CD4~+CD25~+Treg细胞、TGF-β和IL-10在反复自然流产中的变化

目的探讨外周血CD4+CD25+Treg细胞数量和抑制性细胞因子TGF-βI、L-10含量变化在反复自然流产中的作用。方法采用ELISA法检测30例反复自然流产患者3、0例正常妊娠妇女和30例正常非孕妇女外周血抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量,三色流式细胞术检测上述研究对象外周血CD4+CD25+T细胞比例。结果反复自然流产组妇女外周血CD4+CD25+Treg细胞的百分率(6.66±1.30)%明显低于正常非孕组(10.99±2.64)%(P<0.05)和正常妊娠组(12.63±3.05)%(P<0.05)。反复自然流产组妇女外周血TGF-β(123.64±27.31)pg/L明显低于正常非孕组对照组TGF-β(179.25±24.67)pg/L(P<0.05)和正常妊娠组TGF-β(211.72±63.49)pg/L(P<0.05);反复自然流产组妇女外周血IL-10(145.37±42.45)pg/L明显低于正常非孕组对照组IL-10(203.47±42.56)pg/L(P<0.05)和正常妊娠组IL-10(234.45±51.21)pg/L(P<0.05)。结论外周血CD4+CD25+Treg细胞的比例低下以及抑制性细胞因子TGF-β和IL-10含量降低可能参与反复自然流产的发生。     

来氟米特对胶原性关节炎大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响

目的:探讨来氟米特对胶原性关节炎中免疫抑制性CD4+CD25+调节性T细胞的作用.方法:II型胶原诱导Wistar大鼠,建立胶原性关节炎模型;检测关节炎大鼠多发性关节炎评分,每周2次;流式细胞仪检测脾淋巴细胞中CD4+CD25+调节性T细胞的比例;RT-PCR检测脾淋巴细胞中Foxp3 mRNA的表达.结果:与模型组比...     

猪囊尾蚴病患者CD4~+ CD25~+调节性T细胞水平的变化

目的检测猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+调节性T淋巴细胞及其FOXP3的表达情况,探讨CD4+CD25+调节性T淋巴细胞在猪囊尾蚴感染中的免疫调控作用及意义。方法采用流式细胞仪检测11例猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的含量,同时观察CD4+CD25+T细胞中表达FOXP3群体的百分含量。结果囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量为6.11%,较正常人(3.94%)明显升高(P<0.05);患者外周血中CD4+CD25+T细胞表达FOXP3的细胞百分含量为15.67%,与正常对照组(11.09%)有显著性差异(P<0.05)。结论猪囊尾蚴病患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞的百分含量显著升高,表明CD4+CD25+调节性T细胞可能参与猪囊尾蚴感染的免疫抑制。     

雷帕霉素诱导Balb/c小鼠CD4~+ CD25~+ foxp3~+调节性T细胞增殖

目的探讨雷帕霉素对Balb/c小鼠CD4+ CD25+ foxp3+调节性T细胞的作用。方法取8wk龄的SPF级Balb/c小鼠30只,随机分为两组,实验组每只灌胃雷帕霉素0.4mg.d-1,对照组灌胃每天予等体积无菌水,共3wk。无菌条件下肝素抗凝心脏采血,分离脾脏,制备单细胞悬液。采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾细胞CD4+CD25+T细胞,实时定量PCR检测小鼠脾细胞foxp3 mRNA的表达。结果实验组小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+T细胞的比例分别为(9.95±4.65)%和(24.13±10.06)%,对照组小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+T细胞的比例分别为(5.01±1.49)%和(8.48±3.19)%,差异均有显著性(P<0.01)。实验组小鼠脾细胞foxp3 mRNA的表达水平明显高于对照组,是对照组的6.029倍,差异有显著性(P<0.01)。结论雷帕霉素能够明显诱导Balb/c小鼠体内CD4+CD25+T细胞的增殖,并能提高foxp3+ mRNA的表达。     

甲泼尼龙对哮喘患者外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞影响的体外研究

目的观察哮喘患者外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)功能状态及甲泼尼龙对其的影响。方法清晨取静脉血5 mL,常规分离外周血单个核细胞,分为健康组、哮喘组及1×10-7 mol·L-1甲泼尼龙哮喘干预组,刺激培养48 h,用ELISA法测定IL-10及TGF-β1的浓度;流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg的比例及细胞内Foxp3表达,用SPSS 17.0进行分析。结果哮喘组,外周血CD4+ CD25+ Treg细胞比例降低,CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞减少,TGF-β1分泌减少,IL-10分泌有增高趋势,但与健康组比较无统计学意义;甲泼尼龙可以明显增加哮喘急性发作期患者CD4+ CD25+ Treg比例,Foxp3表达明显增强;但未能增加TGF-β1及IL-10的分泌。结论哮喘患者CD4+ CD25+ Treg功能低下,可能是哮喘发病机制之一;甲泼尼龙可能通过上调CD4+ CD25+ Treg数量,起到控制哮喘急性发作的作用。     

免疫性血小板减少症患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞变化的临床意义

目的探讨免疫性血小板减少症(ITP)患者治疗前后CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其临床意义。方法采用流式细胞术检测62例ITP患者(A组)采用不同治疗方案治疗前后和36例正常对照者(B组)外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例。采用RT-PCR检测Foxp3mRNA的表达。结果与B组比较,A组治疗前CD4+CD25+调节性T细胞比例较高[(9.60±4.15)%vs.(16.56±5.68)%],CD4+Foxp3+和CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞比例较低[(3.88±1.34)%vs.(1.98±1.53)%和(2.72±0.93)%vs.(1.38±0.98)%](P<0.05)。与治疗前比较,A组治疗后CD4+CD25+调节性T细胞比例降低[(16.56±5.68)%vs.(10.72±5.15)%](P<0.05)。利妥昔单抗联合丙种球蛋白治疗组CD4+CD25+调节性T细胞比例较其他方案治疗组升高(P<0.05)。A组治疗前的Foxp3mRNA表达低于B组,治疗后明显升高(P<0.05)。结论 CD4+CD25+调节性T细胞数量可能与ITP的严重性密切相关。     

雷帕霉素诱导大鼠体内CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的增殖

目的 探讨雷帕霉素(RPM)对大鼠CD4+CD25+FoxP3调节性T细胞的影响.方法 大鼠20只随机均分为两组:实验组RPM 2 mg·kg-1·d-1灌胃2周;对照组用生理盐水替代.无菌件下下腔静脉采血,并分离脾脏及胸腺,制备单个核细胞悬液.采用流式细胞术检测大鼠外周血、脾脏及胸腺内CD4+CD25+T细胞的占单个核细胞的比例,实时定量-PCR检测脾脏细胞FoxP3 mRNA表达,ELISA检测外周血血清转化生长因子β(TGF-13)和白细胞介素10(IL-10)含量.结果 实验组外周血、脾脏和胸腺中CD4+CD25+T细胞的比例明显高于对照组(P＜0.05).实验组大鼠脾脏细胞FoxP3 mRNA表达为对照组的4.1倍.实验组TGF-β和IL-10显著高于对照组(P＜0.05).结论 RPM能诱导大鼠体内CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞增殖,且增加体内免疫抑制性细胞因子TGF-β和IL-10的分泌.     

孕妇外周血CD4+CD25+调节性T细胞对子痫前期的预测

目的:探讨孕妇外周血CD4+ CD225+调节性T细胞(CD4 CD25+ Tregs)对子痫前期的预测价值.方法:选取190例于我院产前常规孕期体检及分娩的孕产妇作为研究对象,按孕产妇是否发生子痫前期分为子痫前期组及正常对照组,采用流式细胞仪测定各孕妇20～24周外周血单个核细胞(PBMC)中CD4T细胞及CD4 CD25+ Tregs的比率,并随访至分娩.采用磁珠分选技术分选随访期间确诊子痫前期的患者外周血PBMC中CD4 CD25+ Tregs和CD4CD25T细胞,酶联免疫仪检测CD4 CD25+ Tregs对CD4CD25T细胞增殖的抑制作用,并与正常孕妇组对比.结果:①随访情况.190例孕产妇妊娠期内有15例发展为子痫前期,其余175例为正常分娩,2组在剖宫产率、胎儿心率异常率、新生儿1 min及5 min的Apgar评分有显著性差异(P＜0.05).②CD4 CD25+ Tregs的数量.子痫前期组和正常对照组外周血PBMC中CD4T细胞比率分别为34.21％±6.92％和35.72％±7.45％,2组比较无显著性差异(P＞0.05).子痫前期组外周血PBMC中CD4 CD25+ Tregs占CD4T细胞的比率为6.71％±2.21％,明显低于正常对照组的12.01％±2.98％(P＜0.05).③CD4 CD25+ Tregs的抑制功能.子痫前期组CD4 CD25+ Tregs对CD4 CD25-T细胞增殖的抑制百分率为57.56％±9.47％,正常孕妇组为78.27％±12.43％,2组比较有显著性差异(P＜0.05).④CD4 CD25+ Tregs的预测性.以CD4+ CD25+ Trges数量变化预测子痫前期的ROC曲线下面积为0.913,Tregs的最佳截断点为6.605％,预测子痫前期的敏感度86.7％、特异度82.85％.结论:孕妇妊娠中期外周血CD4 CD25+ Tregs数量减少和(或)抑制功能下降与子痫前期的发生相关,可作为子痫前期的预测性指标.     

TF3-H4对CD4~+CD25~+调节性T细胞和CD4~+CD25~-效应性T细胞早期活化的影响

目的观察1',2',3',7'-四氢茶黄素-3,3'-双没食子酸酯(TF3-H4)对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的影响,分析TF3-H4对两群功能相反的CD4+T细胞的作用。方法免疫磁珠分离BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞,加入ConA或PDB,和TF3-H4共同孵育12 h后收集细胞,流式细胞仪分析细胞表面早期活化标志CD69的表达。结果在ConA和PDB的作用下,两群细胞早期活化标志CD69的表达均升高。TF3-H4(20 mg.L-1)不能抑制PKC激动剂PDB激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69的表达,却能抑制ConA激活的CD4+CD25-效应性T细胞CD69表达;同时,TF3-H4也能明显抑制ConA激活的CD4+CD25+调节性T细胞的CD69表达。结论茶黄素衍生物TF3-H4可能经由TCR活化途径的上游抑制CD4+CD25-效应性T细胞活化;TF3-H4对CD4+CD25+调节性T细胞和CD4+CD25-效应性T细胞早期活化的抑制作用,可能是该类化合物发挥抗炎、抗肿瘤作用的机制之一。     

狼疮性肾炎患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的 探讨狼疮性肾炎(LN)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)的变化及意义.方法 采用流式细胞术检测30例LN患JL(LN组)和30例健康儿童(对照组)外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分比,并分析其与24-h尿微量白蛋白(UMA)及狼疮活动指数(SLE-DAI)的关系.结果 LN患儿外周血中CD4+CD25+Tregs明显低于对照组(P<0.01);CD4+CD25+Tregs 与24-h UMA呈显著负相关,与SLE-DAI呈等级负相关.结论 LN患儿外周血CD4+CD25+Tregs百分比异常降低可能参与LN的起病与发展.CD4+CD25+Tregs百分比与24-h UMA呈显著负相关,与SLE-DAI呈等级负相关,提示可以作为监测LN患儿病情及预后的指标.     

Dynamic Frequency of Blood CD4+CD25+ Regulatory T Cells in Rats with Collagen-induced Arthritis

CD4+CD25+ regulatory T cells (CD4+CD25+ Tregs) have been shown to play a regulatory or suppressive role in the immune response and are possibly relevant to the pathogenesis of autoimmune diseases. In the present study, we attempted to investigate the frequency of CD4+CD25+ Tregs in peripheral blood (PB) of collagen-induced arthritis (CIA) rats during the development of arthritis, to determine whether their frequency is involved in the immunoregulation of this disease. The results showed that normal rats had similar frequencies of CD4+CD25+ Tregs in PB during the experiment time, expressed as a percentage of CD4+CD25+Foxp3+ T cells among the CD4+ T lymphocyte population. In contrast, the frequency of CD4+CD25+Foxp3+ T cells in CIA rats was found to change during the development of arthritis. In CIA rats, there is a significant negative correlation between the frequency of CD4+CD25+Foxp3+ T cells and paw swelling (r=-0.786, p< 0.01). The relationship between the frequency of CD4+CD25+Foxp3+ T and immune activation was not found in normal rats. During the time course, the frequency of CD4+CD25+Foxp3+ T was lower in CIA rats than in normal ones. The data suggest that the frequency of PB CD4+CD25+ Tregs may be a promising marker for arthritis activity.     

CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中表达的初步研究

目的初步探讨CD4^＋CD25^＋调节性T淋巴细胞在急性脑梗死患者外周血中的表达情况。方法采用流式细胞术分别检测取98例急性脑梗死患者和50名健康体检者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞所占比例,并用双抗体夹心法检测各组血清TGF-B、IL-10和IL-2。结果急性脑梗死患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞水平显著高于对照组（P〈O．01）,血清中TGF-β、IL-10和IL-2显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋T细胞在急性脑梗死患者外周血中表达显著升高,血清中的相关细胞因子参与诱导CD4^＋CD25^＋T细胞的生成,提示CD4^＋CD25^＋T细胞可能参与了急性脑梗死的发生、发展。     

乙型肝炎患者CD4+CD25+节性T细胞的分子表达研究

目的 研究慢性乙型肝炎(chronic hepatitisB,CHB)患者和乙型肝炎病毒携带者(asymptomatic HBV carriers,ASC)外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+regulatory T cells,Tregs)4个重要分子[细胞间黏附分子-1(ICAM-1),神经纤毛蛋白-1 (Neuropilin-1),Toll样受体TLRS、TLR8]的表达情况,并分析其可能的作用.方法 收集50例CHB患者(CHB组)、28例ASC(ASC组)和24例健康献血者(NC组)的外周静脉血,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,应用MACS免疫磁殊和AutoMACS分离系统分选CD4+CD25+ Tregs,提取CD4+CD25+ Tregs总RNA,逆转录成cDNA后,采用SYBR Green Ⅰ荧光标记技术进行定量PCR检测待测分子的表达水平.结果 荧光定量PCR结果显示,4个待测分子中,ICAM-1、Neuropilin-1、TLR5的表达水平在各研究组间差异均无统计学意义(P＞0.05);TLR8在ASC组外周血CD4+CD25+Tregs中的表达水平明显低于NC组和CHB组,差异有统计学意义(P＞0.05),TLR8的表达水平在CHB组和NC组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 荧光定量PCR显示TLR8的表达水平在各组之间存在明显差异,提示TLR8在HBV感染过程中可能对外周血CD4+CD25+Tregs的功能起着重要的调控作用.     

调节性T淋巴细胞在HCV感染者病程不同阶段的表达

目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在HCV感染者病程不同阶段的表达及其意义。方法收集非活动性HCV感染33例(A组)、活动性HCV感染32例(B组)、慢性丙型肝炎56例(C组)、HCV相关性肝硬化47例(D组)、HCV相关性肝癌45例(E组)和健康对照者60例(F组),采用流式细胞术检测外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+Treg的表达频率,并进行统计学分析。结果 B、C、D、E组外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+Treg的表达频率均明显高于F组(P<0.01)。组间比较,A组患者外周血的CD4+CD25+Treg细胞表达频率明显低于B、C、D、E组(P<0.01),D、E组表达频率明显高于B、C组(P<0.01)。结论 HCV感染导致CD4+CD25+Treg细胞的增殖与活化,使机体对其的免疫清除不完全,从而促进HCV感染者疾病的进展和肝癌的发生。     

Thymol as a reciprocal regulator of T cell differentiation: Promotion of regulatory T cells and suppression of Th1/Th17 cells

Regulatory T cells (Tregs) are critical for maintaining immune response and enhancing their differentiation has therapeutic implications for autoimmune diseases. In this study, we investigated the effects of thymol a well-known monoterpene from Thyme on differentiation and function of Tregs. In vitro generation of Tregs from purified naïve CD4⁺CD25⁻ T cells in the presence of thymol was carried out. Suppressor activity of generated Tregs was examined by changes in the proliferation of CFSE-labeled conventional T cells. Thymol promotes differentiation of naïve CD4⁺CD25⁻ T cells to CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺ Tregs [66.9–71.8% vs. control (47%)] and increased intensity of Foxp3 expression on Tregs (p < 0.01). In functional assay, an increased immune suppression by thymol-induced Tregs (≈2.5 times of untreated Tregs) was detected. For in vivo study, thymol was intraperitoneally administered to ovalbumin (Ova)-immunized mice. Flow cytometry assessment of spleens from thymol-treated Ova-immunized mice showed increased number of CD4⁺ Foxp3⁺ Tregs (>8%, p < 0.01(and decreased levels of CD4⁺T-bet⁺ Th1 and CD4⁺RORγt⁺ Th17 cells resulted in significant decreased Th1/Treg and Th17/Treg ratios. In ex vivo Ova challenge of splenocytes from thymol-treated Ova-immunized mice, similarly higher levels of CD4⁺ Foxp3⁺ Tregs, and also elevated TGF-β expression in CD4⁺Foxp3⁺ population (48.1% vs. 18.9% in untreated Ova-immunized group) and reduced IFN-γ-producing CD4⁺T-bet⁺ T cells and IL-17-producing CD4⁺RORγt⁺ T cells were detected. This led to marked decreased ratios of IFNγ/TGF-β and IL-17/TGF-β expressions. In conclusion, this study revealed thymol as a compound with enhancing effects on Treg differentiation and function, which may have potential benefits in treatment of immune-mediated diseases with Th1/Th17 over-activation.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在类风湿性关节炎中的研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)主要发挥抑制性免疫调节功能,在维持外周免疫耐受和预防自身免疫性疾病中发挥重要作用。该文综述了CD4+CD25+Tregs的特征、作用机制及其在类风湿性关节炎(RA)中的作用,以便进一步研究此群细胞的功能,为RA的防治提供新的思路。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与慢性乙型肝炎病毒感染的关系

目的 探讨调节性T细胞（Treg）在慢性乙型肝炎病毒感染中的免疫调节作用。方法 采用流式细胞术检测慢性活动性肝炎患者、乙型肝炎病毒携带者、乙型肝炎恢复者及健康对照者外周血CIN^＋T细胞中的CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例。采用免疫组织化学法检测肝组织中Foxp3的表达。统计分析外周血中CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例数与血清HBeAg和HBVDNA含量的关系。结果 外周血CIN^＋T细胞中CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的比例数在慢性活动型肝炎组和乙型肝炎病毒携带组均高于健康对照组（P〈0．05），乙型肝炎病毒携带者组高于乙型肝炎恢复组（P〈0．05）。Foxp3在慢性活动型肝炎组肝组织中的阳性率和阳性细胞数均高于乙型肝炎病毒携带者组（P〈0．05）。外周血HBeAg（＋）患者Treg的比例数高于血清HBeAg（-）患者Treg的比例数（t=1．67．P〈0．05）。患者外周血CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg的比例数与血清HBV DNA含量呈正相关（r=0．56，P〈0．01）。结论 CIN^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞可能与乙型肝炎病毒感染慢性化及乙型肝炎病毒的清除有关。     

不同剂量雷帕霉素对小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞的影响

目的研究不同剂量雷帕霉素对小鼠体内Treg细胞的影响。方法将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D三组分别灌胃雷帕霉素1、2、3 mg.kg-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周。3周后,无菌条件下心脏采血,EDTA抗凝,分离脾脏,制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞水平(CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比)。结果实验组(B、C、D)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(9.62±1.43)%(、13.76±1.97)%(、15.41±2.45)%和(12.23±4.56)%(、23.03±6.18)%(、25.17±6.42)%,对照组(A)小鼠外周血和脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞水平分别为(3.52±0.65)%和(6.53±3.01)%,无论是在外周血还是脾细胞中,B、C、D组CD4+CD25+Treg细胞水平明显高于A组(P0.05),C、D组与B组之间CD4+CD25+Treg细胞水平也有明显差异性(P0.05),C组和D组之间CD4+CD25+Treg细胞水平无明显差异性(P0.05)。结论雷帕霉素能够诱导昆明系小鼠体内CD4+CD25+Treg细胞增殖,其使用剂量可以影响CD4+CD25+Treg细胞的增殖程度。