳腺癌细胞发生侵袭和转移的机制。方法收集2018年6月至2019年8月在温州医科大学附属第三医院切除的乳腺癌组织标本及其癌旁正常乳腺组织标本91例。采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌及其癌旁正常组织中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4mRNA表达情况及乳腺癌细胞株MCF-7中hsa_circ_0001946、miR-7、KLF4、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）mRNA表达情况;采用细胞侵袭实验分析乳腺癌MCF-7细胞株的侵袭能力;采用Westernblot法检测乳腺癌细胞株MCF-7中E-cadherin及N-cadherin蛋白表达情况。结果与癌旁正常乳腺组织比较,乳腺癌组织中hsa_circ_0001946和KLF4mRNA表达水平均升高,miR-7表达水平下降（均P＜0.05）。与正常乳腺组织、乳腺导管原位癌组织比较,乳腺浸润性导管癌组织中hsa_circ_0001946mRNA表达水平升高（均P＜0.05）。分析82例乳腺浸润性导管癌患者发现,有淋巴结转移者hsa_circ_0001946mRNA表达水平高于无淋巴结转移者（P＜0.05）。Pearson相关显示,乳腺癌组织中hsa_circ_0001946mRNA的表达与miR-7的表达呈负相关（r=-0.418,P＜0.05）,miR-7的表达与KLF4mRNAmRNA的表达呈负相关（r=-0.340,P＜0.05）。与阴性对照组相比,转染sh-hsa_circ_0001946组MCF-7细胞中miR-7表达升高,KLF4mRNA表达下降（均P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染miR-7mimics组MCF-7细胞中KLF4mRNA表达下降（P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染sh-hsa_circ_0001946组侵袭细胞数减少（P＜0.05）;与阴性对照组相比,转染KLF4siRNA组MCF-7细胞中E-cadherinmRNA及蛋白表达水平均升高,N-cadherinmRNA及蛋白表达水平均下降（均P＜0.05）。结论Hsa_circ_0001946在乳腺癌细胞中表达升高,可通过miR-7/KLF4调控轴使癌细胞发生上皮-间质转化,促进癌细胞的侵袭和转移。     

乳腺癌患者血清HCY、miR-765、miR-155表达水平的临床意义及诊断价值分析

目的探讨乳腺癌患者血清同型半胱氨酸(HCY)、微小RNA(miR)-765、miR-155表达水平的临床意义及诊断价值。方法选取2012年3月-2014年12月沧州市妇幼保健院96例乳腺癌患者为乳腺癌组,同期68名健康体检者为对照组。对比两组血清HCY、miR-765、miR-155表达水平及不同病理特征(肿瘤大小、组织分化程度、临床分期、淋巴结转移)、不同预后乳腺癌患者血清HCY、miR-765、miR-155表达水平,绘制ROC曲线观察血清HCY、miR-765、miR-155单一或联合指标诊断乳腺癌的价值,绘制卡普兰-迈耶曲线(K-M)生存曲线分析血清HCY、miR-765、miR-155不同表达水平的乳腺癌患者生存情况。结果乳腺癌组血清HCY、miR-155水平高于对照组,血清miR-765水平低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。ROC曲线显示,血清HCY、miR-765、miR-155联合检测乳腺癌曲线下面积(AUC)均高于单一指标,依次为联合检测miR-155HCYmiR-765。组织分化程度为中低分化、临床分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移乳腺癌患者血清HCY、miR-155表达水平较高,血清miR-765表达水平较低(P0.05)。5年死亡乳腺癌患者血清HCY、miR-155表达水平高于5年生存患者,血清miR-765表达水平低于5年生存患者(P0.05)。血清HCY、miR-155低表达乳腺癌患者生存率高于高表达患者,血清miR-765低表达乳腺癌患者生存率低于高表达患者。结论乳腺癌患者血清HCY、miR-155高表达,血清miR-765低表达,且表达水平与分化程度、临床分期、淋巴结转移及生存率密切相关,联合检测可提高诊断价值,为早期干预提供依据。     

miR-212 在乳腺浸润性导管癌 组织中的表达及效应分析

目的：分析miR-212在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及与乳腺癌临床病理特征之间的相关性,并分析其效应。方法采用茎环RT- qPCR方法检测38例乳腺癌及癌旁正常乳腺组织标本中miR-212的表达,统计分析其表达水平与乳腺癌常用临床病理指标间的关系。不同浓度miR-212 inhibitor转染MCF7乳腺癌细胞,通过MTT法分析细胞活性,通过Tran- swel 实验检测细胞的侵袭能力。结果与癌旁正常乳腺组织比较,乳腺癌组织中miR-212的表达明显升高（P＜0.05）;分析miR-212表达水平与乳腺癌常用临床病理指标间的关系发现,miR-212表达水平与乳腺癌细胞与淋巴结转移、TNM分期相关及增殖指数（ki67）相关（P＜0.05）,与月经状况、肿块大小、雌激素和孕激素受体状态、Her-2表达未见显著相关性（P＞0.05）。细胞干预实验显示,与空白对照组、阴性对照组比较,miR-212 inhibitor可明显抑制MCF7细胞增殖活性（P＜0.05）和细胞迁移（P＜0.01）。结论乳腺癌组织高表达的miR-212在乳腺癌发展过程中发挥重要作用,有望成为乳腺癌防治的一个新靶点。     

乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达与临床病理特征及预后的关系

目的检测微小RNA（miR）-23a、miR-1247-5p在乳腺癌组织中的表达情况,并分析miR-23a、miR-1247-5p表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法收集2012年1月至2013年12月在昆山市第二人民医院行手术切除的150例乳腺癌患者术后的乳腺癌组织及癌旁正常组织样本,采用RT-PCR法检测组织样本中miR-23a、miR-1247-5p表达水平。单因素分析miR-23a、miR-1247-5p表达水平与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析不同miR-23a、miR-1247-5p表达水平患者的术后生存情况;ROC曲线分析miR-23a、miR-1247-5p对患者预后的预测价值。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织miR-23a表达水平较高、miR-1247-5p表达水平较低（均P＜0.05）。乳腺癌组织miR-23a表达水平与肿瘤直径、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）,miR-1247-5p表达水平与组织病理分级、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）。miR-23a高表达、miR-1247-5p低表达患者的术后5年总生存率及中位生存时间均分别低于miR-23a低表达、miR-1247-5p高表达患者（均P＜0.05）。检测乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测的AUC分别为0.709（95%CI：0.625~0.793）、0.690（95%CI：0.606~0.775）,灵敏度分别为0.812、0.749,特异度分别为0.637、0.622。结论乳腺癌组织miR-23a表达上调,miR-1247-5p表达下调,且与患者预后有关。检测乳腺癌患者术后癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测有一定的临床价值。     

乳腺癌组织中Snail、Bcl-2 的 表达水平及其临床意义

目的 探讨乳腺癌组织中Snail 和Bcl-2 蛋白的表达水平与临床病理特征及预后的相关性。 方法 使用免疫组织化学法分析2010 ～ 2015 年在该院就诊的92 例乳腺癌患者的癌组织中Snail 和Bcl-2 蛋 白表达水平,分析2 种蛋白表达的相关性,以及两者与患者临床病理特征及预后的关系。结果 乳腺癌组织 中Snail 高表达率为62.5%,Bcl-2 低表达率为57.6%,与癌旁组织蛋白表达率比较有差异（P <0.05）,乳腺癌 组织中Snail 与Bcl-2 呈负相关（P <0.05）;Snail 表达水平与组织学分级、淋巴结是否转移、雌激素受体（ER） 及孕激素受体（PR）表达有相关性（P <0.05）,Bcl-2 表达水平与肿瘤大小、ER 及PR 有相关性（P <0.05）; 低表达Snail 乳腺癌患者无瘤生存率为87.5%,死亡1 例;高表达Snail 乳腺癌患者无瘤生存率为78.3%,死亡5 例, 差异有统计学意义（P <0.05）;高表达Bcl-2 乳腺癌患者无瘤生存率为87.2%,死亡1 例,低表达Bcl-2 乳腺 癌患者无瘤生存率为77.4%,死亡5 例,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 Snail 表达水平与乳腺癌进展呈 正相关,Bcl-2 表达水平与乳腺癌进展呈负相关,而高表达Snail 和低表达Bcl-2 患者预后较差。     

MicroRNA-452 和microRNA-5100 在NSCLC 组织中的表达及其临床意义

目的 检测非小细胞肺癌（NSCLC）癌组织中microRNA-452（miR-452）和microRNA-5100 （miR-5100）的表达水平,并探究其临床意义。方法 采用实时聚合酶链反应（real-time PCR）检测94 例 NSCLC 患者的癌组织和癌旁正常组织中miR-452 和miR-5100 的表达水平,分析其与临床病理特征的关 系;采用Kaplan-Meier 生存曲线分析miR-452 和miR-5100 表达对患者术后5 年总生存率和生存时间的影 响。结果 NSCLC 癌组织中miR-452 相对表达量低于癌旁正常组织（P <0.05）,NSCLC 癌组织中miR- 5100 相对表达量高于癌旁正常组织（P <0.05）。NSCLC 癌组织中,miR-452 高表达与肿瘤病理类型、肿 瘤分化程度、肿瘤大小及淋巴结转移有关（P <0.05）;miR-5100 高表达与肿瘤分化程度、TNM 分期有关 （P <0.05）。miR-452 高表达患者的术后5 年总生存率高于低表达患者（P <0.05）,中位生存时间长于低表达 患者（P <0.05）;miR-5100 高表达患者的术后5 年总生存率低于低表达患者（P <0.05）,中位生存时间短于 低表达患者（P <0.05）。结论 在NSCLC 癌组织中,miR-452 呈低表达、miR-5100 呈高表达,两者可能参 与NSCLC 肿瘤形成和恶性进展,影响患者预后。     

Expression of HDAC7 in renal cell carcinoma and its clinical significance

目的 检测并分析肾癌(透明细胞癌)组织中HDAC7 mRNA和蛋白的表达差异,探讨其与肾癌的发生、发展以及患者预后之间的关系.方法 应用实时荧光定量PCR和免疫组化法对60 例肾癌组织及20例正常肾组织中HDAC7的表达情况进行检测,并通过对患者随访,探讨其蛋白表达水平与肾癌临床病理学指标及患者预后之间的关系.结果 HDAC7在肾癌组织中的表达较正常肾组织明显增高,且与肾癌的病理分级和临床分期之间均呈负相关(P＜0.05).HDAC7低表达者的生存率低于HDAC7高表达者(P＜0.05).结论 HDAC7可能与肾癌的发生、发展有关,提示HDAC7可作为评估肾癌恶性程度及预后的肿瘤标志物.     

色素框同源蛋白8在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨色素框同源蛋白8(CBX8)在大肠癌组织及癌旁组织中的表达情况及其意义.方法 应用荧光定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫组化方法检测172例大肠癌患者的癌组织、癌旁组织中CBX8的表达情况,并分析其与临床病理因素的关系.根据大肠癌组织CBX8的表达水平将172例患者分为CBX8低表达组70例、高表达组102例.结果 大肠癌组织中CBX8表达水平及阳性率均明显高于癌旁组织(P＜0.05);CBX8低表达组、高表达组患者的性别、年龄、诊断(直肠癌或者结肠癌)比较,差异无统计学意义(P＞0.05);CBX8低表达组、高表达组患者肿瘤细胞分化程度、术前血清癌胚抗原(CEA)水平、是否血管侵犯及TNM分期比较,差异有统计学意义(P＜0.05);Cox单因素分析显示,肿瘤细胞分化、术前血清CEA水平、血管侵犯以及癌组织CBX8的表达是影响大肠癌患者预后的危险因素(P＜0.05);Cox多因素分析显示,术前血清CEA水平、血管侵犯、癌组织CBX8表达是影响大肠癌患者预后的独立因素(P＜0.05).生存分析显示,两组1年生存率比较,差异无统计学意义(P＞0.05),但CBX8高表达组患者3年、5年生存率均明显高于低表达组(P＜0.05).结论 大肠癌组织中CBX8呈高表达,然而癌组织中CBX8高表达提示患者预后良好.     

miR-320在乳腺癌组织中的表达及临床意义

探讨miR-320在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应法（RTPCR）检测108 例乳腺癌组织和对应癌旁正常组织中miR-320 表达，分析miR-320 表达与乳腺癌病理特征的相关性。结果乳腺癌组织中miR-320 表达水平低于正常乳腺组[（0.58±0.17）vs（1.05±0.21）]（p <0.05）。乳腺癌组织miR-320 表达水平与乳腺癌TNM分期及淋巴转移有关（p <0.05）；而miR-320 表达水平与年龄、绝经、病理类型、肿瘤大小、C-erbB-2 表达、增殖细胞核抗原（PCNA）表达、孕激素受体（PR）表达及雌激素受体（ER）表达无关（p >0.05）。结论miR-320 在乳腺癌组织中呈低表达，且其表达水平与乳腺癌发生发展密切相关，miR-320 可能是乳腺癌特异性诊断潜在标志物和治疗新靶点。     

microRNA-26a在原发性肝癌患者中的表达及临床意义研究

目的探讨microRNA-26a在原发性肝癌（HCC）患者中的表达及临床意义。方法选取HCC、慢性乙型肝炎（CH）患者各28例。HCC患者留取癌组织、癌旁组织、血浆标本,CH患者留取血浆标本,采用RT-PCR法检测标本microRNA-26a的表达水平。比较HCC患者与CH患者microRNA-26a表达水平;分析HCC患者癌组织、癌旁组织microRNA-26a表达水平的相关性;比较血浆microRNA-26a与血清甲胎蛋白（AFP）诊断HCC的灵敏度、特异度;以血浆microRNA-26a水平最佳临界值（2.873）为界,将HCC患者分为microRNA-26a高表达组和低表达组,比较两组患者术后1年生存率。结果HCC患者血浆microRNA-26a表达水平低于CH患者（P＜0.05）。HCC患者癌组织microRNA-26a表达水平低于癌旁组织（P＜0.05）。HCC患者癌组织、癌旁组织microRNA-26a表达水平呈正相关（r=0.574,P＜0.038）。血浆microRNA-26a诊断HCC的灵敏度较血清AFP强（85.8%vs57.8%,P＜0.05）,但特异度较血清AFP弱（65.2%vs80.52%,P＜0.05）。microRNA-26a高表达组患者术后1年生存率高于低表达组（60.25%vs45.77%,P＜0.05）。结论HCC患者microRNA-26a表达水平较低,microRNA-26a可作为早期诊断HCC的生物标志物,也可作为HCC患者预后评估指标。     

抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与不孕及流产的关系

目的　探讨抗精子抗体（ＡｓＡｂ）与抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）在不孕、流产中的作用及二者关系,进一步 揭示不孕、流产的病因。方法　采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测３４５例不孕、流产妇女血清中的ＡｓＡｂ与 ＥＭＡｂ,按ＡｓＡｂ检测结果分阳性组和阴性组,比较两组ＥＭＡｂ阳性率的差异。结果　原发不孕及自然流产妇女中, ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率高达１６．６７％和１９．５１％,而ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率高达４３．６４％和４２．８６％,显著高于 ＡｓＡｂ（－）组（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。继发不孕妇女中ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率为１８．１８％,ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率 为３２．２％,二者无显著性差异（０．０１＞Ｐ＞０．０５）。结论原发不孕及自然流产妇女中因个体免疫反应差异使某些 人易对体内、外物质发生免疫反应而产生抗体,从而导致不孕或流产。     

水疗联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响

目的探讨新生儿游泳联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响。方法将经阴道顺产分娩的正常新生儿100例随机分为两组，观察组（水疗联合抚触组）50例，对照组（单纯沫浴组）50例。①测定两组10日、28日的体重、身长、上臂围；②观察记录胎便转黄时间，测定皿清胆红素；③记录24h睡眠时间。结果两组新生儿10日、28日体重、身长、上臂同增长有显著差异（P〈0．05），两组新生儿5日时，胎便转黄时间及黄疸指数比较均有显著性差异（P〈0．01），两组睡眠时间比较有统计学意义（P〈0．05），两组并发症比较无统计学意义（P〉0．05）。结论新生儿水疗联合抚触可促进新生儿的生长发育，能加速胎粪的早排出，减轻生理性黄疸程度，有效地降低新生儿高胆红素血症的发病率，提高睡眠质量。     

亚硝基脲类和亚硝基硫脲类的理化性质及致突变能力

本题选择N,N′-二甲基亚硝基脲(DMNU),N,N′-二乙基亚硝基脲(DENU),及其类似物N,N′-二甲基亚硝基硫脲(DMNTU)、N,N′-二乙基亚硝基硫脲(DENTU)为代表,测定了这些化合物的水解反应速度、脂溶性(HPLC的logk′值)、水解产物和致突变能力。证明了硫脲的脂溶性大于脲的脂溶性。DMNTU对TA100菌株的致突变能力最强,其它较弱。     

大鼠/小鼠证候及辨证论治方法学的探索与发展

从大鼠/小鼠四诊和辨证方法的提出与创建,大鼠/小鼠计量化辨证方法的建立,荷瘤小鼠证候发生和演变的揭示,大鼠/小鼠异病同证、同病异证的研究,荷瘤小鼠个体化辨证论治及计量化疗效评价,以及不同证候荷瘤小鼠神经—内分泌—免疫网络基因转录与剪接的特征等方面,总结项目组长期以来所提出的系列假说及开展的大量研发工作,对所解决的学术问题,以及该领域存在问题、前沿和发展趋势做了评述。     

Hyperuricemia and gout among Taiwan Aborigines and Taiwanese-prevalence and risk factors

Gout is a metabolic disorder which normally undergoes 4 stages: hyperuricemia, acute gouty arthritis, an intercritical period, and final tophus. Priority associated with gout is hyperuricemia. Only 5%-10% of patients with hyperuricemia will develop gout. Indeed, the serum uric acid level is correlated with the prospects of gouty attack.1 Therefore, study of gout epidemiology should focus on the hyperuricemia of a community or ethnic population. Twenty-three million people live in Taiwan, among them, an ethnic minority of 330 000 native inhabitants (called "Aborigines"), who live mainly in high mountain areas. The rest are "ethnic Taiwanese", most of whom came from the southern Mainland Chinese provinces some 400 years ago. Some of the "ethnic Taiwanese" arrived from the central and northern areas of Mainland China 50 years ago. The languages, dietary habits and cultures of the Taiwanese and Aborigines are completely different.2     

联合应用抗生素测定并鉴别超广谱和Ⅰ型β—内酰胺酶

目的：联合用抗生素测定并鉴别大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌产生的超广谱和Ⅰ型β－内酰胺酶。方法：用头孢噻肟（TX）、头孢他定（CTD）、氨曲南（ATN）、奥格门丁（AOA）、头孢西丁（CXT）和亚胺培能在MH琼脂上进行双纸片搭格耕检测和鉴别大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、沟沟肠杆菌的超广β－内酰胺酶（ESBLs)及Ⅰ型β－内酰胺酶。结果：265株大肠埃希菌、95株肺炎克雷伯菌、67株阴沟肠杆菌均对亚胺培能敏感;对三代头孢菌素的耐药率分别为23．4％、36．8％、58．2％,产生的能水解超广谱β－内酰胺类抗生素的β－内酰胺酶可分为两类,这些菌株对CXT有不同的耐药性,CTX＋CTD＋ATN的ESBLs检出率与单一CTX、CTD、ATN的检出率差异有显性,与CTX＋CTD的ESBLs检出率差异无显性（P＞0．05）。结论：应用不同抗生素可将水解超广谱β－内酰胺类抗生素的β－内酰胺酶分为ESBLs和Ⅰ型,有不同的耐药特点;联合应用两种以抗生素可提高检出率,双纸片搭桥法适合临床使用,临床分离菌株应用将超广谱和Ⅰ型β－内酰胺酶的检测作为常规。     

经络腧穴理论的形成与发展

从<脉书·十一脉><黄帝内经>等文献人手,梳理了血气、经络、腧穴理论的形成与发展,简要介绍了四肢部的基本腧穴、躯体部要穴,以及腧穴配伍的基本要义.     

Hyperuricemia and gout among Taiwan Aborigines and Taiwanese-prevalence and risk factors

Gout is a metabolic disorder which normally undergoes 4 stages : hyperuricemia, acute gouty arthritis, an intercritical period, and final tophus. Priority associated with gout is hyperuricemia. Only 5% - 10% of patients with hyperuricemia will develop gout. Indeed, the serum uric acid level is correlated with the prospects of gouty attack. Therefore, study of gout epidemiology should focus on the hyperuricemia of a community or ethnic population. Twenty-three million people live in Taiwan,among them, an ethnic minority of 330 000 native inhabitants ( called “Aborigines” ), who live mainly in high mountain areas. The rest are “ethnic Taiwanese”,most of whom came from the southern Mainland Chinese provinces some 400 years ago. Some of the “ethnic Taiwanese” arrived from the central and northern areas of Mainland China 50 years ago.The languages,dietary habits and cultures of the Taiwanese and Aborigines are completely different.     

浅谈梅毒的流行与防治

本文报告了梅毒的流行、预防和各期的治疗及胎传梅毒的治疗。     

胆管癌发生与发展的相关基因调控的研究

胆管癌是一种胆管常见的恶性肿瘤,临床上外科根治性切除率低,预后差。近年来随着对胆管癌发病机制研究的不断深入,人们开始从基因水平探索胆管癌的发生和发展机制。已发现胆管癌的发生可能由于ras通路、RB通路等多个信号转导通路中多种基因的点突变、缺失和过度表达,同时伴有多个抑癌基因的共同甲基化。而胆管癌的转移与nm23基因和mammaglobin B基因的过表达有密切联系,同时整合素、CD44等也参与了癌转移的过程。