三七康宁胶囊制剂的含量测定研究

目的建立三七康宁胶囊中人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量测定方法。方法C18柱;乙腈-0.1%磷酸溶液(21:79)为流动相;检测波长为203nm。理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于2000。流速:1.0ml/min;柱温:室温。结果三七皂苷R1在0.324～3.24μg、人参皂苷Rg1在1.26～12.6μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。相关系数分别为0.9999和0.9998,平均回收率为98.44%。结论本法快速,准确,重复性好,可作为本品的质量控制。     

HPLC法测定化淤生骨胶囊中人参皂苷Rg1和 人参皂苷Rb1的含量

目的 建立化淤生骨胶囊中人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法（HPLC）测定。色谱柱为Kromasil-C18(5 μm、4.6 mm×250 mm),乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长203 nm。结果 人参皂苷Rg1浓度在0.0522 mg/ml～0.8220 mg/ml范围内与峰面积的线性关系良好（γ=0.9994）; 人参皂苷Rb1浓度在0.0583 mg/ml～07830 mg/ml范围内与峰面积的线性关系良好（γ=0.9990）。结论 所建方法准确,重复性好,可用于测定化淤生骨胶囊中的人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1。     

丹参、三七及其主要成分对大鼠肠系膜细静脉血栓形成的抑制作用

<正>目的:探讨丹参、三七及其主要成分(丹参素、丹酚总酸、丹酚酸A、丹酚酸B,三七总皂苷、三七皂苷Rb1、Rg1、R1)以及两对照药(阿司匹林和SOD)对血栓形成的抑制作用。     

三七总皂苷对异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚和纤维化的影响

目的：研究三七总皂苷（PNS）对异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚和纤维化的保护作用。方法： 用异丙肾上腺素（ISO）5 mg·kg^-1·d^-1,sc,连续7 d，建立大鼠心肌肥厚和纤维化模型。造模第2 d开始给大鼠腹腔注射PNS 25和50 mg· kg^-1·d^-1,连续14 d，测定全心重量指数（HW/BW）、左心室重量指数（LVW/BW即LVI）；采用试剂盒用分光光度法检测左心室心肌组织中羟脯氨酸（Hyp）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量和超氧化物歧化酶（SOD）、谷光苷肽过氧化酶（GSH-Px）、一氧化氮合酶（NOS）活性；用放免分析法检测左心室心肌组织中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量。结果： ISO模型组大鼠的HW/BW、LVI、左心室HyP、AngⅡ、MDA含量和诱生型NOS(iNOS)活性显著高于生理盐水对照组，SOD、GSH-Px及结构型NOS(cNOS)活性和NO含量明显比生理盐水对照组低；PNS治疗组左心室心肌组织中NO含量、cNOS 、SOD和GSH-Px活性明显高于ISO模型组；MDA和AngⅡ含量及iNOS活性和心脏重量指数比ISO模型组低。结论： PNS有抗心肌肥厚和纤维化作用，该作用与清除氧自由基及升高NO含量有关。     

广东岗梅药材的HPLC指纹图谱研究

目的用高效液相色谱法（HPLC）建立岗梅药材的指纹图谱。方法采用RP-HPLC方法,色谱柱为phenomenex-C18柱（250×4.60mm,5μm）,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱;流速：1.0ml/min;柱温：室温;检测波长为203nm。结果该方法可使岗梅药材中各成分较好分离,检测了不同来源10批岗梅药材,并根据检测结果确定了11个共有指纹峰,相似度较高,建立了岗梅HPLC指纹图谱共有模式。结论建立的HPLC指纹图谱准确、简便、可靠,为岗梅的质量控制提供更全面的信息。     

人海绵状血管瘤动物模型的建立和治疗药物的筛选

 目的 建立人海绵状血管瘤的动物模型，并用于药物筛选。方法 用荆豆凝集素包被的免疫磁珠分离和纯化人海绵状血管瘤内皮细胞（HCAEC）。将HCAEC（2.5×10⁶个）与人肝癌细胞Bel-7402（5×10⁵个）混合接种于裸鼠皮下，建立海绵状血管瘤的动物模型。通过绿色荧光蛋白示踪和组织学检查分析血管瘤中内皮细胞的来源和血管瘤的病理特征。另外，应用血管瘤内皮细胞和血管瘤动物模型筛选血管瘤的治疗药物。结果 HCAEC与Bel-7402细胞共移植于裸鼠皮下后7～9 d即可见接种局部形成血管瘤样结构。组织学检查显示血管瘤模型的组织学特征与人的海绵状血管瘤非常相似。细胞绿色荧光蛋白示踪显示绿色荧光蛋白存在于血管瘤的管壁，表明这些细胞来源于接种的HCAEC。药物筛选发现876-3，一种从中药中提取的单体，体外明显抑制HCAEC增殖，体内对血管瘤具有良好治疗作用。结论 HCAEC与肝癌细胞共移植在裸鼠皮下可以形成人源化血管瘤动物模型，这种血管瘤动物模型可以用于治疗药物的筛选。     

125I 粒子植入治疗荷人乳腺癌裸鼠移植瘤的实验研究

 目的 综合评价 ¹²⁵ I 粒子植入治疗荷人乳腺癌裸鼠移植瘤的疗效，为临床应用提供实验依据。 方法 在 3 ~ 4 周龄雌性 Nc-nu/nu 裸鼠右侧乳房脂肪垫部位注射人乳腺癌 MCF-7 细胞悬液 0.1 ml（5 × 10⁶ 个/ml），建立荷人乳腺癌动物模型。18 只荷瘤裸鼠分为治疗组（肿瘤中心部位植入放射性活度为 29.6 MBq 的 ¹²⁵I 粒子 1 枚）和对照组（不进行任何干预），每组 9 只。饲养 21 d，观察裸鼠肿瘤体积的变化，计算抑瘤率。第 21 天以脱颈椎法处死 2 组裸鼠，处死前检测外周血白细胞计数；处死后取肿瘤、肝脏、心脏、右侧肾脏组织进行组织形态学观察，以免疫组织化学方法检测肿瘤组织增殖细胞核抗原（PCNA）及凋亡抑制基因 Bcl-2 的表达，透射电镜行肿瘤组织超微结构观察。 结果 治疗组肿瘤体积治疗前后分别为（118 ± 14）mm³ 和（21 ± 3）mm³（t = 20.32，P = 0.00）；对照组分别为（118 ± 14）mm³ 和（339 ± 32）mm³（t = 18.98，P = 0.00），治疗组与对照组比较，抑瘤率为 93.8% ± 17.8%。2 组治疗前后比较外周血白细胞计数差异均无统计学意义。光镜观察治疗组裸鼠肝脏、心脏、右侧肾脏组织均未见出现水肿、充血等明显放射损伤改变，¹²⁵ I 粒子植入部位周围可见纤维组织增生，瘤细胞中心区出现大小不等的坏死区。肿瘤组织 PCNA 及 Bcl-2 表达阳性率治疗组分别为 35.42% ± 3.91% 和 11.90% ± 0.75%，对照组分别为 73.39% ± 3.55% 和 20.09% ± 1.69%，治疗组 PCNA 及 Bcl-2 表达阳性率均明显低于对照组（t = 21.55，P = 0.00；t = 13.26，P = 0.00）。透射电镜观察肿瘤组织内见凋亡细胞，并有大量胶原纤维增生和凋亡小体形成。 结论 ¹²⁵ I 粒子植入对荷人乳腺癌裸鼠移植瘤的增殖有明显抑制作用，能够有效地缩小肿瘤体积，有望作为乳腺癌保乳治疗的综合性手段之一应用于临床     

三七总皂苷对心血管细胞信号转导影响的研究进展

三七总皂苷是中药三七的有效成分,它对于心血管细胞具有多方面的作用。在对心肌作用方面,三七总皂苷可降低不可逆性室颤发生,改善心脏舒缩功能,减少心肌缺血性损伤,对抗心肌肥大,抑制左心室重构;对内皮细胞作用主要表现在引起内皮细胞内游离钙离子浓度的增加,分泌NO1t-PA等,保护内皮;对血管平滑肌细胞,三七总皂苷具有抑制和促进细胞增生的双向作用。本文综述了近年来三七总皂苷对心血管细胞信号转导影响的研究进展。     

羊种布鲁氏菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞cDNA文库的构建

 目的 构建羊种布鲁菌 05/43 株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的 cDNA 文库。 方法 培养的绵羊肺泡巨噬细胞经羊种布鲁菌 05/43 株侵染后，以 Trizol 试剂提取其总 RNA， 用 cDNA 文库构建试剂盒构建巨噬细胞的 cDNA 文库。随机选取 cDNA 文库中的 18 个克隆进行表达序列标签（EST）序列测定，测序结果用 BlastX 和 BlastN 软件在 GenBank 蛋白质库和核酸库中进行序列同源性比对。 结果 构建的 cDNA 文库的库容量为 1.192 × 10⁶，重组率为 95.65%。18 个 EST 测序，12 个与 CD 抗原基因、细胞因子基因、蛋白酶基因等已知功能的基因序列相关，6 个为未知功能基因的 EST 序列。 结论 成功构建了羊种布鲁菌 05/43 株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的 cDNA 文库，这将有助于阐明该菌株的致病机制。     

埃兹蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

 目的 探讨埃兹蛋白（ezrin）在胃癌组织中的表达及其临床意义。 方法 随机选择手术切除并经组织病理学检查确诊的胃癌组织标本 40 份和癌旁正常组织标本 30 份，应用免疫组织化学 SP 法检测 ezrin 的表达，并分析 ezrin 表达与胃癌患者年龄、性别、肿瘤直径、浸润和分化程度、有无淋巴结转移等临床病理因素的相关关系。 结果 ezrin 阳性表达率在胃癌组织为 55%（22/40），癌旁正常组织为 0，两者间差异有统计学意义（χ² = 18.07，P < 0.05）；在高、中、低分化胃癌组织分别为 30%（3/10）、53%（10/19）、82%（9/11）（χ² = 5.760，P < 0.05）；在有、无淋巴结转移胃癌组织分别为 72.7%（16/22）、33.3%（6/18） （χ² = 6.208，P < 0.05）。ezrin 表达与胃癌患者年龄、性别、肿块大小及浸润程度无明显相关（P > 0.05）。 结论 ezrin 在胃癌组织中呈高表达，并与胃癌的淋巴结转移及恶性程度呈负相关，是反映胃癌生物学行为的有价值 指标。     

分光光度法测定鼠疫疫苗浓度方法的建立

目的研究鼠疫疫苗浓度与吸光度（A）值之间的相关性,建立通过测定A值来计算鼠疫疫苗浓度的方法。方法确定分光光度法测定鼠疫疫苗浓度的特异性、测定波长及线性范围。4个专业的实验室经对9批成品疫苗进行比浊,测定与细菌浊度标准管（相当于鼠疫浓度7．0亿／ml）浊度一致菌液的A值及标准管对应浓度±20％（即5．6亿／ml和8.4亿／ml）菌液的A值,根据该结果制备鼠疫疫苗浓度测定用参考品。4个实验室应用该参考品对鼠疫疫苗进行协作测定,确定分光光度法测定鼠疫疫苗浓度的可行性。结果确定600nm作为吸光度测定波长,鼠疫疫苗浓度在2．6—10．5亿／ml之间时A值与菌液浓度之间有很好的相关性（r=0．9998,df=3,P〈0．01）。成功制备了3种浓度（即5．6、7．0和8．4亿/ml）的鼠疫疫苗浓度测定用参考品,其A值分别为0．444、0．557和0．651。经4个实验室应用该参考品对鼠疫疫苗进行协作测定,测定误差小于5％。结论分光光度法具有良好的重现性,适用于鼠疫疫苗浓度的测定。     

雌激素对孕妇外周血内皮祖细胞动员作用的体外研究

目的探讨雌激素对孕妇外周血内皮祖细胞（EPC）的动员作用。方法取孕期为10、20、30周的健康、单胎孕妇外周静脉血，采用Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞并进行体外培养。采用免疫荧光细胞化学染色方法进行EPC鉴定，取培养4d的细胞，加入DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白（acLDL）和FITC标记的荆豆凝集素（UEA—I），用激光共聚焦扫描显微镜观察和记录图像。取培养7d的细胞，在相差显微镜下计数不同孕期孕妇外周血EPC集落（≥50个细胞）形成数（CFU）。分别通过跨膜迁移和增殖实验观察雌激素对EPC的动员和促增殖作用，随机选取培养7d的细胞，分别加入浓度为1×10^-10、1×10^-9、1×10^-8mol／L的雌二醇（雌二醇作用组），在相差显微镜下分别计数培养24h后EPC的跨膜迁移数和培养48h后EPC的增殖数，以加入PBS作为对照组，实验均重复3次。结果免疫荧光细胞化学染色显示，平均85％以上的细胞摄取DiI-acLDL并结合FITC—UEA—I，可以鉴定为EPC。孕期为10、20、30周孕妇外周血EPC的CFU分别为1．67±0．33、4．83±0．60、7．50±0．67，组间差异均有统计学意义（P〈0．05）。浓度为1×10^-10、1×10^-9、1×10^-8mol／L雌二醇作用组EPC跨膜迁移数（×10 ^3个／膜）分别为1．50±0，09、1．61±0．06、1．90±0．07，均明显高于对照组（1．03±0．06，P〈0．01）：EPC增殖数（×10^5个）分别为1．07±0．05、1．33±0．05、1．19±0．03，均明显高于对照组（1．00±0．03，P〈0．01）。结论孕妇外周血EPC的功能状态可能与雌激素水平有关，雌激素对EPC的动员具有重要作用。     

蓖麻毒蛋白的分离纯化及其对南方根结线虫杀灭效果的研究

目的 探讨蓖麻毒蛋白对南方根结线虫的杀灭效果。 方法 蓖麻子经脱壳后脱脂，冰浴下在磷酸缓冲溶液中搅拌提取2h，用硫酸铵沉淀得到粗蓖麻毒蛋白，测定并计算浓度；通过葡聚糖G-200柱分离纯化蓖麻毒蛋白，测定并计算浓度；采用小叶碟添加法测定杀灭南方根结线虫的效果；并对蓖麻毒蛋白的血细胞凝集活性进行测定。 结果 分离纯化得到蓖麻毒蛋白的3个组分，组分2的毒性比组分1的毒性强，组分3的杀灭效果不显著。 结论 蓖麻毒蛋白杀灭南方根结线虫的效果良好，在生物农药方面具备良好的应用前景。     

^125I放射粒子植入治疗晚期胰腺癌和放射粒子对正常胰腺组织损伤的实验研究

目的探讨^125I放射粒子植入术治疗浸润性胰腺癌的临床疗效、影响因素和正常胰腺组织放射损伤处理。方法对不能手术切除的浸润性胰腺癌27例,根据治疗计划实施^125I放射粒子植入术,比较分析了术后肿瘤局部控制率、生存率、临床受益反应及其影响因素;24只家兔随机分为A、B两组,正常胰腺、肠系膜血管边缘植入^125I放射粒子,植入后第40天及第80天分别处死,取粒子植入处直径1cm范围内胰腺组织和部分肠系膜血管,HE染色评定胰腺组织及肠系膜血管慢性放射性损伤情况。结果（1）本组病例中,CR2例（8％）;PR8例（32％）：SD12例（48％）;PD3例（12％）：有效率40％疼痛缓解率为92％。本组病例术后6个月,12个月及18个月生存率分别为81％、29％和7％,术后中位生存时间为11．2个月。肿瘤体积大、植入粒子总活度高、术后未追加局部放疗显示术后生存率降低。本组2例（7．4％）发生术后胰腺炎,其中1例出现胰腺假性囊肿。（2）家兔胰腺慢性放射损伤呈逐渐恢复趋势。血管内膜上皮细胞的损伤性改变出现较晚,肌层变性及肌紊乱有明显修复。结论^125I放射粒子植入术是治疗浸润性胰腺癌的一种有效、安全、并发症较少的姑息治疗方法,其胰腺并发症能够预防。     

以腺病毒为模式分析影响病原微生物2种常用灭活方法可靠性的因素

目的以表达绿色荧光蛋白的重组腺病毒（rAdvGFP）为模式病毒,模拟实验室内利用次氯酸钠灭活含病毒废液和利用紫外线对生物安全柜台面进行消毒的实验室操作,并评价其可靠性及影响因素。 方法终浓度为0（阳性对照）、0．5％、0．2％、0．1％、0．05％的次氯酸钠溶液（0．5％、0．2％、0．1％、0．05％次氯酸钠组）分别与rAdvGFP溶液（1×10^6 TCID50）混合后,将混合液原液与混合液的1：10～1：10^5倍比稀释液分别接种人胚肾293细胞,在荧光显微镜下观察GFP蛋白的表达。将rAdvGFP溶液（1×10^3 TCID50）置于紫外灯下分别照射0（阳性对照）、15、30、60、120min（15、30、60、120min照射组）,各组再按垂直照射高度的不同分为5、10、20、30、67cm亚组,照射后收集各组病毒液接种293细胞,在荧光显微镜下观察GFP蛋白的表达。实验均重复3次。 结果各组次氯酸钠病毒混合液原液均造成细胞不同程度的损伤,其中0．5％次氯酸钠组混合液原液对细胞的毒性作用较强;稀释10倍后,除0．05％次氯酸钠组外,其余各浓度次氯酸钠组稀释液均导致细胞不同程度的死亡;稀释100倍后,仅0．5％次氯酸钠组稀释液仍对细胞具有毒性作用。荧光显微镜下观察显示,仅0．1％次氯酸钠组的1：10、1：10^2倍稀释液和0．05％次氯酸钠组的1：10、1：10^2、1：10^3倍稀释液接种细胞可见绿色荧光。紫外线照射后在荧光显微镜下观察显示,15min照射组的各亚组细胞均可见明显绿色荧光;30min照射组的20、30、67cm亚组与60、120min照射组的67cm亚组细胞仍可见绿色荧光。 结论有效氯浓度须在0．2％以上、安全柜内1．12mW／cm^2强度紫外线照射30min以上方能有效灭活重组腺病毒,建立实验室操作的可靠性评价技术体系并据此制定标准操作规程很有必要性。     

6 COMPILATION OF DOSIMETRIC REFERENCE DATA

6.1 GENERAL In this section, dosimetric reference data are presented innumerical tables for a few types of beta-ray and low-energyphoton sources. For planar and concave sources of ⁹⁰Sr–⁹⁰Yand ¹⁰⁶Ru–¹⁰⁶Rh beta rays, relative axial depth–dosedata are given. For seed or wire sources of ⁹⁰Sr–⁹⁰Y and³²P beta rays, and for seed sources of ¹²⁵I and ¹⁰³Pd low-energyphotons, values of the different parameters are given, as requiredfor the determination of dose distributions using the generalformalism presented in Section 4.1. The relative axial depth–dose data in water, given forthe planar and concave beta-ray sources of ⁹⁰Sr–⁹⁰Y and¹⁰⁶Ru–¹⁰⁶Rh, are considered to be the best available datafrom the comparisons conducted for this Report (Soares et al.,2001; see Section 5.2). These     

Prions,urinary gonadotrophins and recombinant gonadotrophins

Dear Sir, The lack of reported cases of variant Creutzfeld-Jakob disease(vCJD) associated with urinary gonadotrophins is not a proofof their safety. One should bear in mind that vCJD incidenceis 1 x 10⁶ (at any one point in time), which translates to alifetime risk of 1 x 10⁴. On the other hand vCJD was first describedin 1996     

重组溶瘤腺病毒Ad-CD80-TPE-GM对Hep2细胞移植瘤的杀伤效应

目的研究自行构建的重组溶瘤腺病毒Ad-CD80-TPE-GM对裸鼠Hep2细胞移植瘤的杀伤效应。 方法裸鼠皮下接种Hep2细胞悬液建立荷人喉癌动物模型。将裸鼠分为单次治疗组和连续治疗（每天1次、连续5d）组，每组据治疗药物不同再分为PBS组、携带增强型绿色荧光蛋白报告基因的复制缺陷型5型重组腺病毒（Ad-GFP）组、Ad-CD80-TPE-GM组，以PBS、Ad-GFP组为对照组。单次治疗组于治疗后4d取外周血并剥离肿瘤，分别用有限稀释法、BCA蛋白质定量试剂盒和流式细胞术检测肿瘤组织中的病毒感染滴度、总蛋白浓度和CD80表达阳性率，ELISA法检测血清和肿瘤组织中粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CS）表达水平，并计算肿瘤组织中病毒感染滴度量和总蛋白中GM-CSF的表达量。连续治疗组于首次给药后观察裸鼠肿瘤体积的变化，待对照组肿瘤直径〉1cm，或肿瘤表面出现明显溃疡时剥离肿瘤，计算Ad-CD80-TPE-GM组分别与2个对照组相比的相对肿瘤增殖率和抑瘤率。 结果单次治疗组中，Ad-CD80-TPE-GM组肿瘤组织中病毒感染滴度量（IU/tumor）为1.13×10^6（1.40×10^5～7.25×10^7），明显高于Ad-GFP组[1.17×10^2（7.80×10^1～2.40×10^2），P=0.01]，而PBS组未检测到病毒；GM-CSF表达量（pg/mg）为397.32±179.67，明显高于PBS组（4.02±0.93，P〈0.01）和Ad-GFP组（6.92±2.79，P〈0.01）；CD80表达阳性率为31.6%＆#61617;9.0%，而PBS和Ad-GFP组均基本不表达（均P〈0.001）。连续治疗组中，Ad-CD80-TPE-GM组与PBS和Ad-GFP组相比，相对肿瘤增殖率分别为31.8%（P〈0.05）、25.9%（P〈0.01）；抑瘤率分别为73.4%、77.9%（均P〈0.001）。 结论Ad-CD80-TPE-GM能在端粒酶阳性的人喉癌Hep2细胞移植瘤组织内大量复制并有效表达目的基因，具有明显的抗肿瘤效应。