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相似文献
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1.
目的比较硫糖铝和多种糖类对抗幽门螺杆菌重组VacA卵黄抗体保护作用,为制备能耐受胃酸和蛋白酶的IgY制剂奠定基础。方法诱导DH5-αvacA-pQE30大量表达VacA蛋白,制备纯化的VacA IgY。在不同酸性的IgY液中加入同浓度各种保护剂,在相同酸性的IgY液中加入不同浓度的各种保护剂,然后加入不同浓度硫糖铝和正常胃内浓度或高浓度的胃蛋白酶,以ELISA法测定试验组IgY的剩余抗体活性(AR)。结果在pH2.0和3.0条件下,各保护剂均能提高IgY抗体活性,且硫糖铝对IgY抗体活性的保护作用优于糖类,在此条件下50%和40%硫糖铝均可完全保持IgY抗体活性。在pH2.0-3.0及正常或高胃蛋白酶浓度下,30%以上硫糖铝均可有效保护IgY的活性。结论低pH下硫糖铝对IgY抗体活性的保护作用优于糖类,且30%以上硫糖铝可增强VacA IgY对胃蛋白酶的耐受能力,是较理想的IgY保护剂。  相似文献   

2.
幽门螺杆菌重组VacA-HpaA IgY的制备   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:采用基因工程技术大量表达、提纯幽门螺杆菌(H pylori)细胞空泡毒素毒性片段,和黏附素片段的融合蛋白,以此为抗原,制备高效价的抗VacA-HpaA蛋黄抗体(IgY).方法:大量培养重组菌pQE30-VacA-HpaA- DH5α,诱导表达获得融合蛋白VacA—HpaA, Ni2 -NTA树脂纯化.将纯化的重组蛋白免疫鸡,水稀释法提取IgY,硫酸铵沉淀法纯化浓缩VacA—HpaA IgY.ELISA法测定抗体产生的时间-效价变化,SDS—PAGE分析纯度, Bradford法测定蛋白含量,Western blot检测其分别对VacA和HpaA抗原的特异性,ELISA法检测效价.结果:重组蛋白主要以包涵体形式表达,免疫鸡后提取的IgY可与该蛋白发生免疫反应, IgY效价总体上随免疫时间增加而升高.经纯化、浓缩后,获得纯度为60%左右,效价为1: 12 800的VacA-HpaA IgY,蛋白浓度为22 g/L, Westem blot显示在Mr27 000和Mr30 000处分别有相应条带,ELISA检测与VacA和HpaA反应的效价分别为1:3200和1:6400(P<0.01).结论:成功制备了高浓度、高效价的抗重组VacA-HpaA的特异性IgY.  相似文献   

3.
背景:空泡形成细胞毒素A(VacA)是幽门螺杆菌(H.pylori)的重要致病因子,研究VacA的致病机制有助于进一步明确H.pylori的致病机制。目的:原核表达H.pyloriVacA亚单位P37和P58,制备P37多克隆抗体并分析其活性。方法:以聚合酶链反应(PCR)扩增H.pylorivacA基因的p37和p58片段,克隆入原核表达载体pQE31,构建重组质粒pQE31-p37和pQE31-p58,转化大肠杆菌(E.coli)M15,诱导蛋白表达。以镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化融合蛋白,以纯化P37蛋白免疫家兔,获取抗P37血清,以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测抗体效价。以蛋白质印迹法(Westernblot)分析P37抗体与VacA的结合能力,观察P37抗体对VacA致胃癌细胞空泡化的抑制作用。结果:十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,E.coliM15经诱导后表达相对分子质量分别为37kDa(1Da=0.9921u)和58kDa的P37和P58融合蛋白,经纯化后为单一蛋白。纯化P37蛋白免疫家兔后获得的抗P37血清抗体效价为1×106。P37抗体能中和VacA阳性H.pylori分泌的VacA,抑制VacA对胃癌细胞的空泡化作用。结论:本实验成功构建了原核表达载体pQE31-p37和pQE31-p58,获得了高纯度单一蛋白和高效价P37抗体,该抗体具有中和VacA毒性的作用。  相似文献   

4.
目的 探讨联合益生菌根除不同分型H.pylori对胃泌素-17(gastrin-17,G-17)、胃蛋白酶原(pepsinogen, PG)的影响。方法将116例H.pylori阳性慢性胃炎患者随机分为四联疗法组和联合益生菌疗法组,疗程均为2周。选取H.pylori阳性健康体检者100名作为健康对照组。对H.pylori抗体CagA、VacA、UreA和UreB进行血清学检测,并检测治疗前后血清中PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/Ⅱ比值(PGⅠ/PGⅡratio, PGR)及G-17水平。结果 四联疗法组、联合益生菌疗法组及健康对照组的H.pyloriⅠ型阳性率均高于H.pyloriⅡ型,且两治疗组H.pyloriⅠ型的阳性率明显高于健康对照组(P<0.05);三组CagA+VacA抗体阳性率均高于各组CagA、VacA抗体阳性率(P<0.05)。三组VacA、UreA、UreB抗体阳性率均高于各组CagA抗体阳性率(P<0.05)。不同炎症程度慢性胃炎CagA、UreB抗体的阳性率差异均无统计学意义(P>0.05);重度慢性胃炎与轻度慢性胃炎比较,VacA抗体阳性率显著...  相似文献   

5.
目的:制备抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)菌毛蛋白FlaA卵黄免疫球蛋白(yolk immunoglobulin,IgY),并进行体外抑菌实验,为治疗H.pylori口服药物的研发奠定基础.方法:采用原核表达制备的FlaA蛋白,将重组FlaA菌毛蛋白免疫蛋鸡获取FlaA IgY,采用间接ELISA的方法检测FlaA IgY的效价.通过将其与肠道中常见菌群乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌进行抗体抗原结合反应,检测其是否与肠道中其他菌群存在交叉反应.评价0.1、1、5 mg/mL低、中、高3种不同浓度的FlaA IgY的体外抑菌实验效果.结果:纯化后的FlaA蛋白浓度为2.97 mg/mL.经重组FlaA IgY免疫制备IgY在第3次免疫1 wk后效价可达到1∶12800,特异性检测结果显示,FlaA IgY不与肠道中常见菌发生交叉反应,与H.pylori全菌和重组FlaA反应强烈.体外抑菌结果显示,0.1、1、5 mg/mL的FlaA IgY处理后的H.pylori菌液浓度与对照组菌液浓度相比具有显著差异(0.324±0.033,0.078±0.012,0.014±0.003 vs 0.539±0.023,P<0.01),表明低、中、高3组浓度的FlaA IgY均能一定程度的抑制H.pylori的生长.0.1 mg/mL IgY的抑菌作用主要表现在1-6 h之间,6 h后抑菌作用基本丧失.1 mg/mL FlaA IgY处理组的H.pylori在1-24 h之间生长较为缓慢,5 mg/mL FlaA IgY处理组菌液浓度在1-24 h之间基本无变化.108 CFU/mL H.pylori经3组不同浓度FlaA IgY处理24h后,低IgY浓度组菌液浓度与其余2组菌液浓度相比差异显著(0.078±0.012,0.014±0.003 vs 0.324±0.033,P<0.01),5 mg/mL FlaA IgY在24 h内能彻底抑制H.pylori的生长.结论:制备的FlaA IgY效价较高,特异性强,不与肠道常见菌群发生交叉反应.5 mg/mL的FlaA IgY在体外对H.pylori具有很强的抑制作用.  相似文献   

6.
目的 观察抗Hp多克隆羊奶抗体的体外被动免疫保护作用。 方法 用MTT法评价羊奶抗体中和Hp细菌本身及其超声裂解蛋白所致Hep - 2细胞空泡变性的细胞毒素作用效果。结果 抗Hp免疫乳抗体能够中和细菌悬液和超声裂解菌体蛋白诱导的Hep - 2细胞毒活性。免疫乳抗体 1∶8、1∶16稀释后能完全阻断细菌及超声裂解抗原对Hep - 2细胞的毒性作用 ,即与阴性对照组相比无显著性差异。经 1∶32~ 1∶2 5 6稀释能一定程度上阻断细胞毒作用 ,即与致细胞发生 5 0 %死亡的阳性对照相比有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 抗Hp免疫乳抗体在中和细菌毒素方面发挥一定的作用。提示局部应用抗体制剂作为被动免疫 ,有可能成为治疗Hp感染性疾病的有效方法之一。  相似文献   

7.
目的 对昆明地区感染幽门螺杆菌(H.pylori)人群检测血清CasA、VacA、Ure、Hsp60、RdxA五种IgG抗体,了解其与消化性溃疡、慢性胃炎的关系.方法 抽静脉血3 mL离心取血清,用H.pylori抗体芯片检测CagA、VacA、Ure、Hsp60、RdxA五种IgG抗体.结果 ①CagA抗体总阳性率为79.7%,十二指肠球部溃疡(DU)、慢性胃炎(CG)、胃溃疡(GU)的CagA抗体阳性率分别为88.0%、60.9%、83.3%,DU的CagA抗体检出率明显高于CG(P=0.008),而DU与GU(P=0.744)、CG与GU(P=0.633)之间的差异无统计学意义;②VacA抗体总阳性率为20.3%,DU、CG、GU的VacA抗体阳性率分别为14.0%、30.4%、33.3%.三者之间的差异无统计学意义(P=0.12);③Ure抗体总阳性率为97.5%,DU、CG、GU的Ure抗体阳性率分别为98%、95.7%、100%,三者之间的差异无统计学意义(P=0.534);④Hsp60抗体总阳性率为6.25%,DU、CG、GU的Hsp60抗体阳性率分别为4.0%、13.0%、0%,三者之间的差异无统计学意义(P=0.317);⑤RdxA抗体总阳性率为17.5%,DU、CG、GU的RdxA阳性率分别为14.0%、30.4%、0%,三者之间的差异无统计学意义(P=0.179).结论 昆明地区H.pylori感染人群CagA抗体阳性率为79.7%,与DU的关系更加密切;CasA、VacA抗体不能单独作为H.pylori感染阳性的标志物;Hsp60抗体水平对于H.priori感染的检测价值不大;RdxA抗体水平不能标志甲硝唑耐药的水平;而Ure抗体阳性率高达97.5%,可作为H.priori感染阳性的标志物,我们认为检测H.pylori血清抗体用于H.pylori感染的流行病学调查,应该以Ure抗体为主,辅以CagA抗体和VacA抗体.  相似文献   

8.
阿司匹林和塞莱昔布对幽门螺杆菌的体外影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的:探讨阿斯匹林和选择性COX-2抑制剂塞莱昔布对体外培养的幽门螺杆菌(H pylori)生长、毒力因子及外膜蛋白的影响.方法:不同浓度的阿司匹林及塞莱昔布与H pylori共同培养,以活菌计数、分光光度计法检测H pylori的生长状态,分光光度计检测A 560nm值判断尿素酶活性,Hela细胞空泡变性实验和中性红吸收试验检测空泡毒素的活性,以SDS-PAGE电泳检测H pylori外膜蛋白的变化.结果:阿司匹林及塞莱昔布可以抑制H pylori的生长,此过程为剂量依赖性效应.阿司匹林0.5 mmol/L及塞莱昔布0.01 mmol/L时与DMSO对照相比H pylori24 h和48 h的菌落计数开始降低,随着两药剂量的加大菌落计数降低得更加明显,阿司匹林2.0 mmol/L和塞莱昔布0.04 mmol/L时H pylori被完全杀灭.阿司匹林及塞莱昔布可剂量依赖性的抑制H pylori的尿素酶活性及空泡毒素的活性.在对H pylori外膜蛋白的研究中发现,NSAIDs可能对H pylori的某种外膜蛋白表达有影响.结论:阿司匹林和塞莱昔布可抑制H pylori的生长、毒力因子的活性,并可能改变H pylori外膜蛋白的表达.  相似文献   

9.
目的 比较胃癌患者与十二指肠溃疡患者血清胃蛋白酶原水平的差异及探讨其与H.pylori感染的关系。方法 采用时间分辨荧光免疫分析方法检测108例胃癌和96例十二指肠溃疡患者血清胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ(PGⅠ,PGⅡ),ELISA方法检测血清H.pylori抗体。结果 胃癌和十二指肠溃疡患者之间PGⅠ水平有显著性差异,胃癌组和十二指肠溃疡组中H.pylori阳性和阴性间PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ,PGⅡ水平等无显著性差异。结论 胃癌患者血清PGⅠ水平显著低于十二指肠溃疡患者,H.pylori感染对胃癌和十二指肠溃疡患者血清胃蛋白酶原水平和PGⅠ,PGⅡ比值均无影响。  相似文献   

10.
目的:了解幽门螺杆菌(H pylori)感染在农村居民的感染率和探索H pylori感染的传播途径.方法:2004-09对河北省遵化市某村71户家庭263人进行横断面研究,采用面对面问卷调查形式由专人填写调查表,采集静脉血液标本5 mL,用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测HpUIgG抗体.用免疫印迹方法(Western blot)检测血清中的H pylori抗体.结果:该地区居民的H pylori感染率属于中等水平,男女感染率没有差别.当地居民H pylori感染的危险因素有未成年时住房拥挤、条件差、养猪、现在家庭中几代共同进餐及醋和水果进食过少等.263位受检者中,H pylori总血清感染率为57.41%,抗体平均水平为0.911±0.810μg/L;其中男性感染率为60.50%,抗体平均水平为0.948±0.843μg/L;女性感染率为54.86%,抗体平均水平为0.880±0.784μg/L.H pylori感染有家庭聚集性.父母双方或者一方H pylori感染阳性的其子女H pylori感染率(60%,51.35%)明显高于父母H pylori感染均阴性者(11.11%,P<0.05).以家庭为单位进行的血清Western blot分析发现各种血缘关系家庭成员,其血清抗体平均相似度较之家庭间成员的平均相似度并没有差别(F=1.22,P>0.05),两两比较结果亦无差别.结论:该地区居民的H pylori感染率属于中等水平,男女感染率没有差别.H pylori感染存在家庭聚集性.  相似文献   

11.
Most adenomas and carcinomas of the small intestine and extrahepatic bile ducts arise in the region of the papilla of Vater. In familial adenomatous polyposis (FAP) it is the main location for carcinomas after proctocolectomy. In many cases symptoms due to stenosis lead to diagnosis at an early tumor stage. In about 80%, curative intended resection is possible. Operability is the most relevant prognostic factor. Most ampullary carcinomas resp. carcinomas of the papilla of Vater develop from adenomatous or flat dysplastic precursor lesions. They can be sited in the ampulloduodenal part of the papilla of Vater, which is lined by intestinal mucosa. They also can develop in deeper parts of the ampulla, which are lined by pancreaticobiliary duct mucosa. Intestinal-type adenocarcinoma and pancreaticobiliary-type adenocarcinoma represent the main histological types of ampullary carcinoma. Furthermore, there exist unusual types and undifferentiated carcinomas. Many carcinomas of intestinal type express the immunohistochemical marker profile of intestinal mucosa (keratin 7?, keratin 20+, MUC2+). Carcinomas of pancreaticobiliary type usually show the immunohistochemical profile of pancreaticobiliary duct mucosa (keratin 7+, keratin 20?, MUC2?). Even poorly differentiated carcinomas, as well as unusual histological types, may conserve the marker profile of the mucosa they developed from. These findings underline the concept of histogenetically different carcinomas of the papilla of Vater which develop either from intestinal- or from pancreaticobiliary-type mucosa of the papilla of Vater. Molecular alterations in ampullary carcinomas are similar to those of colorectal as well as pancreatic carcinomas, although they appear at different frequencies. In future studies, molecular alterations in ampullary carcinomas should be correlated closely with the different histologic tumor types. Consequently, the histologic classification should reflect the histogenesis of ampullary tumors from the two different types of papillary mucosa.  相似文献   

12.
Summary Palmitic acid oxidation in rat diaphragm homogenate is depressed by biguanide concentrations that are still incapable of inhibiting oxidative phosphorylation. Glucose oxidation is not directly effected by the same biguanide concentrations: however, the inhibitory effect of palmitic acid on glucose oxidation is partly removed by biguanides. Inhibition of fatty acid oxidation, which accounts for most of the metabolic effects caused by these drugs, can be regarded as the fundamental mechanism of action of biguanides. There is some evidence suggesting that these drugs might interact with carnitine, thus preventing long-chain fatty acids from being transported across the mitochondrial membrane to the site of oxidation. Traduzione a cura degli AA.  相似文献   

13.
目的胰岛素瘤是最常见的胰腺神经内分泌肿瘤,因其临床表现多样,导致诊断困难。影像学诊断尤其是超声内镜(EUS)在胰岛素瘤的诊断中起着重要作用,拥有较高的敏感性和特异性。本研究拟通过明确胰岛素瘤的解剖分布特点,以期有助于提高影像学的诊断准确率和降低漏诊率,尤其是在教育和培训实践中对于EUS的学习者更具有指导价值。 方法回顾性分析解放军总医院第一医学中心病案资料数据库1993年1月至2019年11月经外科手术、病理确诊为胰岛素瘤的患者的临床资料,检索方法采取搜索术后病理诊断为"胰岛素瘤"的病例,通过查阅病例的方法,提取出胰岛素瘤的大小和解剖分布等数据,进一步分析其特点。 结果共检索到确诊为胰岛素瘤的患者116例,其中,男45例、女71例,年龄13~76岁,平均年龄(44.4±14.85)岁。胰岛素瘤单发110例(94.8%)、多发6例(5.2%)。位置分布:头颈部46例(39.7%),单发45例、多发1例;体尾部68例(58.6%),单发65例、多发3例;全胰腺多发2例(1.7%)。病变大小特点:最大径0.4~3.4 cm,平均大小(1.53±0.58)cm。≤1 cm 29例、>1 cm而≤1.5 cm41例、>1.5 cm而≤2.0 cm28例,≤3 cm 15例,>3 cm 3例。年龄与肿瘤的大小相关,≤44岁患者肿瘤平均大小为(1.36±0.51)cm、>44岁患者肿瘤平均大小为(1.70±0.60)cm,P<0.05。头颈部的肿瘤大于体尾部的肿瘤,头颈部肿瘤平均大小(1.66±0.63)cm,体尾部(1.42±0.52)cm,P<0.05。 结论胰岛素瘤在胰腺体尾部较头颈部更好发;绝大多数单发,但可以全胰腺多发;多数小于1.5 cm,肿瘤的大小与患者年龄和肿瘤的解剖分布相关。  相似文献   

14.
氯硝柳胺悬浮剂的毒性评价   总被引:2,自引:2,他引:2  
目的评价氯硝柳胺悬浮剂的毒性,为现场大规模应用灭螺提供依据。方法按照中华人民共和国国家标准GB 15670-1995《农药登记毒理学试验方法》和鱼类毒性试验方法进行。结果经口、经皮肤的LDso雌、雄性大鼠均>5 000 mg/kg,经呼吸道的LCso雌、雄性大鼠均>5 000mg/m3,该药经口、经皮肤、经呼吸道毒性均属微毒类药物;兔眼用药后,观察期内无不良反应,对眼无刺激性;皮肤用药后对皮肤无刺激性。与氯硝柳胺原药、氯硝柳胺乙醇胺盐原药和氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂相比,氯硝柳胺悬浮剂对鱼急性毒性最低。结论氯硝柳胺悬浮剂属微毒类药物,对鱼的毒性低于其乙醇胺盐可湿性粉剂,适合于现场应用。  相似文献   

15.
BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.  相似文献   

16.
血吸虫童虫是宿主免疫系统攻击的重要靶标,包括皮肤型、肺型和肝门型童虫。宿主分子对童虫生长发育具有重要作用。童虫生长发育机制包括免疫调节、信号转导、性别发育及凋亡等。肌动蛋白、组织蛋白酶、烯醇化酶和葡萄糖基转移酶等分子为血吸虫童虫生长发育的重要分子。本文对血吸虫童虫生长发育及其机制的研究进展做一综述。  相似文献   

17.
目的对临床分离的耐多药结核分枝杆菌相关基因的突变特征进行分析。方法对124例耐多药结核分枝杆菌以及50株敏感株的耐药相关基因(包括异烟肼inh A、kat G、oxyR-ahp C间隔区以及利福平rpo B)进行序列测定,分析其基因突变情况。结果异烟肼耐药inh A基因突变率为14.5%;kat G基因突变率为70.2%(87/124),主要位于315位;oxyR-ahp C间隔区突变率为15.3%;inh A、kat G两种基因同时突变率75.0%,三种基因同时突变率为89.5%。利福平rpo B基因突变的检出率高达95.2%,突变主要发生在531、526、516位点。结论我省耐多药菌异烟肼耐药相关基因最常见突变为kat G 315、inh A C-T(-15)、axyR-ahp C间隔区(-10)C-T,利福平为rpo B531、526、516。结合MDR-TB耐药相关基因的特征分析,可以建立一种快速、准确、特异的适合于我省的检测结核菌耐多药性的新方法。  相似文献   

18.
The aim of the study was to assess the quality of life (QOL) and the psychological status of parents of children with juvenile chronic arthritis (JCA). The QOL, anxiety and depression of the parents of 28 children with JCA were evaluated and compared to those of the parents of 28 healthy children. Mothers of JCA children and mothers of healthy children reported similar QOL. The reported anxiety and depression levels were similar for mothers and fathers in both groups. The parents of children with pauciarticular-type JCA reported lower QOL and higher levels of anxiety and depression than the parents of children with other types, namely polyarticular and systemic JCA. These findings may be explained by the fact that the pauciarticular patients had shorter disease duration and were less frequently seen in the outpatient clinic. The QOL of mothers of children with JCA was found to be slightly impaired in the group of children with pauciarticular JCA. Future larger studies are needed to confirm these results, as the number of subjects in the three groups was rather low. Received: 26 September 2001 / Accepted: 8 February 2002  相似文献   

19.
研究幽门螺杆菌(Hp)感染与胃炎的关系。方法对204例慢性胃炎患者胃粘膜进行观察分析,并测定其中137例Hp阳性患者血清CagA-Hp抗体IgG水平,与组织学对照。结果慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生患者血清CagA抗体IgG明显高于对照组(P<0.01);其他类型胃炎患者血清CagA抗体IgG水平无明显增高(P>0.05)。结论CagA-Hp可能是导致慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生的因素之一,对这类患者应密切随访观察。  相似文献   

20.
目的探讨慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)患者预后的相关危险因素。方法回顾性调查、收集58例AECOPD患者可能影响其预后的相关因素,并对其分别进行单因素分析。并进行Logistic多元逐步回归进行多因素分析,筛选影响AECOPD患者预后的独立危险因素。结果单因素分析后将结果 P0.1的因素纳入多因素Logistic回归,分析发现是否合并呼吸衰竭、气促程度、白细胞计数、APACHEⅡ、应用抗氧化剂、慢阻肺治疗依从性为影响AECOPD患者预后不佳的独立因素(P0.05)。结论根据AECOPD患者预后的独立危险因素,及早判断,选择合适的后续治疗方案,对提高其生存率及生存质量具有重要意义。  相似文献   

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