二乙基二巯基氨基甲酸钠对大鼠皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成的影响

目的：研究二乙基二巯基氨基甲酸钠（ＤＴＣ） 对大鼠皮肤成纤维细胞增殖及胶原蛋白合成的影响。方法：采用［３Ｈ］ － 胸腺嘧啶核苷和［３Ｈ］ － 脯氨酸掺入法,分别测定成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成。结果：ＤＴＣ低剂量时促进成纤维细胞增殖,高剂量时抑制成纤维细胞的增殖和胶原蛋白合成。结论：ＤＴＣ能抑制胶原蛋白的合成,对成纤维细胞的增殖具有双向调节作用     

PDGF-AB对成纤维细胞增殖及DNA合成的影响

目的：探讨ＰＤＧＦ－ ＡＢ促进伤口愈合及其在瘢痕增生中的作用机理。方法：取体外培养的人正常皮肤及增生性瘢痕成纤维细胞（ｎｏｒｍａｌｓｋｉｎｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ,ＮｓＦｂ,ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃ ｓｃａｒｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ,ＨＴｓＦｂ） ,用ＭＴＴ和３Ｈ－ ＴｄＲ掺入法观察ＰＤＧＦ－ ＡＢ对两种细胞增殖及ＤＮＡ合成的影响。结果：ＰＤＧＦ－ ＡＢ对两种成纤维细胞增殖及ＤＮＡ合成均有明显刺激作用,且均呈剂量依赖性关系,但作用有差异。结论：ＰＤＧＦ－ ＡＢ可能通过刺激成纤维细胞增殖及ＤＮＡ合成促进伤口愈合,但同时在瘢痕增生性疾病中可能起重要促进作用。     

木醋杆菌纤维素对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原含量的影响

目的研究木醋杆菌纤维素对人皮肤成纤维细胞（HSFb）的增殖及胶原蛋白合成的影响．探讨其促进创面愈合的可能机制。方法体外培养的HSFb随机分为2组,1组为实验组与木醋杆菌纤维素敷料共同培养．1组设为空白对照组。应用流式细胞仪检测细胞周期变化,应用碱水解法检测培养液中羟脯氨酸的含量变化,检测2组HSFb培养72h后的培养上清液中I型与Ⅲ型胶原含量及其比值的变化。结果细胞周期时项分析结果显示实验组细胞周期S＋G州期细胞百分率及增殖指数PI值较空白组增高（P〈0．05）。实验组在不同时间段时其成纤维细胞培养液中羟脯氨酸含量均明显高于空白组（P〈0．05）。实验组与空白组比较,培养上清液中I型与Ⅲ型胶原含量增高,I型与Ⅲ型胶原比值下降（P〈O．05）。结论木醋杆菌纤维素能有效促进人皮肤成纤维细胞的增殖和胶原的合成,可能与其促进创面愈合的机制有关。     

脂多糖与成纤维细胞在创面修复中的作用机制研究进展

【摘要】 创面愈合是机体对各种有害因素引起的组织细胞损伤的一种防御性和适应性反应。 大量研究表明,成纤维细胞作为创面修复的关键参与者,其增殖、迁移、激活和凋亡在创面修复过程中发挥着重要作用。革兰氏阴性菌是感染性创面的常见菌种,脂多糖作为革兰氏阴性菌细胞壁外壁的主要成分之一,低浓度时可诱导成纤维细胞增殖分化,促进创面愈合,而高浓度时除可造成成纤维细胞异常分泌合成细胞外基质蛋白导致增生性瘢痕形成外,还可抑制成纤维细胞增殖而影响创面愈合。本文主要对脂多糖与成纤维细胞在创面修复中的作用机制予以综述,旨在为创面治疗新方法的创立提供思路和帮助。     

表达hEGF导入基因的角朊细胞促进体外培养的正常角朊细胞增殖

目的 观察含外源性人表皮细胞生长因子（ｈＥＧＦ）基因改造的角朊细胞（ｈＥＧＦ－ＭＨＫ），对正常培养的角朊细胞（ＮＨＫ）增殖的影响；探讨转ｈＦＧＦ对创面愈合的生物学效应及作用机理。方法 收集含真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｈＥＧＦ的Ｈｅｇｆ－ＭＨＫ细胞培养上清，采用放射免疫分析法检测收集的上清液中ｈＥＧＦ含量；以１０％的浓度加入由正常人皮肤组织分离培养的ＮＨＫ细胞培养基内；ＭＴＴ法测定ＮＨＫ细胞增减１５     

PDGF-B基因表达及其对成纤维细胞增生和胶原合成的促进作用

目的建立稳定表达人血小板衍生生长因子－ＢＢ（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－ＢＢ，ＰＤＧＦ－ＢＢ）的细胞株，并考察该重组蛋白与损伤修复有关的生物学作用。方法将含ＰＤＧＦ－Ｂ基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３转染小鼠成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３中，在Ｇ４１８选择压力下得到抗性克隆，收集扩增的抗性克隆培养液并制备细胞膜上ＰＤＧＦ－ＢＢ蛋白质，３Ｈ－ＴｄＲ掺入法表达产物的生物学活性，并以３Ｈ－Ｐｒｏ掺入测胶原合成率。结果免疫荧光染色法证实抗性细胞中ＰＤＧＦ－ＢＢ的表达，膜上ＰＤＧＦ－ＢＢ显著促进ＮＩＨ３Ｔ３细胞ＤＮＡ合成，活性可达约３１．２Ｕ／１０６细胞，而培养液的致丝裂活性低于可检测水平。抗性细胞的胶原合成率显著增高。结论ＰＤＧＦ－ＢＢ的真核表达系统已得以成功构建，该重组蛋白可促进成纤维细胞增生和胶原合成，提示其在损伤修复中有潜在应用价值     

射频电流对成纤维细胞增殖及胶原蛋白表达的影响

目的射频除皱技术在临床上的运用已经相当广泛,并取得了很好的疗效。但缺乏基础研究,以致对射频电流刺激成纤维细胞分泌胶原的机制缺乏了解,本研究旨在观察射频对皮肤成纤维细胞的作用机制,从而更好的推进射频技术的临床运用。方法采用组织块法原代培养成人皮肤成纤维细胞,建立传代细胞系,实验用第4~6代细胞。取对数生长期的成纤维细胞,分为对照组和射频电流组,建立无创性射频除皱技术的体外细胞实验模型,应用倒置相差显微镜观察细胞形态并计数,绘制细胞生长图表,采用酶联免疫法检测细胞分泌胶原蛋白的水平。结果经射频电流作用后细胞数量明显增加,并且在一定范围内随输出电压的增加而增多,同时促进细胞分泌及合成胶原蛋白。结论射频电流刺激人皮肤成纤维细胞的生长及增殖,刺激成纤维细胞分泌胶原,是一种有效的除皱紧肤的方法。     

长链非编码RNA SNHG1对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因1(lncRNA SNHG1)对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响.方法 纳入2019－2021年在宁夏医科大学总医院烧伤整形外科接受手术治疗的22例增生性瘢痕患者,收集其增生性瘢痕组织与瘢痕旁正常皮肤组织(瘢痕旁3 cm以内),从中分离培养成纤维细胞.采用qRT-PCR从组...     

以牛胶原凝胶为支架构建人工真皮的研究

目的：制备成纤维细胞胶原凝胶(即真皮替代物)，以研究细胞的生长、分化、增生及与真表皮问的相互作用，为研制大面积创面覆盖物——复合皮奠定基础。方法：①酶消化法培养胎儿成纤维细胞；②制备细胞胶原凝胶，分为Ca—gel和Cf-gel组，接种后于不同时间观察两组细胞的形态变化和胶原凝胶的收缩情况；③细胞计数；④SEM观测胶原凝胶的表面是否有成纤维细胞附着；⑤HE染色。结果：①成纤维细胞形态及增殖情况：成纤维细胞胶原凝胶形成后呈半透明状，可出现较明显的细胞增殖，并可见凝胶收缩现象，但Ca-gel组较小；人工真皮质地与颜色近似真皮组织，有一定的弹性和抗拉性，不易脆。②细胞计数法所得两组生长曲线基本相似。Ca-gel和Cf-gel组细胞均具有典型的细胞增殖现象，Cf-gel组细胞在后期的增殖略快于Ca-gel组。③扫描显微镜下可见到凝胶表面有梭形的成纤维细胞出现，且成纤维细胞紧密贴附于凝胶上。④HE染色可见胶原呈较均一的淡红色网状分布，成纤维细胞分布于胶原凝胶内部和表面。结论：①培养好的细胞凝胶称之为真皮替代物，是进行皮肤器官型培养和制作复合皮的关键与基础，并可与培养的人工表皮膜片混合移植，起到促进表皮细胞的生长黏附和加速创面愈合的作用。②成纤维细胞在胶原凝胶中有着活跃的生物学特性，因此在研究成纤维细胞在创面愈合中的生物学行为以及在皮肤组织工程学的研究中，以胶原凝胶为支架的三维培养系统较脱细胞基质系统更为科学。     

肾间质纤维化组织来源成纤维细胞血管紧张素Ⅱ1A受体的表达及其生物学意义

用单侧输尿管梗阻的方法诱导小鼠肾间质纤维化，并从中成功地培养出了成纤维细胞。对成纤维细胞血管紧张素Ⅱ１Ａ（ＡＴ１Ａ）受体的表达与细胞增殖和分泌细胞外基质的关系进行了研究。结果发现，从肾间质纤维化组织中培养出的成纤维细胞，细胞增殖和产生纤维连接蛋白及层粘连蛋白的能力明显高于从正常肾间质中培养的成纤维细胞。在单侧输尿管梗阻小鼠的血浆和肾组织中血管紧张素Ⅱ的活性显著升高。从肾间质纤维化组织中培养出的成纤维细胞，ＡＴ１Ａ受体的表达在蛋白质和分子水平上均有明显增高。表明，在肾间质纤维化过程中肾素－血管紧张素系统被激活，对刺激成纤维细胞增殖和产生细胞外基质起着重要作用。