~1H-NMR代谢组学技术用于牛黄解毒片中对雄黄具有配伍减毒作用的主要化学成分群的研究

利用~1H-NMR为基础的代谢组学技术,探讨牛黄解毒片中对雄黄具有配伍减毒作用的主要化学成分群。将24只大鼠随机分成4组:空白组、R组(雄黄组)、RRSPG组(雄黄配伍大黄、黄芩、桔梗和甘草组)、RC组(雄黄配伍大黄总蒽醌、黄芩总黄酮、桔梗总皂苷、甘草总黄酮和甘草总皂苷组),对各组大鼠尿液及血清样品~1H-NMR谱图进行模式识别分析。结果显示雄黄组大鼠尿液及血清样品代谢轮廓和空白组差异明显,RC组大鼠代谢轮廓同空白组相似,向空白组回归,RC组各化学成分可通过调节能量代谢、胆碱代谢、氨基酸代谢和肠道微生物代谢等方面而起到降低雄黄毒性的作用。     

原子荧光光谱法检测牛黄解毒片及其拆方可溶性砷的含量

目的:探讨牛黄解毒片配伍对有毒中药雄黄是否具有减毒作用及其可能减毒药味。方法:设立牛黄解毒片全方及其不同拆方组,分别用人工胃液或人工肠液处理,然后采用原子荧光光谱法测定并比较不同组可溶性砷的含量。结果:人工胃液或人工肠液处理后,牛黄解毒片全方组可溶性砷含量明显低于单味雄黄组(P<0.01);牛黄解毒片全方去甘草、黄芩、大黄组可溶性砷含量明显高于牛黄解毒片全方组(P<0.01)。结论:牛黄解毒片全方配伍对雄黄有减毒作用,并且甘草、黄芩、大黄是减毒的可能药味。     

不同来源牛黄与雄黄配伍的牛黄解毒片对小鼠毒性的影响

目的:比较不同来源牛黄与雄黄配伍的牛黄解毒片对小鼠的毒性反应,探讨临床上牛黄解毒片引起慢性砷中毒的机制。方法:按2015年版《中国药典》的配方用天然牛黄、人工牛黄、体外培育牛黄分别制成牛黄解毒片,并用同法制成无牛黄成分、无雄黄成分的缺味组,另设同剂量单味雄黄作为对照,每种牛黄解毒片组再分为0.5,1.0,2.0 g·kg~(-1)剂量组,单味雄黄组分为0.06,0.12,0.24 g·kg~(-1)剂量组,对ICR小鼠进行灌胃给药28 d,观察毒性反应;给药结束后解剖取血,分离血清检测肝肾功能,取心、肝、脾、肺、肾做组织病理学检查和电镜下超微结构观察。结果:给药期间各给药组未观察到毒性反应,给药结束亦未观察到大体内脏及体表皮肤病变,血液生化指标检查未能明确雄黄对肝肾的毒性作用。组织病理学和电镜下超微结构检查各牛黄解毒片组未发现异常毒性病理改变,但苏木素-伊红(HE)染色显示单味雄黄高剂量组肝脏出现小叶中心性肝细胞肥大和糖原聚集,过碘酸希夫(PAS)染色表明肝细胞内糖原聚集,电镜下超微结构检查发现肝细胞内局灶性胞浆溶解,内有数量不等糖原颗粒,提示雄黄可致小鼠肝脏毒性。结论:用不同来源牛黄与雄黄配伍的牛黄解毒片对小鼠进行28 d灌胃给药,均未发现对小鼠有明显的毒性反应。而用单味雄黄却引起肝脏毒性,提示牛黄解毒片中的其他成分与雄黄配伍能显著降低可溶性砷和价态砷的含量,从而降低雄黄的毒性。     

牛黄解毒片中雄黄含量的测定

目的测定牛黄解毒片中雄黄的含有量。方法对牛黄解毒片进行消解处理后,采用碘量法测定As2S2含有量。结果最佳消解条件为取样量0.25 g,浓硫酸加入量8 m L,消解时间为60 min。平均加样回收率为97.73%,RSD为0.85%,各厂家45批牛黄解毒片中雄黄含有量有较大差异。结论不同厂家牛黄解毒片质量参差不齐,建议《中国药典》应增加牛黄解毒片中雄黄的含有量测定,以确保临床用药的安全有效。     

牛黄解毒片配伍对雄黄肝毒性的影响及其与凋亡调控的关系

目的:探讨牛黄解毒片方中中药配伍能否减低雄黄的肝毒性及其与肝细胞凋亡的关系。方法:40只ICR小鼠随机分为雄黄组,牛黄解毒片全方组(7.8 g·kg~(-1)),牛黄解毒片全方去甘草黄芩大黄组(3.8 g·kg~(-1)),牛黄解毒片全方去雄黄组(7.3 g·kg~(-1))和正常组5组,雄黄组剂量设置为0.5 g·kg~(-1),根据《中国药典》的牛黄解毒片组方比例,设置其他给药组剂量(含等效雄黄量),各组经口给药9周,观察小鼠肝组织病理变化与氧化损伤,并应用末端转移酶标记技术(TUNEL)和免疫组化法检测肝细胞原位凋亡和凋亡相关分子Bcl-2和Bax的表达情况。结果:雄黄组小鼠肝组织出现显著水肿,且局部有坏死,而牛黄解毒片全方组及其他给药组的肝组织未见明显异常;与正常组比较,雄黄组的丙二醛(MDA)明显升高(P0.05);TUNEL凋亡指数,Bax表达平均吸光度A明显增加,Bcl-2表达平均A明显减少(P0.05);与雄黄组比较,牛黄解毒片全方组的MDA明显降低(P0.05),TUNEL凋亡指数,Bax表达平均A明显下降,Bcl-2表达平均A明显增加(P0.05);全方去甘草、黄芩、大黄后,凋亡指数较全方组增加,Bax表达亦明显增加,但Bcl-2表达无明显变化。结论:牛黄解毒片方中中药配伍可减低雄黄的肝毒性,抑制雄黄诱导的肝细胞凋亡可认为是牛黄解毒片配伍减低雄黄肝损伤的分子机制之一,抑制过程可能是通过促进Bcl-2表达而阻碍Bax表达来实现的,抑制药物与甘草、黄芩、大黄3味中药有关。     

牛黄解毒片配伍影响雄黄砷毒性的动物实验研究

目的探讨牛黄解毒片方中中药配伍对有毒中药雄黄是否具有减毒作用及其可能减毒药味。方法设立牛黄解毒片全方及其不同拆方组,ICR小鼠经口给药9周后,采用彗星技术、骨髓细胞微核技术、组织病理等方法,观察牛黄解毒片方中中药配伍对有毒中药雄黄引起的遗传毒性及肝、肾组织损伤的影响。结果与单味雄黄组比较,牛黄解毒片全方组的小鼠外周血细胞DNA损伤、骨髓嗜多染红细胞微核形成率、精子畸变率及肝、肾损伤明显减低;与全方组比较,全方中撤去甘草、黄芩、大黄三味中药后,微核形成率、精子畸变率及肝、肾组织结构未见明显改变,但DNA损伤作用明显增强,且肝细胞及肾小管上皮细胞水肿增加。结论牛黄解毒片全方配伍对雄黄有减毒作用,减毒药味可能与甘草、黄芩、大黄有关。     

牛黄解毒片体外溶出速率测定

牛黄解毒片是由牛黄、石膏、黄芩、雄黄等 8味中药组成的复方制剂。有清热解毒的功能 ,用于火热内盛、咽喉肿痛、口舌生疮等症 ,疗效肯定 ,临床应用广泛。为提高药品质量 ,进一步完善质量标准 ,本文以牛黄解毒片中黄芩苷为溶出指标 ,测定国内 7家药厂生产的 9批牛黄解毒片的体外溶出度 ,为改进生产工艺 ,评价产品的内在质量提供方法和参数。1　仪器和试样TU- 1 2 2 1紫外分光光度计 (北京通用仪器有限公司 ) ,RC- 3B药物溶出度仪 (天津大学无线电厂 ) ,ZB- IB智能崩解仪 (天津大学精密仪器厂 )。样品 :A1( 2 0 0 0 1 0 0 8) ;A2 ( 2 0 …     

排毒疗法治愈长期超量服用牛黄解毒片致慢性砷中毒1例报告

病例报告牛黄解毒片由人工牛黄、雄黄、石膏、大黄、黄芩、桔梗、冰片、甘草等8味药组成,具有清热解毒的功效,用于火热内盛,咽喉肿痛,牙龈肿痛,口舌生疮,目赤肿痛。由于雄黄含砷成分,大量或长期服用该药易引起砷中毒。北京中医药大学姜良铎教授运用排毒疗法治疗1例长期服用牛黄     

牛黄解毒片何以会中毒

牛黄解毒片(丸)是家庭药箱中常备的中成药之一,它由牛黄、雄黄、冰片、生石膏、黄芩、大黄、桔梗、甘草8味药组成,具有清热解毒之功效,对于     

牛黄解毒片不良反应

牛黄解毒片具有清热、降火解毒、通便作用 ,对于因上焦火旺 ,胃肠积热等引起的口舌生疮、咽喉肿痛、疖肿、牙龈炎等具有消炎止痛效果 ,是较常用的中成药之一。牛黄解毒片主要由牛黄、雄黄、石膏、大黄、冰片等组成。因为是较好的清热解毒药 ,而广泛应用于临床 ,甚至有个别病人长期服用牛黄解毒片。由于服用牛黄解毒片引起的不良反应时有报道 ,为使其用药合理、安全、有效 ,现将牛黄解毒片的不良反应综述如下 :1　血小板减少宝国章 [1 ] 报道 ,患者因感冒服牛黄解毒片 ,6片 /次 ,2次 /d。 3d后出现鼻衄及口腔粘膜溃疡 ,又连续服用 ,颜面、上…     

A metabolic profiling analysis of the acute toxicological effects of the realgar (As2S2) combined with other herbs in Niuhuang Jiedu Tablet using H NMR spectroscopy

Ethnopharmacological relevance

Niuhuang Jiedu Tablet (NJT), composed of Realgar (As₂S₂), Bovis Calculus Artificialis, Borneolum Synthcticum, Gypsum Fibrosum, Rhei Radix et Rhizoma (RR), Scutellariae Radix (SR), Platycodonis Radix (PR) and Glycyrrhizae Radix et Rhizoma (GR), is an effective formula of traditional Chinese medicine (TCM) used in treating acute tonsillitis, pharyngitis, periodontitis and mouth ulcer. In the formula, significant level of realgar (As₂S₂) as a potentially toxic element is contained. In our pervious experiments, NJT was significantly less toxic than realgar (As₂S₂), and the material bases of toxicity alleviation effect to realgar (As₂S₂) were RR, SR, PR and GR. However, the toxicity alleviation effect of each above mentioned four herbs to realgar (As₂S₂) and their synergistic detoxification effects to realgar (As₂S₂) were still obscure.

Materials and methods

Male Wistar rats were divided into 11 groups: control, group R (treated with Realgar), group RRSPG (treated with Realgar, RR, SR, PR and GR), group RRSP (treated with Realgar, RR, SR and PR), group RRSG (treated with Realgar, RR, SR and GR), group RRPG (treated with Realgar, RR, PR and GR), group RSPG (treated with Realgar, SR, PR and GR), group RR (treated with Realgar and RR), group RS (treated with Realgar and SR), group RP (treated with Realgar and PR) and group RG (treated with Realgar and GR). Based on ¹H NMR spectra of urine and serum from rats, PCA and PLS-DA were performed to identify different metabolic profiles. Liver and kidney histopathology examinations and serum clinical chemistry analysis were also performed.

Results

The metabolic profiles of groups RR, RS, RP and RG were similar to those of group R, while the metabolic profiles of groups RRSPG, RRSP, RRSG, RRPG and RSPG were almost in line with those of control group. Statistics results were confirmed by the histopathological examination and biochemical assay.

Conclusion

The present work suggested that the toxicity alleviation effects of RR, SR, PR and GR to realgar (As₂S₂) were not obvious when combined with realgar (As₂S₂) respectively, but they had synergistic detoxification effects on realgar (As₂S₂) mutually.     

基于对照制剂的牛黄清胃丸全处方鉴别研究和等级初评价

目的对牛黄清胃丸进行全处方鉴别和等级初评价。方法对现行标准规定的显微特征进行总结,新建了番泻叶、石膏的显微鉴别方法和人工牛黄、大黄、冰片的薄层鉴别方法,改进了薄荷的显微鉴别方法,实现了17个药味的全处方鉴别。研制牛黄清胃丸对照制剂,将其作为随行对照应用于样品的全处方鉴别,对制剂的质量等级进行初评价。结果 18个厂家的48批样品的等级初评价结果为10批优质,37批合格,1批不合格。结论所建方法准确、简便、客观,可更加全面地控制牛黄清胃丸的质量,并为进一步建立药品等级标准提供了研究思路和实验基础。     

《圣济总录·诸风门》神志病证病机及用药特点分析

目的:探析《圣济总录·诸风门》神志病病机及用药规律。方法:以诸风门记载医论为理论基础,分析神志病的病因病机;借助中医传承辅助系统软件(V2.5)中的方剂分析模块,总结神志病用药规律。结果:药物分类使用频次排在前3位的为补虚药、安神药、解表药,高频药物排名前11位的有人参、炙甘草、茯苓、防风、远志、朱砂、桂枝、牛黄、茯神、麝香、冰片,关联规则分析得到常用配伍有人参配伍茯神、茯苓、远志、炙甘草,朱砂配伍麝香、冰片、牛黄。结论:"五脏虚损,风邪乘之"是诸风门神志病证的核心病机。安精神,定魂魄,首选人参;补五脏,安神益智,人参配炙甘草、远志、茯苓;补肝气,助升发,桂枝配干姜;散风邪,疏肝气,佐以防风;窍闭神昏,开窍醒神,朱砂配麝香、冰片、牛黄。     

雄黄水飞炮制机制研究

目的 通过对水飞雄黄和干研雄黄物相结构、元素组成、总砷及可溶性砷含量及抗炎活性进行比较，以阐明雄黄水飞的炮制机制。方法 制备了粒径基本一致的水飞雄黄和干研雄黄，分别采用X射线衍射（X-ray diffraction,XRD）法明确其物相结构并测定伴生矿石含量，采用扫描电子显微镜-能谱仪观测水飞品和干研品形貌特征并检测其元素种类和比例，采用火焰光度原子吸收分光光度法和氢化物发生-原子吸收光度法对2种雄黄中总砷及可溶性砷含量进行了测定。采用二甲苯诱导昆明小鼠耳肿胀实验模型观察雄黄水飞品及干研品不同剂量组的抗炎作用。结果 水飞雄黄和干研雄黄的物相均是AsS和/或As4S4；水飞品相比于干研品，其伴生矿石含量有所减少、与氧结合的砷含量较低、总砷及可溶性砷含量较高。抗炎实验表明，阳性药醋酸地塞米松组、水飞品高剂量组及干研品高剂量组的耳肿胀度与对照组相比均显著降低，水飞品高剂量组的耳肿胀度与干研品高剂量组相比降低有显著性差别。结论 与干研法炮制雄黄相比，水飞法炮制雄黄并不改变其物相种类，但有除杂、减毒及增效三重效果，揭示了水飞法炮制雄黄的机制，丰富了水飞法炮制雄黄的科学内涵。     

动态观测艾片、天然冰片、合成冰片、苏合香、安息香5种开窍药对脂多糖致发热大鼠生理指标的影响

目的基于中医整体观、动态观,平行比较艾片、天然冰片、合成冰片、苏合香、安息香5种开窍药调节脂多糖(LPS)致发热模型大鼠生理指标的作用节点及强度。方法采用Data Science International(DSI)植入式生理信号遥测技术,动态观测开窍药对模型大鼠体温(T)、心率(HR)、血压(SBP、DBP)、活动度(A)等生理参数的影响,用SPSS 17.0、SAS 9.2、Origin Pro 8.5处理数据及作图。结果 3种冰片(艾片、天然冰片、合成冰片)对模型大鼠的T、HR有抑制作用,艾片最优;苏合香对模型大鼠HR、SBP、DBP、A等总体呈现先兴奋后抑制趋势;安息香对各项指标无显著影响。主成分分析结果显示天然冰片、苏合香对模型大鼠作用有一致倾向性;合成冰片能同时对A、SBP、DBP产生较大影响。聚类分析和对应分析均表明3种冰片的作用特点可归为一类;苏合香、安息香具有各自作用规律。结论 3种冰片对各生理指标有抑制作用;苏合香整体呈现出先兴奋后抑制趋势,可能与其性温的时间窗有关;安息香对发热模型无显著影响,可能与其平性相关;今后可从开窍药对该模型大鼠作用机制展开研究。     

耐胆汁型牛黄转化菌的分离、鉴定及其牛黄转化活力研究

目的 分离和鉴定能够耐受牛胆汁的牛黄转化细菌,并应用到体外培育牛黄的制备。方法 从形成牛黄的牛胆囊胆汁中分离到可在牛胆汁中长期存活且具有较强牛黄转化能力的菌株（NDZNM-01）,观测其外部形态、理化性状、分类学地位、牛胆汁耐受力,以及牛黄转化活力。结果 根据对NDZNM-01菌株外部形态与生理生化特征的检测结果,判断为柠檬酸杆菌属细菌。进一步根据其16S rDNA序列的聚类分析结果,显示该菌株与其他3种柠檬酸杆菌属的细菌聚在一个分支上,但形成单系,属于新发现的菌株。应用菌株NDZNM-01发酵新鲜牛胆汁,其中的胆红素含量增加了2.35倍,胆酸含量增加了2.13倍。结论 综合对NDZNM-01菌株的形态观察、生理生化鉴定,以及分子鉴定结果,NDZNM-01属于一种能够耐受牛胆汁的柠檬酸杆菌属的肠道细菌,具有高效转化牛胆汁为牛黄的活力。该牛黄转化细菌最终命名为Citrobacter bovis NDZNM-01 Wang Houwei,菌种收藏编号为CGMCC24893。     

龙州山橙的生物碱类成分研究

对龙州山橙的生物碱类成分进行研究。采用硅胶柱色谱、反相柱色谱、高效制备液相等方法,对龙州山橙的总生物碱进行分离和纯化,并通过1H,13C-NMR,MS等波谱方法鉴定化合物的结构。该研究共分离得到7个生物碱类化合物,分别为scandine(1),tabersonine(2),melodinine N(3),melodinine P(4),melodinine T(5),19-epimeloscandonine(6),16-hydroxy-19 S-vindolinine(7)。化合物均1~7为首次从该植物中分离得到。采用MTT法对分离得到的化合物进行体外抗肿瘤活性评价,发现化合物1~7均表现出一定的体外细胞毒活性。