五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织MMP-2及其抑制剂表达的影响

[目的]研究五田保肝液对酒精性肝纤维化大鼠肝组织中Ⅳ型胶原以及基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子TIMP-2表达的影响,探讨五田保肝液对大鼠酒精性肝纤维化的治疗效果和可能机制。[方法]随机将100只Wistar大鼠分成6组:正常组、五田保肝液低、中、高剂量组、模型组、阳性药对照组,其中正常组10只,其他各组均18只。采用白酒加少量玉米油、吡唑的混合物灌胃,制备大鼠酒精性肝纤维化模型,造模12周后处死大鼠,以免疫组化法检测大鼠肝组织Ⅳ型胶原蛋白的表达,实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2mRNA的表达。[结果]各组Ⅳ型胶原蛋白的表达均比正常组显著升高,但五田保肝液各剂量组和阳性药组Ⅳ型胶原蛋白的表达比模型组降低;模型组大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2的mRNA表达比正常组显著升高,但TIMP-2的mRNA表达升高幅度更大;五田保肝液和阳性药组MMP-2mRNA的表达较模型组升高,但TIMP-2mRNA的表达较模型组降低,且五田保肝液以中、高剂量效果更明显。[结论]五田保肝液可能通过上调MMP-2的表达、下调TIMP-2的表达,从而抑制大鼠酒精性肝纤维化的发生发展。     

丹葛解酲汤对大鼠酒精性肝损伤的保护作用研究

目的 观察丹葛解酲汤对大鼠酒精性肝损伤的保护作用.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=14)和丹葛解酲汤组(n=16), 采用白酒灌胃的方法建立大鼠酒精性肝损伤模型, 给予丹葛解酲汤保护.12周后检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;HE染色观察肝脏的病理变化.结果 与模型组比较,丹葛解酲汤组血清中ALT、AST的含量肝脏均低于模型组,差别有统计学意义(P<0.05);丹葛解酲汤组肝组织中MDA含量的低于模型组,差别有统计学意义(P<0.05);丹葛解酲汤组肝组织中SOD活性高于模型组,差别有统计学意义(P<0.05).肝组织病理结果提示丹葛解酲汤对酒精性肝损伤大鼠具有保护作用.结论 丹葛解酲汤能抑制酒精诱导脂质过氧化反应对肝组织的损伤, 对酒精性肝损伤有明显保护作用.     

利湿保肝健脾汤对大鼠非酒精性脂肪肝影响的研究

目的:探讨利湿保肝健脾汤对高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪肝的保护作用。方法:采用高脂饮食的方法建立大鼠非酒精性脂肪肝动物模型,随机分为空白对照组,NAFLD模型组,利湿保肝健脾汤组,非诺贝特组。检测血清甘油三酯和总胆固醇含量。结果:利湿保肝健脾汤能显著降低高脂饮食所致大鼠非酒精性脂肪肝血清甘油三酯和总胆固醇含量;能明显改善肝组织脂肪变。结论:利湿保肝健脾汤对高脂饮食所致非酒精性脂肪肝具有良好的保肝降脂作用。     

保肝益胃合剂治疗大鼠急性肝损伤的实验研究

目的探讨保肝益胃合剂对急性肝损伤大鼠的治疗作用。方法将100只Wister大鼠随机分为7组,连续灌胃给药7天,以CCL4腹腔注射建立大鼠肝损伤模型,造模后检测各组大鼠血清中AST,ALT的含量,取肝脏组织进行病理检查。结果模型组与空白对照组相比,具有显著性差异(P0.01)。各给药组中,与AST,ALT模型组相比较,保肝益胃合剂高剂量组和易善复对照组的血清AST,ALT显著降低,结果有统计学意义(P0.05),其他组无统计学意义(P0.05)。模型组大鼠肝组织结构严重破坏,保肝益胃合剂高剂量组大鼠肝脏组织结构轻度破坏,其它各组的肝组织破坏程度均轻于模型对照组,但不如保肝益胃合剂高剂量组。结论保肝益胃合剂对CCL4所致的大鼠急性肝损伤有一定的保护作用。     

保肝颗粒对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:研究保肝颗粒对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:将实验小鼠随机分为正常组、模型组、护肝片组、力克组、保肝颗粒高、中、低剂量组。护肝片组ig给予0.7 g·kg-1·d-1,力克组为1.18 g·kg-1·d-1,保肝颗粒高、中、低分别为12.9,6.45,3.225 g·kg-1·d-1,正常组和模型组ig给予等体积的生理盐水。每天分别ig给药1次,连续30 d,末次给药1 h后,除正常组外,每组分别ig 50%乙醇0.012 m L·g-1,造成急性肝损伤模型,禁食不禁水24 h之后,杀鼠取材,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白(HDL),低密度脂蛋白(LDL)及肝脏组织石蜡切片HE染色观察组织病理学改变。结果:与正常组比较,模型组ALT,AST,TBIL,TG和LDL水平明显升高(P0.05,P0.01),HDL含量明显降低(P0.01);与模型组比较,保肝颗粒高、中、低剂量组血清ALT,AST,TBIL,TG,LDL水平明显降低(P0.01,P0.05),HDL水平升高(P0.01,P0.05)。病理观察显示,保肝颗粒高、中、低剂量组肝细胞的形态、结构、水肿和炎性浸润有不同程度的改善。结论:保肝颗粒对小鼠血清中ALT,AST,TG和LDL的含量抑制明显,但对TBIL的含量抑制不明确,能有效促进HDL生成,改善肝细胞水肿及炎性浸润,从而能达到对酒精性肝损伤的保护。     

止喘汤对哮喘大鼠模型气道重构中MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的:观察中药止喘汤对哮喘大鼠气道重构的干预,并探讨其对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法:50只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德(BUD)组、黄芩组及止喘汤组5组。采用卵清白蛋白(OVA)致敏加激发法复制大鼠哮喘模型,苏木精-伊红染色测气道形态学参数,免疫组化染色测定气道壁MMP-9、TIMP-1及IV型胶原含量。结果:哮喘组较正常组大鼠气道壁明显增厚,MMP-9、TIMP-1表达增多(P<0.01)。用中药和BUD干预后大鼠气道壁明显变薄,MMP-9、TIMP-1表达减少,与哮喘组比较有统计学意义(P<0.01);其中复方组肺纤维化轻于单味组,各项指标比较有统计学意义(P<0.05)。大鼠气道壁的厚度、IV型胶原含量、MMP-9、TIMP-1及MMP-9/TIMP间有相关关系。结论:中药具有干预哮喘大鼠模型气道重构的作用,这些作用可能是通过调节MMP-9和TIMP-1而实现的,基于中医基本病机证型的复方优于单味中药。     

菊杞保肝胶囊对大鼠亚急性酒精性肝损伤的保护作用及其机理

目的观察菊杞保肝胶囊对大鼠亚急性酒精性肝损伤的防治作用及作用机理。方法取SPF清洁级SD大鼠60只,随机分为6组,分别为空白组、模型组、对照药(葵花护肝片)组、菊杞保肝胶囊低、中、高剂量(0.23、0.46、0.92 kg/g)组,建立大鼠亚急性酒精性肝损伤模型,菊杞保肝胶囊各组及对照药水溶液灌胃,给药30 d后,检测大鼠血清中胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;ELISA检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)、白介素-6(IL-6)的水平;RTPCR检测COX-2 mRNA的表达及肝组织病理观察。结果与模型组比较,菊杞保肝胶囊各剂量组大鼠血清中CHO、TG、LDL-C、ALT、AST、PGE2、TNF-α、IL-6水平降低,COX-2表达下调,HDL-C水平升高(P0.05或P0.01),并可显著升高中、高剂量组大鼠血清中SOD活性,降低MDA水平(P0.05或P0.01)。病理结果显示菊杞保肝胶囊各剂量能改善模型大鼠的肝脏组织病理损伤。结论菊杞保肝胶囊对大鼠亚急性酒精性肝损伤具有保护作用,其作用机理可能与降低血清中PGE2,TNF-α及IL-6量及下调肝组织COX-2的表达及抗氧化应激有关。     

解酒降脂保肝汤对酒精性脂肪肝的预防作用及机制

目的研究解酒降脂保肝汤对大鼠酒精性脂肪肝的预防及作用机制。方法用白酒和高脂饮食灌胃法制作大鼠酒精性脂肪肝模型,以解酒降脂保肝汤进行治疗,与东宝肝泰治疗组作对比观察。治疗1个月后处死大鼠,取血及肝组织,检测肝功能(ALT,AST)、血脂(TC,TG)及内毒素(ET)和丙二醛(MDA),并对各组大鼠行病理学检查。结果灌胃10周后大鼠形成酒精性脂肪肝,经解酒降脂保肝汤治疗1个月后,血清ALT,AST,TC,TG以及血浆ET,MDA均显著降低,肝脏脂肪变及炎症显著改善。结论解酒降脂保肝汤可有效地防治大鼠酒精性脂肪肝,推测护肝、抗炎、抗内毒素及改善脂质过氧化状态为其主要作用机制。     

降脂保肝汤治疗酒精性脂肪肝30例

目的观察降脂保肝汤治疗酒精性脂肪肝的临床疗效。方法将60例酒精性脂肪肝患者随机分2组,分别用降脂保肝汤、非诺贝特治疗。结果降脂保肝汤组与对照组比较,疗效显著。结论降脂保肝汤是治疗酒精性脂肪肝的有效方剂,值得临床推广。     

葛根保肝汤治疗酒精性肝病43例

笔者近年来运用自拟葛根保肝汤治疗酒精性肝病43例,取得良好的疗效,现报道如下。     

化脓灸预处理对肝纤维化大鼠肝损伤保护作用的实验研究

目的：通过制备免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,探讨化脓灸预处理肝纤维化大鼠肝损伤的保护作用,为进一步研究化脓灸抗肝纤维化作用提供实验依据。方法：于造模时对动物进行化脓灸预处理,检测肝组织TIMP-1和MMP-2基因表达量定量分析、肝组织匀浆羟脯氨酸（Hyp）,观察肝组织病理变化。结果：化脓灸能显著降低肝纤维化大鼠的TIMP-1mRNA水平（P〈0.05）,但对MMP-2mRNA指标作用不明显。同时能明显降低肝纤维化大鼠肝组织匀浆羟脯胺酸（Hyp）水平,显著减轻肝脏细胞的病理损伤。结论：化脓灸具有有一定的保肝护肝作用,有助干预防和阻断肝纤维化的发生,其机制可能与抑制TIMP-1mRNA的基因表达水平有关。     

酒精性肝纤维化饮酒与中医证候特点分布相关性研究

目的探讨酒精性肝纤维化(AF)的致病因子酒精与中医证候特点分布相关性。方法多中心收集酒精性肝纤维化患者的中医四诊资料和一般资料,运用因子分析的方法,应用统计软件处理和分析AF的临床信息,在中医基础理论的指导下,对AF的致病因子酒精与中医证候特点的相关性进行初步的分析和探讨。结果对有限AF病例(92例)的研究结果初步表明,饮酒时间因素对AF患者中医证候特点的分布无影响;累计摄酒量是影响AF患者中医证候特点分布的重要因素,有极显著性差异。结论饮酒量与AF患者中医证候特点的分布有一定相关性。     

祛痰活血汤对非酒精性脂肪肝大鼠细胞凋亡的影响

目的:建立非酒精性脂肪肝(NAFL)大鼠模型,观察非酒精性脂肪肝大鼠肝组织细胞凋亡程度,探讨祛痰活血汤治疗NAFL的作用机制.方法:取SD雄性大鼠60只,在实验条件下饲养1周后,随机分为2组:正常对照组(10只),给予普通饲料;造模组(50只),给予高脂饮食.在给予高脂饮食后的第2周开始,将造模组50只大鼠又分为模型对照组、祛痰活血汤低、中、高剂量治疗组(ig,4.5,9,13 g·kg-1)、凯西莱治疗组(ig,0.03 g·kg-1).模型对照组、正常对照组不用任何药物,代之以同等剂量的生理盐水.实验动物自由进水和进食,每2周称重1次,并相应调整用药剂量.按照以上分组给药方案,第8,9,10周末,从造模组随机各抽取1～2只大鼠处死,观察肝组织病理变化以及血液生化指标[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)等].第10周处死所有大鼠,测定肝功能、血脂,取肝脏组织用10％甲醛溶液固定,石蜡包埋,连续切片,切片厚度为5 μm,进行HE染色和TUNEL法检测细胞凋亡.结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清肝功能和血脂指标,肝组织病理炎症活动度、肝细胞凋亡表达指数均有明显的升高、加重(P＜0.01);祛痰活血汤低、中、高剂量组、凯西莱组与模型对照组比,各项指标均能降低或减轻(P＜0.05).结论:祛痰活血汤可显著减轻NAFL大鼠肝组织脂肪变性程度,调节脂质代谢紊乱,一定程度上改善肝功能,降低组织细胞凋亡指数,这可能是其防治非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的作用机制之一.     

解酒护肝方对不同体质大鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的：观察解酒护肝方对不同体质大鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法：将大鼠随机分为正常组、阳虚模型组、阳虚预防给药组（温低组、温高组、寒低组、寒高组）、阴虚模型组、阴虚预防给药组（寒低组、寒高组、温低组、温高组）等11组,除正常组外,阳虚组采用30 mg/kg肌注氢化可的松,阴虚组采用甲状腺素水溶液25 mg/kg分别建立阳虚模型、阴虚模型,造模完成后针对体质预防给药,分高、低剂量组（按生药量计为4.15,0.83 g/kg）,1小时后灌胃0.009 mL/g 56度红星二锅头,持续灌注5周后测定大鼠血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）水平。结果：与正常组比较,模型组与预防给药组的AST、ALT及AST/ALT比值均增高,提示有不同程度的肝损伤（P＜0.05）;违背体质用药的高剂量组血清AST、ALT增高明显（P＜0.05）;符合体质用药的高剂量组血清AST、ALT明显降低（P＜0.05）。结论：针对体质的解酒护肝方能有效预防大鼠酒精性肝损伤。     

天麻多糖-2对小鼠四氯化碳肝损伤和酒精肝损伤的保护作用

目的观察天麻多糖(GEP)-2对小鼠四氯化碳(CCl4)肝损伤和酒精肝损伤的影响。方法分别采用CCl4和北京红星二锅头诱导小鼠肝损伤,比色法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)以及酒精肝损伤中三酰甘油(TG)的含量、肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)浓度,并作肝组织切片病理观察。结果GEP-2(25、50、100mg/kg)给药明显降低小鼠血清中升高的ALT和AST水平及酒精性肝损伤中TG含量,抑制肝脏中上升的MDA水平和提高过低的SOD活性。病理检查结果显示GEP-2有明显的保肝作用。结论GEP-2对小鼠CCl4肝损伤和酒精肝损伤均具有显著的保护作用。     

MMP-2、TIMP-2、CD147在中医药防治肝纤维化中的作用

基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)是降解Ⅳ型胶原的主要酶,基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)是其天然抑制剂,二者也是维持细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)正常代谢的关键。CD147又被称为细胞外基质金属蛋白酶诱导因子,是MMP-2活化过程中的重要因子。越来越多的研究发现,中医药可通过影响MMPs/TIMPs的表达来防治肝纤维化。中医药学家通过大量的临床和实验研究来防治肝纤维化,并取得了很大的进展,但仍有很多现实问题。临床实际中各中医学家对肝纤维化阶段的辨证着眼点不同,易忽视与其他脏腑之间关系,正确把握"祛邪与扶正"的关系值得进一步探讨。基础研究相对滞后,体外实验研究的局限性,缺乏与人体肝纤维化相近的模型,天然中药成分复杂,中药复方作用机理更加难以阐明,阻碍了中医药防治肝纤维化的应用。中药来源、处理等过程不同,起作用的生物活性物质所用含量有差别,难以对研究结果进行比较。但中药种类丰富,具有多成分、多层次、多途径、多靶点的综合药理作用,可以对肝纤维化复杂的病理过程进行应对,在此方面充分显示了优势,也显示出中医药在防治肝纤维化方面的前景。肝纤维化产生机制复杂,寻求有效的防治肝纤维化之路、逆转早期肝纤维化及延缓肝硬化甚至肝癌的进程有很重要的现实意义,我们还需要不懈的努力和继续进行探索。     

清肝活血方治疗酒精性肝病的临床研究

目的：研究清肝活血方治疗酒精性肝病的临床疗效。方法：采用多中心、随机、对照的方法,将120例酒精性肝病患者分为清肝活血方组(60例,口服清肝活血方)、小柴胡冲剂组(30例,口服小柴胡汤冲剂)、一般治疗组(30例,口服肝泰乐、维生素C),观察各组患者症状、体征、肝功能、血脂、肝纤维化标志物、细胞因子、脂质过氧化物、B超等的改善情况。结果：清肝活血方组总体疗效,食欲减退、恶心、呕吐、黄疸的改善情况优于其他两组,丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)的降低优于其他两组(P<0．01),γ-谷氨酰转移酶(GGT)、极低密度脂蛋白(VLDL)的降低优于一般治疗组(P<0．01);清肝活血方并可降低肝纤维化标志物、细胞因子水平,抗肝脏脂质过氧化损伤,较明显改善脂肪肝程度：结论：清肝活血方对酒精性肝病有明显治疗作用,而抗脂质过氧化,稳定肝细胞膜,纠正肝内脂质代谢紊乱,调节免疫功能。抗肝纤维化,促进酒精在肝内代谢的作用可能是其作用机理。     

雄芍汤对免疫性肝纤维化大鼠MMP-9和TIMP-1的影响

目的:研究雄芍汤对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的影响.方法:大鼠分为正常组、模型组、扶正化瘀胶囊对照组(0.525 g·kg-1)、雄芍汤预防组(7.9 g·kg-1)和高、低剂量组(15.8,7.9g·kg-1).采用猪血清腹腔注射法复制大鼠肝纤维化模型.酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清MMP-9含量,实时荧光定量PCR技术检测肝组织中TIMP-1 mRNA的表达.结果:雄芍汤7.9 g·kg-1剂量预防组MMP-9含量显著高于模型组(P＜0.01).雄芍汤15.8 g·kg-1剂量组TIMP-1 mRNA表达显著低于模型组(P＜0.01).结论:雄芍汤可以促进免疫性肝纤维化大鼠血清MMP-9生成,抑制大鼠肝组织TIMP-1 mRNA表达.调节MMP与TIMP的协调平衡可能是雄芍汤抗肝纤维化的机制之一.     

基于代谢组学的茵陈蒿汤及组分配伍对大鼠酒精性肝损伤的保护作用研究

目的：利用代谢组学技术,结合临床生化检测和组织病理学,评价茵陈蒿汤及其组分配伍对长期过量摄入酒精诱导肝损伤的保护作用。方法：对Wistar大鼠进行“白酒—玉米油—吡唑”混合溶液灌胃和饲喂高脂饲料12周制备酒精性肝损伤大鼠模型,茵陈蒿汤及其组分配伍组分别于造模开始每日灌胃给予茵陈蒿汤和6,7-二甲氧基香豆素、京尼平苷、大黄酸配伍组合,12周末测定血清ALT、AST、ALP、TG、T-BIL、TP、ALB、CHOL、HA、LN、PCIIINP、CIV浓度和肝脏组织HYP、γ-GT、MDA、TBA、SOD和GSHPX含量,观察肝左叶HE和Masson染色病理组织切片,并利用UPLC-Q/TOF-MS技术采集尿液代谢轮廓数据,提取各组样品中酒精性肝损伤生物标记物信息,分析空白对照组、模型对照组、茵陈蒿汤组及茵陈蒿汤组分配伍组之间大鼠代谢轮廓及生物标记物的变化。结果：茵陈蒿汤及其组分配伍均能显著抑制酒精性肝损伤大鼠血清ALT、AST、ALP、TG、T-BIL、TP、ALB、CHOL、HA、LN、PCIIINP、CIV浓度和肝脏组织HYP、γ-GT、MDA、TBA、SOD和GSH-PX含量的变化,减少肝脏细胞炎性浸润和肝纤维化,并使肝损伤大鼠整体代谢轮廓远离模型对照组而靠近正常对照组,使10个生物标记物趋于正常水平。结论 茵陈蒿汤对大鼠酒精性肝损伤具有显著的保护作用,其3个组分6,7-二甲氧基香豆素、京尼平苷和大黄酸的配伍组合能够有效表达茵陈蒿汤的生物效应,是其主要有效组分,为茵陈蒿汤防治酒精性肝损伤疾病的创新药物开发奠定了基础。