急性髓细胞白血病免疫分型特点及临床意义

目的: 探讨急性髓细胞白血病(AML)免疫分型特点及其临床意义。方法: 采用流式细胞术(FCM)对145例AML患者进行白血病免疫分型检测。结果: 145例AML患者中MPO、CD13、HLA-DR、CD33、CD34表达率分别为93.1%、90.3%、77.2%、71.7%、70.3%。CD14仅表达于急性粒单细胞白血病(M4)和急性单核细胞白血病(M5)。AML伴淋系抗原表达者以CD7(34.5%)最为多见,其中以预后较差的M5型表达率为最高,其次为CD19(10.3%),且在急性粒细胞白血病部分分化型(M₂)中表达率最高。CD2仅表达于部分急性早幼粒细胞白血病(M3),共发现2例急性混合细胞白血病,同时有淋系和髓系抗原表达。结论: MPO、CD13、CD33为髓系最敏感的抗原,CD7、CD19、CD2淋系抗原在AML诊断及预后判断上有重要指导意义,FCM免疫分型对白血病的准确分型诊断,预后判断有重要的指导意义。     

检测胞浆抗原用于急性白血病免疫分型

目的:探讨胞浆抗原在急性白血病免疫分型中的临床意义。方法:用流式细胞仪检测42例初治急性白血病患者胞浆抗原CyCD_3,CyCD_(22),CyCD_(79a)和MPO。结果:T—ALL阳性胞浆抗原主要表达在CyCD_3,阳性率占88.9％。B—ALL阳性胞浆抗原主要表达在CyCD_(79a),AML主要表达CyMPO。结论:CyCD_3和CyCD_(79a),及MPO可分别作为T—ALL,B—ALL和AML系列特异性标志,对正确诊断白血病提供非常有价值的依据。     

急性髓系白血病细胞β-catenin和MMP-7的表达

目的:探讨急性髓系白血病细胞中β-catenin和MMP-7表达的意义.方法:急性髓系白血病患者21例(病例组),非恶性血液病患者14例(对照组),采用免疫组织化学SP法测定骨髓单个核细胞(BMMNC) β-catenin和MMP-7的表达水平,记录免疫积分和表达阳性率.结果:病例组BMMNC中β-catenin和MMP-7的免疫积分分别为(88.17±36.58)和(74.79±35.39),阳性率分别为(50.75±34.78)%和(46.42±26.14)%,均高于对照组(P<0.05).病例组β-catenin和MMP-7的免疫积分和阳性率均呈正相关关系(r分别为0.576,0.593,P均<0.05).病例组伴有肝脾淋巴结肿大的患者β-catenin和MMP-7的免疫积分和阳性率均高于无肝脾淋巴结肿大者(P<0.05).结论:急性髓系白血病细胞中β-catenin和MMP-7的表达呈正相关,2者与急性髓系白血病细胞髓外浸润有关.     

125例成人急性髓系白血病免疫表型特点分析

目的：探讨成人急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia,AML)患者的免疫表型特点及临床意义。方法2011年5月-2014年6月在河北省涿州市医院和解放军总医院就诊的125例成人AML患者为研究对象,采用多色流式细胞术,以CD45/SSC双参数散点图设门,对其骨髓进行免疫表型检测。结果 AML患者髓系特异性抗原表达阳性率依次为CD13(90.4%)、CD33(86.4%)、MPO(80.0%)、CD117(73.6%);CD14和CD15主要在M4和M5中表达,CD64和CD15同时强阳性伴HLA-DR高表达,提示M5可能性大;在M3患者中有较强的自发荧光,表达髓系抗原CD13、CD33和MPO,低表达CD34和HLA-DR。造血干/祖细胞标记抗原CD34、HLA-DR、CD38在AML中呈高表达,分别为53.6%、70.4%、71.2%。125例中56例伴有淋系抗原表达,各抗原表达率依次为CD56(25.6%)、CD7(19.2%)、CD19(9.6%)、CD4(7.2%)、CD2(6.4%)。有淋系抗原表达(LymAg+)组表达CD34+比例和肝脾大患者比例明显高于无淋系抗原表达(LymAg-)组(P＜0.01)。伴有CD7+患者完全缓解(CR)率明显低于CD7-患者(P＜0.05),而伴有淋系抗原表达的AML患者CR率(55.6%)与未伴有淋系抗原表达的AML患者CR率(76.2%)差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 AML患者高表达CD13、CD33、MPO,部分患者同时表达髓系、淋系抗原;伴有CD7+表达的患者,化疗后CR率低,预后较差。     

儿童急性白血病免疫分型及其临床意义

目的 探讨儿童急性白血病(AL)抗原表达规律及其临床意义.方法 采用流式细胞术检测46例儿童AL的免疫表型.结果 46例AL中,急性淋巴细胞白血病(ALL)30例,急性髓细胞白血病(AML)10例,杂合型6例.30例ALL中,T系ALL 4例(13.3%),B系ALL 26例(86.7%).ALL中3例(10%)有髓系抗原表达,以CD33阳性最常见;AML中4例(40%)有淋系抗原表达,以CD7阳性率最高.儿童AML淋系抗原表达阳性率高于儿童ALL髓系抗原表达(X2=4.32,P＜0.05).B系ALL中CD34阳性率为56.5%.AML中CD34的表达频率为40.0%,其中M2的CD34阳性率为66.6%,高于其他AML病儿的CD34阳性率(X2=5.42,P＜0.05).结论 应用免疫分型可以较好地分析每例白血病病儿,尤其是对于混合型白血病及抗原交叉表达者更有意义.     

急性髓系白血病中FANCF蛋白表达研究

目的研究FANCF蛋白与急性髓系白血病(AML)的相关性。方法以84例AML患者骨髓提取的单个核细胞为研究对象,采用免疫组织化学染色法检测FANCF蛋白表达。结果FANCF蛋白表达率在初诊AML组为5.0%,完全缓解AML组为68.5%,对照组为75.0%;初诊AML组较对照组中FANCF蛋白表达率明显减低(P<0.05);完全缓解AML组与对照组表达率比较无统计学意义(P>0.05)。结论FANCF蛋白在初诊AML中表达率减低,缓解AML组与对照组无明显差异,提示FANCF蛋白可能与AML发病、预后有相关性。     

急性白血病细胞CD34的表达与系列相关性抗原表达关系的初步分析

目的探讨CD34在急性白血病细胞的表达,比较CD34与其他系列相关性抗原的关系。方法采用三色流式细胞术对41例急性髓性白血病(acutemyeloidleukemia,AML)和15例急性前体B细胞性淋巴细胞白血病(precursorb-acutelymphoblasticleukemia,PreB-ALL)患者进行表面抗原分析,确定各抗原的表达情况,比较CD34阳性与CD34阴性时,CD34与CD13,MPO,CD10和HLA-DR的共同表达情况。结果CD34在AML和ALL中的抗原表达阳性率分别为70.7%和53.3%。在AML中,51.5%的患者表现为CD34/CD13阳性,61.5%的患者表现为CD34/MPO阳性,50.3%的患者表现为CD34/HLA-DR阳性。仅有10.7%的AML患者表现为CD34/CD10阳性。结论与PreB-ALL相比,CD34在AML中表达阳性率更高,CD34结合CD13,MPO或者HLA-DR可以显示大多数AML细胞特征。对于急性髓性白血病,以CD34设门来选择AML细胞群,有助于诊断预后的评估以及AML微小残留病的检测。     

成人和儿童急性白血病常见融合基因表达的比较

目的 比较成人和儿童急性白血病常见融合基因表达的差异.方法 采用多重巢式PCR技术检测159例成人和120例儿童初治急性白血病患者的常见融合基因,比较成人及儿童各融合基因的阳性率.结果 儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患者白血病融合基因总阳性率为51.11%(46/90),高于成人ALL患者的25.53%(24/94)(P<0.05);其中儿童TEL/AML1及TLS/ERG融合基因阳性率高于成人(P>0.05).儿童急性髓系细胞白血病(AML)患者白血病融合基因总阳性率为53.33%(16/30),高于成人AML患者的26.15%(17/65)(P<0.05);其中儿童AML1/ETO融合基因阳性率高于成人(P>0.05).结论 成人及儿童急性白血病融合基因的表达存在一定差异,临床上应有针对性地进行相关融合基因的检测和判读,以提高诊疗质量.     

免疫表型及非髓系分化抗原表达分析： 对急性髓细胞白血病的诊断和预后判定有应用价值

目的 探讨急性髓细胞白血病（AML）免疫表型和非髓系分化抗原表达特征及其临床应用价值。方法 采用 BDFACSCalibur流式细胞仪对109例AML患者进行免疫表型检测,分析AML免疫表型、非髓系分化抗原表达的特点及与预后疗效完全缓解（CR）率的关系。结果 免疫表型显示AML细胞髓系分化抗原阳性率由高到低依次为CD13、CD117、CD33、MPO、CD15,其中CD117、CD13、CD33、MPO阳性率差异无统计学意义（P>0.05）,并且均高于CD15阳性率（P<0.05）;AML细胞非髓系分化抗原CD9、CD200、CD56、CD7阳性率依次降低,均高于CD25、CD19、CD2、CD10、CD4、CyCD79a、CyCD3阳性率（P<0.05）;109例AML中CD7、CD34、CD56、CD25呈阳性的患者CR率均低于阴性患者（P<0.05）;MPO、CD19呈阳性的患者CR率均高于阴性患者（P<0.05）;伴AML1-ETO阳性表达的15例AML-M2b患者中CD56阳性组1疗程CR率低于CD56阴性组,CD56阳性组1年内复发率高于CD56阴性组（P<0.05）。结论 免疫表型和非髓系分化抗原表达分析对AML的诊断及预后判定有重要临床意义,是AML诊疗的主要依据之一。     

实时荧光定量PCR检测急性髓细胞白血病患者MDR1基因表达及临床意义

目的 定量分析急性髓细胞白血病(AML)患者MDR1基因的表达水平及其与临床特征及疗效的关系.方法 构建实时荧光定量PCR检测MDR1基因表达的技术,并定量检测43例AML患者MDR1基因的表达水平及分析其与血象、免疫分型及临床疗效的关系.结果 建立的实时荧光定量PCR方法的标准曲线相关系数＞0.99.AML患者MDR 1基因表达水平较正常对照组显著升高(P＜0.001),FAB分型中M2,M5型患者MDR1基因表达水平显著高于M3型患者(P＜0.05及P＜0.025).MDR 1基因的表达量与AML发病时外周血白细胞计数、血红蛋白、血小板无相关关系;而伴有CD34表达阳性AML患者MDR1基因表达水平显著高于阴性患者(P＜0.01);MDR 1基因高表达的初治AML患者诱导化疗的CR率显著低于低表达病例(P＜0.01).结论 实时荧光定量PCR技术检测急性白血病患者MDR 1基因表达量可更准确判断AML患者的预后及早期预测难治和复发.     

BAG-1蛋白在急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中的表达

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白的表达及意义。方法:用免疫细胞化学SP染色法分别检测初治AML患者(76例)、急性髓系白血病完全缓解(AML-CR)患者(49例)、急性髓系白血病难治复发(RRAML)患者(17例)及正常对照者(15例)的骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白的表达。结果:四组BAG-1蛋白阳性表达率差异有统计学意义(字2=47.857,P0.001);初治AML组和RRAML组中BAG-1蛋白阳性表达率均高于AML-CR组和正常对照组(P0.001);AML各分型患者的BAG-1蛋白阳性表达率差异无统计学意义(字2=1.920,P0.05);初治AML患者骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白阳性表达率与白细胞计数及髓外浸润有关(字2=9.248,13.689,P0.01)。结论:BAG-1可能参与了急性髓系白血病的发生发展。     

ABCG2在白血病细胞中的表达及其意义

目的探讨三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)在白血病细胞膜上的表达规律及其意义.方法应用CD45SSC参数设门多色流式细胞术分析61例白血病患者白血病细胞膜ABCG2及其他白血病细胞相关抗原的表达情况.结果61例急慢性白血病患者的白血病细胞ABCG2表达阳性率为36.07%.ABCG2表达阳性率,急性白血病(AL)患者[34.48%(20/58)]与慢性白血病(CL)患者[66.67%(2/3)];儿童患者[26.09%(6/23)]与成人患者[42.11%(16/38)]差别均无显著性意义(均P＞0.05);急性髓细胞性白血病(AML)患者[46.67%(14/30)]高于急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者[16.67%(4/24)(P＜0.05)];AML患儿[55.56%(5/9)]也高于ALL患儿[7.14%(1/14)(P＜0.05)].ABCG2与另一耐药蛋白P糖蛋白(P-gp)及其他细胞表面抗原的表达均无关(r=0.152、-0.075、-0.063、0.026、-0.149,均P＞0.05),与髓系标志CD13的表达有关(r=0.307,P＜0.05).结论ABCG2在AML患儿中的表达较高,其高表达可能导致AML患儿临床耐药.ABCG2和P-gp可能参与了不同的白血病耐药机制.     

Characteristics of abnormal immunophenotype and clinical significance in acute myelocytic leukemia

目的 探讨急性髓细胞白血病( acute myelocytic leukemia,AML)患者的异常免疫表型特点及临床意义.方法 采用多色流式细胞术对初诊的38例AML患者进行白血病免疫表型检测.结果 AML患者髓系特异性抗原表达阳性率高低依次为:CD33、CD13、cMPO、CD117、CD11b:部分患者异常表达淋巴系抗原,表达率高低依次为CD19、cCD79a、CD7等.CD19+、CD7+患者完全缓解( complete remission,CR)率低于CD19-、CD7-患者,差异有统计学意义(P＜0.05);部分患者表达非特异性早期抗原CD34、HLA-DR、CD38,CD34+患者CR率与CD34 -患者CR率相比差异无统计学意义(P＞0.05),CD56+患者CR率与CD56 -患者CR率相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CD33、CD13、cMPO、CD117为髓系常见且敏感的抗原.伴有CD19、CD7表达的患者,化疗后完全缓解率低于阴性者.     

NPM1基因在急性髓细胞白血病中的表达及其临床意义

目的探讨急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)野生型NPM1基因的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测59例AML患者,分析NPM1基因表达水平与患者性别、年龄、外周血细胞数、骨髓原始幼稚细胞数及临床疗效的关系,并对部分患者NPM1表达水平进行动态观察。结果初治AML患者中NPM1阳性表达率为73.8%,难治复发组NPM1阳性率为100%,完全缓解组NPM1阳性表达率为66.7%,对照组NPM1阳性表达率为60%,但各组之间阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。分析表达水平显示,难治复发组NPM1中位表达水平(0.798 8)高于初治组(0.541 0)、完全缓解组(0.483 6)及对照组(0.371 8)(P<0.05)。NPM1高表达组患者有效为63.1%,低于低表达组(88.9%)和不表达组患者(100%)(P<0.05)。NPM1表达强度与外周血白细胞数和骨髓原始细胞数呈正相关(P<0.05)。对12例初治时NPM1基因高表达患者进了动态观察,1个疗程化疗后获完全缓解5例,其表达水平达正常中位水平以下,其余7例为未缓解患者,NPM1表达水平未见明显变化。结论 NPM1基因在AML中均存在不同程度的过度表达现象,NPM1高表达者提示预后差,完全缓解率低,可作为AML预后不良的指标,PCR动态检测AML患者治疗前后NPM1表达水平,可作为判断AML预后和监测微小残留病(MRD)的一项指标。     

急性髓系白血病的免疫表型分析及临床意义

目的 探讨成人急性髓细胞白血病(AML)的免疫表型特征及临床意义.方法 采用流式细胞仪对113例AML患者进行免疫表型分析.结果 髓系抗原表达阳性率依次为CD13＞CD33＞CD15＞CD14,AML患者CD34阳性表达率为35.40%.113例患者中有28例(24.78%)伴有淋系抗原表达,以CD7多见,表达阳性率为71.43%,其次CD19表达阳性率为35.71%.Ly+AML与Ly-AML相比较,两者在个别形态学亚型、临床体征及CD34表达差异有统计学意义,而在异常染色体核型检出率方面无统计学意义.CD+34组CR率(69.23%)较其阴性组(78.05%)低,但两者差别无统计学意义;Ly+AML组CR率为52.94%(9/17),低于Ly-AML组78%(39/50),其中,CD+7组CR率(41.67%)与其阴性组(80%)相比差别有统计学意义.结论 AML患者高表达CD13、CD33,部分患者同时表达髓系、淋系抗原;CD34及CD7阳性与治疗反应显著相关.     

P-糖蛋白和细胞表面分化抗原在急性髓系白血病中的表达

目的分析初治急性髓系白血病（AML）P-糖蛋白（P-gp）及细胞表面分化抗原的表达。方法应用流式细胞术对81例初治AML患者进行P-gp及免疫表型的检测。结果 AML中P-gp的阳性表达率为39.5%,CD34为51.9%,Ly＋AML为22.2%,其中CD7阳性率最高,为12.3%。P-gp与CD34均与预后为负相关（P〈0.05）,Ly＋AML与Ly-AML的完全缓解（CR）率无统计学差异（P〉0.05）。P-gp＋组中CD34的表达显著高于P-gp-组（P〈0.01）,其它中晚期抗原表达无统计学差异。P-gp与CD34协同表达则CR率更低（26.1%vs 82.7%）。结论 P-gp的过度表达与CD34相关,P-gp＋/CD34＋的AML属于一种预后不良的临床亚型。     

PTEN基因及其相关因子HIF-1α在急性髓性白血病骨髓基质细胞中的表达及意义

目的 探讨PTEN基因及其相关因子HIF-1α在急性髓性白血病(AML)骨髓基质细胞中的表达及意义.方法 取30例急性髓性白血病患者(AML组)和30例非AML患者(对照组)骨髓基质细胞分离纯化后培养,以RT-PCR检测其中PTEN mRNA的表达,并通过凝胶图像分析系统分析其相对含量.同时以Western免疫印迹技术检测骨髓基质细胞中PTEN和HIF-1α蛋白表达.结果 急性髓性白血病患者骨髓基质细胞中PTEN基因和蛋白的表达率及相对含量均显著低于对照组(P<0.01,P<0.05),HIF-1α蛋白表达率及表达水平显著高于对照组(P<0.01,P<0.05).HIF-1α在骨髓基质细胞中的表达上调与PTEN的低表达相关联(P<0.05).结论 PTEN基因可能是抑制白血病异常骨髓造血形成的重要因子,而PTEN表达缺失或下调可能诱导其下游因子HIF-1α的高表达.     

bcl-2基因在急性髓系白血病细胞中的表达及意义

采用链霉亲和素过氧化酶免疫组织化学方法 (S -P法 )检测 30例初发成人急性髓系白血病(AML)患者的骨髓细胞bcl - 2蛋白表达 .结果 :( 1)AML患者骨髓细胞中bcl - 2蛋白阳性表达率为( 55 12± 2 3 78) % ( 19%～ 93% ) ,显著高于正常对照 (P <0 0 1) . ( 2 )AML按FAB分型各亚型间比较 :bcl- 2蛋白表达在M1,M2 型阳性率较高 ( 60 58± 19 0 5) % ;M3 型则较低 ( 2 1 50± 6 2 2 ) % ;M4 ,M5型最高( 69 64± 14 96) % . ( 3)经标准诱导治疗后 ,完全缓解 (CR)组的bcl- 2蛋白表达显著低于未缓解 (NR)组 (P <0 0 5) .提示 :bcl- 2蛋白在AML细胞中呈高表达 ,并为白血病化疗耐药的预后指标之一 .     

36例急性白血病免疫分型特点与临床意义

目的:探讨急性白血病(AL)三色流式细胞术免疫分型的特点及临床意义.方法:采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果:25例急性髓细胞性白血病(AML)主要表达CD13(96.00%)、CD33(92.00%)、MPO(80%)、CD34(68.00%)、HLADR(72.00%).20%的AML患者伴有淋系抗原表达变异型(Ly AML),最常见为CD7.B细胞急性淋巴细胞性白血病(ALL)4例(36.36%),主要表达CD19(100.00%)、HLA-DR(100.00%)、CD22(75.00%)、CD10(50.00%)、CD34(50.00%);T细胞急性淋巴细胞性白血病(ALL)7例(63.64%),主要表达CD7(100.00%)、CD2(71.43%).结论:流式细胞仪三色荧光标记法进行AL免疫分型,对白血病的准确诊断和分型,治疗方案的选择具有重要意义.     

急性髓系白血病GLIPR1基因甲基化及其表达

目的：检测GLIPR1基因在急性髓系白血病（AML)细胞株和AML患者骨髓细胞中的甲基化状态和表达水平,探讨其表达水平与启动子甲基化的关系。 方法：以5株白血病细胞株, 以及54例治疗前AML患者骨髓、48例急性淋巴细胞胞白血病（ALL）患者骨髓、40例慢性粒细胞白血病（CML）患者骨髓、35例对照骨髓和8例治疗后完全缓解AML患者骨髓为样本,采用RT-PCR检测GLIPR1 mRNA表达水平,采用甲基化特异PCR（MS-PCR）方法检测GLIPR1基因甲基化状态,并对GLIPR1 mRNA表达水平与其甲基化状态进行相关性分析。 结果：GLIPR1基因在AML细胞株中的表达水平低于CML急性变细胞株和ALL细胞株,而前者甲基化水平高于后者。5-aza-2dC处理细胞后,GLIPR1基因在AML细胞株中的表达水平明显上调,而在CML急性变细胞株和ALL细胞株中的表达水平上调不明显。GLIPR1基因在AML骨髓中的表达水平（0.38±0.20）明显低于ALL骨髓（0.76±0.18）、CML骨髓（0.80±0.14）和对照骨髓（0.85±0.12）,在完全缓解AML骨髓中的表达水平明显高于治疗前AML骨髓（0.78±0.13 vs. 0.36±0.20）;而ALL和CML骨髓中的表达水平与对照骨髓比较无明显差异(P＞0.05）。GLIPR1基因在AML骨髓的甲基化阳性率(81.5%)明显高于ALL骨髓（37.5%)、CML骨髓（27.5%)和对照骨髓（14.3%),在完全缓解AML骨髓中的甲基化阳性率明显低于治疗前骨髓(12.5% vs. 75.0%);而在ALL和CML骨髓中的甲基化阳性率与对照骨髓比较无明显差异(P＞0.05）。GLIPR1基因在AML骨髓中的表达水平与其甲基化呈负相关。结论：GLIPR1基因在AML中表达下调或缺失及启动子甲基化可能是导致GLIPR1基因表达沉默的原因,GLIPR1基因表达和甲基化水平对判断AML患者的疗效有一定意义。