系统性红斑狼疮患者CD4~+ CD25~+调节性T细胞及其细胞因子的改变

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)及其细胞因子的改变。方法用流式细胞仪直接免疫荧光法检测SLE患者外周血CD4+CD25+T细胞的百分率,FoxP3+分子表达,细胞因子IL-10,TGF-β1的表达。结果 SLE患者活动期组、稳定期组、健康对照组CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的百分率分别是(3.57±1.45)%,(5.14±1.63)%,(6.03±1.96)%。活动期患者明显低于稳定期患者和健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。CD4+CD25+FoxP3+T细胞、CD4+CD25-FoxP3+T细胞占CD4+T细胞的百分率,活动期患者明显高于稳定期患者和健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CD4+CD25+FoxP3+T细胞与疾病的活动指数(DAI)正相关(r=0.659,P<0.05);而CD4+CD25-FoxP3+T细胞与DAI无统计学相关性(r=0.184,P>0.05)。活动期患者CD4+CD25+IL-10+细胞明显高于稳定期患者和健康对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。然而CD4+CD25-TGF-β+细胞在活动期患者、稳定期患者和健康对照组之间比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 SLE患者外周血中Tr细胞数量减少,分泌的IL-10增加,TGF-β减少,可能导致细胞免疫抑制功能减弱,自身免疫耐受平衡被打破,出现激活的自身反应性T细胞增多;此外,T淋巴细胞激活增多,还可辅助B细胞产生更多相关抗体,表现出多种临床症状。     

斑秃患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4~+CD25~+调节T细胞的检测

目的检测斑秃(AA)患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4+CD25+调节性T(Tr)细胞数量变化,分析AA的可能病因。方法利用流式细胞仪和单克隆荧光抗体技术,测定重度和局限性AA各40例患者外周血中T淋巴细胞亚群占T淋巴细胞的比率及CD4+CD25+Tr细胞在CD3+CD4+T淋巴细胞中的比率。结果重度AA患者外周血中CD4+CD25+Tr细胞占CD3+CD4+T细胞的比率为(1.43±0.74)%,显著低于正常对照组(2.25±0.97)%(P<0.01),重度AA患者的CD4+T占T淋巴细胞的比率为(31.42±6.66)%,略高于正常对照组(30.69±7.47)%(P>0.05),差异无显著性,而CD8+T占T淋巴细胞的比率为(25.86±4.35)%,明显高于正常对照组(22.42±6.10)%(P<0.01);局限性AA患者的三项指标分别为(2.14±0.87)%,(32.60±10.27)%和(21.59±5.24)%,与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论AA患者外周血中CD4+CD25+Tr明显低于正常对照组,CD8+T比率明显高于正常对照组,可能是导致重度AA发病的主要免疫机制。     

银屑病和白癜风患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测

目的: 检测CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)在白癜风和银屑病患者外周血中的表达.方法: 用流式细胞术检测19例白癜风患者、18例银屑病患者及19名正常人外周血中CD4+CD25+Treg的表达水平.结果: 白癜风患者的CD4+CD25+Treg表达率为(1.056±0.662)%,低于正常对照组(2.022±0.98)%,差异有统计学意义(P＜0.05);银屑病患者的CD4+CD25+Treg为(1.761±1.396)%,与正常人无显著性差异(P＝0.177).结论: CD4+CD25+Treg细胞在白癜风患者外周血中数量明显减少.     

寻常型银屑病患者外周血CD4~+CD25~+及CD8~+CD25~+细胞的检测

目的研究进展期寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+和CD8+CD25+调节性T细胞的数量变化及其在银屑病免疫病理学发病机制中的作用。方法应用流式细胞术对进展期寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+和CD8+CD25+调节性T细胞进行检测。结果进展期寻常型银屑病外周血CD4+CD25+细胞及CD8+CD25+调节性T细胞数量与正常对照组相比,均显著降低(P<0.05,P<0.005),而CD4+CD25+/CD8+CD25+比值无显著性差异(P>0.05)。结论寻常型银屑病的发病与CD4+CD25+和CD8+CD25+调节性T细胞的同步降低有关,与二者的比值无关。     

扁平苔藓患者外周血CD4+CD25+Treg细胞的检测

目的:检测扁平苔藓患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的数量及FOX3 mRNA的表达.方法:采用流式细胞术对25例扁平苔藓患者和25例健康对照者外周血CD4+CD25+Treg细胞进行检测,并通过RT-PCR方法检测FOXP3转录因子在外周血单个核细胞的表达.结果:泛发性扁平苔藓和口腔扁平苔藓患者外周血CD4+CD25+ Treg细胞数分别为(2.68±2.21)%和(2.38±2.67)%,均低于健康对照者(7.87±1.77)%;扁平苔藓患者的FOPX3表达水平也低于健康对照(P<0.05).结论:CD4+CD25+ Treg细胞数量和功能下降,可能通过导致扁平苔藓患者免疫功能紊乱参与了扁平苔藓的发病.     

梅毒血清固定患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例及功能的研究

目的:通过检测梅毒血清固定患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比例和功能的改变,探讨Treg在梅毒血清固定现象形成中的作用.方法:收集梅毒血清固定患者26例,正常对照23例,利用流式细胞术分别检测外周血Treg比例及Treg内Foxp3、细胞毒性T淋巴细胞抗原(CTLA)-4及白介素(IL)-10的定量表达情况.结果:梅毒血清固定组患者外周血Treg比例明显高于正常对照组(P＜ 0.01);且Treg内转录因子Foxp3及功能性分子CTLA-4和IL-10的表达量也明显高于正常对照组(P＜ 0.05或P＜0.01).结论:梅毒血清固定患者外周血Treg比例和功能的异常,可能是导致该现象形成的重要原因之一.     

CD4~+ CD25~+调节性T细胞与IL-17在梅毒血清固定患者外周血中的表达及意义

目的:观察梅毒血清固定患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和IL-17的表达及意义。方法:采用三色流式细胞术及免疫酶联吸附法测定18例梅毒血清固定患者和18例对照者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和IL-17的表达水平。结果:梅毒血清固定患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的含量明显高于对照组(t=6.29,P<0.01);IL-17的含量与对照组比较差异无统计学意义(t=-1.68,P=0.102)。结论:CD4+CD25+调节性T细胞表达水平增高造成的免疫抑制可能与梅毒血清固定有关;IL-17的表达水平可能与梅毒血清固定无关。     

卵巢癌患者腹水及外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞含量及抑制功能的研究

目的:分析并探讨卵巢癌患者腹水及外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞含量及抑制功能。方法:选取2012年2月至2015年2月期间在我院和宁波市鄞州第二医院接受治疗的卵巢癌患者56例,采集腹水标本56例,外周血标本56例。使用流式细胞术检测CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)的表达。采用1.5μmol/L的羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记CD4~+CD25-T细胞,观察CFSE标记效果,计算抑制率。结果:研究结果显示,56例腹水患者CD4~+CD25~+T cells/CD4~+T cell为(28.34±13.27)%,56例外周血标本CD4~+CD25~+T cells/CD4~+T cell为(14.56±4.36)%。腹水和外周血标本CD4~+CD25~+T cells/CD4~+T cell含量有显著差异(P0.05)。腹水Treg抑制功能比外周血Treg强,经统计学检验,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:腹水Treg含量及抑制功能比外周血Treg强,提示卵巢癌腹腔内相对容易发生免疫逃逸,而Treg升高可能参与促进肿瘤复发。     

大败毒胶囊对梅毒血清固定患者外周血Treg/Th17比例及CD4~+ CD25~+ T细胞水平的影响

目的:探讨大败毒胶囊对梅毒血清固定患者外周血Treg/Th17及CD4~+CD25~+T细胞水平的影响。方法:随机双盲法将60例梅毒血清固定患者分为对照组与观察组,每组30例,对照组采取常规苄星青霉素治疗,观察组在对照组基础上加以大败毒胶囊口服,比较两组临床疗效、治疗前后Treg细胞、Th17细胞、Foxp3及CD4~+CD25~+T细胞比例变化情况。结果:观察组随访12个月临床治愈率、总有效率分别为83.33%、93.33%,均显著高于对照组的0.00%、43.33%,差异有统计学意义(P0.0001)。观察组末次随访时Treg细胞、Th17细胞、Foxp3、CD4~+CD25~+T细胞比例与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:大败毒胶囊治疗梅毒血清固定疗效明确,能显著纠正外周血Treg细胞/Th17细胞失衡现象,降低CD4~+CD25~+T细胞比例,临床值得推广。     

散发型白癜风患者外周血CD4~+/CD8~+T细胞比值及CD4~+CD25~+T细胞的检测

目的检测散发型白癜风患者外周血CD4+/CD8+T细胞比值及CD4+CD25+调节性T细胞水平,探讨其与散发型白癜风发病的关系。方法散发型白癜风患者29例,男13例,女16例。通过流式细胞仪对散发型白癜风患者外周血CD4+/CD8+T细胞比值及CD4+CD25+调节性T细胞水平进行检测,并与20例健康人相比较。结果与健康对照组相比,散发型白癜风患者外周血中CD4+/CD8+T细胞比值的差异无统计学意义(P0.05),而CD4+CD25+调节性T细胞水平明显减少,差异有统计学意义(P0.05),但在不同病程的患者中CD4+CD25+调节性T细胞数量的差异无统计学意义(P0.05)。结论散发型白癜风患者外周血中存在CD4+CD25+调节性T细胞水平下降,可能与散发型白癜风的发生发展有一定关系。     

麻风康复者外周血Treg细胞及IL-10水平检测

目的：通过检测麻风康复者外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分比、IL-10的表达水平,探讨麻风康复者的细胞免疫水平。方法：采用流式细胞技术检测25例麻风康复者和20名健康者对照的外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的水平变化,ELISA法检测血清中IL-10水平,并进行相关性分析。 结果：麻风康复者组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+CD25+Treg淋巴细胞的比率和血清IL-10浓度分别为(7.45±1.43)%和(13.45±3.61)pg/mL,均高于正常对照组的(5.89±1.21)%和(9.23±1.51)pg/mL（P＜0.01）。麻风康复者及正常对照外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与血清中IL-10含量呈正相关（P＜0.05）。结论：麻风康复者外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞与血清中IL-10高于正常对照,麻风康复者可能存在细胞免疫失调状态。     

斑秃患者外周血CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞及T淋巴细胞亚群的测定

目的 研究斑秃患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量及CD4+、CD8+ T淋巴细胞亚群数量与斑秃疾病严重程度的关系。方法 对斑秃进行病情分组，以流式细胞仪检测17例重度、15例局限型斑秃患者和25例正常人对照者外周血中有功能活性的CD4+CD25+调节性T细胞（即CD4+CD25+ Foxp 3 T 细胞）在CD4+ T淋巴细胞中的比率，CD4+和CD8+占T淋巴细胞的比率。 结果 重度斑秃患者外周血中有功能活性的CD4+CD25+ Foxp 3 T细胞占CD4+ T细胞比率为0.54% ± 0.31%，显著低于正常人对照组（3.21% ± 0.76%）及局限型斑秃患者（2.71% ± 0.37%，P ＜ 0.001）；与正常人对照组比较，差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。重度斑秃患者的CD4+占T淋巴细胞的比率为32.61% ± 3.48%，显著低于正常人对照组（43.0% ± 3.63%，P ＜ 0.001），而CD8+占T淋巴细胞的比率为40.96% ± 8.54%，显著高于正常人对照组（25.23% ± 2.14%，P ＜ 0.001）。局限型斑秃患者的此两项指标分别为41.25% ± 4.27%和26.6% ± 2.28%，与对照组差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。重度斑秃患者的CD8+占T淋巴细胞的比率与CD4+CD25+ Foxp 3调节性 T 细胞占CD4+ T细胞的比率有负相关关系（r ＝ －0.94，P ＜ 0.001）。结论 重度斑秃可能与外周血中CD4+CD25+ T细胞数量的减少和功能活性的降低有关。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞及其细胞因子在寻常型银屑病患者的改变

目的探讨寻常型银屑病患者CD4~+CD25~+调节性T细胞及其细胞因子的改变。方法用流氏细胞仪直接免疫荧光法检测寻常型银屑病患者外周血CD4~+CD25~+T细胞的百分率、FoxP3+分子表达、细胞因子白细胞介素(IL)-10、转化生长因子(TGF)-β的表达。结果寻常型银屑病患者CD4~+CD25~+T细胞在进行期组、静止期组、健康对照组结果分别是4.55±1.11、5.26±1.38、6.03±1.96,CD4~+CD25~+FoxP3+T细胞在进行期组、静止期组、健康对照组结果分别是3.85±0.89、4.31±1.26、4.95±1.37。进行期患者明显低于静止期患者和健康对照组(P0.05);而静止期患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。CD4~+CD25~+IL-10+细胞、CD4~+CD25~+TGF-β+T细胞在进行期组、静止期组、健康对照组结果分别是11.57±5.64、14.49±8.26、16.35±9.98;2.65±0.97、4.23±1.55、4.83±1.84;进行期患者明显低于静止期患者和健康对照组(P0.05);而静止期患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。CD4~+CD25~+FoxP3+T细胞与PASI呈负相关(r=-0.659,P0.05);CD4~+CD25~+IL-10+T与PASI呈负相关(r=-0.537,P0.05);而CD4~+CD25~+TGF-β+T细胞与PASI直线相关(r=-0.184,P0.05)。结论 CD4~+CD25~+调节性T细胞的比例以及Foxp3的表达、IL-10、TGF-β的表达明显下降,导致调节性T细胞的抑制功能缺陷,进而影响银屑病病情的发展。可以推测,调节性T细胞的数量或功能异常,均将影响银屑病的发病。     

血清固定梅毒患者外周血CD4+CD25+Treg细胞IL-10的表达

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg细胞)分泌的IL-10在梅毒血清固定现象形成中的作用.方法 流式细胞仪(FCM)检测28例血清固定梅毒患者和28例健康对照外周血CD4+CD25+IL-10+细胞比例及CD4+CD25+Treg细胞的IL-10分子数;同时用免疫磁珠细胞分选技术(MACS)分选出高纯度的CD4+CD25+Treg细胞后,再用实时PCR技术检测CD4+CD25+ Treg细胞的IL-10mRNA相对表达量.结果 血清固定梅毒患者组外周血CD4+CD25+Treg细胞IL-10整体、蛋白和基因表达水平均比健康对照组明显增高,差异有统计学意义(均P＜ 0.01),但与快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)比较,均无相关性(均P＞0.05).结论 CD4+CD25+Treg细胞分泌的IL-10可能参与梅毒血清固定现象形成.     

慢性荨麻疹患者外周血中CD8~+CD28~-T细胞检测结果分析

目的:探讨CD8~+CD28~-T细胞在慢性荨麻疹患者致病机制中的作用。方法:收集临床慢性荨麻疹(CU)病例83例,同时设立对照组64例进行比较。应用ELISA法检测研究对象血清中抗Ig E抗体、抗FcεRⅠ抗体浓度,流式细胞仪检测外周血中CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD8~+CD28~-、CD4~+CD25~+T细胞比例,分析检测结果。结果:83名CU中,23例抗Ig E抗体为阳性,占27.7%(27/83);31例抗FcεRⅠ抗体为阳性,占37.3%(31/83)。CU患者外周血CD8~+T细胞比例、CD8~+CD28~-T细胞比例低于正常对照组(P0.05),CD4~+/CD8~+比值、CD4~+CD25~+T细胞比例均高于对照组(P0.05)。结论:CU患者机体外周血CD8~+CD28~-T细胞、CD4~+CD25~+T细胞比例与对照组相比存在差异,CD8~+CD28~-T细胞比例降低也可能是CU致病机制之一。     

SLE患者外周血中CD4+CD25+CD127low/-标记的调节性T细胞与临床表现和实验室指标相关性研究

目的:探讨CD4+CD25+CD127low/-标记的调节性T细胞(Treg)在系统性红斑狼疮发病机制中的作用.方法:用流式细胞仪检测45例系统性红斑狼疮(SLE)患者和45例年龄、性别相匹配的健康志愿者外周血CD4+T细胞中Treg的百分比,同时分析SLE患者外周血中的CD4+CD25+CD127low/-标记的Tr...     

银屑病患者体外系统血液固有免疫反应中CD4~+ CD25~+ T细胞及CD4~+ CD25~(high) T细胞的变化与意义

目的用体外系统血液固有免疫反应体系研究银屑病患者外周血CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的变化,并探讨其在银屑病发病机制中的作用。方法将灭活大肠杆菌悬液(3×108/mL)0.2mL作为免疫原激活剂加入枸橼酸抗凝的全血细胞悬液0.2mL和血浆0.3mL中,37℃水浴1h,用流式细胞仪测定CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的比例。结果在加入大肠杆菌的银屑病全血细胞组(银屑病实验组)CD4+ CD25highT细胞比例(1.88%)明显高于银屑病对照组(1.41%)(P﹤0.01),CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的比例(16.86%,1.88%)明显低于加入大肠杆菌的健康实验组(24.26%,2.81%)(P﹤0.01);银屑病对照组CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的比例(15.97%,1.41%)较健康对照组明显降低(21.75%,2.17%)(P﹤0.01);健康实验组CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞的比例群(24.26%,2.81%)均明显高于健康对照组(21.75%,2.17%),(P﹤0.05)。结论银屑病患者CD4+ CD25+T细胞及CD4+ CD25highT细胞比例降低,外来抗原刺激后比例升高,但与健康正常人存在差异。这可能与其复杂的系统免疫学发病机制相关。     

特应性皮炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞（CD4+CD25+ Treg）在特应性皮炎（AD）发病中的作用机制及临床意义。方法 流式细胞仪分析AD患者外周血中CD4+CD25+ Treg细胞数量,实时荧光定量PCR检测外周血单核细胞（PBMC）中Foxp3 mRNA水平,ELISA检测血清中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ水平。结果 AD患者外周血中CD4+CD25+ Treg细胞占CD3+ T细胞及CD4+ T细胞的比例均明显低于正常人对照组（t′ = 3.775、4.533,P值均 ＜ 0.01）;外周血中CD4+CD25+ Treg细胞占CD3+ T细胞比例在AD患者急性期明显低于慢性期（t = 2.217,P < 0.05）,而在急性期与亚急性期、亚急性期与慢性期之间差异均无统计学意义（t = 1.558、0.49,P值均 ＞ 0.05）。AD患者PBMC中Foxp3 mRNA的水平低于正常人对照组（z = -2.368,P ＜ 0.05）;其外周血中CD4+CD25+ Treg细胞与血清中IL-2和IL-10成正相关（r = 0.512、0.494,P值均 ＜ 0.05）,与IL-4和IFN-γ的相关性无统计学意义（r = -0.110、-0.237,P值均 ＞ 0.05）。结论 在AD患者中,外周血中CD4+CD25+ Treg细胞数量及Foxp3 mRNA水平均下降,从而可能减少对Th2细胞增生及其细胞因子分泌的抑制,使Th2占优势,参与AD的发病。     

斑秃患者外周血CD4+CD25+ T细胞培养上清液白介素10和转化生长因子β1检测

【摘要】 目的 探讨CD4+CD25+ T细胞与斑秃发病之间的关系。 方法 收集了3组研究对象,其中健康对照组25例、稳定期斑秃患者25例、进展期斑秃患者23例。抽取所有对象外周血,提取CD4+CD25+ T细胞,培养4 d,收集培养上清液,ELISA法检测上清液IL-10和TGF-β1水平。 结果 进展期斑秃患者外周血CD4+CD25+ T细胞培养的IL-10和TGF-β1分别为（31.68 ± 6.78） pg/ml和（32.29 ± 6.80） pg/ml,明显低于健康对照组（57.34 ± 14.15） pg/ml、（57.43 ± 15.16） pg/ml和稳定期斑秃患者（52.56 ± 13.02） pg/ml 和（61.75 ± 14.10） pg/ml（P < 0.05）,而健康对照组和稳定期斑秃患者之间差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 CD4+CD25+ T细胞分泌IL-10和TGF-β1功能降低,在斑秃发病中有一定意义。     

活动性皮肌炎CD4+CD25+CD127lo/-调节性T细胞的检测

皮肌炎(DM)是一种自身免疫性结缔组织病.CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)是存在于人胸腺和外周血中的一类具有免疫抑制作用的T细胞亚群,该细胞数量减少或者功能异常均可导致自身免疫性疾病的发生.转录因子Foxp3是Treg细胞的特征性检测分子.研究发现,表面标志CD127(IL-7αR)的表达与Foxp3呈负相关,可以代替Foxp3作为Treg细胞的检测标志[1].为研究Treg细胞在活动性DM患者发病机制中的作用,我们分别对17例活动性DM患者和正常人对照外周血中的CD4+CD25+、CD4+CD25+CD127lo/-T细胞的百分比进行检测,同时与患者血清肌酸激酶(CK)含量进行相关性分析.并对其中7例住院患者给予糖皮质激素联合免疫抑制剂治疗,观察治疗后10 d,20 d CD4+CD25+和CD4+CD25+CD127lo/-T细胞百分比的变化.