亚砷酸诱导分化的急性早幼粒细胞白血病细胞浸润人肺组织的体外模拟试验研究

目的探讨维甲酸和亚砷酸诱导治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)时引起的维甲酸综合征(RAS)发生的分子机制及治疗方法。方法2006年1月至2007年2月对哈尔滨医科大学附属第一医院32例APL患者,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测人肺组织基质细胞衍生子(SDF-1α)的表达,用流式细胞术检测亚砷酸(ATO)诱导分化的APL(APL/ATO)CXCR4的表达,用微重力旋转培养系统进行APL/ATO浸润人肺组织的体外试验,观察地塞米松(Dex)、阿糖胞苷(Ara-C)和柔红霉素(DNR)对APL/ATO粘附、迁移和浸润能力的影响。结果APL/ATO可明显浸润正常人肺组织,APL/ATO表面CXCR4表达平均荧光强度(MFI)为28.77±1.05明显高于诱导前APL的9.20±4.14。与对照组相比,Dex组可明显抑制APL/ATO的粘附和迁移能力[(29.91±2.70)%对(48.20±5.00)%;30.01±5.01对60.10±3.02];与对照组比较,AraC组和DNR组可明显抑制APL/ATO的粘附、迁移和浸润能力[(30.10±3.00)%、(32.20±2.20)%对(48.20±5.00)%;28.01±5.00、24.02±4.01对60.10±3.02;18.20±3.56、16.01±3.25对46.01±4.05]。结论CXCR4和(或)SDF-1α的高表达可能是APL/ATO引起肺浸润和维甲酸综合征的分子机制之一,Dex、AraC和DNR可抑制APL/ATO的粘附、迁移和浸润。     

姜黄素上调NF-κB诱导急性早幼粒白血病HL-60细胞凋亡

目的观察姜黄素诱导人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞凋亡的作用,并探讨作用机制。方法用台盼蓝计数观察姜黄素对HL-60细胞生长的抑制作用,AnnexinV-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因mRNA的表达,Western blot检测细胞内NF-κB p65蛋白的表达。结果姜黄素对HL-60细胞生长有抑制作用,并诱导细胞凋亡。姜黄素作用前后HL-60细胞中抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl表达无明显变化;促凋亡基因Bax和Bid表达增高;P53基因均不表达;NF-κB mRNA和蛋白表达均增高,并呈剂量依赖性。结论姜黄素能诱导HL-60细胞凋亡和上调促凋亡基因Bax和Bid,这可能与NF-κB表达上调有关。     

甲基转移酶样蛋白14对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用

目的 探讨过表达和敲低甲基转移酶样蛋白14(METTL14)对急性早幼粒白血病细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的调节作用。方法 取人急性早幼粒白血病细胞NB4进行培养,分为过表达对照组、过表达组、干扰对照组、干扰组,过表达对照组及过表达组分别转染空白质粒和METTL14质粒,干扰对照组和干扰组分别转染si-NC和si-METTL14质粒。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,Dot Blotting法检测细胞N-6甲基腺苷（m6A）修饰水平。结果 与过表达对照组相比,过表达组细胞增殖率升高、细胞凋亡率降低、细胞迁移数、细胞侵袭数升高,NB4细胞m6A修饰水平提高（P均<0.05）;与干扰对照组相比,干扰组细胞增殖率降低、细胞凋亡率增加、细胞迁移数、细胞侵袭数降低,NB4细胞m6A修饰水平降低（P均<0.05）。结论 METTL14可促进NB4细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与提高m6A修饰水平有关。     

亚砷酸治疗复发的或顽固的急性早幼粒细胞白血病20例疗效观察

目的观察亚砷酸治疗复发的或顽固的急性早幼粒白血病(APL)的疗效。方法20例APL患者,其中难治16例,复发4例。0.1%As2O3注射液10ml加入50g/L葡萄糖溶液500毫升中,静脉点滴,持续4～6h;最长不超过50d。结果可评价疗效的患者共18例,其中难治14例,复发4例。17例患者取得CR,CR率94.4%。结论亚砷酸对难治和复发APL有较好的治疗作用。     

砷剂对NB4细胞凋亡过程的影响

目的 :探讨砷制剂诱导NB4 细胞凋亡的途径及调控因子。方法 :将NB4 细胞与不同浓度的As2 O3 共同孵育 ,在不同时间 ,用比色法检测NB4 细胞胞浆内Caspase 3、 6、 8的活性 ,并用流式细胞仪检测细胞内转录因子NF κB的表达 ,同时作细胞周期分析及DNA梯度鉴定As2 O3 的致凋亡作用。结果 :NB4 细胞在 1.0、2 .0 μmol/LAs2 O3 的诱导下 ,于 16～ 2 4h的时段内均有明显的凋亡现象 ;期间 ,Caspase 3, 6 , 8被活化 ,较对照组差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;不同的时间点Caspase家族成员激活顺序不同 ,这种时间上的差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;NF κB在 6～ 16h期间的对照组和加药组 (1.0 μmol/LAs2 O3 )均有表达 ,加药组较对照组明显减低 (P <0 .0 5 ) ,但无时间依从性。结论 :As2 O3 可抑制NF κB的表达 ,诱发凋亡 ;NB4 细胞通过Caspase途径凋亡 ,顺序可能为Caspase 8→Caspase 6→Caspase 3,其中 ,Caspase 6是活性较高的成员之一 ;As2 O3 作为NF κB的有效抑制剂 ,可能对多种肿瘤有潜在的治疗意义。     

苦参碱对白血病HL-60细胞增殖、凋亡及其Bcl-2mRNA、Survivin mRNA表达的影响

目的观察苦参碱在体外对急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用,并探讨其可能的分子机制。方法体外培养HL-60细胞至对数生长期,分别以苦参碱（苦参碱组）、顺铂（顺铂组）和药物溶媒（对照组）处理,MTI＇法检测细胞生长抑制率、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化,RT．PCR法检测Bcl-2mRNA、SurvivinmRNA表达。结果与对照组比较,苦参碱组细胞生长抑制率、凋亡率及G,期细胞比例增高,Bcl．2mR—NA、SurvivinmRNA表达均下调,且呈明显的浓度依赖性（P〈0．05或0．01）。结论苦参碱体外可抑制急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖、诱导细胞凋亡,其作用机制可能与下调凋亡基因Bcl一2、Survivin表达有关。     

全反式维甲酸治疗老年早幼粒白血病的临床观察

目的了解全反式维甲酸(ATRA)治疗老年急性早幼粒细胞白血病(APL)的近期疗效．方法13例老年APL患每天予ATRA25—60mg／m^2。直至完全缓解(CR)。结果1、ATRA治疗的CR率高，达84．6％．2、ATRA治疗存在一定副作用，伹老年患均能耐受。3、APL缓解后治疗以A了RA与化疗交替较宜．结论A了RA治疗老年APL疗效明确，CR率高。     

急性白血病细胞体外对Jurkat细胞凋亡的影响

为探讨白血病细胞凋亡相关基因 (Fas)的功能性表达情况 ,将 2 7例白血病患者的白血病细胞与 Jurkat细胞体外孵育后 ,用原位末端标记法 (TUNEL )测定单纯 Jurkat细胞 (对照组 )、不加和加入不同浓度抗凋亡相关基因配体 (Fas L)的 Jurkat细胞凋亡率。结果显示 ,不加抗 Fas L 急性非淋巴细胞白血病组 (ANL L 组 )与对照组比较 ,凋亡率明显增高 (P<0 .0 1) ,急性淋巴细胞白血病组 (AL L 组 )与对照组比较仅轻度增高 (P<0 .0 5 ) ,两者均随细胞浓度的增加而凋亡率增高 ;ANL L组加与不加抗 Fas L 相比凋亡率明显减少 (P<0 .0 1) ,随抗 Fas L浓度的增加而凋亡率减少 ,AL L 组加与不加抗 Fas L 相比凋亡率轻度减少 (P<0 .0 5 ) ,也随抗 Fas L 浓度的增高而减少 ,但不如 ANL L组凋亡率变化明显。提示急性白血病细胞存在 Fas L的功能性表达 ,ANL L较 AL L的 Fas L表达高     

乳香诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡与细胞周期改变

目的 :为探讨乳香抗白血病的作用机制 ,研究乳香诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡与细胞周期关系。方法 :应用形态学观察 ,DNA凝胶电泳、DNA片段百分率 ,流式细胞仪分析检测白血病细胞凋亡及细胞周期。结果 :乳香提取物与全反式维甲酸相似 ,具有诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡及作用细胞周期 G1 及 S期( G1 期细胞减少 ,S期细胞增多 )。结论 :乳香提出物是一有前途的诱导分化剂     

克霉唑对急性早幼粒细胞白血病细胞及骨髓基质细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究抗真菌药物克霉唑作为钙激活性钾通道阻断剂对人类急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞及骨髓基质细胞增殖和凋亡的影响。方法:通过台盼兰拒染计数法检测了钙激活性钾通道阻断剂克霉唑对人APL细胞株NB4、APL患者原代细胞和骨髓基质细胞生存活力的影响,流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体的出现,AnnexinV/PI试剂盒和DAPI荧光染色检测细胞的凋亡情况,激光扫描共聚焦显微镜实时监测[Ca2+]i的变化。结果:克霉唑以浓度依赖方式显著抑制NB4细胞和APL原代细胞生长,在同样条件下骨髓基质细胞没有显著毒性。5μmol/L克霉唑作用72h后,细胞周期明显被阻滞于G0/G1期,S期显著减少,并出现亚二倍体峰。Annexin V/PI双标记和DAPI荧光染色证实克霉唑诱导NB4细胞和APL原代细胞凋亡,凋亡率分别为(30.5±3.9)%、(33.7±4.5)%。5μmol/L克霉唑引起[Ca2+]i荧光比值显著增高。结论:钙激活性钾通道阻断剂克霉唑诱导APL细胞凋亡,这为治疗APL提供了新的有希望的治疗方法,其机制可能与克霉唑调节细胞内钙水平有关。     

急性髓细胞性白血病和急性早幼粒细胞性白血病的治疗进展

2003年12月5～9日第45届美国血液学年会(ASH) 在美国召开,与会代表2万多人,我国有100多位代表参加了会议.上海第二医科大学瑞金医院王振义院士(the first speaker from Asia to serve as the Ham-Wasserman Lecturer)在大会上作了"Treatment of Acute Leukemia by Inducing Differentiation and Apoptosis"的专题发言,引发了热烈的讨论.现将该次年会中有关急性髓细胞性白血病(AML)和急性早幼粒细胞性白血病(APL)治疗的进展作一介绍.     

普萘洛尔对急性髓系细胞白血病U937细胞增殖和凋亡的影响

目的:探究普萘洛尔对急性髓系细胞白血病U937细胞的增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:采用CCK8法检测不同药物对U937细胞增殖率的影响,分别为普萘洛尔(0、200、400、800、1000、2 000μmol/L)作用24、48、72 h,阿糖胞苷单用(0、10、50、100、200、400、800 nmol/L)24 h,普萘洛尔(400μmol/L)联合阿糖胞苷(10、50、100、200、400、800 nmol/L)作用24 h。普萘洛尔(0、200、400、800μmol/L)作用U937细胞24 h后,用流式细胞术检测细胞的凋亡和周期、线粒体膜电位的变化,用碱性彗星实验检测DNA的损伤,Caspase-Glo试剂盒检测Caspase-3、8、9相对活性的变化,Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白表达量的变化。结果:普萘洛尔可以有效抑制U937细胞的增殖,其效应具有一定的时间(200、400μmol/L,P0.05)和剂量相关性(0、200、400、800μmol/L,P0.01),普萘洛尔还可协同阿糖胞苷的抗肿瘤效应。流式、彗星、Caspase、Western blot结果分别表明普萘洛尔可增加细胞凋亡率,增加G_0/G_1期和减少G_2/M期细胞比例,降低线粒体膜电位水平,诱导DNA损伤,增强Caspase3、8、9活性,上调Bax的表达、下调Bcl-2的表达,且在实验浓度范围内与剂量呈相关性(P0.05)。结论:普萘洛尔可抑制急性髓系细胞白血病U937的增殖并诱导其凋亡,这一机制可能与其诱导G_0/G_1期细胞阻滞、损伤DNA,激活内、外源性凋亡途径有关。     

急性早幼粒细胞白血病形态学和细胞遗传学的临床研究

目的 探讨形态学和细胞遗传学(MIC)联合检测对急性早幼粒细胞白血病(M3)的临床意义。方法 将MIC技术用于32例M3患者的诊断、分型及预后评价。结果 形态学检查26例M3a，中2例和6例M3b中3例曾误诊为其它白血病，经核型分析确诊。骨髓染色体分析正常3例(2／32)，28例(28／32)有t(15：17)，1例(1／32)具有变易移位，可评价的20例中19例(19／21)达到CR，具有复杂核型和变易移位各1例未能取得缓解。结论 MIC联合检测对M3的诊断、分型、评价预后等有重要价值。     

急性淋巴细胞白血病移植后12年继发环形铁粒幼细胞性难治性贫血1例

1 病历资料 患者女,42岁.1995年4月因发热、乏力就诊于当地医院,诊断为急性淋巴细胞白血病L1型(ALL-L1),予4次化疗后完全缓解.1995年8月就诊于天津血液病研究所,先后予VDLP方案、大剂量的甲氨蝶呤(HD-MTX)、EA方案、HD-MTX联合左旋门冬酰胺酶、依托泊苷联合6-巯基嘌呤、MOAP方案巩固化疗6次.于1996年4月行自体骨髓造血干细胞移植,预处理方案:左旋苯丙氨酸氮芥180 mg/m2,分3次口服,移植前第3天;全身放疗量(TBI)10 Gy,肺8研,移植前第3天.移植过程顺利,3个月后复     

旋毛虫培养液对人白血病细胞K562凋亡和坏死的影响

在对旋毛虫的研究过程中，有研究者曾对旋毛虫与肿瘤的关系进行了探讨。发现感染旋毛虫的小鼠再接种某些肿瘤细胞后，肿瘤细胞生长缓慢，甚至完全不生长，提示旋毛虫感染可以提高小鼠对肿瘤的防御机能。为了解旋毛虫致死肿瘤细胞的相关机制，本实验观察旋毛虫培养液对K562细胞凋亡和坏死的影响，现将结果报告如下。     

58例急性粒-单核细胞和急性单核细胞白血病的临床及治疗疗效的比较

本文总结了24例 M_4和34例 M_5患者的临床和治疗疗效观察。研究结果表明,M_4好发于女性而 M_5多见于男性,在>60岁老人中 M_5较 M_4多见.M_4患者出血和贫血较明显,M_5以高热、肝脾浸润多见,在治疗反应上,无论 HOAP 或其它化疗方案组,M_5的 CR 率低于 M_4患者。     

化疗药物诱导急性白血病原代细胞凋亡和杀伤作用的研究

为使最大限度消灭肿瘤细胞 ,最低限度损伤机体正常组织的化疗目标得以实现 ,一种以诱导肿瘤细胞凋亡为目标的新的治疗模式开始形成 ,从而对以往“筛选抑制细胞增殖敏感的药物来组成个体化化疗方案”的原则提出了挑战 ,但在临床应用中仍存在诸多疑问 ,如各种药物在体内诱导细胞凋亡的时间、剂量、效应关系 ,化疗药物不同剂量对诱导细胞凋亡的能力有无不同等。我们选取急性白血病 (AL)原代细胞为研究对象 ,模拟人体内用药情况 ,在短时间内观察药物诱导细胞凋亡及杀伤作用 ,试图对诸多问题作出回答。1　资料与方法1 .1　药品配制　根据公式 (…     

TRAIL与DDP联合应用对急性淋巴细胞白血病细胞增殖作用的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)与顺铂(DDP)联合应用抑制急性淋巴细胞白血病细胞增殖的可能机制.方法 以重组载体pACCMV-TRAIL转染人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat,Western印迹检测细胞中TRAIL蛋白表达情况,以及单独或联合应用TRAIL及DDP处理的各组白血病细胞中,凋亡相关蛋白caspase-3、NF-κB和survivin表达水平的变化.结果 DDP组及联合用药组明显抑制了survivin蛋白的表达,DDP组、TRAIL转染组及联合用药组细胞caspase-3表达上调,核因子(NF)-κB表达下降,且联合用药组作用强于单独用药组.结论 TRAIL和DDP可通过caspase、NF-κB途径抑制急性淋巴细胞白血病细胞增殖,同时DDP通过对survivin的调节发挥对TRAIL的协同作用.     

急性早幼粒细胞白血病临床分析和超微结构及超微细胞化学的研究

本文对39例急性早幼粒细胞白血病(APL)进行临床分析,其中30例应用非条件Logi-stic回归分析了16项影响CR的因素,9例作了TEM和MPO及AP两项超微细胞化学的观察。结果表明:骨髓中早幼粒细胞百分比高者、骨髓细胞外颗粒多者以及TEM观察早幼粒细胞内颗粒粗大且有较多Auer小体者,易并发DIC。非条件Logistic回归分析表明:并发DIC(X4)、血小板计数(X3)和年龄(X1)三个因素对CR有独特预后价值(α=0.1):并建立非条件Logistic回归方程:P= e~(-10·21-11·21×1+5·69×3+4·6×4 1+e~(-10·21-11·21×1+6·69×3+4·6×4;此方程回归良好(P<0.05)     

细胞凋亡对急性胰腺炎发展和转归的影响

细胞凋亡，又称为细胞的程序性死亡（ＰＣＤ）。近年来发现胰腺腺体细胞的凋亡对急性胰腺炎严重度和转归有很大影响，为此，本文拟从这一新的视角探索急性胰腺炎的治疗。１胰腺腺体细胞的凋亡过去一直认为急性胰腺炎中细胞的死亡形式是坏死。近两年发现急性胰腺炎与腺体细...