温通减肚水凝胶贴的制备及质量评价

【目的】优化温通减肚水凝胶贴基质处方的配比和制备,并进行质量评价。【方法】以温通减肚水凝胶贴产品的外观性状、初黏力、内聚力和剥离强度为质量评价的主要指标,采用Plackett-Burman设计联合Box-Behnken响应面法,优化辅料配比,采用正交试验设计测试最佳载药量及增黏剂含量,优化制备工艺,并以C-松油烯、莰烯、桉叶油醇、右旋柠檬烯为评价指标,用改良Franz扩散池法,考察不同质量分数促渗剂氮酮对温通减肚水凝胶贴体外透皮渗透量的影响。【结果】筛选出温通减肚水凝胶贴的基质辅料最优处方为:聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)120 50.78 g、酒石酸20.75 g、羧甲基纤维素钠(CMC)3.28 g。3%氮酮对指标成分促渗效果良好。【结论】温通减肚水凝胶贴制备符合相关质量要求,具有良好的稳定性和释药性。     

乳腺宁凝胶膏剂的制备工艺及质量标准研究

目的:研究乳腺宁凝胶膏剂的制备工艺及质量标准。方法:在单因素考察的基础上,利用混料均匀试验设计法,将黏附性、皮肤追随性、膜残留量、赋形性作为乳腺宁凝胶膏剂的评价指标,优化乳腺宁凝胶膏剂基质处方用量,采用HPLC法测定乳腺宁凝胶膏剂中黄芩苷含量,评价乳腺宁凝胶膏剂质量。结果:优化的基质处方为:甘油∶纯水∶NP-700∶Al(OH)3∶酒石酸(0.6475∶0.1712∶0.1446∶0.0163∶0.0068),凝胶膏剂中黄芩苷的含量为0.67mg/g。结论:本试验制备的乳腺宁凝胶膏剂外观平整,成型性好,制备工艺均一,建立的质量标准可靠、准确,为乳腺宁凝胶膏剂进一步研究奠定基础。     

正交设计法优化经络贴巴布剂基质配方研究

目的：优化经络贴巴布剂基质配方。方法：采用正交设计,以初黏力、持黏力、膏体综合感官性能为评价指标,优化处方中的Viscomate NP-700、甘羟铝和甘油的配比。结果：优化处方中的Viscomate NP-700用量为3.0 g,甘羟铝为0.07 g,甘油为18 g。结论：通过优化处方配比,可制得外观优良、黏附性能良好的经络贴巴布剂。     

青鹏膏剂穴位贴敷对大鼠肥大细胞数量和脱颗粒率的影响

目的:观察青鹏膏剂大椎穴贴敷对大鼠穴区组织肥大细胞(MC)数量和脱颗粒率的影响.方法:雄生Wistar大鼠30只随机分为青鹏膏剂穴位贴敷组、电针组和空白对照组,每组10只.青鹏膏剂组大鼠大椎穴穴区局部剃毛后涂抹青鹏膏剂(约25mg,2次/天,每次20min),电针组大鼠大椎穴给予电针刺激.采用甲苯胺蓝染色观察MC的形态、数量和脱颗粒率.结果:青鹏膏剂组和电针组大鼠穴区组织内MC细胞数量增多、体积增大,细胞膜破裂,细胞轮廓不规则,MC脱颗粒现象明显,且MC多沿神经或血管分布.青鹏膏剂组和电针组大鼠穴区组织MC数量比较差异无统计意义(P＞0.05),但均明显高于空白对照组(P＜0.05).三组大鼠穴区组织脱颗粒的MC个数和MC脱颗粒率由高到低依次为青鹏膏剂组、电针组、对照组,两两比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:青鹏膏剂穴位贴敷可激活MC,出现数量增多及募集和脱颗粒现象.     

复方车前凝胶贴膏的制备及初步评价

[目的]研究旨在将复方车前水浸膏制备为易于使用的复方车前凝胶贴膏。[方法]采用Plackett-Burman设计联合Box-Behnken响应面优化法,以初黏力、持黏力、180°剥离强度为评价指标,优选最佳制备处方。采用改良Franz扩散池法,以京尼平苷酸为指标,研究其体外释放行为。以小鼠H22肝癌腹水模型对其药效进行评价。[结果]优化得到复方车前凝胶贴膏的基质配方为NP700,PVPK90,甘油,甘羟铝,酒石酸,蒸馏水(8∶5.38∶32.5∶0.5∶0.5∶44.62)。凝胶膏中京尼平苷酸24 h体外释放(81.23±1.52)%。给药7 d后,与模型组相比,贴膏组与浸膏组小鼠腹水量显著减少(P0.01),腹水中VEGF的量显著下降(P0.05),免疫功能破坏得到显著改善(P0.05),且贴膏组与浸膏组差异无统计学意义。[结论]复方车前凝胶膏的处方合理,制备的凝胶膏黏性良好,指标成分京尼平苷酸体外释放率符合一级动力学方程,复方车前凝胶贴膏能有效减少小鼠腹水量,效果显著。     

均匀设计法优选木芙蓉凝胶膏剂处方及其质量标准研究

目的:优选木芙蓉透皮凝胶膏剂的基质处方及其质量标准的初步研究。方法:采用均匀试验设计法,以黏附性、皮肤追随性、膜残留量和赋形性为评价指标,对各种成分的用量进行优选,该文通过对木芙蓉透皮凝胶膏剂质量控制方法的研究,确定木芙蓉透皮凝胶膏剂中基质的最佳配比,初步制定其质量标准。结果:优选出木芙蓉透皮凝胶膏剂的最佳配比为:甘油∶纯水∶NP-700∶酒石酸∶Al(OH)3=0.6452∶0.2350∶0.1256∶0.0111∶0.0051(质量比)。木芙蓉透皮凝胶膏剂中芦丁的含量稳定,为0.0969 mg·g-1,其含膏量和赋形性符合要求。结论:优选的凝胶膏剂制备工艺稳定可行,建立的质量控制方法准确、可靠、专属性强,可用于该制剂的质量评价,为其临床应用提供参考依据。     

正交试验优选黄地巴布剂的基质处方

目的优选黄地巴布剂的基质处方。方法以初黏力和综合感官(外观、气泡状态、反复揭贴性、舒适性)为考察指标,选取聚丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠、高岭土、甘油、水合氯化铝及柠檬酸的用量为考察因素,采用正交设计法优化黄地巴布剂的基质配比。结果最佳基质配方为聚丙烯酸钠∶羧甲基纤维素钠∶高岭土∶甘油∶水合氯化铝∶柠檬酸=1.25∶0.2∶0.5∶9∶0.18∶0.27。结论按优选配方制得的黄地巴布剂具有良好的初黏力和综合感官,且制备工艺参数合理可行。     

小儿健脾消食穴位凝胶膏剂的制备工艺研究

目的:将小儿健脾消食方研制成小儿健脾消食凝胶膏剂,并且优选小儿健脾消食处方的提取工艺、制剂的成型工艺。方法:以挥发油的含量为评价指标,采用单因素试验和正交试验,优选处方中药材的提取工艺。以膜残留量、皮肤追随性、外观评价、黏附性为指标,采用混料均匀设计试验,选择最佳基质配方。结果:山楂水提2次,提取3 h,加水量16倍。桂枝、苍术、干姜用8倍量蒸馏水,提取8 h。小儿健脾消食凝胶膏剂的最佳基质处方为甘油:NP-700:纯水:酒石酸:Al(OH)_3=0.085:0.609:0.423:0.012:0.005。结论:本实验研制的小儿健脾消食凝胶贴膏制剂工艺稳定可行,黏附性、外观良好,便于贴用,为中医儿科健胃消食疗法提供参考,也为进一步开发中药凝胶贴膏提供实验依据。     

活络止痛凝胶剂的基质配比研究

[目的]通过均匀设计法筛选出活络止痛凝胶剂的最佳处方。[方法]按照《中国药典》2015年版的要求,以剥离度、初黏力和外观评价为指标,采用均匀设计法U_(11)(11~(10))优选活络止痛凝胶剂的处方工艺。[结果]活络止痛凝胶剂基质的最优配比组成为聚丙烯酸钠∶明胶∶高岭土∶甘羟铝∶甘油∶聚乙烯醇=2.50∶5.00∶3.50∶0.04∶40.00∶0.02。[结论]该方法所制的活络止痛凝胶剂具有良好的延展性,外观光滑,黏度湿度,基本符合药典要求,可为其生产提供科学的试验依据。     

芦荟水凝胶巴布贴剂基质优选研究

目的优化芦荟水凝胶贴剂基质配方。方法以水凝胶贴剂基质的外观、初始黏附力、持黏力、剥离强度作为综合指标,以NP700、酒石酸、去离子水、PVPK-30、甘氨酸铝、甘油、芦荟凝胶的用量作为本课题的主要考察因素。依次采用单因素设计实验法,及正交设计实验法评价不同材料用量配比下水凝胶贴剂基质的性能。结果芦荟水凝胶贴剂基质的最佳配方为NP7007.0g,甘氨酸铝0.4g,酒石酸0.2g,甘油35.0g,PVPK-302.0g,氮酮+丙二醇5.0g,水36.4g,芦荟凝胶14.0g。结论按优选基质配方制备的芦荟水凝胶巴布贴剂的基质性能良好,基质均匀,表面光滑,无细小颗粒残留,有较少气泡,容易涂布。巴布贴剂成型后具有较好的初黏力和持黏力,易剥离且剥离时无残留,保湿性能良好,对皮肤无刺激性和致敏性。     

针刀松解法对膝骨性关节炎模型大鼠血清炎性细胞因子的影响

目的:观察针刀松解法对膝骨性关节炎(KOA)模型大鼠血清炎性细胞因子含量的影响,探讨针刀松解法对KOA的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组和针刀组。采用改良的Murat法制备KOA模型,4周后电针组和针刀组给予相应的治疗。7周后进行实验取材和指标检测。结果:模型组血清中IL-1β、IL-6及TNF-α的含量明显增多,与正常组比较有显著性差异(P<0.05)。针刀干预后血清中上述三种物质的含量开始降低,其中TNF-α的含量较模型组明显下降,有显著性差异(P<0.05)。结论:针刀松解法对KOA大鼠血清炎性细胞因子有良性调节作用,这可能是治疗KOA起效的机制之一。     

阿司匹林对Poly-IC诱导小胶质细胞激活的影响及其机制

目的研究阿司匹林对Poly-IC诱导小胶质细胞激活的影响及其机制。方法通过体外培养小鼠小胶质细胞BV2细胞株,建立Poly-IC刺激诱导小胶质细胞免疫激活模型。本研究分为对照组(不做处理)、模型组(Poly-IC 10μg/ml)、高剂量阿司匹林组(1 mmol/L阿司匹林)、低剂量阿司匹林组(0.1 mmol/L阿司匹林)、高剂量阿司匹林预处理组(Poly-IC 10μg/ml+1 mmol/L阿司匹林)、低剂量阿司匹林预处理组(Poly-IC 10μg/ml+0.1 mmol/L阿司匹林)。应用细胞免疫荧光法检测小胶质细胞吞噬能力﹑活性氧﹑Iba1蛋白表达,RT-qPCR法检测各组小胶质细胞炎症因子IL-1β﹑IL-6﹑IL-10﹑TNF-α﹑COX-2的mRNA表达。结果与对照组相比较,模型组中小胶质细胞形态发生改变,吞噬能力增强,活性氧产生增加,Iba1蛋白表达下降。且模型组中IL-1β(20.55±1.92)﹑IL-6(63.98±7.83)﹑TNF-α(16.84±3.19)﹑COX-2(6.78±0.42)的mRNA表达较对照组IL-1β(1.01±0.14)﹑IL-6(0.95±0.17)﹑TNF-α(1.22±0.38)﹑COX-2(0.87±0.11)显著增加(t=26.14,10.22,17.06,37.07;均P<0.01)。经阿司匹林预处理的小胶质细胞吞噬能力较模型组减弱,活性氧产生较模型组降低,且Iba1蛋白表达较模型组有一定恢复。高剂量阿司匹林预处理组促炎因子IL-1β(9.95±0.52)﹑IL-6(39.64±6.89)﹑TNF-α(1.57±0.42)﹑COX-2(2.47±0.14)的mRNA表达较模型组明显降低(t=14.18,3.69,16.68,27.03;均P<0.01)。结论阿司匹林对Poly-IC诱导小胶质细胞激活有抑制作用,其机制可能与阿司匹林抑制胶质细胞炎性因子的表达有关。     

栀黄止痛散外敷治疗急性痛风性关节炎

目的:观察栀黄止痛散外敷治疗急性痛风性关节炎患者的临床疗效,并观察其对患者血清炎性因子水平的影响。方法:60例急性痛风性关节炎患者分为栀黄止痛散组和安康信组各30例。安康信组给予口服安康信,栀黄止痛散组在对照组治疗基础上给予外敷栀黄止痛散,两组均治疗两周。比较两组患者治疗前,治疗第3天、第7天、第14天的视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS);比较两组患者治疗前、治疗第7天、第14天血尿酸(uric acid,UA)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-8、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,同时比较两组患者临床疗效。结果:栀黄止痛散组有效率为96.6%,安康信组有效率为80.0%,两组有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗第3天,栀黄止痛散组的VAS低于安康信组(P<0.05);治疗第7天,栀黄止痛散组UA、CRP、ESR、IL-6、IL-8、TNF-α和IL-1β均低于安康信组(P<0.05);治疗第14天,栀黄止痛散组UA、ESR、CRP水平低于安康信组(P<0.05)。两组治疗后各时间点以上指标与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:栀黄止痛散外敷治疗急性痛风性关节炎疗效显著,可显著降低患者血清炎性因子、ESR、CRP、UA水平,显著改善患者临床症状。     

芹菜素对肝缺血-再灌注大鼠IL-1β、IL-6及TNF-α表达的影响

目的 探讨芹菜素对肝缺血-再灌注大鼠血IL-1β、IL-6、TNF-α表达的影响。 方法 将40只雄性Wistar大鼠随机分为A(假手术)组、B(肝缺血-再灌注损伤)组、C(芹菜素10 mg/kg)组、D(芹菜素20 mg/kg)组。Pringle法建立肝缺血(1 h)-再灌注(6 h)损伤大鼠模型。C、D组在再灌注的同时腹腔内分别给芹菜素10、20 mg/kg。HE染色观察肝组织病理变化。测定血ALT、AST。酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度。 结果 C、D组肝组织病理改变明显轻于B组。C组血IL-1β、IL-6、TNF-α、ALT、AST均高于D组，且均低于B组(均P＜0.01)。IL-1β、IL-6、TNF-α与ALT正相关(r=0.56、0.64、0.57，均P＜0.01)；与AST正相关(r=0.61、0.58、0.63，均P＜0.01)。 结论 芹菜素对缺血-再灌注损伤大鼠肝损伤的保护机制之一为下调血IL-1β、IL-6、TNF-α表达，呈现剂量效应关系。      

抑制高迁移率组蛋白1对大鼠急性脊髓损伤后炎性反应的影响

目的探讨抑制高迁移率组蛋白1(HMGB1)对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)炎性反应的影响。方法选择健康雄性Wister大鼠32只,随机分为正常组、假手术组、模型组、甘草酸(Gly)组,每组8只。正常组大鼠不予任何刺激,假手术组大鼠只咬除T10椎板,不损伤脊髓,模型组和甘草酸组大鼠采用改良Allen’s法制备T10不完全性急性脊髓损伤模型,甘草酸组给予200mg/kg甘草酸灌胃处理,每天1次,连用3天。术后3天取各组大鼠T10段脊髓,应用ELISA法检测脊髓组织HMGB1、核转录因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)水平,qRT-PCR法检测脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达量。结果ELISA结果显示,脊髓损伤后,模型组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β水平较正常组明显升高[(3139.33±68.89)pg/mL比(1977.42±19.08)pg/mL、(2420.16±30.45)pg/mL比(1390.88±15.32)pg/mL;(244.61±5.49)pg/mL比(103.35±2.20)pg/mL、(271.91±3.24)pg/mL比(138.90±3.34)pg/mL、(109.89±3.33)pg/mL比(47.44±1.94)pg/mL,P均<0.01];甘草酸组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β水平较模型组明显降低[(2566.91±23.75)pg/mL比(3139.33±68.89)pg/mL、(1728.55±24.27)pg/mL比(2420.16±30.45)pg/mL、(177.50±4.86)pg/mL比(244.61±5.49)pg/mL、(190.77±1.95)pg/mL比(271.91±3.24)pg/mL、(66.38±3.62)pg/mL比(109.89±3.33)pg/mL,P均<0.01]。RT-qPCR结果表明,模型组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平较正常组明显升高[(1.25±0.08)比(0.57±0.02)、(1.66±0.04)比(0.76±0.02)、(1.26±0.06)比(0.53±0.03)、(1.73±0.08)比(0.94±0.07)、(1.82±0.07)比(1.01±0.06),P均<0.01];甘草酸组大鼠脊髓组织HMGB1、NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA水平较模型组明显降低[(0.79±0.03)比(1.25±0.08)、(1.14±0.04)比(1.66±0.04)、(0.75±0.03)比(1.26±0.06)、(1.37±0.04)比(1.73±0.08)、(1.31±0.04)比(1.82±0.07),P均<0.01]。结论 HMGB1至少部分参与介导ASCI炎性反应,并与HMGB1依赖的NF-κB信号通路密切相关,甘草酸可能通过抑制HMGB1/NF-κB通路减轻大鼠急性脊髓损伤后的炎性反应。     

参苓白术散对溃疡性结肠炎脾虚湿困证大鼠结肠组织TLR2、MyD88、COX-2表达的影响

目的观察参苓白术散对溃疡性结肠炎脾虚湿困证大鼠结肠组织Toll样受体2(TLR2)、髓样分化因子88(MyD88)及环氧化酶-2(COX-2)表达的影响,探讨参苓白术散改善溃疡性结肠炎的作用机制。方法采用TNBS/乙醇灌肠结合环境与饮食干预法复制溃疡性结肠炎脾虚湿困证大鼠模型。按照随机数字表将大鼠分为正常组、模型组、参苓白术散组(15.6 g/kg)、参苓白术散(15.6 g/kg)+TLR2激动剂(50μg/只)组、参苓白术散(15.6 g/kg)+TLR2拮抗剂组(0.121 2μg/g),每组12只,连续给药14 d。ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及白细胞介素1β(IL-1β)水平,免疫组织化学法和Western blot法测定结肠组织中TLR2、MyD88、COX-2蛋白表达,Real-time PCR法检测结肠组织TLR2、MyD88、COX-2 mRNA表达。结果模型组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平均升高(P<0.05),结肠组织TLR2、MyD88、COX-2蛋白和mRNA表达增强(P<0.01);与模型组比较,参苓白术散组和参苓白术散+TLR2拮抗剂组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平均下降,结肠组织TLR2、MyD88、COX-2蛋白和mRNA表达下调(P<0.01)。与参苓白术散组比较,参苓白术散+TLR2拮抗剂组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平,结肠组织TLR2、MyD88、COX-2蛋白和mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);参苓白术散+TLR2激动剂组大鼠血清TNF-α、IL-6及IL-1β水平,结肠组织TLR2、MyD88、COX-2蛋白和mRNA表达均高于参苓白术散组(P<0.01)。结论参苓白术散可下调溃疡性结肠炎脾虚湿困证大鼠结肠组织TLR2、MyD88、COX-2表达,降低炎性因子的释放;参苓白术散通过负性调控TLR2/MyD88信号通路,减轻肠道炎症反应,可能是其治疗溃疡性结肠炎的重要机制之一。     

膝关节骨关节炎软骨中YKL-40、IL-1β的表达及相关性探讨

目的 研究膝关节骨关节炎(KOA)病患软骨中甲壳质酶(YKL 40)、白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平,并分析两者相关性.方法 选择该院骨科住院就诊的符合KOA诊断的病患38例,记为观察组.再选择同期因膝关节外伤行膝关节镜检治疗或膝关节骨折内固定手术患者关节软骨30例,记为对照组.根据KOA放射线及关节镜下分级标准,将观察组分为轻度组16例、中度组11例及重度组10例.对比所有病患的YKL 40、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,同时进行Mankin评分、细胞死亡率的对比.结果 观察组YKL-40、IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平及Mankin评分、细胞死亡率均显著高于对照组,并且观察组中轻度、中度、重度的YKL-40等指标水平呈上升水平(均P＜0.05).并且YKL-40表达水平与IL-1β水平存在显著的正相关(r=0.738,P=0.000).此外,YKL-40表达水平还与IL-6(r=0.819,P=0.000)、TNF-α(r=0.871,P=0.000)表达水平及Mankin评分(r=0.832,P=0.000)、细胞死亡率存(r=0.832,P=0.000)在显著的正相关.结论 KOA病患中YKL-40、IL-1β呈高表达状态,并且两者呈现显著的正相关.     

针刺对慢性萎缩性胃炎大鼠“足三里”穴区 HRH2、SP及炎性因子表达的影响

目的观察针刺对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠及正常大鼠“足三里”穴区组胺H2受体(histamine H2 receptor,HRH2)、P物质(substance P,SP)及炎性因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)的影响,并判断两者间是否存在差异。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、正常+针刺组和模型+针刺组,每组8只。采用1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(1-methyl-2-nitro-1-nitrosoguanidine,MNNG)+乙醇灌胃+饥饱失常法建立大鼠CAG模型。针刺组每日治疗1次,每次20 min,连续针刺14 d。干预结束后,运用HE染色法观察胃组织病理学变化,运用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测“足三里”局部穴区HRH2、SP、IL-6、IL-1β及TNF-α的表达。结果造模后胃组织病理形态改变显著,光镜下可见大量炎症细胞浸润,腺体萎缩且结构紊乱,纤维组织增生充填,并伴有散在出血点,符合CAG病理诊断标准。IHC染色IOD值显示,与正常组相比,模型组、正常+针刺组均能升高局部穴区HRH2表达(P<0.01);与模型组相比,模型+针刺组可以显著上调穴区组织SP表达(P<0.01)。对于炎性因子而言,与正常组相比,模型组均能上调IL-6、IL-1β、TNF-α表达(P<0.05或P<0.01),正常+针刺组可使IL-6表达上调(P<0.01);与模型组相比,模型+针刺组可以降低IL-6、IL-1β表达(P<0.05),而升高TNF-α表达(P<0.01)。结论针刺能对正常和CAG状态下大鼠“足三里”穴区HRH2、SP及炎性因子的表达产生影响,且所产生的生物学效应具有一定趋势,跟是否处于疾病状态有关。     

抗 HMGB1抗体对小鼠肝纤维化的保护作用

目的：：探讨 HMGB1在 CCL4导致的肝纤维化发生发展中的作用及作用机制。方法：昆明种雄性小鼠30只,随机分为3组：正常组、CCL4肝纤维化组、抗 HMGB1抗体组,建模8周后取肝组织及血清。用 ELISA 法检测血清中 HA、Col-Ⅰ、PⅢP 和 IL-6、TNF-α的含量;用 HE 染色和天狼猩红染色观察肝组织病理改变和胶原纤维形成情况;用 Real time RT-PCR 法检测小鼠肝组织中 TGF-β、α-SMA 和MMP-9 mRNA 的表达。结果：CCL4肝纤维化组小鼠血清 HA、Col-Ⅰ、PⅢP、IL-6、TNF-α含量和肝组织 TGF-β、α-SMA 和 MMP-9 mRNA 表达均明显高于正常组小鼠(P <0.05);而且抗 HMGB1抗体组小鼠血清 HA、Col-Ⅰ、PⅢP、IL-6、TNF-α含量和肝组织 TGF-β1、α-SMA 和 MMP-9 mRNA 表达均明显低于 CCL4肝纤维化组小鼠(P <0.05)。结论：抗 HMGB1抗体可减轻小鼠肝纤维化,减少小鼠炎症因子和纤维化因子的表达;HMGB1可能通过启动炎症反应而促进肝纤维化发生发展。     

HBV X蛋白对大鼠肾小球系膜细胞增殖及促炎性细胞因子表达的影响

目的探讨HBV X基因表达的蛋白(HBVx)对体外培养的大鼠系膜细胞表达肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β、IL-6及细胞增殖的影响。方法构建含HBV X基因的真核表达载体pCI-neo-X,采用脂质体法将pCI-neo-X转染给体外培养的大鼠系膜细胞,Western blot测定HBx的表达,以半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定体外培养大鼠系膜细胞TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞增殖。结果转染pCI-neo-X的系膜细胞(MC+pCI-neo-X组),HBx在36、48 h表达明显。同时TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达量较未转染和转染空载体组明显增高。上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平在MC+pCI-neo-X组较未转染和转染空载体组均增高,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞增殖在36、48 h MC+pCI-neo-X组最明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBx可诱导大鼠系膜细胞高表达TNF-α、IL-1β和IL-6,促进系膜细胞增殖。HBx对系膜细胞的增殖作用可能与TNF-α、IL-1β、IL-6的高表达有关。