碱性成纤维细胞生长因子对增生性瘢痕的作用

目的：探讨碱性成纤维性细胞生长因子（bFGF)对移植至裸鼠皮下的人增生性瘢痕的作用。方法：将烧伤患者手术切除的增生性瘢痕移植到裸鼠背部皮下，动物随机分为5组：对照组，bFGF组，胶原酶组， FGF 胶原酶组和玻璃酸钠组，瘢痕块移植后2周分别用上述不同药物局部注射至瘢痕内共3次，每次间隔3d，后观察疤痕大小的1／2－1／3且软，能使粗大密集的胶原束变松散成团，其结构大部分消失，bFGF 胶原酶组所移植的瘢痕组织块有2／3消失，结论：增生性瘢痕局部应用bFGF可以降低瘢痕胶原，瘢痕中粗大的胶原束结构大部分消失。     

针刀松解法对移植于裸鼠的人皮肤增生性瘢痕组织中成纤维细胞的影响

目的观察针刀松解法对移植于裸鼠皮下人增生性瘢痕成纤维细胞增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclearantigen,PCNA)、Ⅰ、Ⅲ型胶原、bcl-2和bax的作用,探讨其对移植于裸鼠皮下的人增生性瘢痕组织中成纤维细胞生物学特性的影响。方法取6例人增生性瘢痕组织,削去瘢痕表皮及皮下组织,将每例增生性瘢痕组织分成重约0.2 g的3块,每只裸鼠移植1块,共移植于18只裸鼠背部皮下,建立增生性瘢痕裸鼠动物模型。移植后10 d在瘢痕组织内分3点分别注射生理盐水0.1 ml(对照组)、注射0.1 mg/ml曲安奈德0.1 ml(曲安奈德组)、将小针刀刺进瘢痕组织内,在瘢痕内向四周切割剥离至瘢痕周边(针刀松解组)进行治疗,每组6只。治疗后14 d取材,利用HE染色计数分析各组成纤维细胞的含量;免疫组织化学染色检测各组PCNA、Ⅰ、Ⅲ型胶原、bcl-2和bax表达阳性成纤维细胞数的变化。结果 HE染色结果:与对照组成纤维细胞数量(913.33±148.95)个/mm2相比,曲安奈德组(853.33±62.82)个/mm2和针刀松解组(863.33±75.28)个/mm2均降低,但是差异无显著性(P>0.05)。免疫组织化学染色结果:曲安奈德组和针刀松解组PCNA、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白阳性的成纤维细胞数量减少,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);3组bcl-2和bax阳性的成纤维细胞数量以及bcl-2/bax比率差异无显著性(P>0.05)。结论 针刀松解法具有抑制移植于裸鼠皮下人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖和分泌合成的能力;针刀松解对增生性瘢痕成纤维细胞中bcl-2和bax表达及其比率没有影响。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩裸鼠模型的研制

目的：复制瘢痕动物模型，旨在从形态学和组织学上验证该模型的可靠性，为瘢痕的基础研究开辟一条新途径。方法：将增生性瘢痕和瘢痕疙瘩小组织块分别植入裸鼠皮下，携带一段时间（５～１２０天），且与原瘢痕作光镜和电镜对照。结果：术后裸鼠全部成活。植入物无变性坏死，且无异性细胞浸润，并保持其原有的胶原形态，透射电镜也证实细胞特性保持不变。结论：增生性瘢痕和瘢痕疙瘩植入裸鼠体内能保持其原有的组织学结构特征，裸鼠用作瘢痕动物模型是可行的、可靠的。     

稳定病理性瘢痕模型的建立

目的:通过比较两种病理性瘢痕动物模型——裸鼠瘢痕模型和兔耳瘢痕模型的稳定性并对制作方法进行改进,为病理性瘢痕研究中选择有效的动物模型提供依据.方法:分别采用改良保留表皮(带表皮人瘢痕组织移植1周后剪除移植组织上方的裸鼠皮肤)、去除表皮(去除瘢痕组织表皮后移植)的方法分别在皮下移植人增生性瘢痕和瘢痕疙瘩制作裸鼠瘢痕模型.分别采用去除软骨膜及软骨、保留软骨膜及软骨、去除软骨膜保留软骨3种术式制作兔耳瘢痕模型,观察各瘢痕模型的效果、模型稳定时间和病理学改变来评价模型质量.结果:裸鼠组可快速并稳定地复制增生性瘢痕及瘢痕疙瘩的病理生理特点,且改良保留表皮增生性瘢痕或瘢痕疙瘩移植组的稳定时间(15周和20周)及增生程度明显优于去除表皮的增生性瘢痕及瘢痕疙瘩移植组(模型稳定时间为8周和10周);兔耳组可观察到去除软骨膜保留软骨组瘢痕稳定时间(1 5周)及增生程度明显优于另外两组(模型稳定时间分别为9周和10周).结论:裸鼠瘢痕模型的制作以改良保留表皮移植术式为最佳,兔耳瘢痕模型的制作则以去除软骨膜保留软骨术式为最佳.     

转Endostatin基因角朊细胞移植对烧伤深Ⅱ°创面愈合及瘢痕增生的影响

目的探讨转内皮生长抑制素(ES)基因角朊细胞移植对烧伤深Ⅱ°创面愈合及瘢痕增生的影响。方法将人体皮肤移植于裸鼠并造成深Ⅱ°烧伤创面。实验分为对照组(11只)、单纯角朊细胞移植组及转ES基因角朊细胞移植组(各10只)。对照组不行细胞移植,创面自行愈合;单纯角朊细胞移植组创面移植培养人角朊细胞;转基因移植组移植转ES基因角朊细胞。观察各组裸鼠创面愈合特点、瘢痕增生情况,并对愈合区组织进行病理切片检查、检测愈合区皮肤组织ES 蛋白表达、I、Ⅲ型前胶原含量。结果转基因移植组裸鼠创面愈合时间(13±5)d与单纯移植组 (14±5)d差异无统计学意义(P>0．05),但明显短于对照组[(25±7)d,P<0．01]。对照组裸鼠创面愈合后瘢痕增生明显,伤后100 d厚度≥0．22 cm,单纯移植组瘢痕增生厚度≥0．17 cm,转基因移植组仅有轻度瘢痕增生,愈合区皮肤组织ES蛋白检测阳性。单纯移植组、转基因移植组愈合区组织前胶原I含量(65．3±8．5)μg／g,(61．4±7．0)μg／g、前胶原I／前胶原Ⅲ比例(0．66±0．15,0．57± 0．13)明显低于对照组(1．51±0．37,P<0．01),而前胶原Ⅲ含量显著高于对照组(P<0．01)。结论转ES基因移植既可加速创面封闭,又能抑制愈合后瘢痕形成。     

小针刀对移植于裸鼠的人皮肤增生性瘢痕组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的影响

目的探讨小针刀对移植于裸鼠皮下人增生性瘢痕真皮组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的作用。方法将6例人无表皮的增生性瘢痕组织分别移植于24只裸鼠背部皮下,建立增生性瘢痕裸鼠动物模型。术后10天,分为对照组、0.1mg/ml曲安奈德组、0.2mg/ml曲安奈德组和小针刀组,每组6只,14天取材,利用免疫组织化学染色检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的变化。结果Ⅰ、Ⅲ型胶原分布于各组成纤维细胞的胞浆及组织中。图像分析结果,0.1mg/ml曲安奈德组和0.2mg/ml曲安奈德组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量（0.09±0.03,0.11±0.05;0.12±0.02,0.11±0.01）低于对照组（0.17±0.04,0.19±0.03）（P〈0.05）;小针刀组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量（0.12±0.02,0.12±0.02）与曲安奈德组差异无显著性（P〉0.05）。结论小针刀可降低移植于裸鼠皮下增生性瘢痕真皮组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量。     

人Ⅰ型前胶原基因反义寡核苷酸对人增生性瘢痕裸鼠移植模型胶原合成的作用

目的人Ⅰ型前胶原基因(ColⅠA1)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotide,ASODN)对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞有抑制胶原合成作用,拟进一步探讨ColⅠA1 ASODN对裸鼠移植模型体内的人增生性瘢痕的胶原合成作用。方法 SPF级BALB/c-nunu品系6～8周龄雌性裸鼠60只,体重约20 g;取行瘢痕切除手术患者自愿捐赠的瘢痕组织块去表皮后,移植至裸鼠背部肩胛内侧皮下,每只裸鼠移植1块,制备人增生性瘢痕裸鼠移植模型。将58只成功制备模型的裸鼠根据处理方法不同,随机分成3组,于瘢痕移植2周根据分组行经皮穿刺瘢痕内注射。A组(n=20):5μL浓度为3 mmol/L ColⅠA1 ASODN、3μL脂质体、92μL Opti-MEMⅠ减血清培养基;B组(n=20):3μL脂质体、97μL Opti-MEMⅠ减血清培养基;C组(n=18):100μL Opti-MEMⅠ减血清培养基。实验最初2周每天注射1次,之后隔天1次,至实验取材。注射后2、4、6周,对存活裸鼠进行瘢痕硬度测量后,处死裸鼠取瘢痕组织行胶原染色组织学观察以及透射电镜观察;提取细胞总RNA后行RT-...     

巢蛋白(nestin)在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中的表达

目的探讨巢蛋白（nestin）在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中的表达。方法采用免疫组织化学技术方法检测8例正常皮肤、7例扁平瘢痕、8例瘢痕疙瘩、8例增生性瘢痕中nestin^＋细胞，计数分析nestin^＋细胞在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中的表达。结果①nestin在8例正常皮肤组织中表皮基底细胞和棘细胞、汗腺、毛囊、皮脂腺、血管内皮细胞和7例成纤维细胞的胞浆中表达。nestin在扁平瘢痕、瘢痕疙瘩、增生性瘢痕组织中表皮基底细胞和棘细胞、血管内皮细胞和成纤维细胞的胞浆及残留的汗腺、毛囊、皮脂腺中表达。②瘢痕疙瘩和增生性瘢痕组织中nestin^＋表皮细胞、nestin^＋成纤维细胞和nestin^＋血管内皮细胞的数量明显高于正常皮肤和扁平瘢痕（P〈0．05），而正常皮肤与扁平瘢痕组织中nestin^＋细胞的表达差异无显著性（P〉0．05）。结论巢蛋白在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕表皮、成纤维细胞和血管内皮细胞中表达增高提示瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的过度增生可能与巢蛋白相关。     

人Ⅰ型前胶原基因反义寡核苷酸对人增生性瘢痕裸鼠移植模型胶原合成的作用

目的人Ⅰ型前胶原基因(ColⅠA1)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxyneucleotide,ASODN)对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞有抑制胶原合成作用,拟进一步探讨ColⅠA1 ASODN对裸鼠移植模型体内的人增生性瘢痕的胶原合成作用。方法 SPF级BALB/c-nunu品系6～8周龄雌性裸鼠60只,体重约20 g;取行瘢痕切除手术患者自愿捐赠的瘢痕组织块去表皮后,移植至裸鼠背部肩胛内侧皮下,每只裸鼠移植1块,制备人增生性瘢痕裸鼠移植模型。将58只成功制备模型的裸鼠根据处理方法不同,随机分成3组,于瘢痕移植2周根据分组行经皮穿刺瘢痕内注射。A组(n=20):5μL浓度为3 mmol/L ColⅠA1 ASODN、3μL脂质体、92μL Opti-MEMⅠ减血清培养基;B组(n=20):3μL脂质体、97μL Opti-MEMⅠ减血清培养基;C组(n=18):100μL Opti-MEMⅠ减血清培养基。实验最初2周每天注射1次,之后隔天1次,至实验取材。注射后2、4、6周,对存活裸鼠进行瘢痕硬度测量后,处死裸鼠取瘢痕组织行胶原染色组织学观察以及透射电镜观察;提取细胞总RNA后行RT-PCR测定ColⅠA1 mRNA相对含量;ELISA法行ColⅠA1蛋白定量分析。结果注射后6周内17只裸鼠死亡;共41只裸鼠40块瘢痕组织符合实验标准,纳入实验;A、B、C组各14、13、14只。注射后2周,3组间瘢痕硬度比较,差异均无统计学意义(P>0.05);4、6周时A组与B、C组比较,差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。随时间延长,组织学观察示3组Ⅲ型胶原表达上升,A组最明显,Ⅰ型胶原排列规则。透射电镜观察示A组成纤维细胞退化,胶原纤维排列更趋于一致;B、C组胶原纤维排列也逐渐规则。注射后2、4周3组间ColⅠA1 mRNA和蛋白表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.05);6周时A组与B、C组比较,差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在人增生性瘢痕裸鼠移植模型的瘢痕内注射ColⅠA1 ASODN可抑制ColⅠA1 mRNA及Ⅰ型胶原表达,促进瘢痕组织成熟、软化,脂质体可促进该抑制效果。     

病理性瘢痕中热休克蛋白47的表达与胶原沉积相关性研究

目的　探讨热休克蛋白 4 7(heatshock protein 4 7,HSP4 7)在病理性瘢痕中的表达与胶原沉积的相关性。　方法　取经病理科确诊的正常皮肤 (10名 )、增生性瘢痕 (19例 )和瘢痕疙瘩 (16例 )组织标本 ,应用免疫组织化学方法、苦味酸 -天狼星红偏振光分析法检测组织中 HSP4 7的表达及胶原纤维含量。　结果　增生性瘢痕平均 IOD值5 2 115 9.5 0± 2 72 994 .13,瘢痕疙瘩组织平均 IOD值 4 0 74 4 0 .30± 2 95 780 .6 3中 HSP4 7表达量显著高于正常皮肤组织平均 IOD值 130 5 0 .17± 4 789.4 1,差异有统计学意义 (P<0 .0 1) ;HSP4 7的表达量与病理性瘢痕总胶原纤维含量呈正相关关系 (r=0 .386 ,P<0 .0 5 )。　结论　 HSP4 7在病理性瘢痕中异常高表达 ,并可能在病理性瘢痕胶原沉积的过程中发挥重要作用。     

Implants of hypertrophic scars and keloids into the nude (athymic) mouse: viability and morphology

Pieces of hypertrophic scars and keloids were implanted into subcutaneous pockets of nude (athymic) mice and carried for varying times up to 246 days. No rejection phenomena were observed. Microvascular anastomosis occurred between host and implant within the first several days. Remodeling of the edges of the implant occurred very early. Multiple regression analysis of volume measurements suggests there was a size reduction of the implants with time. Yet virtually all implants retained their original histotypic character regardless of the length of implantation. The nodular character typical of all hypertrophic scars and keloids was retained in every case. Histologic analysis, confirmed by transmission electron microscopy, demonstrated a sustained cellular character. The degree and magnitude of microvascular occlusion was also sustained. Use of the nude mouse for implants of hypertrophic scar or keloid sustains true viability and morphology of the lesions. This procedure shows clear potential as an experimental model for the study of these lesions.     

胶原酶对裸鼠移植肥厚性瘢痕的治疗作用

目的 观察胶原地肥厚性瘢痕（ＨＴＳ）胶原降解的影响,探讨它对ＨＴＳ的治疗作用。方法 建立ＨＴＳ裸鼠移植模型,局部注射胶原酶于瘢痕组织。治疗后取材行光、电镜观察和分析。结果 ＨＴＳ组织胶原纤维被降解,真皮层变薄,瘢痕缩小,质地变软,与对照组差异十分明显。结论 胶原酶的局部注射可能是治疗ＨＴＳ的较好方法。     

胶原酶对裸鼠移植肥厚性瘢痕的治疗作用

目的观察胶原酶对肥厚性瘢痕(HTS)胶原降解的影响,探讨它对 HTS 的治疗作用。方法建立 HTS 裸鼠移植模型,局部注射胶原酶于瘢痕组织。治疗后取材行光、电镜观察和分析。结果 HTS 组织胶原纤维被降解,真皮层变薄,瘢痕缩小,质地变软,与对照组差异十分明显。结论胶原酶的局部注射可能是治疗 HTS 的较好方法。     

胶原酶对裸鼠移植肥厚性瘢痕的治疗作用

目的观察胶原酶对肥厚性瘢痕（ＨＴＳ）胶原降解的影响，探讨它对ＨＴＳ的治疗作用。方法建立ＨＴＳ裸鼠移植模型，局部注射胶原酶于瘢痕组织。治疗后取材行光、电镜观察和分析。结果ＨＴＳ组织胶原纤维被降解，真皮层变薄，瘢痕缩小，质地变软，与对照组差异十分明显。结论胶原酶的局部注射可能是治疗ＨＴＳ的较好方法。     

病理性瘢痕中结缔组织生长因子基因的表达

目的　探讨结缔组织生长因子在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩发病机制中的作用。　方法　分别留取正常皮肤 5例、增生性瘢痕 15例和瘢痕疙瘩 7例组织标本 ,测定组织中羟脯氨酸含量 ,通过逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)和图像定量分析 ,检测组织中结缔组织生长因子基因表达水平。　结果　正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中羟脯氨酸含量分别为 (2 6 .5 2± 4 .10 )、(84 .10± 1.76 )和 (92 .38± 2 .0 4 )μg/ mg,后两者与前者比较差异有统计学意义 (P<0 .0 1) ;正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中结缔组织生长因子 m RNA指数分别为 0 .0 9± 0 .2 5、0 .78± 0 .6 3和0 .84± 0 .0 4 ,后两者与前者比较差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。　结论　结缔组织生长因子在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩纤维化进程中可能起着促进作用。     

Treatment of hypertrophic scars and keloids with a radiofrequency device: a study of collagen effects

BACKGROUND AND OBJECTIVE: To determine the efficacy and safety of the ThermaCool TC radiofrequency system for treatment of hypertrophic and keloid scars and evaluate treatment associated collagen changes. MATERIALS AND METHODS: Six subjects with hypertrophic and four with keloid scars were treated with the ThermaCool device: one-third of the scar received no treatment (control), one-third received one treatment and one-third received two treatments (4-week interval). Scars were graded before and then 12 and 24 weeks after treatment on symptoms, pigmentation, vascularity, pliability, and height. Biopsies were taken from four subjects with hypertrophic scars and evaluated with hematoxylin and eosin (H & E) staining, multiphoton microscopy, and pro-collagen I and III immunohistochemistry. RESULTS: No adverse treatment effects occurred. Clinical and H & E evaluation revealed no significant differences between control and treatment sites. Differences in collagen morphology were detected in some subjects. Increased collagen production (type III > type I) was observed, appeared to peak between 6 and 10 weeks post-treatment and had not returned to baseline even after 12 weeks. CONCLUSION: Use of the thermage radiofrequency device on hypertrophic scars resulted in collagen fibril morphology and production changes. ThermaCool alone did not achieve clinical hypertrophic scar or keloid improvement. The collagen effects of this device should be evaluated further in order to optimize its therapeutic potential for all indications.     

Effect of TGF-beta2 on proliferative scar fibroblast cell kinetics.

Keloids, hypertrophic scars, and burn hypertrophic scars are all forms of proliferative scarring characterized by overabundant matrix formation. Recently these dermal proliferative disorders have been linked clinically to the cytokine transforming growth factor beta (TGF-beta), and in vitro tests have shown it to be responsible for the activation of fibroblasts and their production and deposition of collagen. Using an established in vivo animal model of proliferative scarring, the effects of this cytokine, specifically the isoform TGF-beta2, on these scars were examined. Proliferative scar specimens were implanted into athymic, asplenic nude rats and isolated in sandwich island flaps based on the superficial inferior epigastric pedicle. After establishment of the transferred flap, the scars were injected with varying doses of TGF-beta2 or vehicle for 5 consecutive days and then again on days 10, 15, and 20. The specimens were measured weekly during the period of dosing, and a biopsy was acquired on days 30 and 60. Fibroblasts from the explanted biopsies and the original scars were grown in cell culture, and cell proliferation studies were performed and the results compared. There was a dose response to TGF-beta2, with 200 ng showing the greatest effect. From the original scar specimens, keloid scars demonstrated the greatest cell proliferation kinetics--significantly faster than nonburn and burn hypertrophic scars. After treatment with TGF-beta2, both keloids and burn hypertrophic scars showed an increase in their cell proliferation kinetics compared with vehicle alone. This was not demonstrated with the nonburn hypertrophic scars. Elevated levels of TGF-beta2 are a major contributing factor to the process of proliferative scars, but because nonburn hypertrophic scars do not result in an equally increased response to this cytokine, a truly causative role for this cytokine cannot be promulgated. Rather, it is the combination of the proliferative scar fibroblasts' abnormal response to TGF-beta2 stimulation and elevated levels of this cytokine that controls more accurately the process of keloid and burn hypertrophic scar formation.     

细菌胶原酶对瘢痕降解的实验研究及临床观察

目的 探讨细菌胶原酶治疗增生性瘢痕及瘢痕疙瘩的作用机量；观测评价其临床疗效。方法 通过动物对细菌胶原酶降解增生性瘢痕的作用进行验证，并通过１０个病例对其临床疗效进行初步观察。结果 动物实验显示，两次注药后两周内瘢痕块体积平均缩小８６％，较对照组差异有非常显著意义。临床观察显示，经过两次病灶内细菌胶原酶的注射，瘢痕体积两周内平均缩小４６．９２％，其中有４例缩小５０％以上，占病例总数的３０％。经过对５